頭孢替坦異構(gòu)體研究

黃貴蓮??黃滔

[摘要] 目的 研究頭孢替坦的兩個(gè)差向異構(gòu)體d-頭孢替坦和l-頭孢替坦的轉(zhuǎn)換規(guī)律，明確異構(gòu)體間的轉(zhuǎn)化條件。方法 采用酸、堿、熱、氧化、強(qiáng)光條件對頭孢替坦進(jìn)行破壞試驗(yàn)。結(jié)果 在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會(huì)向l-頭孢替坦轉(zhuǎn)化。結(jié)論 本研究為頭孢替坦及頭孢替坦二鈉合成過程中的反應(yīng)條件提供依據(jù)，也給生產(chǎn)過程控制提供支持。

[關(guān)鍵詞] 頭孢替坦；異構(gòu)體；轉(zhuǎn)換條件

[中圖分類號(hào)] R917 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）05-34-03

[Abstract] Objective To study the conversion rule of two epimers of cefotetan， d-cefotetan and l-cefotetan， and determine the transformation conditions between two epimers. Methods We had done the destruction tests （including acid， alkali， heat， oxidation and light） to cefotetan. Results Test results shew that d-cefotetan could convert to l-cefotetan in acid， alkali and heat. Conclusion The study provides the basis for the reaction conditions in the synthesis of cefotetan and cefotetan disodium， and it also provides support for the production process control.

[Key words] Cefotetan； Epimers； Conversion condition

頭孢替坦（cefotetan，圖1）對革蘭陽性菌和陰性菌均有抑制作用，臨床用于治療腹腔內(nèi)感染、術(shù)后傷口感染及復(fù)雜性尿路感染等[1-10]。本品收載于美國藥典36版（USP 36）[11]和日本藥局方16版（JP 16）[12]，中國藥典2015年版（ChP 2015）尚未收載本品。有關(guān)物質(zhì)相關(guān)文獻(xiàn)[13-14]未有提及頭孢替坦異構(gòu)體，只有JP 16頭孢替坦質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下收載了l-異構(gòu)體，限度規(guī)定l-異構(gòu)體應(yīng)為35%≤l-異構(gòu)體≤45%。有文獻(xiàn)[15]指出，頭孢替坦兩個(gè)差向異構(gòu)體（d-頭孢替坦、l-頭孢替坦）與互變異構(gòu)體的轉(zhuǎn)化（圖2）。文獻(xiàn)進(jìn)一步指出，兩個(gè)差向異構(gòu)體（d-頭孢替坦、l-頭孢替坦）具有相同的抗菌活性，但具有不同的血清半衰期，可能不會(huì)引起不同的臨床效果。為了進(jìn)一步明確兩個(gè)異構(gòu)體間的轉(zhuǎn)化條件，我們采用JP 16質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下的l-異構(gòu)體檢測方法，在破壞條件（包括酸、堿、熱、氧化、強(qiáng)光）下進(jìn)行試驗(yàn)。

1 儀器與試藥

U3000高效液相色譜儀（Thermo儀器公司），變色龍色譜工作站；BP211D型萬分之一電子分析天平，德國賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

頭孢替坦（本研究所自制，含量 99.2%，批號(hào) P131001）；乙腈為色譜純；十二水合磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、四丁基硫酸氫氨均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

儀器：戴安四元 U3000。

色譜柱：Inertsi ODS-3 4.0mm×150mm，5μm。

流動(dòng)相：流動(dòng)相A∶pH 7.0磷酸鹽緩沖液（0.1mol/L的十二水合磷酸氫二鈉水溶液，0.1mol/L的磷酸二氫鉀水溶液，混合調(diào)節(jié) pH 7.0）∶流動(dòng)相B（水）∶流動(dòng)相C（每150mL乙腈含1.0g四丁基硫酸氫氨）=45∶45∶10。

流速：1.2mL/min。

檢測波長：254nm。

柱溫：40℃。

進(jìn)樣量：5μL。

2.2 試驗(yàn)

2.2.1 未破壞樣品 空白：精密量取空白溶液5μL，照異構(gòu)體檢測方法，進(jìn)樣，記錄色譜圖；未破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖3。

2.2.2 酸破壞試驗(yàn) 酸破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液1mL，室溫下放置1min，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻；酸破壞空白：加0.1mol/L鹽酸溶液1mL置10mL量瓶中，室溫下放置1min，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖4。

2.2.3 堿破壞試驗(yàn) 堿破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加0.01mol/L氫氧化鈉溶液1mL，室溫下放置5min，用0.01mol/L 鹽酸溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻；堿破壞空白：加0.01mol/L氫氧化鈉溶液1mL置10mL量瓶中，室溫下放置5min，用0.01mol/L 鹽酸溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖5。

2.2.4 氧化破壞試驗(yàn) 氧化破壞：取本品約10mg，置10mL量瓶中，加10%的雙氧水1mL，放置5min，40℃超聲5min，加水稀釋至刻度，搖勻；氧化破壞空白：加10%的雙氧水1mL置10mL量瓶中，放置5min，40℃超聲5min，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖6。

2.2.5 熱破壞試驗(yàn) 熱破壞：精密稱取本品10mg，置10mL量瓶中，加入1mL水溶解，置95℃水浴中加熱10min，加水稀釋至10mL，搖勻；熱破壞空白：加入1mL水，置95℃水浴中加熱10min，加水稀釋至10mL，搖勻，色譜圖見圖7。

2.2.6 光破壞試驗(yàn) 光破壞：精密稱取本品10mg置10mL量瓶中，加入1mL水溶解，置（4500±500）lx照度下照射24h，加水稀釋至10mL，搖勻。光破壞空白：加入1mL水，置（4500±500）lx照度下照射24h，加水稀釋至10mL，搖勻，色譜圖見圖8。

2.2.7 破壞試驗(yàn)結(jié)果 按上述條件，照異構(gòu)體檢查方法試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表1。結(jié)果表明，空白溶劑無干擾，酸、堿、熱條件下，l-頭孢替坦都會(huì)增大，即在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會(huì)向l-頭孢替坦轉(zhuǎn)換。

3 討論

從上述結(jié)果可以得到，在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會(huì)向l-頭孢替坦轉(zhuǎn)換。由于頭孢替坦二鈉為頭孢替坦的常用上市產(chǎn)品形式，在生產(chǎn)過程中，頭孢替坦需加入碳酸氫鈉反應(yīng)生成頭孢替坦二鈉。為了使保證產(chǎn)品質(zhì)量，嚴(yán)格按照J(rèn)P 16版頭孢替坦的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)異構(gòu)體項(xiàng)下的要求，對自制產(chǎn)品進(jìn)行異構(gòu)體的控制并列入生產(chǎn)的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)中。通過研究異構(gòu)體的轉(zhuǎn)化條件，給頭孢替坦合成過程中的反應(yīng)條件、頭孢替坦轉(zhuǎn)化為頭孢替坦二鈉的反應(yīng)過程提供了強(qiáng)有力地技術(shù)支持和依據(jù)，也給產(chǎn)品生產(chǎn)的過程控制提供支持，有效地保證了產(chǎn)品的安全有效性。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Ward A， Richards DM.Cefotetan. A review of its antibacterial activity， pharmacokinetic properties and therapeutic use[J].Drugs，1985，30（5）：382-426.

[2] Dav enport R D，Judd W J，Dake L K，et al.Per sistence of cefotetan on red blood cells [J].Tr ansf usion，2004，44（6）：849.

[3] Qiu F，He XJ，Sun YX，et al.Pharmacokinetics of intravenous injection cefotetan in healthy volunteers[J].Chin J Hosp Pharm，2012，32（24）：1960-1964.

[4] 劉曼虹，狄斌，劉文英.頭孢菌素類抗生素—頭孢替坦的研究進(jìn)展[J].抗感染藥學(xué)，2011，36（2）：86-92.

[5] 薛雨，陳宇瑛.頭孢菌素類抗生素的最新研究進(jìn)展[J].中國抗生素雜志，2010，40（6）：775-785.

[6] 黃滔，于娜娜，金鑫.UPLC法測定頭孢替坦二鈉的有關(guān)物質(zhì)[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，33（7）：555-559.

[7] 黃滔，金鑫，于娜娜.頭孢替坦二鈉一未知有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)解析[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2016，47（5）：597-600.

[8] 楊信怡，胡辛欣，婁人慧，等.頭孢替坦二鈉的體外抗菌活性研究[J].中國醫(yī)藥指南，2012，10（13）：82-85.

[9] 劉亞妮，劉金梅，馬林，等.注射用頭孢替坦二鈉在中國健康人體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)[J].中國藥學(xué)雜志，2012，47（2）：132-136.

[10] 何曉靜，劉玉蘭.注射用頭孢替坦鈉的安全性再評價(jià)[J].中國抗生素雜志，2007，32（1）：59-62.

[11] US Pharmacopeia： The United States Pharmacopeial Convention. US Pharmacopeia / National Formulary[M].35th.Official Monographs/Cefotetan：US Pharmacopeia Origination Press，2012：2561-2562.

[12] 日本藥局方編輯委員會(huì)日本藥局方[M].16改正版.日本厚生?。喝毡舅幘址剑?011：570-572.

[13] 李進(jìn)，張斗勝，姚尚辰，等. LC/MS法分析頭孢替坦二鈉原料中的雜質(zhì)[J].中國科學(xué)（化學(xué)），2010， 40（6）：775-785.

[14] 林波，楊建新，向世英，等.高效液相色譜法測定頭孢替坦二鈉中的有關(guān)物質(zhì)[J].中國抗生素雜志，2010，35（11）：S1-S3.

[15] High-performance liquid chromatographic analysis of Cefotetan epimers in human plasma and urine[J].Journal of Chromatography B，1984，305：363-371.

（收稿日期：2016-11-04）