堿解增敏同步熒光測(cè)豬肌肉及腎中頭孢噻呋殘留

李月秋，竇海洋，吳錦濤，齊暢，邸科前，韓媛媛，韓艷梅，*

（1.河北大學(xué) 醫(yī)學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)中心，河北保定071000；2.河北大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，河北保定071000；3.河北大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)與衛(wèi)生事業(yè)管理系，河北保定071000）

堿解增敏同步熒光測(cè)豬肌肉及腎中頭孢噻呋殘留

李月秋1，3，竇海洋2，吳錦濤3，齊暢3，邸科前1，韓媛媛1，韓艷梅1，*

（1.河北大學(xué) 醫(yī)學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)中心，河北保定071000；2.河北大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，河北保定071000；3.河北大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)與衛(wèi)生事業(yè)管理系，河北保定071000）

基于頭孢噻呋堿性條件降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度更強(qiáng)，吐溫－80能提高其降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度，建立測(cè)定豬肌肉及腎中頭孢噻呋殘留的同步熒光分光光度法。優(yōu)化了降解條件（加熱時(shí)間、氫氧化鈉濃度與體積），討論了緩沖溶液、表面活性劑種類及用量對(duì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：4 mL 2.0 mol/L氫氧化鈉溶液，加熱150 min，加3 mL檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液（pH 4.2）和6 mL吐溫－80溶液（0.023 3 mol/L），在1 cm熒光比色皿中，于發(fā)射波長(zhǎng)λem 415 nm～550 nm內(nèi)，△λ為85 nm條件下掃描測(cè)定，440.0 nm處讀出熒光強(qiáng)度。應(yīng)用加乙腈沉淀蛋白的方法對(duì)動(dòng)物性食品進(jìn)行預(yù)處理。在0.625 μg/mL～62.5 μg/mL范圍內(nèi)，頭孢噻呋濃度與降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 3，檢出限為270 μg/kg。加標(biāo)水平在144 μg/kg～2 160 μg/kg范圍內(nèi)，回收率為85.09%～87.83%，RSD為0.93%～1.54%（n=3）。建立的新方法可用于動(dòng)物食品中頭孢噻呋殘留量檢測(cè)。

頭孢噻呋；同步熒光法；吐溫－80；堿性降解；豬肌肉及腎

隨著全球化、工業(yè)化高速發(fā)展，人們生活水平不斷提高，日益彰顯的食品安全問(wèn)題也得到了世界各國(guó)的廣泛關(guān)注。在我國(guó)，食品安全現(xiàn)狀不容樂(lè)觀，獸藥殘留是其中一個(gè)重要方面。

頭孢噻呋（Ceftiofur）又名賽得福，是第3代頭孢菌素類抗生素[1]，具有廣譜高效殺菌作用。現(xiàn)在臨床上常用于肉牛、奶牛、馬、豬、綿羊、山羊的呼吸道及1日齡肉雞細(xì)菌感染的治療。由于其經(jīng)過(guò)腎臟排出，具有腎毒性，殘留在食品中會(huì)對(duì)人體健康造成損害。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外不斷探索頭孢噻呋殘留的檢測(cè)方法。農(nóng)業(yè)部公布的動(dòng)物性食品中頭孢噻呋殘留的檢測(cè)方法[2]即為高效液相色譜法（HPLC），另有牛奶[3]、牛組織中[4]頭孢噻呋殘留量HPLC檢測(cè)方法的報(bào)道。液相色譜法重現(xiàn)性好，易于推廣，但存在靈敏度不如聯(lián)用技術(shù)，有機(jī)溶劑用量多，前處理過(guò)程繁瑣等缺點(diǎn)。

其他方法還有超高效液相色譜法（UPLC）[5]、電分析法[6]、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)[7-9]、免疫分析法（IAS）[10-12]、紫外分光光度法（UV）[13-14]、生物傳感器法[15-16]等。UPLC法存在泵的使用壽命縮短，儀器部件容易出現(xiàn)問(wèn)題等弊端。電分析方法具有消除樣品中蛋白質(zhì)干擾的優(yōu)勢(shì)，但是應(yīng)用不是十分普遍。聯(lián)用技術(shù)靈敏度有了極大提高，特異性更佳，但該技術(shù)儀器昂貴，樣品處理過(guò)程復(fù)雜，對(duì)分析人員技術(shù)水平要求較高，不便應(yīng)用于日常的跟蹤檢測(cè)。IAS法具有諸多優(yōu)點(diǎn)，但美中不足的是假陽(yáng)性率較高。生物傳感器法具有攜帶方便、分析速度快、樣品前處理簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，但存在穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)。

熒光分析法，尤其是同步熒光法[17]具有譜圖簡(jiǎn)化、峰形改善、選擇性高、光散射干擾少等特點(diǎn)。恒（固定）波長(zhǎng)同步熒光法在日常檢測(cè)中最為常用，有利于進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度，減少組分干擾。

有些有機(jī)物本身無(wú)熒光或熒光強(qiáng)度較弱，可通過(guò)一定條件水解使其轉(zhuǎn)換成[18]有熒光的物質(zhì)，進(jìn)一步應(yīng)用表面活性劑可提高熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度[19]。目前，國(guó)內(nèi)外鮮見(jiàn)在一定條件下水解頭孢噻呋，采用增敏方法提高水解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度，并應(yīng)用同步熒光法檢測(cè)動(dòng)物性食品中頭孢噻呋殘留量的報(bào)道。本研究首先篩選頭孢噻呋降解反應(yīng)條件，以獲得熒光強(qiáng)度更高的水解產(chǎn)物。隨后，應(yīng)用表面活性劑對(duì)降解產(chǎn)物增敏，采用同步熒光法對(duì)動(dòng)物性食品中頭孢噻呋殘留量進(jìn)行測(cè)定，使其檢測(cè)限能滿足最大殘留限量要求，建立一種能用于日常跟蹤監(jiān)測(cè)的方法，為更多種類藥物殘留的檢測(cè)研究開(kāi)拓新思路，指出新的研究方向。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

RF-5301PC熒光分光光度計(jì)、AUW120D電子天平：日本島津；Milli-Q Advantage A10超純化水機(jī)：法國(guó)默克密里博公司；FE20 PH計(jì)：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；SK-1快速混勻器：中國(guó)常州國(guó)華電器有限公司；TGL-20B高速臺(tái)式離心機(jī)：中國(guó)上海安亭科技儀器廠；RQ5200E超聲波清洗器：中國(guó)昆山市超聲儀器有限公司；YQD-37A氮?dú)獯蹈蓛x：中國(guó)雷爾達(dá)儀表有限公司；HDM-3000B電熱恒溫水浴鍋：中國(guó)江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司。

1.0 mg/mL頭孢噻呋標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取頭孢噻呋對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）0.1 g溶于水中，定容至100 mL棕色容量瓶中，并置于冰箱中避光冷藏保存。

硫酸、鹽酸（分析純）：北京化工廠；氫氧化鈉、磷酸氫二鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、醋酸、醋酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉（分析純）：天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；十二烷基硫酸鈉（SDS）、聚乙二醇辛基苯基醚（Triton-X）、十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）、十六烷基三甲基氯化銨（CTAC）、氯化十六烷基吡啶（CPC）、吐溫-20、吐溫-80（分析純）：上海麥克林生化科技有限公司；試驗(yàn)用水為超純水。

1.2 方法

1.2.1 豬肌肉、豬腎樣品預(yù)處理

稱取5.0 g樣品，將其切碎勻漿，置于10 mL離心管中，加入3 mL乙腈渦旋混勻1 min，超聲5 min，5 000 r/min離心5 min，上清液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中；再向原離心管沉淀內(nèi)加入3 mL乙腈，渦旋混勻1 min，超聲5 min，5 000 r/min離心5 min，上清液合并至10 mL離心管中，氮吹濃縮至1 mL。移取至10 mL試管內(nèi)作為待測(cè)樣品。

1.2.2 樣品測(cè)定

將處理好的樣品置于具塞比色管中，在各管中依次加入4 mL 2.0 mol/L的NaOH溶液，沸水浴中加熱150 min后取出，冷卻至室溫后，加入3 mL檸檬酸鈉－檸檬酸緩沖液（pH 4.2）和6 mL吐溫－80溶液，渦旋混勻1 min，將樣品溶液分別置于1 cm熒光比色皿中，在發(fā)射波長(zhǎng)λem 415 nm～550 nm范圍內(nèi)，發(fā)射波長(zhǎng)和激發(fā)波長(zhǎng)的波長(zhǎng)差為85 nm（△λ=85 nm）條件下分別掃描樣品，在440 nm處讀出熒光強(qiáng)度。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

配置一系列不同濃度頭孢噻呋標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.2.2試驗(yàn)方法測(cè)定，以頭孢噻呋濃度為橫坐標(biāo)（x），降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)（y），作圖建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=6.772 9x+69.119（r=0.999 3）。結(jié)果表明：在0.625 μg/mL～62.5 μg/mL范圍內(nèi)，頭孢噻呋濃度與降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度呈良好線性關(guān)系。

根據(jù)IUPAC（3δ）[19]規(guī)定，由公式：D=3×δ/k，求得檢測(cè)限為270 μg/kg。

式中：D為檢出限；k為工作曲線斜率；δ為11份空白溶液熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差。

1.2.4 精密度和回收率

取市售豬肌肉樣品9份，每份5 g，按其濃度80%、100%、120%分別加入頭孢噻呋對(duì)照品各3份，按照1.2.1方法處理，按照1.2.2的試驗(yàn)條件測(cè)定，測(cè)定平均回收率和精密度。

1.2.5 穩(wěn)定性

將按照1.2.1及1.2.2方法處理好的標(biāo)準(zhǔn)品溶液在避光條件下，分別在0、0.5、1、2、4、8、12、24 h內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。樣品熒光強(qiáng)度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.907 6%。結(jié)果表明，頭孢噻呋酸解產(chǎn)物在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2 結(jié)果與分析

2.1 同步熒光分光光度法條件選擇

2.1.1 降解介質(zhì)選擇

探討不同介質(zhì)中頭孢噻呋降解后，降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度大小。結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 不同介質(zhì)中頭孢噻呋降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度Fig.1 Fluorescence intensities of ceftiofur’s degradation product in different degradation medium

試驗(yàn)表明：頭孢噻呋在水、鹽酸、硫酸、氫氧化鈉溶液中加熱，均有熒光物質(zhì)產(chǎn)生，其中在氫氧化鈉溶液中降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度顯著高于其他介質(zhì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度，因此本試驗(yàn)選用堿性水解產(chǎn)物做為測(cè)定對(duì)象。

2.1.2 波長(zhǎng)差（△λ）選擇

將兩波長(zhǎng)差（Δ λ）保持為固定值，分別在Δλ為70、75、80、85、90、100、110 nm條件下測(cè)定頭孢噻呋堿性水解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度。測(cè)定結(jié)果顯示，隨著波長(zhǎng)差△λ增加，頭孢噻呋堿性水解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度呈先增長(zhǎng)后降低趨勢(shì)，在△λ=85 nm處，熒光強(qiáng)度最大。故以△λ= 85 nm開(kāi)展后續(xù)研究。熒光與同步熒光的比較見(jiàn)圖2。

圖2 熒光與同步熒光光譜Fig.2 Fluorescence and synchronous fluorescence spectrum

由圖2可知，同步熒光掃描后峰形變窄，能有效減少干擾，適當(dāng)提高靈敏度。

2.1.3 加熱時(shí)長(zhǎng)選擇

取頭孢噻呋標(biāo)準(zhǔn)溶液置具塞比色管中，依已建立方法，考察不同加熱時(shí)間（60、90、120、150、180 min）下，降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度。結(jié)果表明：隨反應(yīng)時(shí)間增加，降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度增強(qiáng)；當(dāng)反應(yīng)時(shí)間大于150 min時(shí)，頭孢噻呋堿性介質(zhì)中降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度達(dá)到平衡，可認(rèn)為頭孢噻呋已完全降解。綜上，選加熱時(shí)間為150 min。

2.1.4 NaOH濃度選擇

取頭孢噻呋標(biāo)準(zhǔn)溶液置于具塞比色管中，依照已建立的試驗(yàn)方法，考察NaOH濃度（1、2、3、4、5、6 mol/L）對(duì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度影響。結(jié)果見(jiàn)圖3。

結(jié)果表明：隨NaOH溶液濃度增加，體系熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng)，當(dāng)NaOH溶液濃度為2 mol/L時(shí)，體系熒光強(qiáng)度達(dá)到最大，所以試驗(yàn)選擇加入2 mol/L NaOH溶液。

2.1.5 NaOH加入量選擇

取頭孢噻呋標(biāo)準(zhǔn)溶液置于具塞比色管中，依照已建立試驗(yàn)方法，考察2 mol/L NaOH體積（1、2、3、4、5、6、7 mL）對(duì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度影響。NaOH加入量對(duì)頭孢噻呋降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度影響見(jiàn)圖3。

圖3 NaOH加入量對(duì)頭孢噻呋降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度影響Fig.3 Effect of the volume of NaOH on fluorescence intensities of ceftiofur’s degradation product

結(jié)果如圖3所示：隨NaOH溶液用量增加，體系熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng)，當(dāng)NaOH溶液加入量達(dá)到4 mL時(shí)體系熒光強(qiáng)度最大，隨后再加入則呈下降趨勢(shì)，所以試驗(yàn)選擇加入4 mL 2.0 mol/L NaOH溶液。

2.1.6 緩沖液選擇

2.1.6.1 緩沖液pH值選擇

按照已建立方法，考察了磷酸氫二鈉-檸檬酸、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液不同pH值（2.2、3.3、4.2、5.2、6.2、7.0、8.0、9.16、10.14、10.83）對(duì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度的影響。結(jié)果表明，隨著所用緩沖對(duì)pH值增大，體系熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng)，當(dāng)pH值為4.2時(shí)熒光強(qiáng)度最大；當(dāng)pH值均為4.2時(shí)，檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖對(duì)對(duì)熒光強(qiáng)度增強(qiáng)的效果明顯好于碳酸氫二鈉-檸檬酸鈉。因此，試驗(yàn)選擇加入檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液將pH值調(diào)到4.2。

2.1.6.2 緩沖液加入量選擇

考察了pH值為4.2的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液不同加入量（1、3、5mL）對(duì)降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度影響。結(jié)果表明，隨著所用緩沖液體積增大熒光強(qiáng)度有先增大后減小趨勢(shì)，當(dāng)體積為3mL時(shí)熒光強(qiáng)度最大。所以，試驗(yàn)選擇加入3 mL pH值為4.2的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。

2.1.7 表面活性劑選擇

表面活性劑濃度達(dá)到臨界膠束濃度（CMC）以上時(shí)，能發(fā)生聚合而形成膠束，形狀一般為球形，將熒光物質(zhì)屏蔽其中以使熒光增敏穩(wěn)定，發(fā)揮提高熒光強(qiáng)度的作用。試驗(yàn)考察了不同表面活性劑（SDS、CPC、Triton100、CTAB、CTAC、吐溫-20、吐溫-80）對(duì)頭孢噻呋降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度的影響。未增敏及吐溫-80增敏的頭孢噻呋酸解產(chǎn)物同步熒光掃描情況見(jiàn)圖4。

結(jié)果表明：向反應(yīng)體系中加入表面活性劑可增大熒光強(qiáng)度；試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)吐溫-80、CTAB、SDS對(duì)頭孢噻呋降解產(chǎn)物熒光強(qiáng)度的提高較為明顯，且吐溫-80稍高。故選擇吐溫-80作為體系增敏劑。

2.1.8 吐溫-80加入量對(duì)熒光強(qiáng)度影響

圖4 未增敏及吐溫-80增敏的頭孢噻呋酸解產(chǎn)物同步熒光光譜圖Fig.4 Synchronous fluorescence Spectrum of ceftiofur’s degradation product in alkaline medium added Twain-80 and not

表面活性劑對(duì)熒光強(qiáng)度的增強(qiáng)作用與表面活性劑的濃度有關(guān)。因此，考察吐溫-80不同體積（2、4、6、8 mL）對(duì)頭孢噻呋降解產(chǎn)物增敏效果。結(jié)果顯示：當(dāng)吐溫-80加入量為6 mL時(shí)，頭孢噻呋堿性水解體系熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值。所以試驗(yàn)選用吐溫-80溶液的體積為6 mL。

綜上，選擇4 mL 2.0 mol/L氫氧化鈉溶液，加熱150 min，加3 mL檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液（pH 4.2）和6 mL吐溫-80溶液，在△λ為85 nm條件下采用同步熒光法對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定。

2.2 樣品測(cè)定

2.2.1 樣品預(yù)處理?xiàng)l件選擇

稱取豬肌肉樣品5.0 g，將其切碎勻漿，置于10 mL離心管中，分別加入3 mL乙腈、三氯乙酸渦旋混勻1 min，超聲5min，分別在3000、5000、6 000、8 000r/min的轉(zhuǎn)速下離心各3、5、10、15、30 min。上清液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中；再向原離心管沉淀內(nèi)加入3 mL乙腈、三氯乙酸，渦旋混勻1 min，超聲5 min分別在3 000、5 000、6 000、8 000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心各3、5、10、15、30 min，上清液合并至10 mL離心管中，氮吹濃縮至1 mL。移取至10 mL試管內(nèi)作為待測(cè)樣品。豬腎樣品處理方法同上。結(jié)果表明：加入乙腈，轉(zhuǎn)速5 000 r/min，離心5 min時(shí)，并對(duì)沉淀再次離心沉淀，合并上清液，肌肉中的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)幾乎完全沉淀，不會(huì)對(duì)測(cè)定造成干擾，且回收率較好。

2.2.2 精密度和回收率

根據(jù)樣品實(shí)際測(cè)定值，按照1.2.4節(jié)中精密度和回收率的測(cè)定方法，平均回收率及精密度的結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2.3 穩(wěn)定性

按照1.2.5方法進(jìn)行穩(wěn)定性測(cè)定，樣品熒光強(qiáng)度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.907 6%。結(jié)果表明，頭孢噻呋堿解產(chǎn)物在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.4 測(cè)定結(jié)果

按照1.2.1節(jié)中樣品預(yù)處理方法對(duì)樣品進(jìn)行處理，按照1.2.2試驗(yàn)條件對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3）Table 1 Average recovery and RDS（n=3）

表2 樣品測(cè)定結(jié)果Table 2 Results of sample determination

3 結(jié)論

本研究探索建立堿性條件下降解，吐溫-80增敏，豬肌肉及腎中頭孢噻呋殘留的同步熒光檢測(cè)方法。此法具有穩(wěn)定性好、精密度高、選擇性好、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，其檢出限低于歐盟、加拿大等發(fā)達(dá)國(guó)家規(guī)定的頭孢噻呋在動(dòng)物性食品中的最大殘留限量（肌肉1 000 μg/kg，腎6 000 μg/kg）[20]。此法可做為動(dòng)物性食品中頭孢噻呋殘留檢測(cè)的新方法，也可為動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測(cè)研究拓展新思路。

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Synchronous Fluorimetric Determination of Residue Ceftiofur in Pig Muscel and Kidney by Alkaline Degradation and Sensibilization

LI Yue－qiu1,3，DOU Hai－yang2，WU Jin－tao3，QI Chang3，DI Ke－qian1，HAN Yuan－yuan1，HAN Yan－mei1，*
（1.Center of Medical Comprehensive Experimental，Hebei University，Baoding 071000，Hebei，China；2.School of Medicine，Hebei University，Baoding 071000，Hebei，China；3.Preventive Medicine and Health Management，Hebei University，Baoding 071000，Hebei，China）

A new synchronous fluorimetric method was developed for the determination of trace ceftiofur in pig muscel and kidney，which was based on the stronger fluorescence intensity of ceftiofur′s degradation product in the alkaline condition and the fluorescence intensity was improved by Tween－80.The degradation conditions（such as heating time，the volume and concentration of sodium hydroxide）were optimized.The effect of types and amounts of surface active agent and buffer on the fluorescence intensity of degradation product was discussed.The results showed that the optimum conditions were 4 mL 2.0 mol/L sodium hydroxide，heating time of 150 min，the buffer of 3 mL citric acid－sodium citrate（pH 4.2）and 6 mL Tween－80 solution（0.023 3 mol/L）. The standard and sample solutions were added into 1cm fluorescence cuvette，Synchronous fluorescence spectrums were scanned from 415 nm to 550 nm，△λ was 85 nm and then the fluorescence intensities were read at 440 nm.The proteins in food sample were precipitaded by acetonitrile.The results showed that in the range of 0.625 μg/mL－62.5 μg/mL，the concentration of ceftiofur and the fluorescence intensity of its degradation product had a good linearity with the correlation coefficients of 0.999 3.The detection limit was 270 μg/kg.At spikedlevels of 144 μg/kg to 2 160 μg/kg，the sample recovery ranges from 85.09%to 87.83%，the relative standard deviation was 0.93%to1.54%（n=3）.The results demonstrated that the new method proposed in this work could be used for the determination of residue ceftiofur in animal food.

ceftiofur；synchronous fluorescence spectrophotometry；Tween-80；alkaline degradation；pig muscel and kidney

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.10.027

2016-09-03

河北省省級(jí)科技計(jì)劃自籌經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目（15275511）；河北省自然科學(xué)青年基金（B2016201002）；河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究青年基金項(xiàng)目（QN201608）；河北省2016醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題（20160048）；保定市科學(xué)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（15ZG049）；2016年國(guó)家級(jí)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（201610075017）

李月秋（1977—），女（漢），講師，碩士，研究方向：食品有害污染物殘留分析。

*通信作者：韓艷梅（1964—），女（漢），教授，碩士，研究方向：生理與病理生理。