復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參生長(zhǎng)和非特異性免疫酶活性的影響

張宇鵬,田燚,商艷鵬,蔣亞男,常亞青

(1.大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧大連116023;2.大連市水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)合會(huì),遼寧大連116023)

復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參生長(zhǎng)和非特異性免疫酶活性的影響

張宇鵬1、2,田燚1,商艷鵬1,蔣亞男1,常亞青1

(1.大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧大連116023;2.大連市水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)合會(huì),遼寧大連116023)

為研究不同復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參Apostichopus japonicus非特異性免疫酶的影響,試驗(yàn)設(shè)置正常對(duì)照組(A組)、芽孢桿菌+殼寡糖+刺五加等中草藥組(B組)、芽孢桿菌+殼寡糖+百合等中草藥組(C組)、芽孢桿菌+殼寡糖+大黃等中草藥組(D組)、芽孢桿菌+殼寡糖+黃芪等中草藥組(E組)、芽孢桿菌+殼寡糖組(F組)、殼寡糖組(G組)和芽孢桿菌組(H組)8組,通過(guò)在飼料中添加中草藥、芽孢桿菌和殼寡糖,研究了芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥對(duì)體質(zhì)量為(3.87±0.54)g的刺參幼參生長(zhǎng)及其酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)等非特異性免疫酶活力的影響。結(jié)果表明:投喂芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥制劑均促進(jìn)了刺參的生長(zhǎng),各試驗(yàn)組刺參的增重率和特定生長(zhǎng)率均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中,D和E組均顯著高于其他試驗(yàn)組(P＜0.05);在飼料中添加不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)AKP活力無(wú)顯著性影響(P＞0.05);投喂50 d后,C、D、E組ACP活力顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂50 d后,除H組外,其他試驗(yàn)組SOD活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中B、C和D組SOD活力較高;投喂50 d后,除G組外,其他試驗(yàn)組LZM活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。研究表明,飼料中共同添加芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥復(fù)合免疫增強(qiáng)劑能進(jìn)一步提高刺參非特異性免疫酶活力,其中C、D和E試驗(yàn)組均能提高刺參的非特異性免疫力,且C組效果最好。

刺參;復(fù)合免疫增強(qiáng)劑;非特異性免疫酶;生長(zhǎng)率;存活率

刺參Apostichopus japonicus是中國(guó)北方重要的海水養(yǎng)殖種類,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。但養(yǎng)殖過(guò)程中操作不規(guī)范和水質(zhì)惡化導(dǎo)致刺參免疫力退化及大規(guī)模病害頻繁發(fā)生,給養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。養(yǎng)殖生產(chǎn)中,人們通過(guò)投喂抗生素來(lái)防治水產(chǎn)品病害,但卻導(dǎo)致了病原體的抗藥性,而且還可通過(guò)多種途徑將其傳遞給對(duì)人類有害的病原體[2-3]。目前,通過(guò)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力來(lái)抵抗疾病已成為提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的關(guān)鍵點(diǎn)。

免疫增強(qiáng)劑是指單獨(dú)或同時(shí)與抗原使用均能增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答的物質(zhì),其通過(guò)提高養(yǎng)殖動(dòng)物的非特異性免疫力來(lái)提高機(jī)體對(duì)病原的抵抗力,具有比抗生素安全、比疫苗作用范圍廣的優(yōu)點(diǎn)。芽孢桿菌能夠促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng),減少病害發(fā)生,并改善養(yǎng)殖環(huán)境,具備許多其他益生菌無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn),已成為公認(rèn)的具有發(fā)展前景的優(yōu)良菌種。中草藥飼料添加劑具有低毒性,能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),可提高養(yǎng)殖動(dòng)物的抗應(yīng)激能力和免疫力。

中草藥、芽孢桿菌和殼寡糖等免疫增強(qiáng)劑,因其綠色、無(wú)污染和無(wú)副作用等優(yōu)點(diǎn)越來(lái)越受到水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者的青睞。已有多項(xiàng)研究表明,免疫增強(qiáng)劑能夠顯著提高刺參的生長(zhǎng)率,以及消化和非特異性免疫酶活力[4-9]。王宜艷等[10]以中草藥復(fù)合免疫藥物蝦康素連續(xù)投喂中國(guó)對(duì)蝦,顯著提高了對(duì)蝦血淋巴的氧化酶和抗氧化酶活力。陳孝煊等[11]試驗(yàn)證實(shí),大黃與黃連對(duì)兩種淡水蝦血細(xì)胞的吞噬活性均有顯著提高,攻毒試驗(yàn)顯示,免疫保護(hù)率為100%。李義等[12]將黃芪、黨參、大黃、板藍(lán)根等十余味中草藥制成顆粒藥餌投喂中華絨螯蟹,結(jié)果表明,中華絨螯蟹血細(xì)胞吞噬百分比和吞噬指數(shù),以及血清溶菌酶和酚氧化酶活力均顯著提高。崔青曼等[13]用0、0.5%、1.0%的復(fù)方中草藥添加劑飼喂河蟹,結(jié)果表明,該添加劑能顯著提高河蟹的血細(xì)胞吞噬活性、血清殺菌活力、血清凝集效果和抗感染能力,極大增強(qiáng)河蟹機(jī)體的免疫功能。羅日祥[14]配伍了兩種復(fù)方中藥免疫增強(qiáng)劑,試驗(yàn)結(jié)果顯示,中藥制劑1號(hào)對(duì)中國(guó)對(duì)蝦的免疫系統(tǒng)有激活作用,中藥制劑2號(hào)對(duì)中國(guó)對(duì)蝦的免疫系統(tǒng)起抑制、破壞作用。陳學(xué)年等[15]篩選了9種中草藥組成5個(gè)復(fù)方,設(shè)計(jì)了以嗜水氣單胞菌為病原菌的鯽魚敗血病防治試驗(yàn)、抑菌定性試驗(yàn),以及注射、口服藥物攻毒試驗(yàn),結(jié)果顯示,5個(gè)復(fù)方均有明顯的防病功能,但抗菌作用卻有較大差異,顯示中草藥主要通過(guò)調(diào)動(dòng)魚體非特異免疫力發(fā)揮功能。

吳會(huì)民等[16]給大菱鲆Psetta maxima和血鸚鵡魚Amphilophus citrinellus投喂由β-葡聚糖、中草藥、維生素B和維生素C等混合配制的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑后,其非特異性免疫酶活性和抗應(yīng)激能力顯著提高。谷珉[17]研究表明,投喂由β-葡聚糖和甘露聚糖組成的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑與單獨(dú)投喂兩者相比,能進(jìn)一步提高刺參的生長(zhǎng)率、非特異性免疫酶活性,且其持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。本試驗(yàn)中,研究了不同復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參生長(zhǎng)和非特異性免疫酶活性的影響,以期對(duì)刺參的免疫防御機(jī)制獲得更深的認(rèn)識(shí),為刺參的健康養(yǎng)殖、疾病防治和探索合適的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用刺參幼參取自大連海源水產(chǎn)有限公司,刺參初始體質(zhì)量為(3.87±0.54)g,暫養(yǎng)于大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。暫養(yǎng)期間,以基礎(chǔ)飼料飽食投喂,水溫為15℃。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)飼料的配制 試驗(yàn)用飼料為大連海洋大學(xué)自制餌料,基礎(chǔ)飼料[18]及試驗(yàn)組飼料配方見表1。飼料原料經(jīng)超微粉碎過(guò)100目篩,各原料按配比定量,加入適量水?dāng)嚢杈鶆?經(jīng)雙螺桿擠條機(jī)擠壓成直徑為1.0 mm的顆粒飼料,干燥后備用。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取試驗(yàn)用刺參,隨機(jī)分配于200 L水槽中進(jìn)行試驗(yàn),并稱量體質(zhì)量。試驗(yàn)設(shè)置7個(gè)處理組,每組設(shè)3個(gè)平行,每個(gè)平行放30頭刺參,分別記為B～H組,對(duì)應(yīng)投喂7種試驗(yàn)飼料,并設(shè)對(duì)照組A,投喂不添加任何免疫增強(qiáng)劑的基礎(chǔ)飼料。其中,芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥總量的添加量分別為0.1%、0.2%和0.2%,B、C、D、E組中各種中草藥成分的配比均為1∶1。

養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)50 d。初始投餌量為其體質(zhì)量的10%,并根據(jù)刺參的攝食情況進(jìn)行調(diào)整,每天17:00投喂1次,次日8:00吸除殘餌和糞便。試驗(yàn)期間,連續(xù)充氣,水溫為(15±0.5)℃,鹽度為32,pH為7.8～8.2,溶解氧不低于5 mg/L,并定時(shí)觀察刺參的生長(zhǎng)和健康狀況。分別于試驗(yàn)的第10、20、30、40、50天測(cè)定刺參的體質(zhì)量。根據(jù)下述公式計(jì)算刺參的存活率(%)、增重率(%)和特定生長(zhǎng)率(%/d):

存活率=(Nt/N0)×100%,

增重率=(Wt-W0)/W0×100%,

特定生長(zhǎng)率(SGR)=(ln Wt-ln W0)/t×100%。其中:N0和Nt分別為試驗(yàn)初始、結(jié)束時(shí)刺參的數(shù)量;W0和Wt分別為試驗(yàn)初始和結(jié)束時(shí)刺參的體質(zhì)量(g);t為試驗(yàn)時(shí)間(d)。

1.2.3 樣品的采集與測(cè)定 分別于試驗(yàn)的第10、20、30、40、50天在冰盒中抽取刺參體腔液,每次抽取5頭刺參的體腔液,將體腔液裝入1.5 mL離心管中,取樣完成后在4℃下以3000 r/min離心10 min,取上清液,在超低溫冰箱(-80℃)中保存?zhèn)溆?。使用南京建成生物工程研究所的試劑盒和酶?biāo)儀測(cè)定各樣品中酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±S.D.)表示,采用SPSS 11.5軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行組間單因素方差分析,若差異顯著,則用Duncan法進(jìn)行多重比較,顯著性水平設(shè)為0.05。

表1 試驗(yàn)組飼料配方Tab.1 The dietary formulation in the expreriment

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參生長(zhǎng)的影響

從表2可見:飼料中添加復(fù)合免疫增強(qiáng)劑未對(duì)刺參的存活率產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05),各組刺參的存活率均在95%以上;各試驗(yàn)組刺參的增重率和特定生長(zhǎng)率均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中,同時(shí)添加芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥的D組和E組刺參的生長(zhǎng)效果較好,其增重率和特定生長(zhǎng)率均顯著高于其他試驗(yàn)組(P＜0.05)。

表2 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參存活率及生長(zhǎng)的影響Tab.2 Effects of immunostimulant compound on survival rate and growth of sea cucumberApostichopus japonicus

2.2 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參AKP活力的影響

從表3可見:在飼料中添加不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)AKP活力均無(wú)顯著性影響(P＞0.05);在整個(gè)試驗(yàn)期間,除C組刺參的AKP活力在第30天大幅升高外,其他試驗(yàn)組AKP活力變化趨勢(shì)基本一致,即AKP活力呈先升高后下降并趨于穩(wěn)定的趨勢(shì)。

2.3 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參ACP活力的影響

在飼料中添加不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑均不同程度地提高了刺參體腔液中的ACP活力。從表4可見:投喂10 d時(shí),C、D、E、G組ACP活力顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中C組ACP活力最高;投喂20 d時(shí),所有試驗(yàn)組ACP活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂30 d時(shí),除B組外,其他試驗(yàn)組ACP活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂40 d時(shí),除B組和H組外,其他試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂50 d時(shí), C、D、E、F組ACP活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。將各時(shí)間段刺參ACP活力的平均值進(jìn)行比較,各試驗(yàn)組ACP活力的平均值均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中C、D、E組ACP活力的平均值較高。

隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)照組未有顯著變化,而試驗(yàn)組ACP活力總體變化趨勢(shì)基本一致,均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),B、C、D組ACP活力在第20天時(shí)達(dá)到最高,E、G、H組ACP活力在第30天時(shí)達(dá)到最高,F組則在第40天時(shí)達(dá)到最高(表4)。

2.4 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參SOD活力的影響

在飼料中添加不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑均不同程度地提高了刺參體腔液中SOD活力。從表5可見:投喂10 d時(shí),各試驗(yàn)組刺參體腔液SOD活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中B組SOD活力最高;投喂20 d時(shí),僅H組SOD活力顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);投喂30 d時(shí),各試驗(yàn)組SOD活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂40 d時(shí),除H組外,其他試驗(yàn)組SOD活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂50 d時(shí),除G、H組外,其他試驗(yàn)組SOD活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。將各時(shí)間段SOD活力的平均值進(jìn)行比較,除H組外,其他試驗(yàn)組SOD活力的平均值均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中B、C、D組SOD活力平均值顯著高于其他試驗(yàn)組(P＜0.05)。

表3 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參體腔液中堿性磷酸酶活力的影響Tab.3 Effects of immunostimulant compound on AKP activity in coelomic fluid of sea cucumberApostichopus

隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng),除H組外,各試驗(yàn)組SOD活力均呈先升高后降低的趨勢(shì),B、F、G組SOD活力在第40天時(shí)達(dá)到最高,C、D、E組SOD活力在第30天時(shí)達(dá)到最高,H組則在第50天時(shí)達(dá)到最高(表5)。

2.5 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參LZM活力的影響

在飼料中添加不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑均不同程度地提高了刺參體腔液中的LZM活力。從表6可見:投喂10 d時(shí),只有D、E組LZM活力顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其他試驗(yàn)組均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05);投喂20 d時(shí),B、C、D、E組LZM活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其中C組LZM活力最高;投喂30 d和40 d時(shí),各試驗(yàn)組LZM活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);投喂50 d時(shí),除G組外,其他試驗(yàn)組LZM活力均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。將各時(shí)間段LZM活力的平均值進(jìn)行比較,各試驗(yàn)組LZM活力的平均值均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng),各試驗(yàn)組LZM活力的變化趨勢(shì)基本一致,均為先上升后趨于平穩(wěn),后期又上升的趨勢(shì),其中B、C、F、G和H組LZM活力在第50天時(shí)達(dá)到最高,D、E組則在第10天時(shí)達(dá)到最高(表6)。

表5 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參體腔液中超氧化物歧化酶活力的影響Tab.5 Effects of immunostimulant compound on SOD activity in coelomic fluid of sea cucumberApostichopus

3 討論

3.1 不同復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參生長(zhǎng)的影響

研究表明,中草藥和微生態(tài)制劑可以促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng),增強(qiáng)其抵抗疾病的能力。另有研究表明,許多中草藥成分對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)代謝有促進(jìn)作用,可以促進(jìn)微生態(tài)制劑中微生物的增殖。同時(shí),微生態(tài)制劑(益生菌)也可以促進(jìn)中草藥的吸收和利用。袁成玉等[19]在基礎(chǔ)飼料中分別添加光合細(xì)菌、芽孢桿菌和復(fù)合菌飼喂幼刺參,結(jié)果表明,試驗(yàn)組刺參的特定生長(zhǎng)率、成活率和消化酶活力均顯著提高。此外,王際英等[5]在給幼刺參投喂添加半乳甘露寡糖的飼料后發(fā)現(xiàn),其特定生長(zhǎng)率顯著提高并能改善刺參體壁氨基酸組成。本研究結(jié)果顯示:投喂添加芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥制劑的飼料均能促進(jìn)刺參生長(zhǎng),各試驗(yàn)組刺參的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組;而投喂由芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥制劑混合配制而成的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑,其增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于投喂單獨(dú)添加殼寡糖和芽孢桿菌的試驗(yàn)組。該結(jié)果與于明超[20]進(jìn)行的芽孢桿菌和中草藥在凡納濱對(duì)蝦飼料中的應(yīng)用研究結(jié)果相一致。于明超[20]研究發(fā)現(xiàn),同時(shí)添加0.10%中草藥制劑和0.15%芽孢桿菌制劑組的投喂效果最好,優(yōu)于單獨(dú)添加兩者之一的試驗(yàn)組,表明中草藥和芽孢桿菌共同添加時(shí)具有疊加效應(yīng),比單獨(dú)添加的效果要好。本試驗(yàn)表明,殼寡糖、芽孢桿菌和中草藥在提高刺參的特定生長(zhǎng)率和增重率的過(guò)程中具有相互促進(jìn)的作用。

3.2 不同復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參非特異性免疫酶活力的影響

刺參主要依靠非特異性免疫來(lái)抵抗外源病原體,包括體壁防御和體液防御,其中,AKP、ACP、SOD和LZM為刺參體液免疫中最重要的幾種免疫酶類,其濃度高低反映了刺參的免疫力。于明超[20]研究表明,芽孢桿菌與中草藥通過(guò)交互作用對(duì)血清酚氧化酶(PO)產(chǎn)生顯著影響(P＜0.05),高濃度的中草藥可以提高血清PO和溶菌酶活力。駱?biāo)囄腫21]的研究表明,添加單一和復(fù)合芽孢桿菌制劑均能提高刺參攻毒后的存活率,其中添加復(fù)合制劑組與對(duì)照組差異顯著,表明芽孢桿菌能夠提高刺參免疫力。樊英等[8]將黃柏、苦參、菊粉和天蠶素等中草藥和天然物質(zhì)注射到仿刺參體內(nèi)后發(fā)現(xiàn),其體腔細(xì)胞總量(TCC)、呼吸爆發(fā)活性、吞噬活性、PO活性、ACP活性和SOD活性均顯著提高,表明中草藥有助于提高刺參的抵抗力。而谷珉[17]的研究表明,投喂由β-葡聚糖和甘露聚糖組成的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑與單獨(dú)投喂兩者之一相比,能進(jìn)一步提高刺參的生長(zhǎng)率、免疫力,且其作用時(shí)間更長(zhǎng)。上述試驗(yàn)結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。本試驗(yàn)中,各試驗(yàn)組在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中, SOD、ACP和LZM活力均高于對(duì)照組,尤其是同時(shí)添加芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥混合制劑的試驗(yàn)組表現(xiàn)更加明顯。采用殼寡糖、芽孢桿菌和中草藥不同配伍的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑能顯著提高刺參的生長(zhǎng)率和體腔液中ACP、LSZ、SOD等非特異性免疫酶活力,從而提高刺參的非特異性免疫力,但各組分在提高刺參非特異性免疫力過(guò)程中的作用及交互作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。

綜上所述,飼料中同時(shí)添加芽孢桿菌、殼寡糖和中草藥復(fù)合免疫增強(qiáng)劑,能進(jìn)一步提高刺參的特定生長(zhǎng)率、增重率和非特異性免疫酶活力,C、D和E試驗(yàn)組均能提高刺參的非特異性免疫力,其中,C組(芽孢桿菌、殼寡糖、百合、當(dāng)歸、牛膝)的免疫效果最好,在飼料中添加此配方的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑將有利于刺參的健康養(yǎng)殖。

表6 復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)刺參體腔液中溶菌酶活力的影響Tab.6 Effects of immunostimulant compound on LZM activity coelomic fluid of sea cucumberApostichopus

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Effects of compound immunostimulant on growth and non-specific immune enzyme activity in sea cucumber Apostichopus japonicus

ZHANG Yu-peng1,2,TIAN Yi1,SHANG Yan-peng1,JIANG Ya-nan1,CHANG Ya-qing1
(1.Key Laboratory of Mariculture&Stock Enhancement in North China's Sea,Ministry of Agriculture,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China;2.Dalian Fisheries Industry Technology Innovation Association,Dalian 116023,China)

The survival,growth,and activities of acid phosphatase(ACP),alkaline phosphatase(AKP),lysozyme(LZM),and superoxide dismutase(SOD)were studied in juvenile sea cucumber Apostichopus japonicus with initial body weight of(3.87±0.54)g fed basal diet(control group,group A),and basal diet containing Bacillus+ chitosan oligosaccharide+Acanthopanax root compound(group B),Bacillus+chitosan oligosaccharide+lily compound(group C),Bacillus+chitosan oligosaccharide+Rheum officinale compound(group D),Bacillus+chitosan oligosaccharide+Astragalus membranaceus compound(group E),Bacillus+chitosan oligosaccharide(group F), chitosan oligosaccharide(group G)and Bacillus(group H)at water temperature of(15±0.5)℃for 50 d to evaluate the effect of different Chinese herbal medical compound immunostimulants on nonspecific immunity in sea cucumber.The results showed that growth of the sea cucumber was improved by dietary Chinese herbal medicines, Bacillus and chitosan oligosaccharide.There were significantly better weight gain and specific growth rate in the sea cucumber juveniles in the experimental groups than those in the control group(P＜0.05),significantly higher in the animals in groups D and E than in the other groups(P＜0.05).No significant difference in AKP activity was observed(P＞0.05),significantly higher AKP activity in sea cucumber in groups C,D and E than that in the control group in the 50 day feeding trial(P＜0.05).The ACP activities were shown to be significantly higher in the sea cucumber in groups C,D and E than those in the control group(P＜0.05).There were significantly higher SOD activities in the sea cucumber in groups B,C,D,E,F and G than that in control group,especially higher in groups B,C and D.LZM activities were found to be significant higher in the sea cucumber in groups B,C,D,E, F and H than that the control group(P＜0.05).The findings indicate that Chinese herbal medicine,Bacillus and chitosan oligosaccharide in groups C,D and E,especially group C,improve the nonspecific immune enzyme activity and nonspecific immunity in sea cucumber.

Apostichopus japonicus;compound immunostimulant;nonspecific immune enzyme;growth rate;survival rate

10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.02.010

2095-1388(2017)02-0178-06

S917.1;S948

:A

2016-05-30

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(41106128);遼寧省高等學(xué)校杰出青年學(xué)者成長(zhǎng)計(jì)劃項(xiàng)目(LJQ2012064);大連市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012B11NC049)

張宇鵬(1990—),男,碩士研究生。E-mail:sxzhangyupeng@163.com

田燚(1979—),女,博士,副教授。E-mail:tianyi@dlou.edu.cn