偏頭痛相關(guān)的發(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙
——漢族家系臨床及遺傳學(xué)特征

畢光輝 曲星華 劉增玲 劉長玲

（東營市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，山東 東營 257091）

偏頭痛相關(guān)的發(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙
——漢族家系臨床及遺傳學(xué)特征

畢光輝 曲星華 劉增玲 劉長玲

（東營市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，山東 東營 257091）

目的 探討合并偏頭痛漢族家系發(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙（Paroxysmal kinesigenic dyskinesia，PKD）誘發(fā)因素、臨床及遺傳學(xué)特點(diǎn)。方法 對1個(gè)漢族PKD家系共13名成員進(jìn)行PRRT2基因檢測，其中患者4例，總結(jié)其誘因及臨床遺傳特點(diǎn)、藥物治療效果。結(jié)果 該家系4例患者均有偏頭痛，3例患者為男性，1例為女性，男女比3∶1，4例對苯妥英鈉療效顯著，該家系PRRT2基因檢測結(jié)果顯示該家系中4例存在突變c.694G＞A，符合常染色體顯性遺傳。結(jié)論 PKD男性多發(fā)，臨床表型具多樣性，除運(yùn)動外，非運(yùn)動因素如偏頭痛亦可導(dǎo)致PKD發(fā)作。

動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙；臨床；遺傳學(xué)；誘發(fā)因素

發(fā)作性運(yùn)動障礙（Paroxysmal dyskinesias，PxDs）是一組少見的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)作性疾病，其中，發(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙（PKD）是最常見的發(fā)作類型，該病的首個(gè)致病基因PRRT2（proline-rich transmembrane protein 2）于2011年被克隆[4]。PRRT2致病突變在其他發(fā)作性疾病中也有發(fā)現(xiàn)[1]。本文報(bào)道的PKD家系除了動作誘發(fā)外，偏頭痛亦是其誘發(fā)因素，通過對該家系研究，進(jìn)一步了解其臨床及遺傳學(xué)特點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：本家系患者發(fā)病年齡13～17歲，男性3例，女性1例，男女比3∶1，發(fā)病特點(diǎn)為單側(cè)及雙側(cè)發(fā)作性肌強(qiáng)直，動作及偏頭痛誘發(fā)，每次發(fā)作持續(xù)時(shí)間不超過1 min，每日發(fā)作1～30次，發(fā)作時(shí)及發(fā)作間期均無意識障礙，臨床輔助檢查正常，4例患者均合并偏頭痛，對抗癲癇藥敏感，特別是苯妥英鈉療效顯著，對妥泰亦有效。

1.2 方法

1.2.1 先證者Ⅲ入院后查血生化，甲功系列，及甲狀旁腺激素，排除糖尿病甲狀腺功能亢進(jìn)等代謝性疾病，行顱腦MRI、腦電圖、肌電圖、心電圖、頭頸部血管超聲、頭頸部MRA等檢查均未發(fā)現(xiàn)異常?；颊撷瘛ⅱ?、Ⅱ2未住院院治療，在門診給予上述檢查未見異常。

1.2.2 基因檢測：①外周血基因組DNA提取：經(jīng)東營市人民醫(yī)院倫理委員會研究批準(zhǔn)，先證者及家系成員均簽署知情同意書后抽取其外周血，提取全部受檢個(gè)體外周血基因組DNA，采用標(biāo)準(zhǔn)酚-氯仿法提取基因組DNA，TE緩沖液溶解，-20 ℃保存?zhèn)溆谩＂谝锖铣桑豪肞rimer 3在線設(shè)計(jì)軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，涵蓋PRRT2所有外顯子編碼區(qū)及內(nèi)含子-外顯子剪切區(qū)。③聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)及Sanger測序、比對：采用標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系，于相應(yīng)的退火溫度條件下進(jìn)行PCR反應(yīng)，2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行反應(yīng)產(chǎn)物的鑒定及純化，ABI3730自動測序儀進(jìn)行PRRT2測序。測序結(jié)果應(yīng)用DNAStar軟件與標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對分析。

2 結(jié) 果

2.1 遺傳特征：該家系連續(xù)3代發(fā)病，符合常染色體顯性遺傳（家系譜圖見圖1）。

2.2 基因檢測結(jié)果：該家系成員Ⅰ、Ⅱ1、Ⅱ3、Ⅲ1的PRRT2基因均在3號外顯子存在突變c.694G＞A，突變類型為錯(cuò)義突變，其余成員均未發(fā)現(xiàn)基因突變（圖2）。

圖1 PKD——家系譜圖

表1 引物序列及反應(yīng)條件

圖2 基因測序圖

3 討 論

發(fā)作性運(yùn)動障礙（Paroxysmal dyskinesias，PxDs）目前根據(jù)誘發(fā)因素可將其分為4種類型，即發(fā)作性運(yùn)動誘發(fā)性運(yùn)動障礙（paroxysmal kinesigenic dyskinesia，PKD）、發(fā)作性過度運(yùn)動誘發(fā)性運(yùn)動障礙、發(fā)作性非運(yùn)動誘發(fā)性運(yùn)動障礙及發(fā)作性夜間睡眠性運(yùn)動障礙[2]。PKD是最常見的發(fā)作類型，2004年Bruno等[3]提出其臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；本文報(bào)道的1家系4例患者符合Bruno提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)。家族性患者的遺傳方式以常染色體顯性遺傳為主，有的呈不完全外顯，也有呈常染色體隱性遺傳的家系報(bào)道[5]，本文報(bào)道的家系為典型常染色體顯性遺傳，單純PKD家系較為少見，大多伴發(fā)其他疾病，本文報(bào)道家系即合并偏頭痛。迄今為止，共有3個(gè)位點(diǎn)被報(bào)道與發(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙有關(guān)，即EKD1～3[6-8]。2011年，來自中國的研究小組率先證實(shí)了PRRT2基因?yàn)榧易逍园l(fā)作性動作誘發(fā)性運(yùn)動障礙的致病基因[4]。本文報(bào)道的家系，基因檢測結(jié)果PRRT2基因3號外顯子均存在突變c.694G＞A，突變類型為錯(cuò)義突變，再次證實(shí)PRRT2為PKD致病基因。系列研究發(fā)現(xiàn)PRRT2基因突變也存在于其他一系列發(fā)作性疾病，并由此提出了“PRRT2 相關(guān)疾?。≒RD）”的概念。PRRT2基因包含4個(gè)外子，其中第2和3外顯子為主要突變部位，我們研究的PKD家系基因突變都位于PRRT2基因第3外顯子。在PRRT2相關(guān)疾病中主要突變類型為無義突變，其他突變類型包括錯(cuò)義突變、剪切突變和插入突變[6]。c.649dupC（p.R217PfsX8）為熱點(diǎn)突變，因此，對于PKD家系患者，進(jìn)行PRRT2基因檢測時(shí)，c.649dupC（p.R217PfsX8）可列為首選。我們報(bào)道的家系致病基因PRRT2，突變c.694G＞A，突變類型為錯(cuò)義突變，也屬較常見的突變類型，一種突變可導(dǎo)致多種表型，PRRT2基因突變的基因型與表型之間的關(guān)系目前還無法確定。

目前PKD發(fā)病機(jī)制尚未明確，PRRT2基因編碼一個(gè)跨膜蛋白2，具有重要生理功能。大腦皮質(zhì)以及小腦、小腦腳、蒼白球、尾狀核、丘腦底核等結(jié)構(gòu)中可檢測到高表達(dá)的PRRT2 mRNA[4]。無義突變引起肽鏈截短并介導(dǎo)mRNA降解，導(dǎo)致PRRT2蛋白功能喪失[8]，因此PRRT2蛋白功能缺失引起細(xì)胞膜定位功能異常，可能與PKD發(fā)病有關(guān)。此外PKD與突觸相關(guān)蛋白25（SNAP25）有關(guān)，PRRT2蛋白發(fā)生功能缺失后，SNAP25功能受到影響，導(dǎo)致電壓門控性鈣離子通道調(diào)控失常，影響突觸囊泡胞吐過程誘發(fā)PKD。本研究家系合并偏頭痛，研究發(fā)現(xiàn)家族性偏癱性偏頭痛（familial hemiplegic migraine，F(xiàn)HM）是一種與遺傳因素明顯相關(guān)的先兆性偏頭痛?；颊甙l(fā)病年齡一般在兒童期或青少年期。2012年Dale等[9]在伴有偏癱性偏頭痛的發(fā)作性運(yùn)動障礙家系中檢測出PRRT2基因C.649dupC突變，此后Gardiner等[10]研究發(fā)現(xiàn)PRRT2在偏癱性偏頭痛家系中檢出率6.3%（4/49），散發(fā)患者為1.1%（2/180），這證明PRRT2是家族性偏癱性偏頭痛致病基因之一。本研究所獲得致病基因是否也導(dǎo)致了該家系偏頭痛，或者偏頭痛是一臨床表型，抑或是PKD的另一誘發(fā)因素，PKD是否還存在更多的誘發(fā)因素，有待于進(jìn)一步探討。

[1] Wood H.Genetics:expanding the spectrum of neurological disorders associated with PRRT2 mutations [J].Nat Rev Neurol,2012,8(12): 657.

[2] Demirkiran M,Jankovic J.Paroxysmal dyskinesias;clinical features and classification[J].Ann Neurol,1995,38:571-579.

[3] Bruno MK,Hallett M,Gwinn-Hardy K,et al.Clinical evaluation of idiopathic paroxysmal kinesigenic dyskinesia: new diagnostic criteria[J].Neurology,2004,63(12):2280-2287.

[4] Chen WJ,Lin Y,Xiong ZQ,et al.Exome sequencing identifies truncating mutations in PRRT2 that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia[J].Nat Genet,2011,43(12):1252-1255.

[5] 周瑾瑕,李國良,劉鼎,等.家族性發(fā)作性運(yùn)動誘發(fā)性運(yùn)動障礙六個(gè)家系的臨床及遺傳特點(diǎn)分析[J].中華神經(jīng)科雜志,2006,39(11): 726-729.

[6] Lee HY,Huang Y,Bruneau N,et al.Mutations in the gene PRRT2 cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia with infantile convulsions [J].Cell Rep,2012,1(1):2-12.

[7] Spacey SD,Valente EM,Wali GM,et al.Genetic and clinical heterogeneity in paroxysmal kinesigenic dyskinesia: evidence for a third EKD gene[J].Mov Disord,2002,17(4):717-725.

[8] Cartegni L,Chew SL,Krainer AR.Listening to silence and understanding nonsense: exonic mutations that affect splicing[J].Nat Rev Genet,2002,3(4):285-298.

[9] Dale RC,GardinerA,Antony J,et a1.Familial PRRT2 mutation with heterogeneous paroxysmal disorders including paroxysmal torticollis and hemiplegic migraine[J].Dev Med Child Neurol,2012,54(10): 958-960.

[10] Gardiner AR,Bhatia KP,Stamelou M,et a1.PRRT2 gene mutations: from paroxysmal dyskinesia to episodic ataxia and hemiplegic migraine[J].Neurology,2012,79(21):2115-2121.

Clinical and Genetic Features of One Han Nationality Family with Paroxysmal Kinesigenic Dyskinesia and Migraine

BI Guang-hui, QU Xing-hua, LIU Zeng-ling, LIU Chang-ling
(Department of Neurology, Dongying People's Hospital, Dongying 257091, China)

Objective To study the clinical and genetic features and inducing factors of one Han nationality family with paroxysmal kinesigenic dyskinesia (PKD) and migraine. Methods The information of 13 family members in one pedigree, including 4 patients were analyzed, and the responce to treatment and inducing factors and the clinical and genetic features were followed up. DNA was extracted from peripheral blood samples, and then screened for PRRT2 mutations. Results There were four patients with migraine in the pedigree (three men, one women); the ratio of male to female was 3∶1; the four patients showed good response to phenytoin we detected a nonsense mutation c.694G＞A in PRRT2 gene in four family members, showing autosomal dominant inheritance. Conclusions PKD with multiple clinical phenotypes occur in more than man, besides kinesigenic factor nonkinesigenic factors such as migraine induced PKD.

Paroxysmal kinesigenic dyskinesias; Clinical; hereditary; Inducing factors

R747.2

B

1671-8194（2017）01-0013-02