飼糧中配合橡膠籽餅對(duì)蛋雞蛋黃脂肪酸組成的影響

魯瓊芬 陳培富* 柴 艷 李琦華(.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明6500；.云南省德宏州芒市科學(xué)技術(shù)局，德宏678400；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明6500)

飼糧中配合橡膠籽餅對(duì)蛋雞蛋黃脂肪酸組成的影響

魯瓊芬1陳培富1*柴 艷2李琦華3**
(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201；2.云南省德宏州芒市科學(xué)技術(shù)局，德宏678400；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650201)

本試驗(yàn)通過(guò)在海蘭褐蛋雞飼糧中配合不同比例的橡膠籽餅，評(píng)價(jià)其對(duì)蛋黃脂肪酸組成及膽固醇含量的影響。選取72只25周齡的健康海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分成6個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只雞。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，Ⅰ～Ⅴ組飼糧分別配合5.00%、10.00%、15.00%、20.00%和25.00%的橡膠籽餅。各組飼糧的營(yíng)養(yǎng)水平一致。試驗(yàn)期6周。結(jié)果表明：飼糧中配合不同比例橡膠籽餅對(duì)蛋雞蛋黃飽和脂肪酸(SFA)含量無(wú)顯著影響(P>0.05)；但蛋黃亞油酸(LA)、α-亞麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加呈增加趨勢(shì)，且各試驗(yàn)組蛋黃DHA含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)；隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加，蛋黃總多不飽和脂肪酸(PUFA)、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量呈增加趨勢(shì)，n-6/n-3 PUFA呈降低趨勢(shì)；各試驗(yàn)組蛋黃膽固醇含量與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)，但均低于對(duì)照組。由此可見(jiàn)，飼糧中配合一定比例的橡膠籽餅?zāi)軌颢@得較低的n-6/n-3 PUFA，達(dá)到提高蛋黃總PUFA、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量的效果。

橡膠籽餅；蛋雞；蛋黃；多不飽和脂肪酸

橡膠籽是橡膠樹(shù)的種子，為橡膠種植業(yè)的副產(chǎn)物。新鮮橡膠籽的外殼約占其總重量的1/3，水分含量達(dá)25%；籽仁中富含油脂，其組成類(lèi)似于亞麻籽油。與大豆餅粕相比，溶劑浸出和機(jī)榨的橡膠籽餅粕含較多油脂。橡膠籽粕的脂肪酸組成中，多不飽和脂肪酸(PUFA)占54.7%，單不飽和脂肪酸(MUFA)占25.9%，飽和脂肪酸(SFA)占10.4%；而亞麻籽粕的脂肪酸組成中，PUFA、MUFA和SFA分別占67.9%、16.4%和9.7%[1]。橡膠籽粕的粗蛋白質(zhì)含量為25%～30%，各種必需氨基酸含量較高且比例均衡，是優(yōu)質(zhì)的純天然熱帶蛋白質(zhì)飼料原料[2]。橡膠籽餅粕可部分替代優(yōu)質(zhì)蛋白源，為飼糧補(bǔ)充能量和蛋白質(zhì)。目前，我國(guó)可結(jié)籽橡膠樹(shù)約1 400萬(wàn)畝(1畝≈667 m2)，每畝橡膠林年產(chǎn)橡膠籽30～45 kg，全國(guó)每年可產(chǎn)橡膠籽42～63萬(wàn)t[3]。截止2008年，云南省橡膠種植面積達(dá)43.58萬(wàn)公頃[4]，僅西雙版納華坤生物科技有限公司年加工橡膠籽可達(dá)1萬(wàn)余t，生產(chǎn)橡膠籽油2 000多t和橡膠籽餅4 200多t[5]。由此可見(jiàn)，橡膠籽資源開(kāi)發(fā)潛力巨大。橡膠籽粕售價(jià)僅為2 500元/t，遠(yuǎn)低于豆粕，若大力發(fā)展飼料用橡膠籽粕，必將降低地方畜禽養(yǎng)殖成本，形成對(duì)豆粕等飼料的有力補(bǔ)充。研究表明，飼糧中配合8%～24%的橡膠籽餅，肉仔雞未出現(xiàn)臨床中毒癥狀，肝功能正常，肝組織切片鏡檢也未發(fā)現(xiàn)中毒病理變化[6]；飼糧中配合5%～25%的橡膠籽餅對(duì)肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育、成活率、日增重和肌肉化學(xué)成分等均無(wú)不良影響，但各試驗(yàn)組的采食量及料重比均高于對(duì)照組[7]。目前，有關(guān)橡膠籽餅粕在蛋雞上的應(yīng)用報(bào)道較少，且僅限于對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的研究[8]。已知通過(guò)調(diào)整蛋雞飼糧可改變蛋的脂肪酸組成，進(jìn)而增加蛋中PUFA含量，為人類(lèi)提供富含PUFA的蛋[9-10]。研究也發(fā)現(xiàn)，通過(guò)調(diào)控蛋雞飼糧，使之產(chǎn)富含n-3 PUFA的蛋完全切實(shí)可行[11-14]。鑒于橡膠籽富含PUFA，本試驗(yàn)通過(guò)在蛋雞飼糧中配合不同比例的橡膠籽餅，研究其對(duì)蛋黃脂肪酸組成和膽固醇含量的影響，以期提高橡膠籽餅粕的附加值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)用橡膠籽餅由云南西雙版納華坤生物科技有限公司提供，常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量見(jiàn)表1。試驗(yàn)選取72只21周齡的健康海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分成6個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只雞。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，Ⅰ～Ⅴ組飼糧分別配合5.00%、10.00%、15.00%、20.00%和25.00%的橡膠籽餅。各組營(yíng)養(yǎng)水平一致。用供雞場(chǎng)家飼糧繼續(xù)飼喂蛋雞3周，待各組蛋雞適應(yīng)新環(huán)境且產(chǎn)蛋率無(wú)顯著差異(P<0.05)時(shí)，用各試驗(yàn)組飼糧飼喂并逐漸過(guò)渡3 d，以減少換料給蛋雞造成的應(yīng)激，預(yù)試期1周。25周齡時(shí)開(kāi)始正式試驗(yàn)，試驗(yàn)期6周。

表1 橡膠籽餅常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量

表中所有數(shù)值均為實(shí)測(cè)值。

All values in the table were measured values.

1.2 試驗(yàn)飼糧

各組試驗(yàn)飼糧按照代謝能和各營(yíng)養(yǎng)素相同的原則，參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T33—2004)中的產(chǎn)蛋雞營(yíng)養(yǎng)需要進(jìn)行科學(xué)配制，所有原料一次性采購(gòu)。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

表2 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表2項(xiàng)目Items組別Groups對(duì)照ControlⅠⅡⅢⅣⅤ總磷TP0．600．600．600．600．600．60有效磷AP0．380．390．400．400．410．41食鹽NaCl0．370．370．370．370．370．37賴氨酸Lys0．830．830．830．830．830．83蛋氨酸Met0．360．360．360．360．360．36粗脂肪EE6．607．107．307．908．809．30粗纖維CF3．504．004．304．505．506．10

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Premix provided the following per kg of diets:VA 16 500 IU，VD33 300 IU，VE 200 mg，VK33 mg，VB11.5 mg，VB26.0 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 9.0 mg，煙酸 niacin 18.0 mg，VB63.0 mg，VB120.009 mg，葉酸 folic acid 0.6 mg，生物素 biotin 0.03 mg，Zn 35.00 mg，Cu 4.00 mg，F(xiàn)e 60.00 mg，Mn 30.00 mg，I 0.35 mg，Se 0.10 mg，乙氧基喹啉 ethoxyquin 750 mg。

2)粗脂肪和粗纖維為實(shí)測(cè)值，其余均為計(jì)算值。EE and CF were measured values, while the others were calculated values.

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞在同一棟雞舍內(nèi)飼養(yǎng)，采用籠養(yǎng)方式，每籠1只雞。雞舍按照常規(guī)程序消毒、清理糞便，每天上午喂料前打開(kāi)窗戶，晚上關(guān)燈前關(guān)閉窗戶，以保證雞舍內(nèi)良好的空氣環(huán)境。試驗(yàn)期間每天07:00和16:00喂料，白天采用自然光照，晚上輔以人工光照，每天恒定光照時(shí)間為16 h。采用自動(dòng)飲水器自由飲水，自由采食。每天16:30收集雞蛋，每天記錄雞舍溫度和濕度。

1.4 橡膠籽餅和試驗(yàn)飼糧的脂肪酸組成

橡膠籽餅和試驗(yàn)飼糧的脂肪酸組成見(jiàn)表3。

表3 橡膠籽餅和試驗(yàn)飼糧的脂肪酸組成

ND表示未檢測(cè)到。ND meaned undetected.

1.5 主要儀器及試劑

1.5.1 儀器

HP-7890氣相色譜儀(USA)，配氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)檢測(cè)器和HP INNOWAX毛細(xì)管色譜柱，柱長(zhǎng)30 m，內(nèi)徑0.25 mm，膜厚0.25 μm，溫度承受范圍40～260 ℃(程序升溫最高耐受溫度為270 ℃)，載氣為高純氮?dú)?N2)，燃?xì)鉃榛旌峡諝饧案呒儦錃?H2)。HP-1100型高效液相色譜(HPLC)儀(USA)，配HP 20RBA×SB-C18液相色譜柱，5 μm，250 mm×4.6 mm，流動(dòng)相為乙腈-異丙醇(4∶1)，須過(guò)0.45 μm有機(jī)系微孔濾膜，流速為1.200 mL/min，柱溫35.0 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm，進(jìn)樣量為10 μL。XW-80A旋渦混勻器，THZ-82恒溫振蕩器，CP-214電子分析天平，JI 80-2B離心機(jī)，DL-180A超聲波清洗機(jī)，HH SY21-Ni恒溫水浴鍋。

1.5.2 試劑

月桂酸甲酯、肉豆蔻酸甲酯、棕櫚酸甲酯、十七烷酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯和花生酸甲酯脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自美國(guó)AccuStandard公司。亞油酸(LA)甲酯、γ-亞麻酸(GLA)甲酯、α-亞麻酸(ALA)甲酯、花生四烯酸(AA)甲酯、二十碳五烯酸(EPA)甲酯、二十二碳六烯酸(DHA)甲酯脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品和膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自美國(guó)NU-CHEKPREP公司。常規(guī)試劑：乙腈、甲醇、異丙醇均為色譜純(美國(guó))，正己烷、甲醇、乙酰氯、碳酸鉀均為分析純(國(guó)產(chǎn))。

1.5.3 標(biāo)準(zhǔn)品及試劑的配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液及工作液配制：分別稱取各脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品100 mg，用正己烷多次洗滌轉(zhuǎn)移至5 mL容量瓶中，定容至刻度，得到各脂肪酸甲酯標(biāo)樣儲(chǔ)備液(20 mg/mL)，封口，-20 ℃保存。用此溶液配制濃度分別為5.00、2.50、1.25、0.50和0.25 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

稱取20.2 mg膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品，置于燒杯中，用無(wú)水乙醇溶解，多次洗滌轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中稀釋至刻度，得到膽固醇儲(chǔ)備液(1.008 mg/mL)。用此溶液配制濃度分別為0.100 8、0.201 6、0.403 2、0.604 8和0.806 4 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液。在HPLC進(jìn)樣前須過(guò)0.45 μm有機(jī)系微孔濾膜。

1.6 樣品采集

于第4和6周的周五、周六收集雞蛋，每重復(fù)取3枚雞蛋，分離蛋清后，3個(gè)蛋黃合并為1個(gè)樣品，混勻后于-20 ℃保存，用于分析蛋黃脂肪酸組成。于第6周，每組隨機(jī)抽取4枚蛋，用于測(cè)定蛋黃膽固醇含量。

1.7 樣品前處理

1.7.1 脂肪酸測(cè)定樣品甲酯化

取5 g蛋黃樣品，冷凍干燥48 h，準(zhǔn)確稱取0.500 0 g干燥的蛋黃樣品于20 mL具塞試管中，每個(gè)試管中加入2 mL正己烷，然后緩慢加入3 mL 5%新配制的甲酰氯(緩慢加入1倍乙酰氯于10倍無(wú)水甲醇中)，并使該溶劑直接加至樣品中，以防濺到試管壁上。慢速旋渦振蕩1 min，使反應(yīng)物距試管底部高度保持在2～3 cm，然后將樣品管于70 ℃水浴2 h，如果溶劑揮發(fā)，則樣品冷卻后加入2 mL正己烷，再水浴，以保證甲酯化完全。再將樣品管冷卻至室溫，加入5 mL 6%碳酸鉀溶液，再加入2 mL正己烷使樣品接近中性。中速振蕩30 s混勻，然后1 500 r/min離心10 min，試管上層有機(jī)相(正己烷)用移液器轉(zhuǎn)移到螺蓋試管中，然后向試管中的萃取液加入1 g無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)0.45 μm有機(jī)系微孔濾膜，上機(jī)待測(cè)。

1.7.2 膽固醇測(cè)定樣品前處理

將雞蛋打開(kāi)，除去蛋清，將蛋黃置于燒杯中混勻，稱取5.000 0 g蛋黃樣品，用蒸餾水稀釋并定容至50 mL容量瓶中，混勻，得到蛋黃稀釋液0.1 g/mL。精密量取蛋黃稀釋液1.0 mL，置于具塞磨口試管，加入1 mL 95%乙醇，旋渦混勻，以避免絮狀沉淀產(chǎn)生。加入2.5 mL乙醚，振搖30 s；再加入2.5 mL石油醚，充分振蕩，靜置30 min，使液層分離；吸取上層有機(jī)相于另一具塞試管中，同法再依次加入乙醚、石油醚萃取1次，合并2次萃取液。合并2次的萃取液，于40 ℃水浴中用N2吹干，加入2.0 mL無(wú)水乙醇溶解，過(guò)0.45 μm有機(jī)系微孔濾膜，作為HPLC分析樣品上機(jī)待測(cè)。

1.8 樣品測(cè)定

1.8.1 蛋黃中脂肪酸的測(cè)定及含量計(jì)算

蛋黃中脂肪酸的測(cè)定參照Sukhija等[15]的方法，并做改進(jìn)。HP-7890氣相色譜儀(USA)的工作條件：色譜柱為HP INNOWAX 30 m×0.25 mm×0.25 μm，載氣為N2；恒定柱流+尾吹速度23.371 mL/min，H2流量40 mL/min，空氣流量400 mL/min；進(jìn)樣口溫度220 ℃，采取不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量2 μL，壓力設(shè)為433.87 Pa，隔墊吹掃流量3 mL/min；FID檢測(cè)器工作溫度280 ℃。升溫程序：100 ℃保持1 min，以15 ℃/min升至200 ℃并保持5 min，再以4 ℃/min升至250 ℃并保持10 min，合計(jì)35.167 min。根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。根據(jù)峰面積和濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積(y)為縱坐標(biāo)，各脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(x)為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出各脂肪酸甲酯的線性方程，以樣品中各脂肪酸絕對(duì)含量為測(cè)定指標(biāo)。線性方程相關(guān)系數(shù)分別為：月桂酸甲酯，R2=0.999 2；肉豆蔻酸甲酯，R2=0.999 4；棕櫚酸甲酯，R2=0.999 1；十七烷酸甲酯，R2=0.999 3；硬脂酸甲酯，R2=0.999 4；油酸甲酯，R2=0.998 2；LA甲酯，R2=0.999 0；GLA甲酯，R2=0.999 2；ALA甲酯，R2=0.999 3；花生酸甲酯，R2=0.999 8；AA甲酯，R2=0.999 2；EPA甲酯，R2=0.999 1；DHA甲酯，R2=0.999 8。

1.8.2 色譜圖

混合標(biāo)樣的脂肪酸甲酯氣相色譜圖按出峰時(shí)間順序依次為月桂酸甲酯(6.439 min)、肉豆蔻酸甲酯(7.474 min)、棕櫚酸甲酯(9.275 min)、十七烷酸甲酯(11.804 min)、硬脂酸甲酯(13.538 min)、油酸甲酯(15.581 min)、LA甲酯(16.912 min)、GLA甲酯(17.560 min)、ALA甲酯(18.227 min)、花生酸甲酯(19.773 min)、AA甲酯(22.152 min)、EPA甲酯(23.486 min)、DHA甲酯(28.607 min)(圖1)。蛋黃樣品脂肪酸甲酯氣相色譜見(jiàn)圖2。

圖2 蛋黃樣品的脂肪酸甲酯氣相色譜圖

1.8.3 蛋黃中膽固醇測(cè)定及含量計(jì)算

蛋黃中膽固醇測(cè)定采用楊琴等[16]的HPLC法。根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。根據(jù)峰面積和濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積(y)為縱坐標(biāo)，各膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(x)為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出各膽固醇的線性方程，以樣品中各膽固醇絕對(duì)含量為測(cè)定指標(biāo)(圖3)。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)和Duncan氏法多重比較，P<0.05為差異顯著，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

圖3 膽固醇標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)蛋雞蛋黃脂肪酸組成的影響

由表4可知，第4周，與對(duì)照組相比，Ⅰ組蛋雞蛋黃中月桂酸含量差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組均無(wú)顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組蛋黃肉豆蔻酸、棕櫚酸、十七烷酸和花生酸含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；Ⅰ和Ⅱ組蛋黃硬脂酸含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，而Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)；總體上，飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)蛋黃中SFA的沉積量無(wú)顯著影響(P>0.05)。Ⅰ和Ⅱ組蛋黃油酸含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，而Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)；Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的蛋黃LA含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，而Ⅳ和Ⅴ組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，且蛋黃中LA含量與飼糧中橡膠籽餅配合比例呈正相關(guān)，線性方程為y=0.262 4x+17.376 0，R2=0.938(P=0.006)；各試驗(yàn)組蛋黃GLA含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組蛋黃ALA含量與對(duì)照組相比差異均顯著(P<0.05)，且與飼糧橡膠籽餅配合比例呈正相關(guān)，線性方程為y=0.066 0x+0.399 5，R2=0.992(P=0.001)；Ⅰ組蛋黃AA含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)；Ⅰ和Ⅱ組蛋黃EPA含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，而Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，且隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加蛋黃EPA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程為y=0.002 0x+0.107 9，R2=0.873(P=0.023)；各試驗(yàn)組蛋黃DHA含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，且隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加蛋黃DHA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程為y=0.091 1x+1.498 4，R2=0.983(P=0.001)。隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加，蛋黃中SFA和MUFA含量無(wú)顯著變化(P>0.05)，但Ⅲ組含量均略高于其他組；蛋黃總PUFA、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程依次為y=0.423 7x+22.738 0，R2=0.957(P=0.030)；y=0.264 6x+20.732 0，R2=0.917(P=0.010)；y=0.159 1x+2.005 4，R2=0.989(P=0.001)；蛋黃n-6/n-3 PUFA呈降低趨勢(shì)，且與飼糧中橡膠籽餅配合比例呈負(fù)相關(guān)，線性方程為y=-0.243 0x+9.792 9，R2=0.882(P=0.002)。

表4 飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)第4周蛋雞蛋黃脂肪酸組成的影響

續(xù)表4項(xiàng)目Items組別Groups對(duì)照ControlⅠⅡⅢⅣⅤ油酸Oleicacid(C18∶1)71．29±1．19b72．15±1．59b72．08±0．33b77．26±1．38a78．30±1．88a78．54±0．69a亞油酸Linolercacid(C18∶2，n?6)18．01±0．34b18．09±2．24b18．83±0．87b22．26±1．67ab23．44±1．33a23．30±2．64aγ-亞麻酸γ?linolenicacid(C18∶3γ，n?6)0．16±0．010．15±0．010．16±0．010．17±0．010．17±0．010．17±0．01α-亞麻酸α?linolenicacid(C18∶3α，n?3)0．40±0．02d0．76±0．09c0．94±0．07c1．51±0．14b1．73±0．12ab2．01±0．26a花生酸Arachicacid(C20∶0)0．29±0．010．26±0．030．27±0．010．28±0．030．31±0．010．27±0．03花生四烯酸Arachidonicacid(C20∶4，n?6)3．42±0．06a2．97±0．30b3．08±0．01ab3．25±0．07ab3．47±0．01a3．15±0．19ab二十碳五烯酸Eicosapentaenoicacid(C20∶5，n?3)0．11±0．02c0．11±0．01c0．13±0．01bc0．16±0．01a0．14±0．02ab0．15±0．01ab二十二碳六烯酸Docosahexaenoicacid(C22∶6，n?3)1．35±0．03e2．04±0．21d2．37±0．02c3．10±0．05b3．38±0．09ab3．59±0．18a飽和脂肪酸SFA29．5829．0829．5932．1830．2029．94單不飽和脂肪酸MUFA27．4327．0627．3129．7227．6627．52多不飽和脂肪酸PUFA23．4524．1125．5030．4432．3332．36n?6多不飽和脂肪酸n?6PUFA21．5921．2022．0725．6827．0826．61n?3多不飽和脂肪酸n?3PUFA1．862．913．434．765．255．75n?6/n?3多不飽和脂肪酸n?6/n?3PUFA11．647．296．435．395．164．62

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

由表5可知，第6周，各試驗(yàn)組蛋黃月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸和花生酸含量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)，各試驗(yàn)組間也無(wú)顯著差異(P>0.05)；Ⅰ組蛋黃十七烷酸含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組蛋黃硬脂酸含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)；總體上，飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)蛋黃中SFA的沉積量無(wú)顯著影響(P>0.05)。Ⅰ組蛋黃油酸含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組蛋黃LA含量與對(duì)照組相比差異均顯著(P<0.05)，且隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加蛋黃LA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程為y=0.310 5x+23.598 0，R2=0.924(P=0.008)；各試驗(yàn)組蛋黃GLA含量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)；Ⅰ組蛋黃ALA含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異均顯著(P<0.05)，且隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加蛋黃ALA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程為y=0.076 9x+0.587 0，R2=0.993(P=0.001)；Ⅴ組蛋黃AA含量與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異均不顯著(P>0.05)，且各試驗(yàn)組蛋黃AA含量均低于對(duì)照組；各試驗(yàn)組蛋黃EPA含量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)，線性方程為y=0.001 3x+0.130 9，R2=0.891(P=0.017)；各試驗(yàn)組蛋黃DHA含量與對(duì)照組相比差異均顯著(P<0.05)，且隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加蛋黃DHA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程為y=0.096 3x+1.801 8，R2=0.986(P=0.001)。隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加，蛋黃中SFA和MUFA含量無(wú)顯著變化(P>0.05)，但試驗(yàn)組蛋黃MUFA含量均高于對(duì)照組；蛋黃總PUFA、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量呈增加趨勢(shì)，線性方程依次為y=0.470 1x+30.452 0，R2=0.953(P=0.003)；y=0.295 6x+27.932 0，R2=0.911(P=0.011)；y=0.174 5x+2.519 7，R2=0.991(P=0.001)；n-6/n-3 PUFA呈降低趨勢(shì)，且與飼糧橡膠籽餅配合比例呈負(fù)相關(guān)，線性方程為y=-0.250 2x+10.567 0，R2=0.904(P=0.013)。

表5 飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)第6周蛋雞蛋黃脂肪酸組成的影響

2.2 飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)蛋雞蛋黃膽固醇含量的影響

由表6可知，各試驗(yàn)組蛋黃膽固醇含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)，但各試驗(yàn)組全蛋膽固醇含量均低于對(duì)照組(P>0.05)，且Ⅳ組含量最低。

表6 飼糧中不同橡膠籽餅配合比例對(duì)蛋雞蛋黃膽固醇含量的影響

3 討 論

本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，隨飼糧中富含LA和ALA的橡膠籽餅配合比例的增加，蛋雞蛋黃中LA、ALA、EPA及DHA含量增加，蛋黃總PUFA、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量也呈增加趨勢(shì)，n-6/n-3 PUFA呈降低趨勢(shì)。Whitehead[17]發(fā)現(xiàn)飼糧脂肪酸組成可影響蛋黃中脂肪酸的沉積和組成。由于蛋黃中PUFA和其他脂類(lèi)成分受飼糧中相應(yīng)成分含量的影響，故提高飼糧中PUFA含量可提高蛋中PUFA的沉積量[18-21]。Bruneel等[22]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻可顯著增加蛋雞蛋黃中n-3 PUFA含量，生產(chǎn)出富含DHA的雞蛋。飼糧中添加富含ALA的胡麻籽和紫蘇籽等，可增加蛋雞蛋黃中n-3 PUFA的沉積，獲得富含n-3 PUFA的雞蛋[23-24]。上述研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。飼糧n-3 PUFA能顯著提高蛋黃中總PUFA含量，促進(jìn)蛋黃中n-3 PUFA的富集，降低蛋黃中的n-6 PUFA的含量及n-6/n-3 PUFA[25-26]。本研究中，飼糧中配合橡膠籽餅提高了蛋黃中n-6 PUFA的含量，其主要原因是蛋黃中LA(屬n-6 PUFA)含量顯著增加所致，與吳華等[20]結(jié)論一致。Pardio等[27]報(bào)道認(rèn)為，飼糧中配合富含n-3 PUFA的飼料原料能競(jìng)爭(zhēng)抑制AA在雞蛋中的沉積，提高雞蛋中n-3 PUFA含量，降低n-6/n-3 PUFA比值。本研究中，隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加，n-6/n-3 PUFA降低，也證實(shí)了這個(gè)結(jié)論。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，各試驗(yàn)組蛋雞蛋黃中AA含量均低于對(duì)照組(除第4周Ⅳ組外)，原因可能是飼糧中LA與ALA比例的變化所致。飼糧中配合富含n-3 PUFA的飼料原料，雞蛋中受影響最大的n-6 PUFA為AA。Cherian等[28]報(bào)道，蛋雞飼糧中配合富含ALA的飼料原料會(huì)導(dǎo)致雞蛋中AA含量降低。Jiang等[13]研究表明，蛋雞采食含ALA的飼糧時(shí)，雞蛋中AA含量的降低可能是由于ALA抑制了AA的合成。這可能是由于亞麻酸以及其代謝物可抑制AA的生成和代謝或能夠置換出AA的磷脂酶[29]，LA和ALA在去飽和碳鏈延長(zhǎng)過(guò)程中競(jìng)爭(zhēng)相同的Δ6和Δ5酶[30]。因此，飼糧中ALA含量的增加會(huì)降低AA代謝，可能是雞蛋中AA沉積量減少的原因[31]。

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，蛋黃SFA中含量最高的為十七烷酸。棕櫚酸在體內(nèi)有2個(gè)轉(zhuǎn)化方向：1)可進(jìn)行碳鏈延長(zhǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)橛仓幔?)可通過(guò)去飽和作用生成棕櫚烯酸[31]。有關(guān)飼糧中配合富含n-3 PUFA的飼料原料對(duì)蛋中SFA含量影響的研究結(jié)果不同。Caston等[32]報(bào)道認(rèn)為，飼糧中添加富含n-3 PUFA的亞麻籽或魚(yú)油，對(duì)蛋中棕櫚酸含量無(wú)顯著影響；而Marshall等[33]發(fā)現(xiàn)，飼喂白來(lái)航蛋雞1.5%的魚(yú)油，蛋中棕櫚酸含量顯著降低。Sims等[34]報(bào)道，肝臟中不飽和脂肪酸的消化產(chǎn)生的對(duì)脂肪酸合成的抑制作用高于SFA。棕櫚酸含量的降低可能與飼糧中不飽和脂肪酸含量增加導(dǎo)致脂肪合成的下降有關(guān)[31]。李運(yùn)珊等[35]給獼猴飼喂橡膠籽油，結(jié)果發(fā)現(xiàn)獼猴體內(nèi)脂肪酸組成發(fā)生了顯著變化，主要表現(xiàn)為SFA含量顯著降低(主要為棕櫚酸含量降低)，不飽和脂肪酸含量增加，其中主要為L(zhǎng)A含量增加，亞麻酸含量也略有增加。而本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)飼糧中配合橡膠籽餅對(duì)蛋黃中的棕櫚酸含量無(wú)顯著影響，與Caston等[32]研究結(jié)果相一致。

本試驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，蛋黃中總PUFA含量隨蛋雞飼糧中橡膠籽餅配合比例的增加而增加，而蛋黃MUFA和SFA含量變化不大；蛋黃膽固醇含量與對(duì)照組相比也無(wú)顯著差異。其原因除與蛋雞對(duì)脂肪酸的沉積特性有關(guān)外，還與橡膠籽餅的脂肪酸組成有關(guān)，同時(shí)也表明蛋黃脂肪酸組成主要受飼糧中PUFA含量的影響。汪鯤[36]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加亞麻籽可顯著提高蛋黃PUFA含量，降低MUFA和SFA含量。盧建等[37]利用水飛薊油飼喂蛋雞的研究發(fā)現(xiàn)，與大豆油飼糧相比，水飛薊油能顯著提高蛋中總SFA含量，顯著降低總PUFA含量，但與常規(guī)飼糧無(wú)顯著差異；與常規(guī)飼糧和大豆油飼糧相比，水飛薊油能顯著增加蛋中ALA和DHA含量。Gul等[38]報(bào)道，飼糧中添加2.0%、4.0%和6.0%的菜籽油，可降低蛋黃PUFA含量，顯著提高M(jìn)UFA含量，提高膽固醇含量；Hoan等[39]在蛋雞飼糧中添加1.5%、3.0%和4.5%芝麻油也得到了類(lèi)似的結(jié)果。

4 結(jié) 論

① 飼糧中配合5%～25%的橡膠籽餅對(duì)蛋雞蛋黃SFA含量無(wú)顯著影響，但蛋黃LA、ALA、EPA和DHA含量隨飼糧橡膠籽餅配合比例的增加呈增加趨勢(shì)，且各試驗(yàn)組蛋黃DHA含量與對(duì)照組差異顯著。

② 飼糧中配合一定比例的橡膠籽餅?zāi)軌颢@得較低的n-6/n-3 PUFA，達(dá)到提高蛋黃總PUFA、n-6 PUFA和n-3 PUFA含量的效果。

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*Contributed equally

**Corresponding author, professor, E-mail: 2473170727@qq.com

(責(zé)任編輯 李慧英)

Effects of Dietary Rubberseed Cake on Fatty Acid Composition in Yolk of Laying Hens

LU Qiongfen1CHEN Peifu1*CHAI Yan2LI Qihua3**
(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China; 2.MangshiBureauofScienceandTechnologyofDehongStateofYunnanProvince,Dehong678400,China; 3.KeyLaboratoryofAnimalNutritionandFeed,CollegeofAnimalScienceandTechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)

This study was conducted to evaluate the effects of rubberseed cake on the fatty acid composition and cholesterol content in yolk of Hy-Line Brown laying hens by formulated different proportions of rubberseed cake in their diets. Seventy two 25-week-old healthy Hy-Line Brown laying hens were randomly divided into 6 groups with 4 replicates per group and 3 hens per replicate. The laying hens in the control group were fed the corn-soybean meal basal diet, and the others in groups Ⅰ to Ⅴ were fed the formulated diets with 5.00%, 10.00%, 15.00%, 20.00% and 25.00% rubberseed cake, respectively. All diets contained the same nutrition levels. The experiment lasted for 6 weeks. The results showed that different dietary rubberseed cake formulated proportions had no significant effect on saturated fatty acid (SFA) content in yolk of laying hens (P>0.05), but the contents of linoleic acid (LA), α-linolenic acid (ALA), eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) in yolk showed an increasing trend with the increase of dietary rubberseed cake formulated proportion, and the DHA content in yolk in all experimental groups had significant difference with that in the control group (P<0.05). The contents of total polyunsaturated fatty acids (PUFA), n-6 PUFA and n-3 PUFA in yolk showed an increasing trend with the increase of dietary rubberseed cake formulated proportion, but the ratio of n-6 PUFA to n-3 PUFA showed a decreasing trend. The cholesterol content in yolk in all experimental groups had no significant difference with that in the control group (P>0.05), but lower cholesterol content was detected in all experimental groups compared with the control group. The above findings indicate that different dietary rubberseed cake formulated proportions can obtain a lower ratio of n-6 PUFA to n-3 PUFA and achieve the desired results of improving the contents of total PUFA, n-3 PUFA and n-6 PUFA in yolk.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(5)：1739-1749]

rubberseed cake; laying hens; yolk; polyunsaturated fatty acids

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.05.034

2016-11-04

魯瓊芬(1976—)，女，云南安寧人，實(shí)驗(yàn)師，碩士，主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail: luqiongfen0302@163.com

S831

A

1006-267X(2017)05-1739-11

*同等貢獻(xiàn)作者

**通信作者:李琦華，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: 2473170727@qq.com