癲癇患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ 水平變化及其意義

桂蘭，康靖，呂麗英 (興安職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)分院，內(nèi)蒙古烏蘭浩特37400；興安盟人民醫(yī)院)

癲癇患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ 水平變化及其意義

桂蘭1，康靖2，呂麗英2
(1興安職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)分院，內(nèi)蒙古烏蘭浩特137400；2興安盟人民醫(yī)院)

目的 觀察兒童癲癇患者血清高遷移率族蛋白1(HMGB1)、白細(xì)胞介素1(IL-2)、干擾素-γ(INF-γ)變化，并探討其意義。方法 選擇10例兒童癲癇患者為觀察組，30例健康兒童為對(duì)照組。觀察組癲癇頻發(fā)29例，持續(xù)狀態(tài)22例，非頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)38例。采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組血清HMGB1、IL-2及INF-γ水平。結(jié)果 觀察組血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平高于對(duì)照組(P均<0.05)。觀察組癲癇頻發(fā)、處于持續(xù)狀態(tài)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平高于非頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)患兒(P均<0.05)，癲癇頻發(fā)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平與持續(xù)狀態(tài)患兒相比，P均>0.05。結(jié)論 癲癇患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平升高。檢測(cè)HMGB1、IL-2、INF-γ可能有助于兒童癲癇的診斷及病情評(píng)估。

癲癇；高遷移率族蛋白1；白細(xì)胞介素2；干擾素-γ

免疫功能的紊亂以及炎癥性反應(yīng)在成人癲癇發(fā)作過程中有重要作用[1，2]。高遷移率族蛋白1(HMGB1)是廣泛存在于心、肝、脾、肺、腎等組織細(xì)胞中的非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，有研究發(fā)現(xiàn)[3]，HMGB1參與了顱內(nèi)感染、腦缺血、腦損傷以及敗血癥等炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展過程。IL-2由活化的CD4+T、CD8+T細(xì)胞合成并分泌，是具有廣泛生物活性的調(diào)控免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子，有研究證實(shí)白細(xì)胞介素2(IL-2)在癲癇發(fā)生發(fā)展過程中扮演重要作用[4]。干擾素-γ(INF-γ)是在一定刺激原作用下由T淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，能通過調(diào)節(jié)并誘導(dǎo)細(xì)胞趨化因子的表達(dá)而促進(jìn)炎癥性反應(yīng)的發(fā)生[5]。但是癲癇兒童血清HMGB1、IL-2、IFN-γ水平的變化并不明確。本研究觀察了癲癇兒童血清中HMGB1、IL-2、IFN-γ水平變化，探討其在兒童癲癇發(fā)生發(fā)展過程中的作用及其臨床意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2014年1月～2016年12月收治的89例兒童癲癇患者為觀察組，其中男49例、女40例，年齡3個(gè)月～14歲、平均5.7歲。病程3個(gè)月～5年，平均1.2年。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合2010年國(guó)際抗癲癇聯(lián)盟和國(guó)際癲癇局制定的癲癇發(fā)作和癲癇綜合征診斷指南[6]，并結(jié)合臨床特征、病史、腦電圖、MRI等檢查確診的原發(fā)性癲癇；②年齡0～14歲；③近1個(gè)月內(nèi)未服用免疫抑制劑、激素類以及其它可能影響本研究結(jié)果的藥物；④患者家屬在知情同意書上簽字；⑤獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)的通過。排除標(biāo)準(zhǔn)：①顱腦損傷、腦出血、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等引起的繼發(fā)性癲癇；②近期感染性疾病者；③內(nèi)分泌性疾病、惡性腫瘤等患者。根據(jù)癲癇發(fā)作的頻率以及每次發(fā)作持續(xù)時(shí)間，本組癲癇頻發(fā)29例、持續(xù)狀態(tài)22例、非癲癇頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)38例。另選取同期查體的30例健康兒童為對(duì)照組，其中男18例，女12例；年齡1～13歲，平均6.1歲。本研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有受試者的監(jiān)護(hù)人已簽署知情同意書。

1.2 血清HMGB1、IL-2、IFN-γ檢測(cè)方法 觀察組患兒清晨采集癲癇發(fā)作12 h內(nèi)空腹肘靜脈血4 mL，對(duì)照組兒童于清晨體檢時(shí)采集空腹肘靜脈血4 mL，在室溫下靜置30 min后以3 000 r/min的速度離心10 min，留取血清液置于-80 ℃環(huán)境下保存待測(cè)。采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平，其中HMGB1、IL-2試劑盒均購(gòu)自上海生工生物工程股份有限公司(HMGB1檢測(cè)試劑盒批號(hào)：A729AD0275，IL-2檢測(cè)試劑盒批號(hào)：A729AD0276)，INF-γ試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司(INF-γ檢測(cè)試劑盒批號(hào)：20130403)。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平比較 觀察組患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)。兩組患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平比較見表1。

表1 兩組患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平比較

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05。

2.2 觀察組不同病情患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平比較 觀察組不同病情癲癇兒童血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平水平見表2。觀察組癲癇頻發(fā)、處于持續(xù)狀態(tài)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平高于非頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)患兒(P均<0.05)，癲癇頻發(fā)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平與持續(xù)狀態(tài)患兒相比，P均>0.05。經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，觀察組患者血清HMGB1與IL-2、INF-γ均呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.793、0.659，P<0.05)，血清IL-2與INF-γ呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.812，P<0.05)。

HMGB1主要存在于心、肝、脾、肺、腎等組織的真核細(xì)胞中，是一類非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，具有調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞出芽以及遷移的作用，參與了腦發(fā)育的生理過程。報(bào)道表明[11]，HMGB1參與了組織損傷、缺血性腦損傷、膿毒血癥等疾病的病理過程。Huang 等[12]研究顯示，癲癇大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞中HMGB1水平升高，Choy等[13]發(fā)現(xiàn)癲癇患者海馬組織中HMGB1表達(dá)明顯增加。IL-2主要是由激活的T細(xì)胞分泌的可溶性因子，具有調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞平衡、促進(jìn)淋巴細(xì)胞增生的功能。研究發(fā)現(xiàn)[14]，IL-2抗體、IL-2受體的抗體可以抑制興奮性氨基酸的神經(jīng)傳導(dǎo)作用，并促進(jìn)γ氨基丁酸的神經(jīng)傳遞作用，進(jìn)而抑制癲癇的發(fā)作。由此推斷，IL-2作為炎癥因子，可能參與了癲癇的發(fā)病過程。IFN是具有廣泛生物活性的防御糖蛋白，具有免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗細(xì)胞增殖等作用，INF-γ主要是由T細(xì)胞、NK細(xì)胞所分泌，屬于小分子多肽，只存在于人或者靈長(zhǎng)類動(dòng)物組織細(xì)胞中。研究發(fā)現(xiàn)[15]，INF-γ介導(dǎo)了機(jī)體感染后的多種免疫應(yīng)答反應(yīng)。

表2 觀察組不同病情癲癇患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平比較

注：與非癲癇頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)者相比，#P<0.05。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，觀察組患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平高于對(duì)照組，提示HMGB1、IL-2、INF-γ可能參與了癲癇的發(fā)病過程，與文獻(xiàn)[12,16]一致。兒童癲癇發(fā)病過程極為復(fù)雜，發(fā)作頻率、發(fā)作持續(xù)時(shí)間對(duì)評(píng)估癲癇病情有重要意義，發(fā)作頻率越高、持續(xù)時(shí)間越久，患者預(yù)后相對(duì)越差。本研究結(jié)果顯示，觀察組癲癇頻發(fā)、處于持續(xù)狀態(tài)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平高于非頻發(fā)或持續(xù)狀態(tài)患兒，癲癇頻發(fā)患兒血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平與持續(xù)狀態(tài)患兒相比P均>0.05。說明發(fā)作頻繁、發(fā)作持續(xù)時(shí)間久的兒童癲癇患者血清HMGB1、IL-2、INF-γ水平明顯升高，HMGB1、IL-2、INF-γ水平越高，癲癇病情越嚴(yán)重。癲癇病情越嚴(yán)重，免疫應(yīng)答反應(yīng)越強(qiáng)烈，合成并分泌的細(xì)胞因子水平越高。

近年來(lái)，生態(tài)旅游業(yè)發(fā)展火爆，各地都在積極開發(fā)生態(tài)旅游事業(yè)，取得了一定的成效，生態(tài)旅游已經(jīng)成為旅游業(yè)可持續(xù)發(fā)展的有效途徑。在發(fā)展生態(tài)旅游業(yè)的過程中，也遇到了一些問題和阻礙，沒有有效發(fā)揮生態(tài)旅游對(duì)環(huán)境保護(hù)的積極作用，對(duì)此，還需要進(jìn)一步提升認(rèn)識(shí)，積極組織開展生態(tài)旅游，推進(jìn)生態(tài)旅游發(fā)展模式的不斷優(yōu)化，才能促進(jìn)生態(tài)旅游和環(huán)境保護(hù)的協(xié)同發(fā)展。

循環(huán)式空氣源熱泵熱水系統(tǒng)是先將外界冷水送入保溫水箱，然后通過水泵不斷地將保溫水箱內(nèi)的水送入熱泵機(jī)組內(nèi)循環(huán)加熱，直至將保溫水箱內(nèi)的水加熱到設(shè)定溫度。熱泵機(jī)組的進(jìn)水溫度和出水溫度每次均不相同。

由于行政事業(yè)單位的管理者對(duì)內(nèi)部控制工作不夠重視，使得單位不能很好地貫徹和落實(shí)國(guó)家傳達(dá)的各項(xiàng)政策。行政事業(yè)單位的管理者對(duì)國(guó)家政策中的核心的理念理解不夠深入，進(jìn)而在單位內(nèi)部控制建設(shè)上產(chǎn)生消極的態(tài)度，不能很好地發(fā)揮內(nèi)部控制的真正作用。

癲癇是臨床常見的綜合征，我國(guó)人群癲癇的患病率在3.3%～5.8%之間，其中約有75%～80%在兒童期起病[7]。正規(guī)抗癲癇治療后，約70%的癲癇患者病情可得到有效控制甚至治愈，30%的患者反復(fù)發(fā)作而發(fā)展為難治性癲癇。癲癇嚴(yán)重?fù)p傷腦組織，加上藥物的不良反應(yīng)，給患者的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育造成嚴(yán)重影響[8]。免疫系統(tǒng)在復(fù)雜的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中具有雙向調(diào)節(jié)作用，神經(jīng)系統(tǒng)可產(chǎn)生不同類型的神經(jīng)調(diào)質(zhì)介導(dǎo)免疫功能，而免疫系統(tǒng)可產(chǎn)生免疫活性物質(zhì)介導(dǎo)神經(jīng)功能。因此，神經(jīng)系統(tǒng)性疾病常伴發(fā)不同程度的免疫系統(tǒng)功能紊亂，神經(jīng)系統(tǒng)能產(chǎn)生并分泌多種細(xì)胞因子，同時(shí)也能表達(dá)多種細(xì)胞因子受體。研究發(fā)現(xiàn)[9]，癲癇發(fā)病機(jī)制中，神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能的失衡具有重要作用，并且癲癇發(fā)病類型、病程的長(zhǎng)短以及發(fā)作頻率等均會(huì)影響免疫系統(tǒng)功能，從而造成體內(nèi)細(xì)胞因子分泌水平的不同。Bembeeva 等[10]研究顯示，細(xì)胞因子在癲癇患者腦組織及癲癇動(dòng)物模型大腦皮層中呈不同程度的升高。

2018年7月初，連續(xù)降雨致使許多蘋果園葉片出現(xiàn)生理性“蒸葉”現(xiàn)象，根系生長(zhǎng)受阻，進(jìn)一步影響樹體對(duì)養(yǎng)分的吸收、運(yùn)輸和轉(zhuǎn)化。

相關(guān)性分析顯示，病例組患者血清HMGB1與IL-2、INF-γ均呈正相關(guān)，血清IL-2與INF-γ呈正相關(guān)，提示HMGB1與IL-2、INF-γ相互作用，共同參與癲癇的發(fā)病過程。HMGB1處于致炎因子網(wǎng)絡(luò)的中心環(huán)節(jié)，受損壞死細(xì)胞、巨噬細(xì)胞被激活后能釋放HMGB1，進(jìn)而利用信號(hào)通路誘介導(dǎo)IL-2、INF-γ等細(xì)胞因子的合成和分泌，反過來(lái)，HMGB1和細(xì)胞因子又能促進(jìn)HMGB1的釋放，最終通過互相調(diào)節(jié)的正反饋環(huán)路而在癲癇發(fā)病過程中啟動(dòng)、維持、放大炎癥反應(yīng)。

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《山東醫(yī)藥》關(guān)于醫(yī)學(xué)名詞與統(tǒng)計(jì)學(xué)符號(hào)的應(yīng)用說明

醫(yī)學(xué)名詞要以1989年及以后由全國(guó)自然科學(xué)名詞審定委員會(huì)審定、公布，科學(xué)出版社出版的《醫(yī)學(xué)名詞》和相關(guān)科學(xué)的名詞為準(zhǔn)，暫未公布者仍以人民衛(wèi)生出版社出版的《英漢醫(yī)學(xué)詞匯》為準(zhǔn)。中文藥物名稱應(yīng)使用1995年藥典(法定藥物)或衛(wèi)生部藥典委員會(huì)編輯的《藥名詞匯》(非法定藥物)中的名稱，英文藥物名稱則采用國(guó)際非專利藥名，不用商品名。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.11.019

R742.1

B

1002-266X(2017)11-0060-03

2016-12-23)