不同檢測(cè)方法計(jì)數(shù)血小板的準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)

摘要：目的探討血小板計(jì)數(shù)不同檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性。方法選取我院檢驗(yàn)科收集的全血標(biāo)本66例，采用電阻抗法、CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡法進(jìn)行PLT計(jì)數(shù)，以顯微鏡直接計(jì)數(shù)法為標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)電阻抗法與CD61 免疫學(xué)法兩種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性。結(jié)果血小板計(jì)數(shù)在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)間中電阻抗法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；血小板計(jì)數(shù)在>350×109/L和<50×109/L計(jì)數(shù)區(qū)間內(nèi)電阻抗法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；血小板計(jì)數(shù)在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計(jì)數(shù)區(qū)間中CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。結(jié)論電阻抗法在高值和低值血小板計(jì)數(shù)中準(zhǔn)確性低于CD61免疫學(xué)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，在血小板正常范圍內(nèi)計(jì)數(shù)三種方法無(wú)差異。

關(guān)鍵詞：血小板計(jì)數(shù)；電阻抗法；顯微鏡法；CD61免疫學(xué)法；準(zhǔn)確性

血小板計(jì)數(shù)是指單位體積血液中所含的血小板數(shù)目，在臨床血栓疾病、血小板減少性疾病及出血性疾病的診斷、鑒別診斷、止血及治療中血小板計(jì)數(shù)具有極為重要的指導(dǎo)意義[1]。但是在血小板計(jì)數(shù)檢測(cè)中由于血小板體積較小并且容易發(fā)生粘附、聚集與變形破壞其檢測(cè)結(jié)果存在一定的誤差，如何提高血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性是目前臨床研究熱議的話題[2]。為進(jìn)一步探究不同檢測(cè)方法血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，筆者針對(duì)我院檢驗(yàn)科收集的66例全血標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性研究，現(xiàn)將研究?jī)?nèi)容報(bào)告如下：

1資料與方法

1.1一般資料本研究所納入的66例血樣標(biāo)本中，男性患者39例，女性患者27例，年齡15～52歲，平均年齡（34.67±4.26）歲，66例血液樣本中包含32例血液疾病患者和34例非血液病患者。并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果將血小板計(jì)數(shù)區(qū)間劃分為>350×109/L、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L、<50×109/L。

1.2檢測(cè)儀器Sysmex-1000i血液分析儀，Leica 光學(xué)顯微鏡（德國(guó)），細(xì)胞計(jì)數(shù)板，采血管，EDTA-K2真空抗凝采血管。

1.3檢測(cè)方法

1.3.1顯微鏡直接計(jì)數(shù)法按照世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦血小板計(jì)數(shù)方法[4，5]，參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第3 版）》血小板顯微鏡直接計(jì)數(shù)法操作流程，由兩名專業(yè)檢驗(yàn)師進(jìn)行操作，取抗凝靜脈血20μL加入380μL1%草酸銨血小板稀釋液中，混勻后靜置15分鐘，待紅細(xì)胞充分破壞后，充入細(xì)胞計(jì)數(shù)板中，計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)4角及中央共計(jì)5個(gè)中方格內(nèi)的血小板數(shù)，即為每升血液內(nèi)的血小板數(shù)。計(jì)數(shù)按照雙盲法取2次結(jié)果平均數(shù)作為血小板計(jì)數(shù)，并于計(jì)數(shù)結(jié)束后進(jìn)行照相核對(duì)計(jì)數(shù)。

1.3.2電阻抗法與CD61 免疫學(xué)法在血小板計(jì)數(shù)前由專業(yè)人員對(duì)檢測(cè)儀器指控檢測(cè)，即用配套低、中、高值 3 種質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控檢測(cè)，以確保儀器性能的穩(wěn)定性。而后根據(jù)儀器操作規(guī)范及試劑盒中相關(guān)檢測(cè)流程分別使用電阻抗法及CD61免疫學(xué)法對(duì)血小板進(jìn)行計(jì)數(shù)。操作時(shí)間均在2h內(nèi)完成。

1.4觀察指標(biāo)分別評(píng)價(jià)電阻抗法、CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法之間的計(jì)數(shù)差異。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件包 SPSS 19.0 對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分比表示，用X2進(jìn)行檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均值加減標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用配對(duì)獨(dú)立樣本T 檢驗(yàn)，以p<0.05 為表示為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1電阻抗法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法將檢測(cè)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，血小板計(jì)數(shù)在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)間中電阻抗法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；血小板計(jì)數(shù)在>350×109/L和<50×109/L計(jì)數(shù)區(qū)間內(nèi)電阻抗法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法將檢測(cè)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，血小板計(jì)數(shù)在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計(jì)數(shù)區(qū)間中CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。結(jié)果見(jiàn)表2。

3討論

臨床診斷與治療中，血小板計(jì)數(shù)是常用的檢測(cè)指標(biāo)之一。隨著檢驗(yàn)計(jì)數(shù)的不斷更新與進(jìn)步，臨床血小板計(jì)數(shù)檢測(cè)儀器多種多樣，但都存在一定的誤差，為進(jìn)一步探究電阻抗法、CD61 免疫學(xué)法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法之間的計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性差異，筆者針對(duì)66例血樣樣本進(jìn)行探討研究。

電阻抗法是將等滲電解溶液稀釋后的細(xì)胞懸液倒入特制容器中，接通電源，根據(jù)細(xì)胞非導(dǎo)電的性質(zhì)，會(huì)引起瞬間電壓的變化，產(chǎn)生一個(gè)脈沖信號(hào)。細(xì)胞體積決定脈沖振幅，細(xì)胞數(shù)目決定脈沖的數(shù)目。血小板與紅細(xì)胞同時(shí)檢測(cè)，根據(jù)二者體積差異，按照其提前設(shè)定的閾值，高于閾值為紅細(xì)胞，低于閾值為血小板，由此得出血小板數(shù)目，其計(jì)數(shù)結(jié)果易受影響。CD61 免疫學(xué)法在儀器的特殊模式下完成檢測(cè)，通過(guò)標(biāo)記的全血血小板和紅細(xì)胞比值，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)法測(cè)量得出的紅細(xì)胞數(shù)來(lái)計(jì)算血小板計(jì)數(shù)，進(jìn)樣模式均采用閉合自動(dòng)進(jìn)樣模式。

綜上所述，電阻抗法在高值和低值血小板計(jì)數(shù)中準(zhǔn)確性低于CD61免疫學(xué)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，在血小板正常范圍內(nèi)計(jì)數(shù)三種方法無(wú)差異。

參考文獻(xiàn)：

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