活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147的表達(dá)情況分析

摘要：目的：探索活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147的表達(dá)情況。方法：在2015年6月至2016年6月期間選取60例健康體檢者、60例活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎為研究對(duì)象，對(duì)所有受檢者進(jìn)行外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147鑒定。結(jié)果：觀察組患者外周血單核細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度（214.36±24.36）、T淋巴細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度（35.91±8.45）明顯高于對(duì)照組健康體檢者（P<0.05）。結(jié)論：對(duì)活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者實(shí)施外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147鑒定，可提示患者病情發(fā)展程度。

關(guān)鍵詞：活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎；外周血單核；T淋巴細(xì)胞；CD147

本文旨在探索活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147的臨床意義，具體可見下文描述。

1 資料和方法

1.1 基線資料

選擇60例活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎（AS）患者為此次研究對(duì)象，并將其作為觀察組，所有患者均在2015年6月至2016年6月期間收治，同時(shí)在此段時(shí)間內(nèi)選取60例健康體檢者，作為對(duì)照組。

觀察組患者平均年齡為（34.65±5.84）歲，36例為男性患者，24例為女性患者。

對(duì)照組健康體檢者平均年齡為（34.58±5.87）歲，男：女健康體檢者比例為35：25。

兩組受檢者各項(xiàng)資料差異不明顯（P>0.05）。

1.2 方法

標(biāo)本采集：抽取受檢者6ml外周靜脈血，并放入真空EDTA抗凝管中，置冰箱（4°C）內(nèi)保存?zhèn)溆?。抽?ml血液標(biāo)本測定PCR、RNA實(shí)驗(yàn)，剩余血液標(biāo)本用于FCM分析。對(duì)活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者進(jìn)行C反應(yīng)蛋白和紅細(xì)胞沉降率檢測。

主要儀器和試劑：由美國BD BIOSCIENCES公司提供紅細(xì)胞裂解液、FITC mouseanti-human、PE-CY5 mouse anti-human、PE mouse anti-human CD14；由美國INVITROGEN公司提供Trizol；由美國Fermentas公司生產(chǎn)的REVERTAID逆轉(zhuǎn)錄試劑盒。

流式細(xì)胞術(shù)檢測CD147表達(dá)：將100μL抗凝血置入5ml流式細(xì)胞儀中，隨后再分別加入10μL的CD147、CD3、CD14。放入室溫下20分鐘后加入1ml紅細(xì)胞裂解液，再避光10分鐘進(jìn)行離心處理，每分鐘1000r，5分鐘后使用1ml PBS洗滌，隨后再加入PBS 400μL重懸細(xì)胞，混勻后檢查FCM。在檢測過程中，可使用側(cè)向散射角和前向散射角將細(xì)胞大致分群，再分別以CD3/SSC和CD14/SSC設(shè)門后收集PE-CY5-CD3 T淋巴細(xì)胞和PE-CD14單核細(xì)胞，最后進(jìn)行軟件分析測定平均熒光強(qiáng)度。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組受檢者的外周血單核細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度、T淋巴細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，以P<0.05代表對(duì)比值存在差異。

2 結(jié)果

活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血單核細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度、T淋巴細(xì)胞CD147的熒光強(qiáng)度明顯高于對(duì)照組健康體檢者（P<0.05）。具體結(jié)果如表1所示：

3 討論

強(qiáng)直性脊柱炎屬于慢性自身免疫性疾病，目前發(fā)病機(jī)制尚未闡明，部分學(xué)者認(rèn)為其與機(jī)體HLA-B27水平值有關(guān)，通過研究證實(shí)，若未及時(shí)干預(yù)，可導(dǎo)致患者致殘、死亡。大部分強(qiáng)直性脊柱炎患者均好發(fā)于中軸骨骼，而隨著病情的嚴(yán)重化，可導(dǎo)致肢體功能喪失，典型臨床表現(xiàn)為骶髂關(guān)節(jié)炎、附著點(diǎn)炎、脊柱融合等。學(xué)者通過對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎的深入研究，發(fā)現(xiàn)大部分患者病情惡化時(shí)，體內(nèi)外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147可發(fā)生水平值的變化[1]。

強(qiáng)直性脊柱炎具有較高的死亡率、致殘率、發(fā)病率，嚴(yán)重影響人們的身體健康，目前發(fā)病機(jī)制未明確。而CD147是CYPA受體之一，屬于多種組織細(xì)胞中的跨膜糖蛋白，是免疫球蛋白超家族，目前已有研究證實(shí)，其屬于較強(qiáng)的MMP誘導(dǎo)劑，可參與胚胎形成和組織創(chuàng)傷愈合的生理過程，同時(shí)有部分學(xué)者認(rèn)為其在感染、動(dòng)脈粥樣硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡中起到舉足輕重的作用，能夠參與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤[2]。而近年來，有研究發(fā)現(xiàn)CD147還可通過激活MMP分泌，參與骨組織和關(guān)節(jié)軟管的破壞、降解、損傷，促進(jìn)血管翳的形成[3]。而本次研究，可證實(shí)CD147在膠原性關(guān)節(jié)炎形成中發(fā)揮著重要角色，可參與強(qiáng)直性脊柱炎的整個(gè)發(fā)病過程。

總而言之，外周血單核及T淋巴細(xì)胞中CD147鑒定在活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者中效果顯著，不僅可反映患者病情程度，還可為臨床治療提供重要依據(jù)，值得推廣。

參考文獻(xiàn)：

[1]李秀娟，黃勝起，鄭輝等.流式細(xì)胞術(shù)分析外周血輔助性T17細(xì)胞在強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血的表達(dá)及其意義[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2011，15（2）：116-118.

[2]胡曉蕾，趙志鋼，駱方軍等.浙江省麗水市強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞程序性死亡因子1的表達(dá)及意義研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2016，42（6）：678-682.

[3]李秀娟，黃勝起，王阿妮等.CD154與CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血中的表達(dá)及意義[J].中國基層醫(yī)藥，2014，21（13）：1942-1944.