多樂氟中氟含量及體外釋放度研究

舒泉湧，麻紀(jì)斌，邢建峰，翟 帆，李宗霖，郭 晨

(1 西安交通大學(xué)，陜西西安 710061；2 陜西中藥研究所，陜西咸陽 712000；3 陜西新藥技術(shù)開發(fā)中心，陜西西安 710075)

多樂氟中氟含量及體外釋放度研究

舒泉湧1，2，麻紀(jì)斌3，邢建峰1，翟 帆3，李宗霖3，郭 晨3

(1 西安交通大學(xué)，陜西西安 710061；2 陜西中藥研究所，陜西咸陽 712000；3 陜西新藥技術(shù)開發(fā)中心，陜西西安 710075)

以多樂氟為研究對象，進行了紫外分光光度法測定多樂氟中氟化鈉含量的方法學(xué)研究，并以純化水為溶出介質(zhì)，測定了多樂氟48h的體外釋放。結(jié)果顯示，氟化鈉在8.896μg～62.272μg有良好的線性，R2=0.997。48h的累積釋放量為6.57%。

多樂氟，紫外分光光度法，含量測定，釋放度

氟是人體必需的微量元素之一[1]，游離的氟可與牙齒表面的鈣鹽結(jié)合，提高牙齒的抗酸能力，發(fā)揮防齲作用[2]，而一旦攝入過量，又會對人體造成危害，如患氟斑牙、氟骨病等[3]。目前對氟含量的測定有離子選擇電極法、紫外分光光度法、離子色譜法、熒光測定法等[1]。口腔材料氟含量測定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)所采用的方法為離子選擇電極法，據(jù)文獻報導(dǎo)該方法測定的氟含量比實際值偏低[4]，我們在實驗過程中也發(fā)現(xiàn)其在低濃度測定時準(zhǔn)確度偏低，重現(xiàn)性差，對電極的精度要求較高。2015版中國藥典氟檢查法為紫外分光光度法，我們參考此方法，并在其基礎(chǔ)上進行了一定的改進，本文應(yīng)用優(yōu)化后的方法對多樂氟的含量測定進行了研究，并測定了多樂氟在純化水中48h的釋放情況。

1 材料與方法

1.1 儀器及試藥

儀器：紫外分光光度計(VARIAN 50Conc)；溶出測試儀(天大天發(fā)科技有限公司，RC8MD)；取樣收集系統(tǒng)(天大天發(fā)科技有限公司，RZQ-8D)；電熱恒溫水浴鍋(科偉YLJYE-100)；Ag135電子天平(METTER TOLEDO)，超聲清洗儀，渦旋振蕩器，電子天平(PTT-A3000)。

試藥：多樂氟(高露潔棕欖有限公司，批號174205)；氟化鈉(西安化學(xué)試劑廠，批號20140222，AR)；茜素氟藍(國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號F2011123，指示劑Ind)；醋酸鈉(天津市盛奧化學(xué)試劑有限公司批號20130726，AR)；硝酸亞鈰(國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號20121210，AR)；冰乙酸(成都市科龍化工試劑廠，批號201504021，AR)；鹽酸羥胺(成都市科龍化工試劑廠，批號081025，AR)；濃硝酸(天津市富宇精細化工有限公司，批號120802，AR)；氫氧化鈉(天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號20131127，AR)；濃鹽酸(國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號20140925，AR)。

1.2 方法學(xué)考察

1.2.1 溶液的配置

配置茜素氟藍試液250mL，硝酸亞鈰試液1000mL，12%醋酸鈉的稀醋酸試液100mL，具體方法參照中國藥典2015版四部試液項下規(guī)定[5]。

1.2.2 線性

取氟化鈉適量放入烘箱中110℃干燥4h，放入干燥器中冷卻。精密稱取0.2224g至1000mL量瓶中，加純化水水溶解并稀釋至刻度，轉(zhuǎn)入聚乙烯塑料瓶中，作為儲備液。取儲備液液10mL至50mL量瓶中，加純化水水稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL于50mL量瓶中，分別加入茜素氟藍試液10mL，12%醋酸鈉的稀醋酸試液3mL，硝酸亞鈰試液10mL，純化水定容至刻度，搖勻，暗處放置1h。以純水為空白對照，610nm測定吸光度。以NaF的量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，線性回歸得線性方程。

1.2.3 多樂氟含量測定

分別稱取多樂氟樣品三份約0.4g，精密稱定，至250mL三角瓶中。加水100mL，超聲30min，80℃水浴30min，移入1000mL量瓶中，加水定容至刻度。上清液微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液2mL至50mL量瓶中，分別加入茜素氟藍試液10mL，12%醋酸鈉的稀醋酸試液3mL，硝酸亞鈰試液10mL，純化水定容至刻度，搖勻，暗處放置1h。以純水為空白對照，610nm測定吸光度，代入線性方程，計算含量。

1.2.4 準(zhǔn)確度

分別稱取多樂氟樣品約0.3g 6份至三角瓶中，精密稱定。再取干燥后的NaF約10mg 6份，精密稱定，分別加入6個三角瓶中。渦旋振蕩器震蕩混勻，加水100mL，超聲30min溶散，80℃水浴30min，移入1000，ml量瓶中，加水定容至刻度，混勻。上清液過濾，取續(xù)濾液2mL至50mL量瓶中，加入茜素氟藍試液10mL，12%醋酸鈉的稀醋酸試液3mL，硝酸亞鈰試液10mL，純化水定容至刻度，搖勻，暗處放置1h。以純水為空白對照，610nm測定吸光度，計算回收率。

1.3 多樂氟體外釋放度測定

取清潔的60mm×20mm塑料片，距每片一端20mm處畫一橫線，從塑料片另一端至橫線處薄薄涂一層樣品，樣品稱重(精確至0.0001g)，固化30min。將帶有樣品的塑料片的一端浸入盛有200mL水的溶出杯中，溫度(37±1)℃，于2h、24h、48h取5mL溶液，按照多樂氟含量測定方法測定吸光度，計算釋放度。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性結(jié)果

以NaF的量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，由表1數(shù)線性回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.004x+0.167，R2=0.997，線性范圍為：8.896μg～62.272μg。

表1 線性試驗結(jié)果Table 1 Linear test results

2.2 含量測定結(jié)果

多樂氟含量測定結(jié)果見表2。

表2 多樂氟含量測定結(jié)果Table 2 Content determination results of duraphat

注：多樂氟密度為1.2292g/mL，標(biāo)示含量為50mg/mL。

由表2可得，平均含量為47.84mg/mL，為多樂氟標(biāo)示含量的95.68%。按質(zhì)量分數(shù)來算，平均含量為3.892%。

2.3 準(zhǔn)確度結(jié)果

準(zhǔn)確度測定結(jié)果見表3。

表3 準(zhǔn)確度測定結(jié)果Table 3 Accuracy measurement results

由表3可得，平均回收率為97.52%，符合中國藥典要求，該含量測定方法可行，準(zhǔn)確度較高。

2.4 體外釋放測定結(jié)果

由表4結(jié)果可知，多樂氟在前2h釋放較快，之后的釋放很緩慢，24h之后幾乎停止釋放。以多樂氟的全牙最大涂用量0.5mL計算，24h釋放量為1.52mg，小于衛(wèi)生部規(guī)定的日最大攝入量2.0mg[6]，在安全劑量范圍內(nèi)。

表4 多樂氟體外釋放測定結(jié)果Table 4 Results of in vitro release assay of duraphat

以相同的樣品采取離子選擇電極法進行測定，結(jié)果顯示該方法測定的結(jié)果普遍低于紫外分光光度法，且在濃度較低時，相對誤差較大。將多樂氟稱取一定的量，固化干燥后，粉碎，依法進行含量測定，與水浴加熱所得結(jié)果并無差別。我們以茜素氟藍試液10mL，12%醋酸鈉的稀醋酸試液3mL，硝酸亞鈰試液10mL，加水定容至50mL量瓶中，暗處放置1h，作為空白對照，所得吸光值很小，在測定多樂氟釋放時，吸光值基本小于0.1，準(zhǔn)確度低，重現(xiàn)性差，相對誤差較大。

試驗結(jié)果顯示，該方法簡便易行，穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度高，較為適合牙膏及樹脂型含氟牙用材料的氟含量測定。有機氟化物經(jīng)氧瓶燃燒后，也可參考此法進行氟含量的測定。

[1] 秦宗會，謝兵.氟含量測定方法綜述[J].中國西部科技，2007，9(21)：1-3.

[2] 楊慧. 離子選擇性電極測定牙膏中的總氟含量[J]. 南京曉莊學(xué)院學(xué)報，2011，11(6)：53-54.

[3] 趙彥玲，朱蘭蘭.南極磷蝦中氟含量的兩種測定方法優(yōu)化與比較[J]. 食品研究與開發(fā)，2014，35(9)：100-102.

[4] 宋崇富，王中躍. 含氟牙膏中的氟含量測定方法準(zhǔn)確度探究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43(1)：214-216.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2015年版二部[S].中國醫(yī)藥科技出版社，2015：317-324.

[6] WS/T 87-1996人群總攝氟量衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，1997.

Study on Fluoride Content and in Vitro Release of Duraphat

SHU Quan-yong1，2，MA Ji-bin3，XING Jian-feng1，ZHAI Fan3，LI Zong-lin3，GUO Chen3

(1 Xi’an Jiaotong University，Xi’an 710061，Shaanxi，China；2 Shaanxi institute of traditional Chinese medicine，Xianyang 712000，Shaanxi，China；3 Shaanxi Pharmaceutical Development Center，Xi’an 710075，Shaanxi，China)

The research object is Duraphat. We studied on UV spectrophoto-metry to deter-mine the content of sodium fluorid in the methodology research.We also used the purifi-ed water as the dissolution medium，determined the in vitro release of Duraphat in 48 hours. The results showed that sodium fluoride has a good linear in 8.896μg～62.272μg，R2=0.997. The cumulative release of 48 hours was 6.57%.

duraphat，UV spectrophotometry，determination of content，dissolution rate

邢建峰，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向為新型給藥系統(tǒng)的設(shè)計與研究以及消化系統(tǒng)疾病治療藥物的研究；E-mail：xajdxjf@mail.xjtu.edu.cn；Tel：15829081518

TQ 07，R 788+.1