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    牡蠣多糖鋅配合物對脂多糖刺激斷奶仔豬生長性能和腸道健康的影響

    2017-04-24 04:46:38馬茂濤林少偉殷光文黃志堅
    動物營養(yǎng)學(xué)報 2017年4期
    關(guān)鍵詞:糖酶空腸飼糧

    馬茂濤 林少偉 殷光文 黃志堅

    (福建農(nóng)林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,福建省動物藥物工程實驗室,福州350002)

    牡蠣多糖鋅配合物對脂多糖刺激斷奶仔豬生長性能和腸道健康的影響

    馬茂濤 林少偉 殷光文 黃志堅*

    (福建農(nóng)林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,福建省動物藥物工程實驗室,福州350002)

    本試驗旨在探討牡蠣多糖鋅配合物對斷奶仔豬生長性能和脂多糖刺激斷奶仔豬血清抗氧化能力以及空腸黏膜抗炎性因子含量和二糖酶活性的影響。試驗選取30頭(28±1)日齡的仔豬,按體重相近的原則,隨機分為空白對照組(Ⅰ組)、應(yīng)激對照組(Ⅱ組)、牡蠣多糖低劑量組(Ⅲ組)、牡蠣多糖中劑量組(Ⅳ組)和牡蠣多糖高劑量組(Ⅴ組),每組6個重復(fù),每個重復(fù)1頭豬。Ⅰ組和Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)飼糧,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000、3 000和5 000 mg/kg牡蠣多糖鋅配合物的試驗飼糧。飼養(yǎng)試驗30 d后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組試驗豬按體重腹腔注射100 μg/kg的脂多糖,Ⅰ組注射等量的生理鹽水。各組于注射后3 h采血,測定血清抗氧化能力;采集空腸黏膜,酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測白細胞介素(IL)-2、IL-10和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量以及二糖酶活性。試驗結(jié)果顯示:1)與Ⅰ組和Ⅱ組相比,Ⅳ組和Ⅴ組平均日增重顯著提高(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組料重比有降低趨勢(P>0.05)。2)與Ⅰ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組血清總超氧化物歧化酶顯著提高(P<0.05);與Ⅱ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組血清谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著提高(P<0.05),血清丙二醛含量顯著降低(P<0.05)。3)與Ⅰ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組空腸黏膜IL-2和IL-10含量顯著提高(P<0.05),其中,Ⅳ組IL-10含量還顯著高于Ⅱ組(P<0.05);與Ⅱ組相比,Ⅲ組和Ⅳ組空腸黏膜TNF-α含量顯著降低(P<0.05)。4)與Ⅱ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組空腸蔗糖酶、麥芽糖酶和乳糖酶活性都有顯著性地提高(P<0.05)。由此可見,飼糧中添加牡蠣多糖鋅配合物能有效提高斷奶仔豬血清抗氧化能力和免疫耐受能力,提高空腸黏膜二糖酶的活性,對免疫應(yīng)激有明顯的緩解作用,其中以飼糧中添加3 000 mg/kg牡蠣多糖鋅配合物效果最佳。

    牡蠣多糖鋅配合物;斷奶仔豬;生長性能;抗氧化能力;炎性細胞因子;二糖酶

    多糖具有降血脂、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗突變、抗病毒及抗腫瘤等作用,而且對正常的細胞沒有毒副作用,因此越來越受到研究人員的重視[1]。利用多糖等免疫藥物作為免疫增強劑,提高動物的免疫力,成為畜牧業(yè)病害防治的重要方向。李志[2]研究表明牡蠣多糖(oyster polysaccharides,OPS)具有抗腫瘤、抗氧化衰老、抗菌抗病毒以及提高機體免疫功能等作用。而鋅是所有動物必需的一種微量元素,它幾乎存在于機體所有組織和器官中。機體內(nèi)至少300種酶中含有鋅,這些鋅承擔(dān)著不同的生物功能,在動物的生長發(fā)育、免疫、物質(zhì)代謝及繁殖等多方面起著重要作用[3]。孫國君[4]的研究結(jié)果顯示鋅對斷奶仔豬的腸道上皮細胞的免疫功能有調(diào)節(jié)作用。岳雙明[5]的研究結(jié)果顯示在仔豬飼糧中添加鋅可以提高仔豬生長性能,同時可以增強仔豬抗氧化能力以及提高腸道黏膜免疫功能,保護腸道健康?,F(xiàn)代藥理研究表明,天然藥物有效成分與金屬離子形成的配合物具有更強的藥理活性[6-8]。趙姝雯等[9]關(guān)于比較研究金針菇多糖與鋅螯合前后的抗腫瘤作用與其體外抗氧化活性的研究,其結(jié)果顯示金針菇多糖鋅配合物抗氧化活性較螯合前有所提高。

    脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可引發(fā)機體炎癥。革蘭氏陰性細菌感染時,細菌或LPS進入血循環(huán),激活多種炎癥細胞并誘導(dǎo)釋放炎性介質(zhì),引起炎癥反應(yīng)。同時,機體產(chǎn)生大量自由基,促進機體的氧化反應(yīng)過程[10]。LPS具有致熱、抗腫瘤、增強抗感染力等多種生物學(xué)功能,是目前建立免疫應(yīng)激模型最有效的免疫應(yīng)激原[11]。

    羅剛等[12]和陳騰騰[13]的研究結(jié)果表明OPS可以促進斷奶仔豬的生長性能并對免疫應(yīng)激仔豬的腸道健康有緩解作用。本試驗在他們試驗的基礎(chǔ)上,在一定反應(yīng)條件下,通過OPS和微量元素鋅發(fā)生螯合反應(yīng),形成OPS鋅配合物(Zn-OPS),探究Zn-OPS對斷奶仔豬生長性能的影響,以及對由LPS引起的處于免疫應(yīng)激狀態(tài)下斷奶仔豬血清抗氧化能力、腸道黏膜抗炎性因子含量及二糖酶活性的影響,分析飼糧中添加Zn-OPS對由LPS引起的斷奶仔豬免疫應(yīng)激是否有緩解作用和對腸道健康是否有幫助,從而為Zn-OPS應(yīng)用于豬飼養(yǎng)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    斷奶仔豬由福建省南平某豬場提供;Zn-OPS由實驗室自制(火焰原子吸收法測定鋅含量為4.6%)。LPS(大腸桿菌血清型O55∶B5,Sigma公司),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(Cusabio公司);酶標(biāo)儀(芬蘭雷勃公司);過氧化氫酶(CAT)活性測定試劑盒,丙二醛(MDA)含量測定試劑盒,總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性測定試劑盒,谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性測定試劑盒,總蛋白含量測定試劑盒(以上試劑盒均來自南京建成生物工程研究所)。

    1.2 斷奶仔豬免疫應(yīng)激模型的建立

    試驗選取30頭(28±1)日齡的杜洛克×長白×大白三元閹公仔豬,按體重、窩別等原則隨機分為5個組,分別為空白對照組(Ⅰ組)、免疫應(yīng)激對照組(Ⅱ組)、Zn-OPS低劑量組(Ⅲ組)、Zn-OPS中劑量組(Ⅳ組)和Zn-OPS高劑量組(Ⅴ組),每組6個重復(fù),每個重復(fù)1頭豬。Ⅰ和Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)飼糧,其組成及營養(yǎng)水平見表1,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000、3 000和5 000 mg/kg Zn-OPS的飼糧。試驗預(yù)試期3 d,正試期30 d。試驗結(jié)束,禁食12 h后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組豬按體重腹腔注射100 μg/kg LPS,Ⅰ組注射等量的生理鹽水。

    表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

    續(xù)表1項目Items28~40日齡28to40daysofage41~60日齡41to60daysofage蔗糖Sucrose2.02.0預(yù)混料Premix1)8.06.0合計Total100.0100.0營養(yǎng)水平Nutrientlevels2)粗蛋白質(zhì)Crudeprotein19.5819.52粗纖維Crudefiber2.042.82粗脂肪Crudefat6.044.72鈣Calcium0.780.75總磷Totalphosphorus0.500.54有效磷Availablephosphorus0.400.41干物質(zhì)Drymatter87.3687.53消化能Digestiveenergy/(MJ/kg)14.7614.27賴氨酸Lysine1.501.33錳Mn/(mg/kg)45.7445.33鋅Zn/(mg/kg)40.6040.60銅Cu/(mg/kg)134.17133.60

    1)每千克預(yù)混料含有 One kilogram of premix contained:VA 2 400 IU,VD3240 IU,VE 60 IU,VK 8 IU,生物素 biotin 0.2 mg,氯化膽堿 choline chloride 400 mg,煙酸 niacin 30 mg,核黃素 riboflavin 16 mg,泛酸 pantothenic acid 20 mg,VC 70 mg,VB1240 μg,Cu 10 mg,I 0.15 mg,F(xiàn)e 100 mg,Mn 20 mg,Se 0.30 mg,Zn 125 mg。

    2)消化能為計算值,其他為實測值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

    1.3 樣品的采集及測定

    前腔靜脈釆血,3 500 r/min離心10 min,分離血清用于抗氧化能力的測定。采用頸靜脈放血處死,打開腹腔,將空腸從其腸系膜處取下后于冰上取樣。于空腸1/2處截取20 cm左右腸段,剖開空腸,于0.9%生理鹽水中輕輕沖洗除去腸壁上的內(nèi)容物,放置于濾紙上吸干水分,用刀背刮取空腸黏膜10 g于無菌凍存管中,立即放入冰中帶回。用勻漿管將空腸黏膜與10 mL蒸餾水充分研磨,3 500 r/min離心10 min,取上清液用于白細胞介素(IL)-2、IL-10、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量和二糖酶活性的測定。

    1.4 測定指標(biāo)及方法

    1.4.1 生長性能

    試驗仔豬在試驗開始和結(jié)束時分別逐只空腹稱重,每次稱重前12 h停止喂食。試驗期間記錄各組試驗仔豬的日采食量,計算平均日增重、平均日采食量和料重比。

    1.4.2 血清抗氧化能力

    CAT和GSH-Px活性采用比色法測定,MDA含量采用苯巴比妥法測定,T-SOD活性采用黃嘌呤氧化法測定。測定試劑盒購于購自南京建成生物工程研究所,所用儀器為PERSEE-TU1810紫外光分光光度計(北京普析通用儀器責(zé)任有限公司),具體操作步驟按試劑盒說明書進行。

    1.4.3 空腸黏膜抗炎性因子含量

    IL-2、IL-10、TNF-α含量均使用ELISA方法測定,測定試劑盒購于Cusabio公司,所用儀器為TECAN-F50酶標(biāo)儀,測定方法按照試劑盒使用手冊測量。

    1.4.4 空腸二糖酶活性

    麥芽糖酶、乳糖酶和蔗糖酶活性測定均按照測試試劑盒說明書測量,試劑盒購于南京建成生物工程研究所,所用儀器為PERSEE-TU1810紫外光分光光度計(北京普析通用儀器責(zé)任有限公司)。

    1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析,采用Duncan氏法進行多重比較,P<0.05為差異顯著,試驗結(jié)果使用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

    2 結(jié) 果

    2.1 Zn-OPS對斷奶仔豬生長性能的影響

    由表2可知,Ⅳ和Ⅴ組的平均日增重較Ⅰ和Ⅱ組有顯著性地提高(P<0.05),其中Ⅳ組的平均日增重相較于Ⅰ組提高了18.3%(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組的平均日采食量相較于Ⅰ和Ⅱ組有顯著性地提高(P<0.05)。Ⅳ和Ⅴ組料重比相較Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組都有降低,但差異不顯著(P>0.05)。

    表2 Zn-OPS對斷奶仔豬生長性能的影響

    同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

    In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

    2.2 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響

    由表3可知,Ⅱ組血清CAT活性較Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組有顯著性地提高(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無顯著性差異(P>0.05);Ⅱ組相較于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清GSH-Px活性顯著性地降低(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無顯著性差異(P>0.05);Ⅰ、

    Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清MDA含量較Ⅱ組分別顯著降低了11.6%、5.9%、7.3%、5.4%(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無顯著性差異(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清SOD活性較Ⅱ組分別提高了0.9%(P>0.05)、2.5%(P<0.05)、0.9%(P>0.05),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無顯著性差異(P>0.05)。

    2.3 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子含量的影響

    由表4可知,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組IL-2和IL-10含量較Ⅰ組都有顯著性地提高(P<0.05),同時Ⅳ組IL-2含量較Ⅱ組提高了1.3%(P>0.05),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組IL-10含量較Ⅱ組分別提高了14.5%(P>0.05)、27.1%(P<0.05)和20.3%(P>0.05)。Zn-OPS添加組各組之間IL-2和IL-10含量無顯著性差異(P>0.05)。Ⅱ組TNF-α含量顯著高于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組TNF-α含量較Ⅱ組降低了23.5%(P<0.05)、35.3%(P<0.05)和5.9%(P>0.05)。

    表4 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子的影響

    2.4 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸二糖酶活性的影響

    由表5可知,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組各組之間的仔豬空腸乳糖酶、麥芽糖酶和蔗糖酶活性較Ⅱ組都有顯著性地提高(P<0.05),Ⅲ組乳糖酶活性較Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組有顯著性地降低(P<0.05),Ⅰ組麥芽糖酶活性相較于Zn-OPS添加組有顯著性地提高(P<0.05),Zn-OPS添加組各組之間麥芽糖酶及蔗糖酶活性無顯著性差異(P>0.05)。

    表5 Zn-OPS對免疫應(yīng)激仔豬空腸二糖酶活性的影響

    3 討 論

    3.1 Zn-OPS對斷奶仔豬生長性能的影響

    大量研究表明,仔豬飼糧中添加多糖能提高仔豬的平均日增重,有利于仔豬的健康生長[14]。陳騰騰[13]研究表明,飼糧中添加OPS可增加平均日增重,提高生長性能。宋志學(xué)等[15]研究表明,飼糧中添加紅芪粗多糖可顯著提高仔豬的生長性能。鋅是仔豬生長必不可少的一種微量元素,鋅可以增加仔豬的采食量,增強腸道消化能力,提高飼料利用率,促進仔豬生長[3,16]。岳雙明[5]的研究表明,飼糧中添加高鋅能提高仔豬的生長性能。

    本試驗結(jié)果顯示,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組相較于Ⅰ和Ⅱ組,平均日采食量、平均日增重和料重比都有改善,其中Ⅳ組相較于其他各組效果更為明顯,這表明飼糧中添加Zn-OPS能增加仔豬的采食量,提高飼料利用率和斷奶仔豬生長性能。可能的原因是Zn-OPS增強了仔豬腸道免疫能力,從而增進仔豬食欲,降低腹瀉率。蔡旭濱等[17]關(guān)于太子參莖葉多糖應(yīng)用于斷奶仔豬的試驗結(jié)果顯示,飼糧中添加太子參莖葉多糖可以降低斷奶仔豬的腹瀉率,提高生長性能。

    3.2 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響

    LPS進入動物機體之后通過改變細胞膜氧化酶系統(tǒng)和微粒體代謝過程,釋放大量自由基。自由基具有很強的氧化性,可與體內(nèi)細胞膜、蛋白質(zhì)及核酸發(fā)生氧化反應(yīng),改變它們的功能,對機體造成巨大危害[18]。機體內(nèi)存在酶類抗氧化系統(tǒng)和非酶類抗氧化系統(tǒng)維持體內(nèi)自由基的平衡,T-SOD、GSH-Px、CAT是酶類抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分。T-SOD可清除超氧陰離子,使細胞和組織免受損害;CAT可以降低細胞中自由基前體的過氧化氫(H2O2)濃度;GSH-Px通過清除氫氧化物和脂質(zhì)氧化物而抑制自由基的生成反應(yīng)[19]。MDA作為由自由基引起的脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,可作為由于氧化作用而造成細胞損傷程度的重要指標(biāo)[20-21]。

    本試驗結(jié)果顯示,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清MDA含量和T-SOD活性較Ⅰ組有顯著性地提高,CAT活性也呈現(xiàn)升高趨勢。這與Ben-Shaul等[22]的研究結(jié)果一致,提示仔豬在注射LPS后,血清中自由基含量大量增加,機體進入免疫應(yīng)激狀態(tài)。Ⅱ組血清中GSH-Px活性相較于Ⅰ組有顯著性地降低,可能的原因是注射LPS后,仔豬機體產(chǎn)生急性免疫應(yīng)激,GSH-Px活性的降低導(dǎo)致了機體血清中自由基含量的上升[23-24]。此外,本試驗中,Zn-OPS添加組的血清T-SOD和GSH-Px活性與Ⅱ組相比都有顯著性地提高,血清MDA含量顯著性地降低。大量研究均表明飼糧中添加鋅和多糖都可以提高機體的抗氧化能力[25-27]。冷煒博等[28]的研究顯示飼糧中添加天冬氨酸可以提高黏膜抗氧化酶的活性,顯著降低空腸和回腸MDA的含量。宋志學(xué)等[15]的研究結(jié)果表明飼糧中添加紅芪粗多糖可以有效增強仔豬在免疫應(yīng)激狀態(tài)的抗氧化能力。本次試驗結(jié)果說明在飼糧中添加Zn-OPS可以使酶類自由基清除系統(tǒng)活性提高,增強機體的血清抗氧化能力。

    3.3 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子含量的影響

    LPS是革蘭氏陰性菌外壁的主要化學(xué)成分,通過胃腸道進入動物機體后,可以刺激IL(如IL-2、IL-10)以及TNF-α等細胞因子,激活免疫細胞,增強特異性和非特異性免疫反應(yīng)[11]。IL-2是T淋巴細胞分泌的一種具有提升免疫反應(yīng)以及介導(dǎo)免疫耐受,具有雙向免疫調(diào)節(jié)作用的細胞因子[29]。韓杰等[30]研究結(jié)果表明,在斷奶仔豬飼料中添加多糖可以提高斷奶仔豬血液中IL-2的含量。IL-10是由多種細胞分泌的一種多效價細胞因子,既有免疫抑制作用也有免疫刺激作用[31-32]。TNF-α是一個多功能的細胞因子,主要介導(dǎo)動物體的免疫及炎癥反應(yīng)。

    本次試驗結(jié)果顯示,Ⅱ組和Zn-OPS添加組在腹腔注射LPS后,與Ⅰ組相比,腸道黏膜中的IL-2、IL-10和TNF-α含量顯著性地提高,這與朱春甲等[33]和徐占云等[34]的研究結(jié)果一致。說明斷奶仔豬在LPS的刺激已經(jīng)進入免疫應(yīng)激狀態(tài)。Zn-OPS添加組與Ⅱ組對比,腸道黏膜中IL-2和IL-10含量有不同程度地提高,而TNF-α含量卻有顯著性地降低。羅剛等[12]關(guān)于OPS對免疫應(yīng)激仔豬炎性細胞因子和過氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPARγ) mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響以及周丹[35]關(guān)于TNF-α在大鼠早期炎癥過程中的初步研究的研究結(jié)果均提示血清TNF-α含量的上升。本試驗中TNF-α含量下降的原因可能有以下2點:1)Zn-OPS可以提升機體的免疫能力和免疫耐受能力,使得IL-2、IL-10含量上升和TNF-α含量下降,試驗結(jié)果與施惠娟等[36]關(guān)于氧化苦參堿對銀屑病小鼠模型血清中IL-2、IL-10、TNF-α含量的影響的研究結(jié)果基本一致。2)Zn-OPS中所含的鋅元素對提升腸道免疫功能起到作用[4],提示Zn-OPS可以通過調(diào)節(jié)機體免疫系統(tǒng)對免疫應(yīng)激仔豬腸道產(chǎn)生保護作用。

    3.4 Zn-OPS對免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸二糖酶活性的影響

    小腸是機體中食物消化最主要的部位,二糖不能被小腸黏膜直接吸收,所以小腸黏膜上二糖酶的活性對糖水化合物的吸收起著至關(guān)重要的作用,其中以麥芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶最為重要[31],其中以空腸二糖酶活性最高[37]。仔豬斷奶會引起豬小腸二糖酶活性的下降[38]。本次試驗結(jié)果顯示:注射LPS的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組空腸二糖酶活性都顯著性地低于Ⅰ組,說明LPS確實可以導(dǎo)致仔豬空腸二糖酶活性的降低[39]。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的二糖酶活性與Ⅱ組相比都有顯著地提高。陳騰騰[13]關(guān)于OPS對LPS刺激斷奶仔豬小腸健康的影響的研究結(jié)果顯示腹腔注射LPS會導(dǎo)致斷奶仔豬小腸二糖酶活性的下降,但是飼糧中添加OPS可顯著提高二糖酶活性。許梓榮等[38]的研究結(jié)果顯示微量鋅可以提高小腸黏膜中蔗糖酶的活性,但是也一定程度上抑制小腸黏膜中麥芽糖酶的活性。郭彤等[40]研究結(jié)果顯示Cu2+/ZnO-蒙脫石可以顯著提高空腸黏膜二糖酶的活性。本次試驗結(jié)果說明,Zn-OPS可以提高免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸黏膜的二糖酶活性,能有效緩解LPS引起的免疫應(yīng)激。

    4 結(jié) 論

    飼糧中添加Zn-OPS可以提高斷奶仔豬的生長性能,同時可以有效提高斷奶仔豬血清的抗氧化能力,提高仔豬免疫耐受能力,對免疫應(yīng)激有明顯的緩解能力,并且可以顯著提高仔豬空腸二糖酶的活性。本試驗結(jié)果顯示,在飼糧中添加3 000 mg/kg的Zn-OPS效果最佳。

    [1] 俞慧紅,竺巧玲,戴飛,等.多糖抗氧化作用的研究現(xiàn)狀[J].食品研究與開發(fā),2008,29(3):172-176.

    [2] 李志.牡蠣多糖的分離純化及生物學(xué)活性研究[D].碩士學(xué)位論文.福州:福建農(nóng)林大學(xué),2009.

    [3] 吳文平.不同鋅源及鋅水平對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和血液生理生化指標(biāo)的影響[D].碩士學(xué)位論文.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [4] 孫國君.鋅對仔豬及小腸上皮細胞免疫功能的調(diào)節(jié)作用[D].博士學(xué)位論文.雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.

    [5] 岳雙明.不同蛋白水平日糧添加高鋅對早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能、抗氧化作用和腸道粘膜免疫的影響[D].碩士學(xué)位論文.雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2008.

    [6] 王曉暉,白海泉,烏蘭格日樂.多糖金屬配合物的研究進展[J].內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2014,29(5):516-519.

    [7] 馬利華,秦衛(wèi)東,陳學(xué)紅,等.金針菇多糖-Fe(Ⅱ)螯合物的制備及抗氧化活性[J].食品科學(xué),2010,31(20):202-207.

    [8] 蔣偉.金蓮花中葒草苷鋅配合物合成、表征及其生物活性初步研究[D].碩士學(xué)位論文.張家口:河北北方學(xué)院,2013.

    [9] 趙姝雯,夏宇,陳貴堂,等.金針菇多糖-Zn2+螯合物對L929腫瘤細胞的增殖抑制作用及其抗氧化活性[J].食品科學(xué),2016,37(5):202-207.

    [10] 楊帆,崔小強,楊秀榮.SPR生物傳感器研究脂多糖與生物分子的相互作用[J].化學(xué)傳感器,2005,25(2):30-31.

    [11] 郭志有,李晶,周勤飛,等.細菌脂多糖在模擬仔豬斷奶免疫應(yīng)激模型上的應(yīng)用[J].畜禽業(yè),2011(3):46-48.

    [12] 羅剛,黃志堅,陳騰騰,等.牡蠣粗多糖對免疫應(yīng)激仔豬炎性細胞因子和PPARγmRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2014,45(3):483-488.

    [13] 陳騰騰.牡蠣粗多糖對脂多糖刺激斷奶仔豬小腸健康的影響[D].碩士學(xué)位論文.福州:福建農(nóng)林大學(xué),2014.

    [14] 劉祝英.復(fù)合多糖對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫功能影響的研究[D].碩士學(xué)位論文.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [15] 宋志學(xué),杜天璽,孫紅國,等.紅芪粗多糖對免疫應(yīng)激斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2013,25(5):1062-1068.

    [16] 張純,陳代文,丁雪梅,等.不同鋅源對斷奶仔豬生長性能和血液指標(biāo)的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報,2006,19(3):515-518.

    [17] 蔡旭濱,陳凌鋒,檀新珠,等.太子參莖葉多糖對斷奶仔豬生長性能和血清抗氧化指標(biāo)、免疫指標(biāo)及生化指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2016,28(12):3867-3874.

    [18] NISHI K,ODA T,TAKABUCHI S,et al.LPS induces hypoxia-inducible factor 1 activtion in macrophage-differentiated cells in a reactive oxygen species-dependent manner[J].Antioxidants & Redox Signaling,2008,10(5):983-995.

    [19] 姜招峰.自由基醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)理論[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1990,11(1):39-42.

    [20] HORTON A A,FAIRHURST S,BUS J S.Lipid peroxidation and mechanisms of toxicity[J].Critical Reviews in Toxicology,1987,18(1):27-29.

    [21] FREEMAN B A,CRAPO J D.Biology of disease:free radicals and tissue injury[J].Laboratory Investigation,1982,47(5):412-426.

    [22] BEN-SHAUL V,LOMNITSKI L,NYSKA A,et al.The effect of natural antioxidants,NAO and apocynin,on oxidative stress in the rat heart following LPS challenge[J].Toxicology Letters,2001,123(1):1-10.

    [23] 張偉,楊震國,侯永清,等.N-乙酰半胱氨酸對脂多糖刺激仔豬空腸黏膜抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2011,23(5):842-847.

    [24] 田新強,許瑞齡,尹蕾.N-乙酰半胱氨酸對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠肝MAPK磷酸化的影響[J].中國病理生理雜志,2008,24(8):1565-1569.

    [25] 方洛云,鄒曉庭,蔣林樹,等.不同鋅源對斷奶仔豬免疫和抗氧化作用的影響[J].中國獸醫(yī)學(xué)報,2005,25(2):201-203.

    [26] 馮望寶,王麗,王安.微量元素鋅在動物營養(yǎng)上的研究進展[J].飼料博覽,2007(3):51-54.

    [27] 楊保收,陳越,金久善.鋅與自由基[J].中國獸醫(yī)雜志,1999,25(11):42-44.

    [28] 冷煒博,劉玉蘭,李爽,等.天冬氨酸對脂多糖刺激斷奶仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和黏膜抗氧化能力的影響[J].中國畜牧雜志,2014,50(11):32-36.

    [29] 翟志敏.IL-2對免疫激活和免疫耐受的雙向調(diào)節(jié)作用[J].中國藥理學(xué)通報,2013,29(3):319-322.

    [30] 韓杰,邊連全,張一然,等.刺五加多糖對脂多糖免疫應(yīng)激斷奶仔豬生長性能和血液生理生化指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2013,25(5):1054-1061.

    [31] 周琳,周光炎,路麗明.IL-10的雙向免疫調(diào)節(jié)作用[J].細胞與分子免疫學(xué)雜志,2012,28(10):1100-1102,1106.

    [32] 郭錦錦,孫萬邦.IL-10受體及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進展[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2012,19(1):135-137.

    [33] 朱春甲,朱紅濤,汪坤,等.異丙腎上腺素對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠肺泡巨噬細胞分泌TNF-α和IL-10及吞噬功能影響的研究[J].安徽醫(yī)學(xué),2009,30(6):656-658.

    [34] 徐占云,秦睿玲,褚耀誠,等.枸杞多糖對雛雞淋巴細胞體外增殖及分泌IL-2的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2013,44(2):322-328.

    [35] 周丹.腫瘤壞死因子(TNF-α)在大鼠早期炎癥過程中的初步研究[D].碩士學(xué)位論文.南通:南通大學(xué),2009.

    [36] 施惠娟,周茹,金少舉,等.氧化苦參堿對銀屑病小鼠模型血清中IL-2、IL-10、TNF-α水平的影響[J].華西藥學(xué)雜志,2010,25(4):418-420.

    [37] 宋小珍,劉風(fēng)華,王恬,等.中藥復(fù)方對熱應(yīng)激豬小腸二糖酶活性及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白表達的影響[C]//紀(jì)念中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會中獸醫(yī)學(xué)分會成立30周年中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會中獸醫(yī)學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會、華東區(qū)第十九次中獸醫(yī)科研協(xié)作與學(xué)術(shù)研討會論文集.南昌,江西,中國:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會,2009.

    [38] 許梓榮,李衛(wèi)芬,孫建義.豬胃腸道黏膜二糖酶的性質(zhì)[J].動物學(xué)報,2002,48(2):202-207.

    [39] 范偉,劉玉蘭,孟國權(quán),等.脂多糖刺激對斷奶仔豬小腸結(jié)構(gòu)的影響及機理[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2010(3):65-67.

    [40] 郭彤,吳艷,李曉晨,等.Cu2+/ZnO-蒙脫石對斷奶仔豬生長性能、腸道菌群、黏膜二糖酶活性及腸黏膜形態(tài)的影響[J].中國畜牧雜志,2016,52(17):48-53,59.

    *Corresponding author, professor, E-mail: huangzj1999@sina.com

    (責(zé)任編輯 田艷明)

    Effects of Oyster Polysaccharide-Zinc Complex on Growth Performance and Intestinal Health of Weaned Piglets Induced by Lipopolysaccharide

    MA Maotao LIN Shaowei YIN Guangwen HUANG Zhijian*

    (EngineeringLaboratoryofAnimalPharmaceuticals,CollegeofAnimalScience,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002,China)

    This study was conducted to investigate the effects of oyster polysaccharide (OPS)-zinc complex (Zn-OPS) on growth performance of weaned piglets, and serum antioxidant capacity and anti-inflammatory factor content and disaccharidase activity in jejunum mucosa of immunized pigs with lipopolysaccharide (LPS). A total of thirty piglets of (28±1) days of age were randomly allocated into five groups named blank control (group Ⅰ), immunological stress control (group Ⅱ) and low OPS (group Ⅲ), medium OPS (group Ⅳ) and high OPS (group Ⅴ) with six replicates per group and one pig in each replicate according to the principle of similar weight. Piglets in groups Ⅰ and Ⅱ were fed basal diets, and in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were fed basal diets supplemented with 1 000, 3 000 and 5 000 mg/kg Zn-OPS, respectively. The piglets were injected intraperitoneally with a dose of LPS (100 μg/kg BW) except in group Ⅰ which were injected with the same dose of normal saline after 30 days of feeding experiment. And three hours after injection, the serum samples were collected to measure antioxidant capacity, and the jejunum mucosa was collected for measuring contents of interleukin (IL)-2, IL-10 and tumor necrosis factor-α (TNF-α) and disaccharidase activity by enzyme linked immunosorbent assay. The results showed as follows: 1) compare with groups Ⅰ and Ⅱ, average daily gain of weaned piglets in groups Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05), and the ratio of feed to gain in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was decreased in some tendency (P>0.05). 2) Compare with group Ⅰ, the serum total superoxide dismutase activity in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05). And compare with group Ⅱ, the serum glutathione peroxidase activity in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05), while the serum malondialdehyde content was significantly decreased (P<0.05). 3) Compare with group Ⅰ, the contents of IL-2 and IL-10 of jejunum mucosa in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were significantly increased (P<0.05), and IL-10 content in group Ⅳ was significantly higher than that in group Ⅱ (P<0.05). Compare with group Ⅱ, TNF-α content of jejunum mucosa in groups Ⅲ and Ⅳ was significantly decreased (P<0.05). 4) Compare with group Ⅱ, the activities of sucrose, maltase and lactase of jejunum mucosa in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were significantly increased (P<0.05). It is concluded that dietary Zn-OPS can improve the serum antioxidant capacity and immune tolerance of piglets, increase the jejunum mucosal disaccharidase activity, which can relieve the immune stress. The effect of Zn-OPS supplemented with 3 000 mg/kg is the best.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(4):1359-1366]

    Zn-OPS; weaned piglets; growth performance; antioxidant capacity; inflammatory cytokines; disaccharidase

    10.3969/j.issn.1006-267x.2017.04.034

    2017-01-16

    福建省科技廳引導(dǎo)項目(2015N0017);國家自然科學(xué)基金——青年基金項目(31502058);??萍及l(fā)展資金項目(KF2015017)

    馬茂濤(1991—),男,福建寧德人,碩士研究生,從事臨床獸醫(yī)學(xué)研究。E-mail: 452650019@qq.com

    *通信作者:黃志堅,教授,碩士生導(dǎo)師,E-mail: huangzj1999@sina.com

    S816.7

    A

    1006-267X(2017)04-1359-08

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