曲馬多相關(guān)物證檢驗方法評述

楊陽　肖凱

【摘 要】鹽酸曲馬多（ tramadol hydrachloride，）作為一種具有良好鎮(zhèn)痛效果的藥物，作用于人體的中樞，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中有比較廣泛的應(yīng)用，比如很多疼痛性疾病都是通過鹽酸曲馬多這種藥物來達(dá)到延緩病痛的效果。所以這種藥物在近年來也得到了很多醫(yī)務(wù)人員的親睞，但是這種藥物因為具有良好的鎮(zhèn)痛效果，所以很多時候都是受到管制的。近年來，這種藥物又被應(yīng)用到那些戒毒人員身上，雖然這是一種比較好的嘗試，不過社會上還是存在該藥物濫用的情況。

【關(guān)鍵詞】曲馬多；檢驗；評述

0 引言

曲馬多（tramado1）是90年代初在我國開始使用的一種新型鎮(zhèn)痛藥，化學(xué)名稱為（±）-2-（二甲氨基甲基）-1-（間氧苯基）-環(huán)己醇。鹽酸曲馬多本身作為一種鎮(zhèn)痛藥物，在很多臨床病癥中都有廣泛的應(yīng)用，近年來又不斷地應(yīng)用到其他方面，比如吸毒人員的解毒時候一般都會有用到這種藥物。根據(jù)大量的臨床試驗表明，鹽酸曲馬多一般發(fā)生作用的時候是在服用之后十五到二十分鐘之間，一般來說采用口服的方式，而這種口服的鹽酸曲馬多大部分會經(jīng)過腎臟排出體外，對于很多戒毒人員的誤區(qū)是這種藥物一般并不能代替那些毒品進(jìn)行治療，這種藥物不僅不能夠幫助那些患者減輕病患，反而有可能使得某些癥狀更加惡化，造成反作用。

1 毒品檢驗方法評述

1.1 氣相色譜法

一般來說，我們會使用GC-MS即氣相色譜-質(zhì)譜的方式對曲馬多這種藥物進(jìn)行人體藥代力和血藥濃度的相關(guān)實驗和測定[1-2]。

李景蘇等人[3]就有過使用氣相色譜法（GC） 這種經(jīng)歷，他們團(tuán)體使用這種方法分別是對國產(chǎn)的和進(jìn)口的兩種曲馬多進(jìn)行了實驗，實驗的內(nèi)容就是人體生物利用度方面的研究，值得一提的是，在這次實驗中，他們并沒有加內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，相反他們是采用的另一種方法，即利用標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)他們的檢測表明最低濃度是56ng/mL。

另外，李樺等人[4]也對國產(chǎn)和進(jìn)口曲馬多進(jìn)行了實驗中的對比，但是與前面李景蘇等人不同的是他們選擇了內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，他們選擇了美沙酮作為內(nèi)標(biāo)，而他們選用的是氮選擇性檢測器對國產(chǎn)的和進(jìn)口的曲馬多進(jìn)行一定的測定，最終結(jié)果是國產(chǎn)對進(jìn)口的相對生物利用度為98.7%。

同時，劉會臣[5]也有相關(guān)的研究，劉不僅對兩種曲馬多的相對生物度進(jìn)行了研究，同時還針對其中不同的藥代動力進(jìn)行了一系列的實驗，而劉等人采用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)是N-（ 4-氯-鄰-甲苯基）-N，N-二甲基甲瞇。他們的實驗結(jié)果表明利用AUC0-t對生物等效性的評價是最好的手段，同時劉會臣等人提出的在對曲馬多緩釋片的生物等效性評價不應(yīng)該如此片面，還應(yīng)該另外對不同立體異結(jié)構(gòu)體的體內(nèi)過程進(jìn)行一定的探究。

歐陽冬生通過實驗對國產(chǎn)的曲馬多和進(jìn)口的生物等效性進(jìn)行了有效的驗證；經(jīng)過國內(nèi)外不同的曲馬多的比較，藥物達(dá)峰（tmax）一致，但Cmax、AUC和T1/2值是相比較于國外的報道稍微略高，這個差別是不是與肝代謝酶（ CYP2D6）的遺傳變異有關(guān)，還沒有相關(guān)的實驗和研究能夠證明。

王躍東等[7]采用毛細(xì)管色譜柱和氮磷檢測器建立了人體血清中曲馬多的定量分析方法，他們在樣本中添加了一種叫做殺蟲脒作為實驗的內(nèi)標(biāo)，這種物質(zhì)是從石油醚中經(jīng)過復(fù)雜程序提取出來的，最終檢測到的結(jié)果是鹽酸曲馬多的檢出限是5μg/L。他們在實驗中限定的濃度范圍6.25～800μg/L，這個時候標(biāo)準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)出來的是一種相對比較良好的線性關(guān)系。綜上所述，氣相色譜法是一種比較好的研究方法，這種研究方法能夠比較靈敏簡便的檢驗出曲馬多的各種特性。

1.2 液相色譜法

張冕等[8]用高效液相色譜紫外檢測法（HPLC-UV）測定曲馬多的血藥濃度，采用ZORBA×SBC18色譜柱，流動相為磷酸鹽緩沖液（0.02mol/L，pH3.7）乙腈（81：19），檢測波長217nm。最終的檢測結(jié)果是曲馬多在血漿中最低含量是10μg/L，在15～800μg /L的范圍之間有著比較好的相關(guān)關(guān)系。這個檢測方法具有很多優(yōu)點，比如測量結(jié)果準(zhǔn)確，而且有很好的靈敏度。

曲馬多及其代謝物O-去甲基曲馬多均具有熒光效應(yīng)。張哲峰等[9]根據(jù)這種獨特的性質(zhì)，利用HPLC熒光檢測法這種獨特的方法同時對兩種藥物進(jìn)行檢測，并且采用阿替洛爾作為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。

夏東來等[10]用HPLC熒光檢測法研究曲馬多膠囊在漢族健康人體內(nèi)的藥動學(xué)。孫考祥等[9]用反相HPLC熒光檢測法測定多劑量口服HPLC緩釋片后的血藥濃度（標(biāo)準(zhǔn)曲線法不加內(nèi)標(biāo)物質(zhì)），結(jié)果普通片血藥濃度的上升與消除均較快，而緩釋片則上升和消除均比較平緩（15h血藥濃度仍維持在100μg/L以上）。

余深等[11]用反相HPLC熒光檢測法對國內(nèi)外不同的曲馬多生物利用度以及藥代動力進(jìn)行了一定的比較分析。

盧曉陽等[12]采用建立了一種測定曲馬多血藥濃度的方法，學(xué)術(shù)界稱之為高效液相色譜測定法，經(jīng)過多次的實驗結(jié)果表明，這個檢測方法擁有比較高的靈敏度，同時檢測結(jié)果也是值得肯定的。

1.3 薄層色譜法

展開劑有環(huán)己烷-二乙胺（8：2），氯仿-甲醇（9：1），乙酸乙酯-二乙胺（9：1），乙醚-二乙胺（9：1）。

顯色采用Rokus A推薦的程序化顯色方法進(jìn)行顯色[13]。顯色劑有1）釩酸銨溶液：釩酸銨200mg+濃硫酸250mL；2）改進(jìn)的Dragendorff試劑：碘化鉀59+碘29+硝酸鉍0.29+濃鹽酸0.5mL+冰醋酸10.5mL+水239mL。顯色方法：將展開后的薄層色譜板放在一封閉的容器內(nèi)，利用甲醛蒸汽熏蒸2min，然后在熱空氣流下干燥5～10s，將色譜板緩慢浸入到釩酸銨溶液中5s后取出，反復(fù)進(jìn)行2次，20s后對顏色進(jìn)行觀察；將薄層色譜板快速浸入到水中并立即取出，在熱空氣流下干燥lmin，將色譜板快速浸入水中2～3次，至顏色穩(wěn)定后進(jìn)行觀察；將薄層色譜板干燥后在長波（366nm）紫外燈下觀察；將薄層色譜板浸入到改進(jìn)的Dragendorff溶液中，20s后取出并對顏色進(jìn)行觀察。endprint

1.4 毛細(xì)管電泳法

一般來說，曲馬多是通過順反異構(gòu)的混合物混合而成的。劉會臣等[14]對血清里面的反式曲馬多進(jìn)行測定，他們選用的方法是通過高效毛細(xì)管電泳法來進(jìn)行試驗。實驗結(jié)果證明，當(dāng)血藥濃度穩(wěn)定之后，在不一樣的時間內(nèi)，血清中（+）-反式濃度高于（-）-反式鹽酸曲馬多的程度非常的明顯清晰。

1.5 兩點電位滴定法

馮俊賢等[15]根據(jù)鹽酸曲馬多藥物里面可能會含有可電離鹵索的特殊性，另辟蹊徑的提出另一種檢測方法，即兩點點位滴定法。這個測定方法更為簡單，其中需要注意的地方就是需要在滴定計量的點位置記錄相應(yīng)的溶液體積以及與之相對的電極電位值，之后再利用相應(yīng)的公式對鹽酸曲馬多的含量進(jìn)行計算。這個方法非常之簡單，是一種非常簡單的測量曲馬多含量的方法。

1.6 流動注射納米微反應(yīng)器化學(xué)發(fā)光法

石文兵等[16]在利用酸性將鹽酸曲馬多分子中氮原子被質(zhì)子化后，再與陰離子AuCl4-形成相關(guān)混合，形成混合物，這種混合物再與二氯甲烷帶入魯米諾的氯化十六烷基三甲基銨反膠束納米進(jìn)行微反應(yīng)，在AuCl4-被離解出來之后，就能夠跟魯米諾產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)并且散發(fā)出光。在相應(yīng)的濃度一定的情況下，還可以通過這種反應(yīng)的發(fā)光程度來側(cè)面證明其中鹽酸曲馬多的含量多少。根據(jù)他們的實驗結(jié)果說明，能夠檢出限為0.02ng·mL-1），當(dāng)然這需要一定的條件，其條件就是線性范圍為0.001～30μg·mL-1。這個方法已經(jīng)經(jīng)過多次片劑和注射等的檢測，其結(jié)果也是相當(dāng)成功的。

1.7 選擇性電極法

吳擁軍等[17]綜合考慮活性物質(zhì)的含量和增塑劑種類及含量的影響，選擇以鹽酸曲馬多四苯硼鈉締合物為活性物質(zhì)，以DOP為增塑劑的電極體系。該電極在5×10-5～1×10-2mol/L范圍內(nèi)表現(xiàn)能斯特響應(yīng)，斜率為57.1mV/pC，檢測下限為1×10-5mol/L。電極對多種異質(zhì)離子表現(xiàn)良好的選擇性。運用電位法測定藥物中的鹽酸曲馬多，回收率為94.9%～106.0%。

在曲馬多毒品相關(guān)物證檢驗中，采用氣質(zhì)聯(lián)用法（ GC-MS）對從販毒嫌疑人處查獲的可疑藥片進(jìn)行檢驗，以確定其中含有何種毒品成分。該法操作簡便，定性準(zhǔn)確，是目前未知毒品檢驗最常用的方法。

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[責(zé)任編輯：田吉捷]endprint