丙型肝炎患者基因分型與抗HCV、HCV-RNA的相關(guān)性研究

冀敏

(新鄉(xiāng)市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南新鄉(xiāng)453000)

丙型肝炎患者基因分型與抗HCV、HCV-RNA的相關(guān)性研究

冀敏

(新鄉(xiāng)市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南新鄉(xiāng)453000)

目的探討丙型肝炎患者基因分型與抗HCV、HCV－RNA的相關(guān)性，為丙型肝炎的防治提供參考。方法選取2015年6月－2016年6月期間診治的80例丙型肝炎患者，以ABI3500dx基因測(cè)序儀對(duì)基因分型進(jìn)行測(cè)序，確定基因分型，以化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)抗HCV濃度，計(jì)算測(cè)定值/臨界值（S/CO）比值，采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)HCV－RNA濃度。結(jié)果患者基因分型主要為1b、1c、2a分別有48例、14例、8例，占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分別占77．50%、22．50%；抗HCV陽性者79例、HCV－RNA陽性者53例，陽性率分別為98．75%、66．25%；基因型1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV－RNA濃度分別為（13．27±3．33）、（6．54±1．24）×106copies/ml均高于非1型患者（11．28±3．25）、（5．86±1．03）× 106copies/ml，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；HCV－RNA陽性患者抗HCV(S/CO）比值為（13．33±4．39）高于陰性患者（9．74± 3．84），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。結(jié)論丙型肝炎患者基因分型主要為1b、1c、2a，不同基因型時(shí)抗HCV、HCV－RNA濃度不同，基因分型與抗HCV、HCV－RNA的之間存在一定相關(guān)性。

丙型肝炎；基因分型；抗HCV；HCV－RNA

肝臟是人體重要代謝器官，在肝臟受損時(shí)可發(fā)生代謝異常，最終部分患者可發(fā)生肝衰竭等病變引起死亡。病毒性肝炎是肝臟最常見的傳染性疾病，是由肝炎病毒感染所致，其中丙型肝炎病毒（HCV）感染所致的丙型肝炎在病毒性肝炎中占到第二位，在我國人群感染率在0．1%～10%之間[1，2]，其中80%的患者為慢性病變，丙型肝炎患者中約20%的患者可發(fā)展為肝硬化，因此丙型肝炎的防治與乙型肝炎有同等重要地位。本研究對(duì)丙型肝炎患者基因分型與抗HCV、HCV－RNA的相關(guān)性進(jìn)行了研究，為丙型肝炎的防治提供參考，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1．1臨床資料選取2015年6月－2016年6月期間診治的80例丙型肝炎患者，納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴均符合丙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。⑵年齡≥18歲。⑶患者自愿進(jìn)行本研究，知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并有甲、乙、丁、戊等其他肝炎病毒感染。⑵合并有酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、肝臟腫瘤特異性免疫原性肝病等其他肝臟疾病。⑶妊娠期及哺乳期婦女。80例患者臨床資料分布及構(gòu)成比見表1。

表1 患者臨床資料分布及構(gòu)成比（%）

1．2方法抽取患者空腹外周靜脈血，以EDTA抗凝血漿TRlzo LS試劑提取法提取HCV－DNA，采用ABI3500dx基因測(cè)序儀對(duì)基因分型進(jìn)行測(cè)序，確定基因分型；以HCV核酸定量檢測(cè)試劑盒采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)HCV－RNA濃度；對(duì)抽取患者外周血液標(biāo)本，以化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)抗HCV濃度，計(jì)算測(cè)定值/臨界值（S/CO）比值，（S/CO）比值≥1為陽性。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)采用SPSS 19．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1患者基因分型分布及構(gòu)成比與抗HCV、HCVRNA陽性率分布患者基因分型主要為1b、1c、2a，分別有48例、14例、8例，占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分別占77．50%、22．50%，見表2；抗HCV陽性者79例、HCV－RNA陽性者53例，陽性率分別為98．75%、66．25%，見表3。

表2 患者基因分型分布及構(gòu)成比（%）

表3 患者基因分型、抗HCV、HCV-RNA陽性率（%）分布

2．2不同基因分型患者抗HCV濃度及HCV－RNA比較基因型為1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV－RNA濃度分別為（13．27±3．33）、（6．54±1．24）× 106copies/ml均高于非1型患者（11．28±3．25）、（5．86±1．03）×106copies/ml，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），見表4。

表4 不同基因分型患者抗HCV（S/CO）比值及HCV-RNA比較（x±s）

2．3 HCV－RNA不同定性患者抗HCV濃度比較HCV－RNA陽性患者抗HCV(S/CO）比值為（13．33± 4．39）高于陰性患者（9．74±3．84），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），見表5。

表5 HCV-RNA不同定性患者抗HCV(S/CO）比值比較（x±s）

3 討論

丙型肝炎與肝臟病變的嚴(yán)重程度、干擾素應(yīng)答等均有密切關(guān)系，對(duì)HCV基因型進(jìn)行檢測(cè)對(duì)于HCV的感染及治療可提供一定參考依據(jù)，目前臨床研究顯示HCV基因型主要分為1、2、3、4、5、6六個(gè)基因型及68個(gè)亞型，在不同國家和地區(qū)HCV基因型分布稍有不同[4－7]，全球范圍內(nèi)1型和2型均有流行，歐洲部分國家、北美及亞洲地區(qū)主要流行3型，歐洲部分國家、中東及中非流行4型，歐洲部分國家及非洲流行5型，6型在北美部分地區(qū)及東南亞相對(duì)多見，在我國則主要以1b期2a型相對(duì)多見[8，9]，其中1b型占優(yōu)勢(shì)，混合型則主要在有輸血史及吸毒史患者中相對(duì)多見，本研究中丙型肝炎患者基因分型主要為1b、1c、2a，分別占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分別占77．50%、22．50%，基因型分布趨勢(shì)與臨床報(bào)道現(xiàn)狀一致，同時(shí)也有6例患者為混合型。

HCV是RNA病毒，感染后可引起肝細(xì)胞的慢性損傷，在患者體內(nèi)可出現(xiàn)免疫功能的紊亂，HCV病毒可激活自身反應(yīng)性CD8T細(xì)胞，誘導(dǎo)出現(xiàn)自身免疫，抗HCV是HCV感染后產(chǎn)生的抗體，能反應(yīng)出機(jī)體免疫應(yīng)答狀態(tài)，HCV-RNA則是反應(yīng)病毒水平的一項(xiàng)主要指標(biāo)[10，11]，以上兩項(xiàng)指標(biāo)均是臨床HCV檢測(cè)常用指標(biāo)，有的患者可表現(xiàn)為以上兩項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)陽性，有時(shí)為單一陽性，HCV-RNA檢測(cè)窗口期一般在1~2周，抗HCV檢測(cè)窗口期在15d左右，兩者窗口期接近，但是臨床報(bào)道顯示抗HCV漏診率相對(duì)較高，因此HCV-RNA相對(duì)于抗HCV準(zhǔn)確性更高，而且HCV-RNA陰性這也不能排除HCV感染，抗HCV陰性時(shí)也不能排除HCV感染，比如患者正處于病毒復(fù)制不活躍狀態(tài)則HCVRNA可能出現(xiàn)陰性，在血清抗體尚未轉(zhuǎn)陽的窗口期可出現(xiàn)抗HCV陰性，因此是否確定HCV感染需對(duì)以上兩項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。本研究中80例丙型肝炎患者抗HCV陽性者79例、HCV-RNA陽性者53例，陽性率分別為98.75%、66.25%，HCVRNA陽性率低于抗HCV陽性率，分析原因，可能是由于納入病例已經(jīng)均得到一定時(shí)間段的治療，患者非保護(hù)性抗體均基本產(chǎn)生，而HCV-RNA已經(jīng)部分患者轉(zhuǎn)陰。有報(bào)道顯示丙型肝炎基因型與抗HCV、HCV-RNA之間缺乏相關(guān)性支持證據(jù)、有報(bào)道認(rèn)為之間存在一定相關(guān)性[12-16]，本研究對(duì)不同基因型患者抗HCV（S/CO）比值及HCV-RNV濃度進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示基因型1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV-RNA濃度均高于非1型患者，HCV-RNA陽性患者抗HCV(S/CO）濃度高于陰性患者，提示基因型與抗HCV及HCV-RNA之間有一定相關(guān)性，是否是1型基因型患者多為難治性丙型肝炎患者有關(guān)，尚需要進(jìn)一步研究，而且本研究樣本量也較少，未能將1型基因型及其他基因型進(jìn)一步行抗HCV及HCV-RNA水平的比較，是否也存在一定差異性尚不確定。

丙型肝炎患者基因分型主要為1b、1c、2a，不同基因型時(shí)抗HCV（S/CO）比值、HCV-RNA濃度不同，基因分型與抗HCV、HCV-RNA的之間存在一定相關(guān)性，但尚需要大樣本數(shù)據(jù)進(jìn)一步研究對(duì)本結(jié)果進(jìn)行支持。

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Relationship between HCV genotypes，Anti HCV and HCV-RNA in patients with chronic hepatitis

C JI Min.Department of Clinical Laboratory，Xinxiang Maternal and Child Health Hospital，Xinxiang Henan，453000，China.

Objective To discuss relationship between HCV genotypes，Anti HCV and HCV－RNA in patients with chronic hepatitis C，and provide reference for prevention and control of chronic hepatitis C．Methods Eighty cases in patients with chronic hepatitis C from June 2015－June 2016 were included．The HCV genotypes were determined by ABI3500dx gene sequencing machine，and the level of serum Anti HCV was measured with Chemiluminescence method，determining the value calculation/critical value(S/CO)，the level of serum HCV－RNA was measured with Light real－time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction system．Results Among the 80 cases，48 cases(60．00%)for 1b，14 cases(17．50%)for 1c，8 cases(10．00%) for 1a，62 cases(77．50%)for 1 type HCV infection，18 cases(22．50%)for no 1 type HCV infection；79 cases(98．75%)for Anti HCV positive，53 cases(66．25%)for HCV－RNA positive；HCV（S/CO）were(13．27±3．33)and HCV－RNA were(6．54±1．24)×106copies/ml in patients with 1 type，HCV（S/CO）were(11．28±3．25)and HCV－RNA were(5．86±1．03)×106copies/ml in patients with no 1 type，the difference was statistically significant(P＜0．05)；HCV（S/CO）were(13．33±4．39)in HCV－RNA positive，HCV（S/CO）were(9．74±3．84)in HCV－RNA negative，the difference was statistically significant(P＜0．05)．Conclusion HCV lb，1c and 2a are the main prevalent genotypes in patients with chronic hepatitis C，and there is certain correlation between different Anti HCV and HCV－RNA of different genotypes．

Chronic hepatitis C；Genotypes；Anti HCV；HCV－RNA

R446．62，R512．6+3，Q523

A

1674－1129(2017)02－0202－03

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．020

2016-11-08；

2017-02-27)

冀敏，女，1975年生，本科學(xué)歷，學(xué)士學(xué)位，主管檢驗(yàn)師，研究方向：免疫學(xué)。