蒼艾揮發(fā)油的抗抑郁作用及機(jī)制研究

李翼堯雪洲(通訊作者)

100055北京市西城區(qū)廣外醫(yī)院中藥房1

650500云南中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心(昆明)2

蒼艾揮發(fā)油的抗抑郁作用及機(jī)制研究

李翼1堯雪洲(通訊作者)2

100055北京市西城區(qū)廣外醫(yī)院中藥房1

650500云南中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心(昆明)2

目的：研究蒼艾揮發(fā)油(VOCA)的抗抑郁作用及機(jī)制。方法：選用Wistar大鼠90只，平均分為6組，即VOCA高、中、低劑量組，陽性藥組、模型組、空白對照，對空白對照組以外的5組大鼠進(jìn)行21 d的慢性應(yīng)激形成模型并同時(shí)給予對應(yīng)藥物。實(shí)驗(yàn)后，測試動物的糖水偏好度及HPA軸血清激素含量變化。結(jié)果：與模型組相比，VOCA高、中劑量組能明顯提高糖水偏好；氟西汀組明顯提升糖水偏好。與模型組相比，VOCA組大鼠血清中CORT、CRH、ACTH水平降低，其中VOCA高、中劑量組結(jié)果較顯著，且VOCA高劑量組結(jié)果與氟西汀組相當(dāng)。結(jié)論：VOCA具有較好的抗抑郁作用，其抗抑郁功效或許與HPA軸激素水平調(diào)節(jié)有關(guān)。

VOCA；抗抑郁

抑郁癥是一種常見精神障礙疾病，患者主要表現(xiàn)為長期情緒低落，對周圍所有事物缺乏興趣，癥狀較輕患者會對學(xué)習(xí)、生活造成影響，病情較重的患者可出現(xiàn)自殘甚至輕生的念頭[1]。然而，隨生活節(jié)奏的加快，心理壓力也越來越大，抑郁癥發(fā)病率也隨之增加，對人們身體健康造成負(fù)面影響，已引起越來越多的人開始關(guān)注。目前治療抑郁癥多選擇醫(yī)藥治療，雖然西藥治療效果較好，但不良反應(yīng)是西藥存在的最大問題。因此，有必要尋求一種安全有效的藥物治療抑郁癥[2]。

蒼艾揮發(fā)油(VOCA)是以云南中醫(yī)學(xué)院熊磊教授的臨床治法經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)，選用蒼術(shù)、艾葉等含揮發(fā)油成分較多、氣味清香、辛散走竄的中藥組方制成的揮發(fā)油復(fù)方制劑。經(jīng)鼻給藥具有芳香辟穢、悅脾燥濕、開竅解郁之功效，并對該藥進(jìn)行抗抑郁作用及機(jī)制研究。

資料與方法

藥物：VOCA制備：蒼術(shù)、艾葉等藥材均采購于上海市藥材公司，加入2倍純凈水在軋碎后的藥材中，并存儲于水蒸氣蒸餾裝置中浸泡1 h，再加熱蒸餾2 h，便可得到無色透明、帶有芳香的VOCA。

藥品：VOCA：取VOCA加等量無水乙醇、3倍蒸餾水、0.2倍聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯(吐溫80)配制成VOCA乳液。陽性對照藥使用Sigma公司生產(chǎn)的氟西汀。

試劑：皮質(zhì)酮(CORT)、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、ELISA試劑盒購于上海研域商貿(mào)有限公司。

儀器：上海比朗儀器制造有限公司的KS-1800F型超聲波細(xì)胞破碎儀；德國Eppendorf公司生產(chǎn)的5415R小型冷凍高速離心機(jī)；上海元析儀器有限公司生產(chǎn)的UV-9000S型雙光束紫外可見分光光度計(jì)；美國Bio-Rad公司的Mini-ROTEAN3電泳系統(tǒng)和Mini Trans-Blot轉(zhuǎn)移系統(tǒng)；上海圣科儀器設(shè)備有限公司的TS-2脫色搖床；上海核所日環(huán)光電儀器有限公司的SN-697γ放射免疫計(jì)數(shù)器。

動物：第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供Wistar大鼠90只，其體重均在200～220 g。

方法：①動物分組：所有大鼠均在本院飼養(yǎng)1周后將Wistar大鼠平均分為6組，即VOCA高、中、低劑量組與陽性藥組、模型組、空白對照組。給予陽性藥組氟西汀10 mg/kg，VOCA高劑量組給予600 mg/kg，VOCA中劑量組給予300 mg/kg，VOCA低劑量組給予150 mg/kg，均給藥21 d。模型組和空白對照組每日給予同等劑量的生理鹽水。②動物造模：將空白對照組15只大鼠平均分為3籠正常飼養(yǎng)，其他組大鼠均采用單籠飼養(yǎng)，并依照應(yīng)激程序安排慢性輕度應(yīng)激抑郁模型(CUMS)。以下7種刺激模式每天1種隨機(jī)安排，每種刺激≥2次(不可連續(xù)出現(xiàn))。具體方法：夾尾1 min，濕墊料24 h，水平搖晃5 min，明暗顛倒24 h，25℃水中游泳30 min，10℃水中游泳5 min，鼠籠傾斜24 h。共刺激21 d，形成CUMS。③糖水測試：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前及造模后對所有動物禁食禁水20 h，然后放入同等量的常規(guī)飲用水和1%的蔗糖水，觀察1 h內(nèi)液體消耗量，計(jì)算動物對糖水的偏好率。糖水偏好率=糖水消耗/總液體消耗×100%。④HPA軸血清激素水平測試：所有動物在行為學(xué)測試結(jié)束后，均處死后取全血，離心取上清液。使用試劑盒測試動物血清中CORT、ACTH、CRH含量。

結(jié)果

各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后糖水偏好比較：實(shí)驗(yàn)前各組大鼠對糖水偏好差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)過21 d應(yīng)激后，模型組糖水偏好與空白對照組相比，其糖水偏好度顯著下降(P＜0.01)；與模型組相比，VOCA中劑量組能明顯提高應(yīng)激后大鼠對糖水的偏好(P＜0.05)；VOCA高劑量組和氟西汀組顯著提升了大鼠在應(yīng)激后對糖水的偏好(P＜0.01)。

各組大鼠HPA軸血清激素水平比較：與空白對照組相比，模型組CORT水平升高非常顯著(P＜0.01)，CRH、ACTH水平顯著升高(P＜0.05)，見表1。

討論

VOCA經(jīng)鼻給藥可通過鼻-腦通路進(jìn)入CNS。VOCA可影響嗅球，損毀大鼠抑郁相關(guān)腦區(qū)的功能活動。研究VOCA鼻-腦通路作用采用的大鼠嗅球損毀模型同時(shí)也是用于研究抗抑郁藥物作用機(jī)制的經(jīng)典動物模型。在研究中，課題組發(fā)現(xiàn)VOCA與氨水對照組相比，能提高嗅球損毀大鼠感覺運(yùn)動區(qū)、扣帶、海馬、丘腦區(qū)域的腦功能活動水平，這與抑郁癥發(fā)病相關(guān)的邊緣-皮層-紋狀體-蒼白球-丘腦(LCSPT)神經(jīng)環(huán)路具有一致性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，VOCA還能增加嗅球損毀大鼠CNS單胺遞質(zhì)的含量，因此我們推測VOCA具有抗抑郁作用，機(jī)制可能與影響單胺類神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)。

本文研究結(jié)果顯示，慢性應(yīng)激后模型組大鼠對糖水偏好度明顯下降，以及試驗(yàn)后測試的CORT、CRH、ACTH水平含量均較空白對照組顯著升高，說明造模成功。VOCA高、中劑量組大鼠血清中CORT、CRH、ACTH水平含量顯著低于模型組，且VOCA高劑量組血清激素水平檢測結(jié)果與空白對照組接近，表明VOCA可明顯減弱HPA軸功能亢奮，并與VOCA劑量有關(guān)，給藥600 mg/kg VOCA的抗抑郁與給藥10 mg/kg經(jīng)典抗抑郁西藥氟西汀功效相當(dāng)，VOCA抗抑郁功效或許與對HPA軸激素水平調(diào)節(jié)有關(guān)。因此，VOCA具有較好的抗抑郁作用及開發(fā)前景。

[1]楊樹彬,楊紹杰,盧春雪,等.中藥開心散抗抑郁癥的機(jī)制研究進(jìn)展[J].中醫(yī)院學(xué)報(bào), 2016,44(1):79-81.

[2]高洪元,田青.佛手揮發(fā)油的抗抑郁作用機(jī)制探討[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18 (7):231-234.

Antidepressant effect and mechanism of Cang Ai volatile oil

Li Yi1,Yao Xuezhou(Corresponding author)2
TCM Pharmacy,Guangwai Hospital of Xicheng District,Beijing City 1000551
Scientific Research Center of Yunnan University of Traditional Chinese Medicine(Kunming City)6505002

Objective:To explore the antidepressant effect and mechanism of Cang Ai volatile oil.Methods:90 Wistar rats were selected.They were divided into 6 groups averagely:VOCA high,medium and low dose group,positive drug group,model group and blank control group.In addition to the blank control group,other 5 groups of rats were given a model of chronic stress formation for 21 days.At the same time,they were given corresponding drugs.After the experiment,we tested the sucrose preference degree can changes of HPA axis serum hormone.Results:Compared with the model group,VOCA high and medium dose groups could significantly increase the sucrose preference.Fluoxetine group can significantly improve the sucrose preference.Compared with the model group,the levels of CORT,CRH and ACTH in serum of rats in the VOCA group were lower,the results of VOCA high and medium dose groups were significant,and the results of VOCA high dose group were comparable to those of fluoxetine group. Conclusion:VOCA had good antidepressant effect.Its antidepressant effect may be related to the regulation of HPA axis hormones.

VOCA;Antidepressant

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.8.1

云南省教育廳科學(xué)研究基金項(xiàng)目 。項(xiàng)目編號：2015Z120

Fund project Scientific research foundation of Yunnan provincial department of education.Item number:2015Z120