• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    雞血藤精準(zhǔn)煮散飲片與原飲片質(zhì)量的對(duì)比性研究*

    2017-04-10 13:06:40黃志海丘小惠JulieHawkins陳士林
    關(guān)鍵詞:雞血藤條形碼兒茶素

    徐 文,雷 迪,張 靖,徐 江,黃志海,丘小惠,Julie A.Hawkins***,陳士林***

    (1. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院/廣東省中醫(yī)藥科學(xué)院/中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣東分院 廣州 510006;2. 雷丁大學(xué)生物科學(xué)學(xué)院 英國(guó) RG6 6AH;3. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 北京 100700)

    雞血藤精準(zhǔn)煮散飲片與原飲片質(zhì)量的對(duì)比性研究*

    徐 文1**,雷 迪2,張 靖1,徐 江3,黃志海1,丘小惠1,Julie A.Hawkins2***,陳士林3***

    (1. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院/廣東省中醫(yī)藥科學(xué)院/中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣東分院 廣州 510006;2. 雷丁大學(xué)生物科學(xué)學(xué)院 英國(guó) RG6 6AH;3. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 北京 100700)

    目的:本研究采用化學(xué)指紋圖譜法及DNA條形碼分子鑒定技術(shù)對(duì)雞血藤飲片煮散質(zhì)量體系進(jìn)行探索研究。方法:應(yīng)用ITS2序列作為DNA條形碼對(duì)雞血藤進(jìn)行鑒定,對(duì)比雞血藤原飲片及精準(zhǔn)煮散飲片的出膏率;收集3個(gè)批次雞血藤飲片,采用HPLC法進(jìn)行3批次飲片混合粉碎前后質(zhì)量均一性、指紋圖譜與相似度評(píng)價(jià)。結(jié)果:ITS2序列對(duì)雞血藤藥材可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確鑒定。雞血藤煮散飲片出膏率及指標(biāo)成分表兒茶素含量均略高于原飲片;原飲片批間表兒茶素溶出量有明顯差異性RSD為11.0%,混合后制成煮散飲片后差異性明顯降低RSD為1.0%。指紋圖譜中14個(gè)共有峰相對(duì)峰面積均有所提高,RSD值明顯減少。結(jié)論:雞血藤精準(zhǔn)煮散飲片提高原飲片的浸出率,成分溶出率及質(zhì)量均一性,表明雞血藤煮散飲片有較好的的臨床應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

    精準(zhǔn)煮散飲片 雞血藤 均一性 DNA條形碼 質(zhì)量體系

    雞血藤為豆科植物密花豆Spatholobus suberectusDunn.的干燥藤莖,具有補(bǔ)血、活血、通絡(luò)的功效,用于治療月經(jīng)不調(diào)、血虛萎黃、風(fēng)濕痹痛等癥,主產(chǎn)于廣西、廣東,以野生藥材入藥[1]。雞血藤中主要含黃酮類、有機(jī)酸、蒽醌類、甾體及三萜類等化學(xué)成分[2,3]。由于近年來(lái)的過(guò)度砍伐與利用,其野生資源蘊(yùn)藏量不斷下降,一些比較細(xì)的或達(dá)不到入藥要求的藤莖亦被采挖和藥用,因而雞血藤藥材的質(zhì)量參次不齊,其化學(xué)成分含量差異非常大[4-6],直接影響臨床用藥療效及穩(wěn)定性。因此需要一種易于鑒定和檢測(cè),可經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化工藝制備、規(guī)?;a(chǎn)、質(zhì)量均一的方法,以提高臨床用藥療效穩(wěn)定的新型飲片。

    本課題組前期研究提出的“精準(zhǔn)煮散飲片”理論體系[7],其實(shí)質(zhì)是通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化工藝將中藥飲片的形狀規(guī)格微小化、均勻化處理,使飲片批量規(guī)模穩(wěn)定化,批內(nèi)質(zhì)量均一化,實(shí)現(xiàn)了準(zhǔn)確、高效的自動(dòng)化分裝、調(diào)劑、煎煮流程,提高臨床湯劑用藥的穩(wěn)定有效。中藥煮散起源于先秦,盛行于唐宋,是將中藥粉碎成一定粒度與水共煎,去渣取汁制成的中藥液體制劑。通過(guò)將藥材粉碎,制成煮散,有利于提高藥材煎煮效率,減少藥材使用量,具有省材、省時(shí)之特點(diǎn)[8-10]。煮散的缺點(diǎn)在于粉碎過(guò)程中破壞藥材形態(tài),喪失藥物鑒別特征,導(dǎo)致“辨藥之難”,逐步被中藥飲片所取代[11,12]。近年來(lái),隨著中藥DNA條形碼鑒定體系及中藥指紋圖譜技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展為構(gòu)成精準(zhǔn)化的中藥質(zhì)量控制體系,提供精準(zhǔn)化的中藥識(shí)別溯源與檢測(cè),實(shí)現(xiàn)藥品基源、生產(chǎn)加工及市場(chǎng)流通等多領(lǐng)域監(jiān)管,有效解決傳統(tǒng)煮散的“辨藥之難”問(wèn)題。本研究以雞血藤為考察對(duì)象,以飲片規(guī)格、含量、指紋圖譜與相似度評(píng)價(jià)及DNA條形碼比對(duì)為考查重點(diǎn),以期揭示精準(zhǔn)煮散飲片應(yīng)用的優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)中藥飲片的質(zhì)量均一化,使之實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)和配給的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化,為中醫(yī)臨床療效提供可靠保障。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 主要儀器及試劑

    美國(guó)Waters2695型高效液相色譜儀系統(tǒng)(Empower 色譜工作站, W2998 DAD檢測(cè)器);BT125D十萬(wàn)分之一分析天平(瑞士METTLERTOLEDO公司);粉碎機(jī)(臺(tái)灣榮聰鐵工廠);2720 Thermal Cycler PCR儀(美國(guó) Applied Biosystems公司);DYY-8C型電泳儀(北京市六一儀器廠);JY04S-3C型凝膠成像分析系統(tǒng)(北京君意東方電泳設(shè)備有限公司);1-14 小型離心機(jī)(德國(guó)Sigma公司);MX-RL-E型混合儀(大龍興創(chuàng)儀器有限公司);DP305植物組DNA提取試劑盒(北京天根生化科技有限公司);DL 2000 DNA Marker(日本TaKaRa公司);Glodview(上海賽百盛基因技術(shù)有限公司);Tris-HCl(上海麥克林生化科技有限公司,生產(chǎn)批號(hào):T818979);Tris(美國(guó)Sigma公司,生產(chǎn)批號(hào):V900483);β-巰基乙醇(美國(guó)Sigma公司,生產(chǎn)批號(hào):M6250);瓊脂(美國(guó)Sigma公司,生產(chǎn)批號(hào):V900500);引物由上海美吉生物科技有限公司合成,2×Tap PCR Mix酶(北京艾德萊生物科技有限公司);乙腈、甲酸均為色譜純(美國(guó)Fisher公司);超純水由Millipore制得。

    1.2 受試藥物

    表兒茶素(含量≥98%,生產(chǎn)批號(hào):110878-200102),購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品鑒定所;雞血藤市售飲片分別購(gòu)自康美藥業(yè)有限公司(產(chǎn)地:廣西,生產(chǎn)批號(hào):160811031、160301031)及嶺南中藥飲片有限公司(產(chǎn)地:廣西,生產(chǎn)批號(hào):160302),經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室黃志海主任中藥師鑒定均為2015版《中國(guó)藥典》(一部)雞血藤項(xiàng)下收載品種。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 DNA 條形碼的建立

    取飲片樣本約40 mg,用液氮進(jìn)一步磨碎,采用植物DNA提取試劑盒提取基因組總DNA。ITS2序列擴(kuò)增采用正向引物ITS2F: 5′-ATGCGATACTTGGTG TG AAT-3′,反向引物:ITS3R: 5′-GACGCTTC TCCAGACTACAAT-3′,進(jìn)行擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系為25 μL,包括2×Taq PCR Mix 酶12.5 μL,正向、反向引物各1 μL(2.5 μmol·L-1),模板DNA 2.0 μL(約30-100 ng),加ddH2O補(bǔ)足至25 μL。擴(kuò)增程序:94℃變性5 min;94℃變性30 s,56 ℃退火30 s,72 ℃延伸45 s(40個(gè)循環(huán));72 ℃延伸10 min[10]。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物采用1.2 %瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè),將電泳條帶清晰、明亮、單一的PCR產(chǎn)物送測(cè)序公司進(jìn)行雙向測(cè)序。

    2.2 指紋圖譜檢測(cè)方法

    2.2.1 色譜條件的建立

    色譜柱:Welch ODS-3 C18(4.6×250 mm,5 μm);柱溫:25℃;流動(dòng)相為0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脫(5%→20%);流速:1 mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng):286 nm;柱溫:25℃;洗脫時(shí)間:28 min;進(jìn)樣體積:10 μL。

    2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

    精密稱取表兒茶素對(duì)照品適量,加甲醇配制成含表兒茶素1 mg·mL-1的對(duì)照品溶液,表兒茶素對(duì)照溶液依次稀釋成80、40、20、10、5及2.5 μg·mL-1系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液,置于4℃冰箱中保存,備用。

    2.2.3 供試品溶液的制備

    精密量取適量飲片提取液,用水稀釋成相當(dāng)于雞血藤飲片0.02 g·mL-1的供試品溶液。

    2.2.4 線性關(guān)系考察

    按照2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析。以對(duì)照品峰面積(Y)對(duì)濃度(X)進(jìn)行線性回歸,計(jì)算回歸方程,考察表兒茶素在上述色譜條件下的線性關(guān)系。

    2.3 原飲片與煮散飲片出膏率比較

    不同規(guī)格雞血藤煮散飲片制備:取雞血藤飲片(生產(chǎn)批號(hào):160301301),粉碎后過(guò)篩,得到5-10目(2-4 mm)、10-24目(0.8-2 mm)、24-65目(0.25-0.8 mm)等不同粒徑范圍的煮散飲片。

    稱取原飲片及不同粒徑范圍煮散飲片各100 g,采用標(biāo)準(zhǔn)湯劑煎煮法[13]進(jìn)行提取。分別加8倍量水,浸泡30 min,煮沸后保持30 min,過(guò)濾,濾渣再加7倍量水煎煮30 min。合并過(guò)濾液,減壓旋蒸至100 mL,即濃縮為相當(dāng)于雞血藤飲片1 g·mL-1的藥液。精密量取25 mL溶液,蒸干,得干浸膏重量,計(jì)算出膏率。

    2.4 原飲片與煮散飲片均一性比較

    分別取3個(gè)批次雞血藤飲片各200 g,充分混合后,粉碎,過(guò)篩,取10-65目粒徑范圍的煮散飲片。原飲片及精準(zhǔn)煮散飲片形態(tài)見(jiàn)圖1。不同批次原飲片各取50 g(S1的批號(hào)為160811031,S2的批號(hào)為160301031,S3的批號(hào)為160302);取10-65目雞血藤煮散飲片,均勻攤平,畫格分為9份,隨機(jī)選取3份(S4-S6),從每份中分別稱取50 g。

    上述6份樣品分別按標(biāo)準(zhǔn)湯劑煎煮法進(jìn)行提取。合并煎煮液,濃縮成100 mL溶液,即濃縮為0.2 g·mL-1的原藥材溶液。合并提取液,定容至500 mL,即為相當(dāng)于雞血藤飲片0.1 g·mL-1的藥液。精密量取藥液并用水稀釋5倍,采用0.22 μm濾膜過(guò)濾,取10 μL進(jìn)樣。

    2.5 數(shù)據(jù)處理

    所得序列采用CodonCode Alinger 6.02軟件進(jìn)行校對(duì)拼接,去除序列兩端低質(zhì)量區(qū)。利用軟件MEGA 6.06對(duì)不同樣本序列進(jìn)行比對(duì),分析ITS2序列特點(diǎn)。以條形碼附加二維碼的方式展示主導(dǎo)單倍型序列特征,左側(cè)部分為DNA序列轉(zhuǎn)換的彩色條形碼圖片,右側(cè)二維碼圖片為QRcode的編碼方式進(jìn)行編碼,掃描可讀取序列信息(圖2)。

    采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,兩兩比較時(shí),采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    HPLC圖譜采用國(guó)家藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件(2004 A版),生成指紋圖譜共有模式,計(jì)算樣品的相似度。標(biāo)定共有峰,以表兒茶素為參照峰,計(jì)算共有峰的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 ITS2序列分析

    應(yīng)用MEGA6.06分析雞血藤3條ITS2序列特征,發(fā)現(xiàn)種內(nèi)存在2個(gè)變異位點(diǎn),分別為22位點(diǎn)的G/A突變和83位點(diǎn)的C/T突變,3條雞血藤序列長(zhǎng)度均為207 bp。A、C、G、T的堿基平均含量分別為12.80%、34.54%、35.51%、17.15%,GC含量達(dá)70.53%,主導(dǎo)單倍型序列見(jiàn)圖2。BLAST搜索結(jié)果顯示各樣品相似性最高的為密花豆Spatholobus suberectus與其最相似序列的相似度為100%,表明ITS2序列對(duì)雞血藤藥材可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確鑒定。

    圖1 雞血藤飲片形態(tài)圖

    圖2 雞血藤ITS2條形碼

    表1 雞血藤原飲片與精準(zhǔn)煮散飲片出膏率(±s,n=3)

    表1 雞血藤原飲片與精準(zhǔn)煮散飲片出膏率(±s,n=3)

    注:“+++”:澄清度較高,”++”:較為澄清;“-”:未見(jiàn)明顯糊化。

    飲片規(guī)格出膏率/%澄清度糊化度原飲片14.01±0.25 +++ -5-10目(2-4 mm)15.53±0.12 +++ -10-24目(0.8-2 mm)15.67±0.15 ++ -24-65目(0.25-0.8 mm)14.63±0.15 ++ -

    圖3 表兒茶素對(duì)照品(A)、雞血藤水提液(B)HPLC色譜圖;

    表2 原飲片與精準(zhǔn)煮散飲片提取液中表兒茶素含量(±s,n=3)

    表2 原飲片與精準(zhǔn)煮散飲片提取液中表兒茶素含量(±s,n=3)

    組別編號(hào)含量/ mg·g-1x±sRSD/% S1 1.10原飲片提取液S2 1.00 S3 0.89 1.00±0.11 10.54 S4 1.27煮散飲片提取液S5 1.26 S6 1.28 1.27±0.00 0.78

    表3 雞血藤指紋圖譜相似度結(jié)果

    3.2 原飲片與煮散飲片出膏率比較

    出膏率考察結(jié)果表明,與原飲片比較,粉碎后不同粒徑煮散飲片的出膏率均較原飲片有所提高,不同粒徑煮散飲片間出膏率無(wú)顯著性差異(表1)。

    3.3 色譜條件考察

    將對(duì)照品溶液及供試品溶液按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣,發(fā)現(xiàn)該色譜條件下表兒茶素分離度良好,對(duì)照品及提取液色譜圖見(jiàn)圖3。以對(duì)照品峰面積(Y)對(duì)濃度(X)進(jìn)行線性回歸,回歸方程為:表兒茶素(286 nm),Y=2774X-2403(R2=0.999 9),表明表兒茶素在2.5-80 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    3.4 飲片均一性評(píng)價(jià)

    以表兒茶素為考察指標(biāo),測(cè)定其在原飲片及煮散飲片中的含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果顯示,混合制成煮散飲片后指標(biāo)成分煎出率有所提高;而其含量均值的RSD值明顯減小,表明飲片質(zhì)量及均一性有所提高。

    3.5 指紋圖譜研究

    3.5.1 指紋圖譜及相似度評(píng)價(jià)

    按照“2.2.1”項(xiàng)下方法,對(duì)雞血藤飲片水提液進(jìn)行指紋圖譜的測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖4。以雞血藤原飲片為參照譜,進(jìn)行自動(dòng)匹配并計(jì)算指紋圖譜相似度,計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示,在現(xiàn)有的檢測(cè)方法下,原飲片與經(jīng)粉碎混勻得雞血藤煮散飲片樣品共6批樣品的主要色譜峰均可以良好的匹配,相似度分析結(jié)果顯示原飲片的相似度在0.912-1.000之間,而煮散飲片的相似度均在0.977以上,表明雞血藤精準(zhǔn)煮散飲片均一性明顯提高。

    3.5.2 指紋圖譜共有峰的標(biāo)定

    本研究中以原飲片中表兒茶素(tR=40.765 min)為參考峰,計(jì)算制得精準(zhǔn)煮散飲片與原飲片各共有峰的相對(duì)峰面積(表4)。結(jié)果表明,雞血藤煮散飲片14個(gè)共有峰相對(duì)峰面積略高于原飲片,均一性明顯提高。

    4 討論

    圖4 雞血藤原飲片及精準(zhǔn)煮散飲片HPLC指紋圖譜

    雞血藤具有活血補(bǔ)血、調(diào)經(jīng)止疼、舒筋活絡(luò)的功效,用于治療月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、經(jīng)閉、風(fēng)濕痹痛、麻木癱瘓、血虛萎黃等癥?!吨袊?guó)藥典》對(duì)雞血藤飲片性狀描述為橢圓形、長(zhǎng)矩圓形或不規(guī)則的斜切片,厚3-10 mm。雞血藤煮散飲片為顆粒型飲片,在10-65目之間,藥液過(guò)濾速度適度,澄清度尚可;與原飲片比較,粉碎后不同粒徑煮散飲片的出膏率均有增加;但不同粒徑差異不明顯。比較雞血藤煮散飲片與原飲片指紋圖譜,其共有峰的平均溶出均略有升高,但均一性改善明顯,混合粉碎后的精準(zhǔn)煮散飲片指紋圖譜相似度更佳。

    雞血藤為藤莖類飲片,含有大量的木質(zhì)纖維,破碎時(shí)容易出現(xiàn)纖維素與細(xì)粉分離,反而導(dǎo)致精準(zhǔn)煮散飲片含量降低,浸膏提取率降低的現(xiàn)象,所以雞血藤破碎需用剪切式粉碎儀,將雞血藤切割成大小均一的顆粒狀飲片即可。

    中藥HPLC指紋圖譜結(jié)合DNA條形碼技術(shù)保證雞血藤物種的正確性及質(zhì)量的可靠性。解決了傳統(tǒng)煮散的“辨藥之難”問(wèn)題,能有效實(shí)現(xiàn)煮散飲片的精準(zhǔn)化鑒定和檢測(cè),為精準(zhǔn)煮散飲片的應(yīng)用與推廣提供可靠的技術(shù)支持與保障。同時(shí),發(fā)展精準(zhǔn)煮散飲片能提高中藥藥效物質(zhì)的溶出和保證湯劑煎煮質(zhì)量的穩(wěn)定,從而在保證療效的前提下,可降低藥物使用量,節(jié)約資源,提高中藥資源的合理利用,降低藥品費(fèi)用。

    表4 雞血藤共有峰相對(duì)峰面積比較

    參考文獻(xiàn)

    1 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部). 北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:194.

    2 黃燦輝. HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地雞血藤中原兒茶酸的含量. 中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009,15(3):83-84.

    3 邊寶林,王宏潔,司南.雞血藤藥材中表兒茶素的含量測(cè)定. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2004, 10(6):31-33.

    4 舒順利,應(yīng)軍,劉軍民,等. 雞血藤化學(xué)成分研究. 中藥新藥與臨床藥理,2012,23(2):184-186.

    5 Tang Renneng, Qu Xiaobo , Guan Shuhong,et al. Chemical constituents of Spatholobus suberectus.Chin J Nat Med, 2012, 10 (1):32-35.

    6 Li Wenting, Liu Jing, Guan Ronggui,et al. Chemical characterization of procyanidins from Spatholobus suberectus and their antioxidative and anticancer activates.J Funct Foods, 2015, 12:468-477.

    7 陳士林,黃志海,丘小惠,等. 中藥精準(zhǔn)煮散飲片. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2016,18(9):1430-1440.

    8 唐安玲,宋英,李圓圓,等. 續(xù)斷煮散顆粒煎煮工藝正交試驗(yàn)與溶出曲線的研究. 中成藥, 2015, 37(2):430-433.

    9 劉偉玲. 黃柏煮散顆粒制備工藝研究. 中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師, 2015, 12(7):20-23.

    10 朱國(guó)雪,張超,王淑美. 麻杏石甘湯煮散工藝研究. 中國(guó)現(xiàn)代中藥,2015,17(3):250-253.

    11 徐海波. 中藥煮散源流考. 河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào), 1999,14(4):11-13.

    12 穆蘭澄, 曹京梅. 中藥煮散的歷史沿革與現(xiàn)代研究概述. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2008, 14(7):74-75.

    13 陳士林,劉安,李琦,等. 中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究策略. 中國(guó)中藥雜志,2016,40(8):1367-1375.

    A Quality Comparison Between the Precise Powder Decoction Pieces and the Original Slices of Spatholobus suberectus Dunn.

    Xu Wen1, Lei Di2, Zhang Jing1, Xu Jiang1, Huang Zhihai1, Qiu Xiaohui1, Julie A. Hawkins2, Chen Shilin3
    (1. The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine / Guangdong Provincial Academy of Chinese Medical Sciences / China Academy of Chinese Medical Sciences Guangdong Branch, Guangzhou 510006, China; 2. School of Biological Science, University of Reading, Berkshire RG6 6AH, United Kingdom; 3. Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China)

    In this study, DNA molecular identification technology and chemical fingerprint method were adopted to evaluate the quality system of precise powder decoction pieces (PPDP) ofS. suberectusdunn (SSD). ITS2 sequence was taken as DNA barcode to indentify SSD. Different specifications of PPDP were prepared, their dry extract contents were quantified in contrast with that of original slices. Three batches of SSD original slices were gleaned and the content uniformity, fingerprint and similarity evaluation before and after the mixing and pulverization were valued by HPLC-DAD. As a result, ITS2 successfully and accurately identified the SSD in this study. The extract rate of PPDP was 15.5%, 1.11 times as much as the original slices. RSD of inter-assay dissolution of cepicatechin from the original slices was 11.0%, which was reduced to 1.0% after mixing and preparing into PPDP. The relative peak area of the 14 common peaks identified by fingerpringts were larger, while the RSD values significantly decreased. It was concluded that the PPDP of SSD improved the extraction efficiency and uniformity of the original slices, featuring quite prospective in more reasonable and scientific clinical use.

    Precise powder decoction pieces,Spatholobus suberectusdunn, uniformity, DNA barcode, quality system

    10.11842/wst.2017.01.012

    R283.3

    A

    (責(zé)任編輯:馬雅靜,責(zé)任譯審:朱黎婷)

    2016-12-23

    修回日期:2016-12-23

    * 廣東省中醫(yī)院專項(xiàng)(2015KT1817):嶺南中草藥DNA條形碼分子鑒定和生態(tài)適宜性研究,負(fù)責(zé)人:黃志海;中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)藥健康服務(wù)專項(xiàng)(ZZ0908067):200種嶺南中草藥DNA條形碼研究,負(fù)責(zé)人:黃志海。

    ** 徐文、雷迪為共同第一作者。

    *** 通訊作者:Julie A.Hawkins,主要研究方向:植物分子生物學(xué);陳士林,本刊執(zhí)行主編,博士,研究員,主要研究方向:生藥分子鑒定研究。

    猜你喜歡
    雞血藤條形碼兒茶素
    創(chuàng)意條形碼
    超高效液相色譜法測(cè)定茶葉中的兒茶素
    益母草與雞血藤及其配伍的抗氧化活性比較
    雞血藤藥膳五款
    長(zhǎng)壽(2019年9期)2019-10-11 07:17:24
    從條形碼到二維碼
    從條形碼到二維碼
    條形碼大變身
    不同規(guī)格不同浸泡時(shí)間雞血藤水煎物含量研究
    全甲基化沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯的制備
    兒茶素酶促制備茶黃素的研究進(jìn)展
    茶葉通訊(2014年2期)2014-02-27 07:55:38
    女同久久另类99精品国产91| 色老头精品视频在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 精品国产美女av久久久久小说| 在线国产一区二区在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久精品国产亚洲av高清一级| www.999成人在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老司机在亚洲福利影院| 欧美高清成人免费视频www| 最新美女视频免费是黄的| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 精品电影一区二区在线| 激情在线观看视频在线高清| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 无人区码免费观看不卡| 日本一二三区视频观看| 舔av片在线| 成在线人永久免费视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产伦人伦偷精品视频| 美女黄网站色视频| 此物有八面人人有两片| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 看片在线看免费视频| 国产激情久久老熟女| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲av熟女| 午夜福利免费观看在线| 免费av毛片视频| 村上凉子中文字幕在线| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 免费在线观看影片大全网站| 精品第一国产精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线看三级毛片| 日本一二三区视频观看| 久久久久九九精品影院| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲无线在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产一区二区在线av高清观看| 国产91精品成人一区二区三区| 他把我摸到了高潮在线观看| 欧美在线黄色| 国产在线观看jvid| 无遮挡黄片免费观看| 午夜影院日韩av| 神马国产精品三级电影在线观看 | 成人国产一区最新在线观看| 日韩欧美 国产精品| 在线a可以看的网站| 在线a可以看的网站| 午夜两性在线视频| 熟女电影av网| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 欧美日韩精品网址| 亚洲色图av天堂| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女| av福利片在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 小说图片视频综合网站| 国语自产精品视频在线第100页| 麻豆成人av在线观看| 一区二区三区激情视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久热爱精品视频在线9| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 麻豆成人av在线观看| 亚洲成人久久性| 波多野结衣高清无吗| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产欧美日韩一区二区三| 国产高清激情床上av| av在线播放免费不卡| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产精品影院久久| 波多野结衣高清无吗| 99国产极品粉嫩在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 啦啦啦免费观看视频1| 国产不卡一卡二| 国产不卡一卡二| 午夜免费观看网址| 亚洲精品色激情综合| 免费高清视频大片| 亚洲成人国产一区在线观看| 天堂动漫精品| 欧美性猛交黑人性爽| 最近视频中文字幕2019在线8| 天天添夜夜摸| 免费看美女性在线毛片视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 91成年电影在线观看| 成在线人永久免费视频| 91av网站免费观看| av视频在线观看入口| 亚洲国产精品成人综合色| 母亲3免费完整高清在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 一本久久中文字幕| 欧美成狂野欧美在线观看| www.www免费av| 又大又爽又粗| 在线观看午夜福利视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产成人欧美在线观看| 女人被狂操c到高潮| 欧美中文综合在线视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 午夜福利成人在线免费观看| 国产片内射在线| 窝窝影院91人妻| 国产伦在线观看视频一区| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 精品不卡国产一区二区三区| 老司机靠b影院| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲成人久久爱视频| 久久九九热精品免费| 美女 人体艺术 gogo| 国产单亲对白刺激| 国产成人啪精品午夜网站| 国产在线精品亚洲第一网站| 99精品在免费线老司机午夜| 搞女人的毛片| 国产亚洲精品一区二区www| 欧美激情久久久久久爽电影| 在线a可以看的网站| 亚洲电影在线观看av| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 啦啦啦免费观看视频1| 免费在线观看完整版高清| 精品久久久久久久毛片微露脸| 黄色视频,在线免费观看| 国产精品av久久久久免费| 精品免费久久久久久久清纯| 精品久久久久久久末码| 一本一本综合久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美中文日本在线观看视频| 国产片内射在线| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久精品国产综合久久久| 少妇熟女aⅴ在线视频| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲精品一区av在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日本a在线网址| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产成人av教育| 日本在线视频免费播放| 丁香六月欧美| 色老头精品视频在线观看| 我的老师免费观看完整版| 欧美av亚洲av综合av国产av| 两个人免费观看高清视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲国产精品成人综合色| 国产成人av教育| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲午夜理论影院| 手机成人av网站| 此物有八面人人有两片| 久久久久久久久久黄片| 黄色视频,在线免费观看| 最近最新免费中文字幕在线| bbb黄色大片| 欧美中文综合在线视频| 精品高清国产在线一区| 熟女电影av网| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 在线观看日韩欧美| 国产精品永久免费网站| 亚洲专区字幕在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99在线人妻在线中文字幕| 母亲3免费完整高清在线观看| 午夜老司机福利片| 观看免费一级毛片| www日本在线高清视频| 日韩免费av在线播放| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 色播亚洲综合网| av片东京热男人的天堂| 日本一本二区三区精品| 搞女人的毛片| ponron亚洲| 国产91精品成人一区二区三区| 叶爱在线成人免费视频播放| 成人手机av| 国产成人啪精品午夜网站| 一本大道久久a久久精品| 老司机靠b影院| 国产精品久久久av美女十八| 天堂√8在线中文| 国产精品 国内视频| 国产69精品久久久久777片 | 国产精品 欧美亚洲| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 99国产精品一区二区三区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产主播在线观看一区二区| 最近视频中文字幕2019在线8| 好男人在线观看高清免费视频| 国产探花在线观看一区二区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产一区在线观看成人免费| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜免费激情av| 99久久综合精品五月天人人| 真人做人爱边吃奶动态| 中文亚洲av片在线观看爽| 一级a爱片免费观看的视频| 露出奶头的视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美极品一区二区三区四区| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| www日本黄色视频网| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 真人做人爱边吃奶动态| 超碰成人久久| 大型黄色视频在线免费观看| 在线永久观看黄色视频| 国产精品精品国产色婷婷| 99在线视频只有这里精品首页| 人妻久久中文字幕网| 中文资源天堂在线| 老司机靠b影院| 两个人免费观看高清视频| 日本a在线网址| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品免费视频内射| 国产在线观看jvid| 九九热线精品视视频播放| 欧美成狂野欧美在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲精品一区av在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 日韩有码中文字幕| 国产探花在线观看一区二区| 国产一级毛片七仙女欲春2| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲av电影在线进入| 亚洲欧美日韩高清专用| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲av五月六月丁香网| 美女午夜性视频免费| 亚洲av熟女| 国产97色在线日韩免费| 无限看片的www在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产成人av教育| 一区二区三区国产精品乱码| 少妇粗大呻吟视频| 国产三级黄色录像| 久9热在线精品视频| 中文在线观看免费www的网站 | 我要搜黄色片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 久久精品人妻少妇| or卡值多少钱| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 99国产精品99久久久久| 国产爱豆传媒在线观看 | 中文字幕久久专区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 99久久精品热视频| 老鸭窝网址在线观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 欧美成人午夜精品| 1024香蕉在线观看| 中国美女看黄片| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品不卡国产一区二区三区| 丰满的人妻完整版| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 在线永久观看黄色视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 天堂影院成人在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 在线永久观看黄色视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩欧美 国产精品| 久久久久久久午夜电影| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产一区二区三区视频了| АⅤ资源中文在线天堂| 后天国语完整版免费观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线a可以看的网站| 美女黄网站色视频| 最近在线观看免费完整版| 成人欧美大片| 日本五十路高清| 国产黄色小视频在线观看| 人妻久久中文字幕网| 国语自产精品视频在线第100页| 免费av毛片视频| 黄片大片在线免费观看| 伦理电影免费视频| 亚洲电影在线观看av| 亚洲18禁久久av| bbb黄色大片| 在线国产一区二区在线| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲中文av在线| 无人区码免费观看不卡| 中文资源天堂在线| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲七黄色美女视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 在线a可以看的网站| 五月玫瑰六月丁香| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲国产看品久久| av超薄肉色丝袜交足视频| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲全国av大片| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一本久久中文字幕| 亚洲av成人精品一区久久| 午夜福利高清视频| 视频区欧美日本亚洲| 热99re8久久精品国产| 国产伦在线观看视频一区| 午夜福利18| 一个人免费在线观看电影 | 1024手机看黄色片| 国产激情欧美一区二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 给我免费播放毛片高清在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 久久精品人妻少妇| 亚洲人与动物交配视频| 色尼玛亚洲综合影院| 日韩中文字幕欧美一区二区| 男人舔女人的私密视频| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲一区二区三区不卡视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 99热这里只有是精品50| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产97色在线日韩免费| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 午夜日韩欧美国产| 午夜免费成人在线视频| 男女之事视频高清在线观看| 国产成人啪精品午夜网站| 全区人妻精品视频| 亚洲人成77777在线视频| 特大巨黑吊av在线直播| 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 人妻久久中文字幕网| 午夜两性在线视频| 欧美性猛交黑人性爽| 国产激情久久老熟女| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 99热这里只有精品一区 | 日本三级黄在线观看| 在线观看www视频免费| 制服丝袜大香蕉在线| 中文字幕最新亚洲高清| 国产三级中文精品| 国产精品 国内视频| 麻豆一二三区av精品| 久久久国产欧美日韩av| 床上黄色一级片| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品免费一区二区三区在线| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产成人精品久久二区二区免费| 男女下面进入的视频免费午夜| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 看片在线看免费视频| 美女午夜性视频免费| 一本一本综合久久| 国产精品乱码一区二三区的特点| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久草成人影院| 老汉色∧v一级毛片| 搡老妇女老女人老熟妇| 中文字幕久久专区| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 中国美女看黄片| 中文字幕高清在线视频| 美女午夜性视频免费| 成年人黄色毛片网站| 人人妻人人看人人澡| 色综合婷婷激情| 欧美黑人精品巨大| 一本久久中文字幕| 99国产精品一区二区三区| 亚洲精品色激情综合| 国产亚洲欧美98| 亚洲一区二区三区色噜噜| 18禁美女被吸乳视频| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 三级毛片av免费| av免费在线观看网站| 精品国产美女av久久久久小说| bbb黄色大片| 国语自产精品视频在线第100页| 精品久久久久久久毛片微露脸| 成人三级做爰电影| 又粗又爽又猛毛片免费看| av超薄肉色丝袜交足视频| 可以在线观看毛片的网站| 日本 av在线| 久久这里只有精品19| 妹子高潮喷水视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产激情欧美一区二区| 丰满的人妻完整版| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 全区人妻精品视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 可以在线观看毛片的网站| av欧美777| bbb黄色大片| 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产99久久九九免费精品| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美3d第一页| 欧美一区二区精品小视频在线| 免费看十八禁软件| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久久久久久久久黄片| 日韩欧美在线二视频| 最好的美女福利视频网| www.熟女人妻精品国产| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产高清有码在线观看视频 | 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 一个人免费在线观看的高清视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 一a级毛片在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 日本黄大片高清| 母亲3免费完整高清在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 国产私拍福利视频在线观看| 精品久久蜜臀av无| 此物有八面人人有两片| 1024手机看黄色片| 婷婷亚洲欧美| 国产午夜精品久久久久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 巨乳人妻的诱惑在线观看| x7x7x7水蜜桃| 国产高清视频在线播放一区| 久久久久九九精品影院| 欧美精品亚洲一区二区| 国产高清有码在线观看视频 | 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲五月天丁香| 老司机深夜福利视频在线观看| 露出奶头的视频| 成人欧美大片| 久久久久久久久久黄片| www.熟女人妻精品国产| av欧美777| 女人被狂操c到高潮| 男人舔女人的私密视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久精品国产亚洲av高清一级| 中文资源天堂在线| 国产亚洲欧美在线一区二区| 精品久久久久久久久久免费视频| 美女午夜性视频免费| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国模一区二区三区四区视频 | 亚洲专区字幕在线| 欧美性猛交黑人性爽| 午夜精品一区二区三区免费看| 99久久精品热视频| 校园春色视频在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 无人区码免费观看不卡| 国产一区二区三区视频了| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日韩精品中文字幕看吧| 国产黄色小视频在线观看| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲无线在线观看| 国产精品野战在线观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产欧美日韩一区二区三| 欧美中文综合在线视频| 亚洲乱码一区二区免费版| bbb黄色大片| 免费在线观看影片大全网站| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美日韩乱码在线| 国产免费男女视频| 香蕉丝袜av| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 天天添夜夜摸| 香蕉久久夜色| 午夜亚洲福利在线播放| netflix在线观看网站| 91成年电影在线观看| 亚洲av片天天在线观看| av有码第一页| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产成年人精品一区二区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 黄片小视频在线播放| 最新美女视频免费是黄的| 18禁国产床啪视频网站| 男女那种视频在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 天堂√8在线中文| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩三级视频一区二区三区| 国产精品野战在线观看| 国产三级黄色录像| 国产成人欧美在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 精品久久久久久久末码| 亚洲成人免费电影在线观看| 青草久久国产| 两个人的视频大全免费| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲全国av大片| 亚洲成a人片在线一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 无遮挡黄片免费观看| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美极品一区二区三区四区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日本三级黄在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美国产日韩亚洲一区| 岛国视频午夜一区免费看| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品九九99| 黑人操中国人逼视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 一本综合久久免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 精品福利观看| 欧美黑人巨大hd| 一边摸一边做爽爽视频免费| 十八禁人妻一区二区| 动漫黄色视频在线观看| 欧美色视频一区免费| 97碰自拍视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产真人三级小视频在线观看| 国产激情久久老熟女| 国产私拍福利视频在线观看| 怎么达到女性高潮| 嫩草影院精品99|