抗IL-9抗體治療肝癌惡性腹水的療效及其機(jī)制研究①

張沛玲 雷榮娥 覃沁怡 石 城 姜海行 覃山羽

(廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，南寧530021)

抗IL-9抗體治療肝癌惡性腹水的療效及其機(jī)制研究①

張沛玲 雷榮娥 覃沁怡 石 城 姜海行 覃山羽

(廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，南寧530021)

目的：探索抗IL-9抗體治療小鼠肝癌惡性腹水(MA)的療效及作用機(jī)制。方法：應(yīng)用小鼠H22細(xì)胞系建立小鼠MA模型，造模24 h后將45只小鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組，每組15只。實(shí)驗(yàn)組給予腹腔注射抗IL-9抗體，陰性對(duì)照組給予注射同型IgG抗體，空白對(duì)照組給予注射生理鹽水，隔天1次，共注射5次。每次注射前均稱量各組小鼠體重，并觀察小鼠日?；顒?dòng)狀態(tài)。末次用藥結(jié)束24 h后每組隨機(jī)處死5只小鼠，測(cè)量MA體積，收集MA上清，采用ELISA法檢測(cè)MA中VEGF、MMP-2、IL-9、IFN-γ表達(dá)水平。其余小鼠觀察其生存時(shí)間。結(jié)果：干預(yù)后實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠的MA體積分別為(6.70±1.52)ml、(10.28±1.75)ml、(10.36±2.30)ml，與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA體積明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組小鼠平均生存時(shí)間為(17.2±2.1)d，顯著長(zhǎng)于陰性對(duì)照組(14.5±1.2)d和空白對(duì)照組(14.8±1.4)d(P<0.05)；與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA中VEGF水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與陰性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA中IL-9水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；但三組間MMP-2、IFN-γ水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：腹腔注射抗IL-9抗體可以有效地抑制H22細(xì)胞荷瘤小鼠MA的產(chǎn)生，延長(zhǎng)其生存時(shí)間，該作用可能是通過(guò)抑制MA中VEGF、IL-9的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。

惡性腹水；抗IL-9抗體；H22細(xì)胞；肝癌

多種惡性腫瘤，如肝癌、卵巢癌、胃癌等疾病發(fā)展至晚期時(shí)，由于腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移到腹腔可導(dǎo)致惡性腹水(Malignant ascites，MA)，大量MA嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量并縮短患者的生存時(shí)間[1]。除了原發(fā)病的治療外，現(xiàn)階段對(duì)于MA的治療并沒(méi)有十分有效的方法。血管生成和血管滲透性增加被認(rèn)為是MA形成的主要機(jī)制。目前臨床上治療MA的藥物(如恩度、卡妥索單抗等)主要是通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)等因子來(lái)抑制腫瘤血管生成，進(jìn)而減少M(fèi)A的產(chǎn)生[2,3]。然而，這些藥物的臨床療效有限，仍需尋找其他有效的藥物進(jìn)行治療。

研究表明，MA中含有大量的免疫細(xì)胞和免疫因子，這些免疫細(xì)胞和免疫因子在MA的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要的作用[4]。然而，目前有關(guān)MA中免疫因子作用的報(bào)道十分有限，仍需進(jìn)一步研究。白細(xì)胞介素9(IL-9)是機(jī)體重要的免疫因子，可由多種免疫細(xì)胞(Th2、Th9、Th17和Treg細(xì)胞等)分泌[5]。本研究前期實(shí)驗(yàn)已發(fā)現(xiàn)肝癌患者的MA中IL-9水平較肝硬化患者腹水中的水平高[6]，且肝癌患者M(jìn)A中高表達(dá)IL-9與患者生存期縮短相關(guān)，因此我們推測(cè)IL-9可能具有促進(jìn)MA發(fā)生發(fā)展的作用，但目前尚未有抑制IL-9水平對(duì)MA轉(zhuǎn)歸影響的研究報(bào)道。因此，本研究通過(guò)建立小鼠肝癌MA模型，并給予抗IL-9抗體干預(yù)，以進(jìn)一步闡明IL-9在MA的作用，并探索抗IL-9對(duì)治療MA的療效和機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 清潔級(jí)雌性BALB/c小鼠45只，4～5周齡，體質(zhì)量18～22 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SYXK桂2014-0002。肝癌H22 MA瘤模型小鼠購(gòu)自廣西中醫(yī)藥研究所。實(shí)驗(yàn)小鼠飼養(yǎng)于室溫(24±2)℃，相對(duì)濕度40%～60%，12 h光照、12 h黑暗的實(shí)驗(yàn)室中，自由攝取食物和水。動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中喂食小鼠標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料(購(gòu)自廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。多克隆山羊抗鼠IL-9抗體和同型對(duì)照IgG抗體均購(gòu)于美國(guó)R&D公司；小鼠VEGF、MMP-2、IL-9、IFN-γ的酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)武漢華美生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 MA瘤小鼠模型的制作 取傳代第7天鼠肝癌H22MA瘤小鼠1只，頸椎脫臼法處死，用75%乙醇消毒小鼠腹部，于超凈臺(tái)下無(wú)菌操作吸取小鼠腹腔乳白色瘤液3 ml，移入離心管離心(1 000 r/min離心5 min)，收集H22細(xì)胞。用PBS緩沖液輕輕吹打后離心(1 000 r/min，5 min)，棄上清，用PBS緩沖液將細(xì)胞懸液濃度調(diào)整為1×107ml-1。0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色鏡檢細(xì)胞存活率≥95%后行腹腔接種。用75%乙醇消毒小鼠腹部，每只小鼠腹腔注射瘤細(xì)胞懸液0.2 ml(相當(dāng)于瘤細(xì)胞數(shù)2×106個(gè)/只)。整個(gè)過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌操作，接種于1 h內(nèi)完成。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)小鼠分組與用藥 小鼠腹腔注射H22細(xì)胞24 h后，將45只小鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組，每組15只。實(shí)驗(yàn)組給予腹腔注射抗IL-9抗體(20.0 μg/只)，陰性對(duì)照組給予注射同型IgG抗體(20.0 μg/只)，空白對(duì)照組給予腹腔注射等體積的生理鹽水。各組小鼠隔日給藥1次，共給藥5次，每只小鼠每次注射藥體積均為0.2 ml。

1.2.3 觀測(cè)指標(biāo)

(1) 一般觀測(cè)指標(biāo)：用藥期間觀察各組小鼠毛色，活動(dòng)狀況及精神狀態(tài)等一般生活狀況，每次給藥前稱量體重。(2) 小鼠MA體積檢測(cè)：末次給藥24 h后，采用頸椎脫臼法每組隨機(jī)處死5只小鼠，利用無(wú)菌注射器抽取MA并測(cè)量MA體積；按下列公式計(jì)算小鼠MA抑制率：MA抑制率=(1-實(shí)驗(yàn)組平均MA體積/對(duì)照組平均MA體積)×100%[7]。(3) MA中的VEGF、MMP-2、IL-9、IFN-γ濃度檢測(cè)： 將MA收集于離心管中，1 000 r/min離心5 min，取上清。采用ELISA 法檢測(cè)MA上清中VEGF、MMP-2、IL-9、IFN-γ濃度。(4) 小鼠生存期觀察：記錄各組剩下的10只小鼠的死亡時(shí)間，從小鼠接種H22細(xì)胞開始至小鼠死亡結(jié)束。按下列公式計(jì)算小鼠生命延長(zhǎng)率：生命延長(zhǎng)率=(實(shí)驗(yàn)組平均生存時(shí)間-對(duì)照組平均生存時(shí)間)/對(duì)照組平均生存時(shí)間×100%[8]。

2 結(jié)果

2.1 造模結(jié)果及生長(zhǎng)狀態(tài) 各組小鼠造模后第6～7天開始腹部逐漸膨隆，提示MA模型造模成功。各組小鼠均出現(xiàn)毛發(fā)干燥、脫毛、活動(dòng)力下降等現(xiàn)象，以空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組明顯。與實(shí)驗(yàn)組相比，空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組小鼠腹部膨隆較迅速。但各組小鼠體重改變無(wú)明顯差異。

2.2 各組小鼠MA量 末次用藥結(jié)束24 h后每組隨機(jī)處死5只小鼠，抽取MA，測(cè)量MA體積，實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠的MA體積分別為(6.70±1.52)ml、(10.28±1.75)ml、(10.36±2.30)ml，與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠平均MA體積明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；空白對(duì)照組與陰性對(duì)照組相比， MA體積無(wú)明顯變化 (P>0.05)。與空白對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組的MA抑制率為35.33%。

GroupsIL-9VEGFIFN-γMMP-2Experimentalgroup184.77±7.402) 67.74±7.771)2)2173.53±482.891397.07±19.03Negativecontrolgroup420.68±233.4894.16±20.832224.03±470.181414.90±22.00Blankcontrlgroup375.51±143.6790.99±6.40 2380.07±464.941406.02±12.85

Note：Compared with blank control group,1)P<0.05；Compared with negativec control group，2)P<0.05.

圖1 各組小鼠生存時(shí)間比較Fig.1 Comparison of survival time among mice with different interventionNote: Mice with IL-9 antibody injection had a longer survival time than mice with IgG or saline injection.

2.3 小鼠MA中VEGF、MMP-2、IL-9、IFN-γ濃度 與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA中VEGF水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與陰性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA中IL-9水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組小鼠MA中MMP-2、IFN-γ濃度減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.4 各組小鼠生存期比較 空白對(duì)照組小鼠至造模后第18天全部死亡，陰性對(duì)照組小鼠至造模后第16天全部死亡，而實(shí)驗(yàn)組小鼠至造模后第20天全部死亡。實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組小鼠的平均生存時(shí)間分別為(17.2±2.10)d、(14.4±1.18)d、(14.8±1.40)d，Log-rank檢驗(yàn)顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠生存時(shí)間顯著長(zhǎng)于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比，生存時(shí)間無(wú)明顯變化，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與空白對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠生存時(shí)間延長(zhǎng)率為16.2%，提示抗IL-9抗體干預(yù)后，小鼠生存時(shí)間延長(zhǎng)，有較好的效果。見(jiàn)圖1。

3 討論

IL-9是機(jī)體重要的免疫因子，可由多種免疫細(xì)胞(Th2、Th9、Th17、Treg細(xì)胞等)分泌[5]。IL-9與IL-9受體(IL-9R)結(jié)合，通過(guò)激活JAK/STAT信號(hào)通路，啟動(dòng)一系列相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)來(lái)發(fā)揮一系列生物學(xué)作用。IL-9具有多種免疫作用，如能促進(jìn)機(jī)體清除寄生蟲，增強(qiáng)Treg細(xì)胞的免疫抑制功能等[5]。然而，目前有關(guān)IL-9在腫瘤方面的研究較少，IL-9與腫瘤的關(guān)系還不明確。有研究發(fā)現(xiàn)，使用IL-9干預(yù)黑色素瘤細(xì)胞HTB-72后，可抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[9]，而在肺癌的研究中發(fā)現(xiàn)IL-9能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖[10]。在IL-9-/-小鼠建立的乳腺癌和大腸癌模型中的研究發(fā)現(xiàn)，T細(xì)胞對(duì)腫瘤的敏感性增高，即小鼠早期就出現(xiàn)腫瘤排斥現(xiàn)象；而使用抗IL-9干預(yù)后，野生型小鼠的腫瘤生長(zhǎng)出現(xiàn)減慢的現(xiàn)象[11]。我們前期研究也發(fā)現(xiàn)MA中IL-9水平較高[6]，提示IL-9與MA的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，而抗IL-9有可能成為治療MA的一種可行的方法。

MA的發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，血管生成和血管滲透性增加被認(rèn)為是MA生成的兩個(gè)重要因素，而VEGF、MMP-2、MMP-9、堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)等血管活性因子在其中起著重要作用。目前臨床上使用的藥物也是通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞表面的血管活性因子來(lái)抑制腫瘤血管生成，進(jìn)而減少M(fèi)A的生成。在使用抗IL-9單抗治療哮喘疾病的研究中發(fā)現(xiàn)，抗IL-9抗體可抑制IL-9的表達(dá)，降低肥大細(xì)胞的數(shù)量和活性，同時(shí)減少肺VEGF和成纖維生長(zhǎng)因子(FGF)-2的表達(dá)[12]。我們應(yīng)用抗IL-9抗體注射治療肝纖維小鼠模型，發(fā)現(xiàn)使用抗IL-9能顯著改善小鼠肝纖維化狀態(tài)，并能促進(jìn)其較快的恢復(fù)[13]。在體外研究中，我們還發(fā)現(xiàn)IL-9干預(yù)肝癌細(xì)胞可以提高VEGF、MMP的表達(dá)，因此本實(shí)驗(yàn)中探討注射抗IL-9對(duì)小鼠MA模型療效的影響及可能機(jī)制，結(jié)果表明，與未使用抗IL-9注射治療相比，抗IL-9注射后小鼠的MA生成減少，且MA中的VEGF表達(dá)水平下降，提示抗IL-9可以有效地治療MA，其機(jī)制可能是通過(guò)降低MA中VEGF表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

有研究發(fā)現(xiàn)使用抗IL-9抗體中和IL-9后，可以改善實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的癥狀，這是通過(guò)減少Th17細(xì)胞數(shù)量，降低血清中IL-17、IL-6、IFN-γ和TNF-α表達(dá)水平來(lái)實(shí)現(xiàn)的[14]。既往報(bào)道和我們的前期研究均表明，MA中Th9、Th17、Th1等免疫細(xì)胞通過(guò)分泌效應(yīng)因子，如IL-9、IL-17、IFN-γ 等來(lái)參與MA的生成和發(fā)展過(guò)程，其中Th9細(xì)胞數(shù)量增多，提示患者預(yù)后較差。本實(shí)驗(yàn)在研究抗IL-9抗體對(duì)MA中的IL-9、IFN-γ影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)抗IL-9抗體能夠降低MA中IL-9的表達(dá)水平，IFN-γ表達(dá)有所下降，但組間比較IFN-γ的表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這提示抗IL-9抗體有可能通過(guò)降低MA中IL-9水平來(lái)抑制腫瘤的活性，從而延長(zhǎng)小鼠的生存時(shí)間。本研究中實(shí)驗(yàn)組小鼠的生存時(shí)間較空白組和陰性對(duì)照組延長(zhǎng)，但從生存時(shí)間的數(shù)值上看不是十分明顯；結(jié)合實(shí)驗(yàn)組MA中IL-9雖然顯著低于對(duì)照組，但檢測(cè)值仍有(184.77±7.40)pg/ml，考慮生存時(shí)間延長(zhǎng)不十分明顯的其中一個(gè)原因是實(shí)驗(yàn)中抗IL-9抗體的用量不足，未能完全中和MA中IL-9；其次，MA是腫瘤終末期的表現(xiàn)，在H22腹水瘤模型小鼠造模中接種的腫瘤細(xì)胞數(shù)目較多，腫瘤細(xì)胞增殖快，模型小鼠的腫瘤負(fù)荷量大，使得小鼠在短時(shí)間內(nèi)死亡，導(dǎo)致最終實(shí)驗(yàn)組生存期雖有所延長(zhǎng)，但不十分明顯。

綜上所述，本研究顯示抗IL-9抗體干預(yù)肝癌MA模型小鼠后可以有效地減少小鼠MA的產(chǎn)生，改善小鼠的癥狀，延長(zhǎng)其生存時(shí)間，其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制MA中VEGF和IL-9的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

[1] Cavazzoni E,Bugiantella W,Graziosi L,etal.Malignant ascites:pathophysiology and treatment [J].Int J Clin Oncol，2013,18(1):1-9.

[2] Wang Y,Xu RC,Zhang XL,etal.Interleukin-8 secretion by ovarian cancer cells increases anchorage-independent growth,proliferation,angiogenic potential,adhesion and invasion [J].Cytokine，2012,59(1):145-155.

[3] 吳春艷,王 偉,陳 鑫,等.重組人血管內(nèi)皮抑素治療小鼠惡性腹腔積液療效及作用機(jī)制研究[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2014,19(5):507-511.

[4] Cao X.Regulatory T cells and immune tolerance to tumors [J].Immunol Res，2010,46(1-3):79-93.

[5] Stassen M,Schmitt E,Bopp T.From interleukin-9 to T helper 9 cells [J].Ann N Y Acad Sci,2012,1247:56-68.

[6] Yang XY,Jiang HX,Huang XL,etal.Role of Th9 cells and Th17 cells in the pathogenesis of malignant ascites [J].Asian Pac J Trop Biomed,2015,5(10):772-777.

[7] 時(shí)艷艷,岳 麓,齊衛(wèi)衛(wèi),等.消癌平治療小鼠惡性腹水的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華腫瘤防治雜志,2011,18(9):655-658.

[8] 劉 宣,柴 妮,韓植芬,等.健脾解毒方對(duì)濕熱證結(jié)腸癌小鼠腫瘤血管新生的抑制作用[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,29(6):50-54.

[9] Fang Y,Chen X,Bai Q,etal.IL-9 inhibits HTB-72 melanoma cell growth through upregulation of p21 and TRAIL [J].J Surg Oncol,2015,111(8):969-974.

[10] Ye ZJ,Zhou Q,Yin W,etal.Differentiation and immune regulation of IL-9-producing CD4+T cells in malignant pleural effusion [J]. Am J Respir Crit Care Med,2012,186(11):1168-1179.

[11] Hoelzinger DB,Dominguez AL,Cohen PA,etal.Inhibition of adaptive immunity by IL9 can be disrupted to achieve rapid T-cell sensitization and rejection of progressive tumor challenges [J].Cancer Res，2014,74(23):6845-6855.

[12] Oh CK,Raible D,Geba GP,etal.Biology of the interleukin-9 pathway and its therapeutic potential for the treatment of asthma[J].Inflamm Allergy Drug Targets，2011,10(3):180-186.

[13] Qin SY,Lu DH,Guo XY,etal.A deleterious role for Th9/IL-9 in hepatic fibrogenesis [J].Sci Rep，2016,6:18694.

[14] Li H,Nourbakhsh B,Ciric B,etal.Neutralization of IL-9 ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis by decreasing the effector T cell population [J].J Immunol，2010,185(7):4095-4100.

[收稿2016-10-17 修回2016-11-16]

(編輯 倪 鵬)

Effects and mechanism of anti IL-9 antibody on malignant ascites of hepatic carcinoma

ZHANGPei-Ling,LEIRong-E,QINQin-Yi,SHICheng,JIANGHai-Xing，QINShan-Yu.

DepartmentofGastroenterology,theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China

Objective:To explore the effects and mechanism of anti IL-9 antibody on malignant ascites (MA) of hepatic carcinoma in mice.Methods: A mouse model of MA was established by mouse H22 cell line.45 mice were divided randomly into experimental group,negative control group and blank control group at 24 hours after modeling,with 15 mice in each group.The experimental group was injected intraperitoneally with anti IL-9 antibody;the negative control group was injected with isotype IgG antibody;the blank control group was injected with normal saline.The weight and behavior of the mice were measured before each injection.Five mice of each group was sacrificed at 24 hours after the last injection to measure the volume of MA.The level of VEGF,MMP-2,IL-9 and IFN-γ in MA were determined with ELISA assay;the survival time of rest mice were recorded and compared.Results: The mean volume of MA of experimental group,negative control group and blank control group were (6.70±1.52)ml,(10.28±1.75)ml,(10.36±2.30) ml,respectively,the MA volume of experimental group were lower as compared to negative control group and blank control group(P<0.05).The mean survival time of experimental group was (17.2±2.1)d,which was significantly prolonged compared with the negative control group (14.5±1.2)d and the blank control group (14.8±1.4)d (P<0.05).The levels of VEGF of MA in experimental group was significantly lower compared to the negative control group and blank control group (P<0.05).The levels of IL-9 of MA in experimental group was significantly lower compared to the negative control group(P<0.05).The levels of MMP-2 and IFN-γ in experimental group had no significant difference compared with the negative control group and blank control group (P>0.05).Conclusion: Intraperitoneal injection anti IL-9 antibody on H22 ascites-bearing mice can effectively inhibit the generation of the MA.The mechanism may be related to the inhibition of the expression of the VEGF and IL-9.

Malignant ascites;Anti IL-9 antibody;H22 cell;Hepatic carcinoma

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.03.015

①本文受國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31560257；31360221)資助。

張沛玲(1991年-)，女，在讀碩士，主要從事消化系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制研究。

及指導(dǎo)教師：覃山羽(1973年-)，女，博士，教授，主任醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)腫瘤疾病發(fā)病機(jī)制的研究，E-mail：qsy0511@163.com。

R735.7

A

1000-484X(2017)03-0388-04