溶血、脂血和黃疸對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響

代春雨473000河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

溶血、脂血和黃疸對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響

代春雨
473000河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

目的：探討溶血、脂血和黃疸對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響。方法：用EV71-IgM膠體金法檢測(cè)不同程度溶血、脂血、黃疸EV71-IgM含量3.0 ng/mL的標(biāo)本。結(jié)果：不同濃度膽紅素、不同濃度甘油三酯以及血紅蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標(biāo)本對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響不明顯(P＞0.05)。血紅蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標(biāo)本對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響顯著(P＜0.01)。結(jié)論：重度溶血對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響很大，輕度溶血、黃疸和脂血對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響不明顯。

溶血；脂血；黃疸；EV71-IgM膠體金法

EV71-IgM膠體金法檢測(cè)簡(jiǎn)便、快速和穩(wěn)定，靈敏度較高，廣泛用于發(fā)熱門診和兒科門診等[1，2]。臨床實(shí)際操作過程中會(huì)出現(xiàn)黃疸、脂血、溶血等特殊情況，其對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響的研究較少。本研究旨在探討溶血、脂血、黃疸對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

資料與方法

儀器與試劑：腸道病毒71-IgM (EV71-IgM)膠體金血清診斷試劑(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司)；金標(biāo)試紙條智能測(cè)定儀(型號(hào)：SC-2，福州大學(xué)科技開發(fā)總公司)；EV71-IgM全血診斷試劑(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司)；EV71-IgM標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控品(3.0 ng/mL)；酶標(biāo)試劑(上海研盟生物技術(shù)有限公司)；高溶血EV71-IgM陰性患者血漿；高甘油三酯EV71-IgM陰性患者血清；高膽紅素EV71-IgM陰性患者血清；溶血、脂血、黃疸三項(xiàng)指標(biāo)正常的EV71-IgM陽性患者血清。

方法：以EV71-IgM標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控品為陽性對(duì)照，用酶標(biāo)法檢測(cè)EV71-IgM陽性患者血清EV71-IgM含量。EV71-IgM陽性患者血清用正常人血漿稀釋，使EV71-IgM含量為3.0 ng/mL和1.5 ng/mL兩個(gè)樣本，簡(jiǎn)稱正3.0和正1.5；用EV71-IgM陽性患者血清同高總膽紅素血清稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，膽紅素分別為100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L、800 μmol/L和1 600 μmol/ L的5個(gè)樣本，分別簡(jiǎn)稱為TB 100、TB 200、TB 400、TB 800和TB 1 600；用EV71-IgM陽性患者血清用高甘油三酯血清稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，甘油三酯分別為4 mmol/L、8 mmol/L和16 mmol/L的3個(gè)樣本，分別簡(jiǎn)稱為TG4、TG8和TG16；EV71-IgM陽性患者血清用高溶血血漿稀釋，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，血紅蛋白含量分別為0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L和0.8 g/L的4個(gè)樣本，分別簡(jiǎn)稱為Hb 0.2、Hb 0.4、Hb 0.6和Hb 0.8。分別用EV71-IgM全血診斷試劑(對(duì)照組)和EV71-IgM膠體金血清診斷試劑(試驗(yàn)組)按照試劑和儀器操作說明測(cè)定14個(gè)樣本，每種試劑對(duì)14個(gè)樣本測(cè)定20次，用金標(biāo)試紙條智能測(cè)定儀讀出OD值。

結(jié)果

不同濃度膽紅素、不同濃度甘油三酯以及血紅蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的標(biāo)本對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響不明顯(P＞0.05)；血紅蛋白0.4 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 標(biāo) 本 對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)略有影響(P約等于0.05)；血紅蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 標(biāo) 本 對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響顯著(P＜0.01)。見表1。

討論

手足口病是一種常見的多發(fā)性傳染病，以小于3歲的嬰幼兒發(fā)病為主。多種腸道病毒均能引起手足口病，EV71病毒是其中最主要的一種，一般全年均可發(fā)生，5～7月為高發(fā)期。手足口病患者癥狀一般較輕，輕癥患者出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、流涕等類似上呼吸道感染的癥狀，發(fā)熱1～2 d后開始出現(xiàn)皮疹，通常出現(xiàn)于手足、臀部，或出現(xiàn)口腔皰疹。部分患兒不發(fā)熱，只表現(xiàn)為手、足、臀部皮疹或皰疹性咽峽炎，病情較輕，患兒大多數(shù)在1周內(nèi)病情緩解。重癥患者病情進(jìn)展十分迅速，發(fā)病1～5 d會(huì)出現(xiàn)精神障礙、循環(huán)障礙等，極少數(shù)患者病情危重，可致患兒死亡，存活患者可留有后遺癥。手足口病目前沒有專門的疫苗，也沒有專門的特異性強(qiáng)的抗手足口病病毒藥物，但早發(fā)現(xiàn)、早治療完全可防可治，患兒檢測(cè)血清EV71-IgM可幫助臨床醫(yī)生確診手足口病，醫(yī)務(wù)工作人員應(yīng)非常重視手足口病的診斷。

表1 兩種試劑對(duì)14個(gè)樣本測(cè)定的平均OD值

本研究發(fā)現(xiàn)，重度溶血(血紅蛋白＞0.4 g/L)對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響很大，輕度溶血、黃疸和脂血對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)的影響不明顯。因此檢驗(yàn)科抽血檢測(cè)血清EV71-IgM時(shí)，務(wù)必做到采血順利和促凝管潔凈等，防止標(biāo)本發(fā)生重度溶血，造成假陰性結(jié)果，導(dǎo)致漏診誤診，對(duì)于重度溶血標(biāo)本必須重新采血。

溶血、脂血和黃疸是臨床上經(jīng)常出現(xiàn)的標(biāo)本現(xiàn)象。大部分溶血現(xiàn)象可通過正確采血和正確保存標(biāo)本而避免。脂血原因分為飯后采血、自身高血脂?？崭共裳杀苊怙埡蟛裳霈F(xiàn)的脂血。黃疸不易改變。但脂血和黃疸對(duì)EV71-IgM膠體金法檢測(cè)影響非常小。

綜上所述，正確采血和正確保存標(biāo)本是EV71-IgM膠體金法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠的保證。為避免漏檢、減少因漏檢等引發(fā)的醫(yī)患糾紛，臨床應(yīng)注意溶血對(duì)弱陽性標(biāo)本的影響，EV71-IgM的復(fù)檢應(yīng)采用穩(wěn)定性好、特異性強(qiáng)、靈敏度高的定量新方法，以確保和提高檢測(cè)EV71-IgM的準(zhǔn)確性[3，4]。

[1] 王連友.HBsAg快速金標(biāo)法在街頭無償獻(xiàn)血中的應(yīng)用[J].中國輸血雜志,1999,12(3): 175.

[2]仇銘華,張學(xué)亮,楊一軍.金標(biāo)試紙血清法與全血法篩選獻(xiàn)血者HBsAg比較[J].中國輸血雜志,2001,14(4):229.

[3]魏來,陶其敏.努力規(guī)范肝臟疾病的免疫學(xué)診斷[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(2): 69-71.

[4] 王小光,汪萍,陳國強(qiáng),等.上海市閔行區(qū)飲食服務(wù)人員HBsAg、HBeAg檢測(cè)結(jié)果分析[J].職業(yè)與健康,2005,21(5):689-690.

Effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection

Dai Chunyu
Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Nanyang City,Henan Province 473000

Objective:To investigate the effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection.Methods: EV71-IgM colloid gold detection was used to detect the specimen with EV71-IgM 3 ng/mL and different degrees of hemolysis, lipemia and jaundice.Results:The specimen with different degrees of bilirubin,different concentrations of three acyl glycerol and hemoglobin0.2 g/L and EV71-IgM 3 ng/mL did not have obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection(P＞0.05).The specimen with hemoglobin 0.6 g/L and 0.8 g/L,EV71-IgM 3 ng/mL had significant effect on EV71-IgM colloidal gold detection (P＜0.01).Conclusion:Severe hemolysis had great effect on EV71-IgM colloidal gold detection.Mild hemolysis,jaundice and lipemia had no obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection.

Hemolysis;Lipemia;Jaundice;EV71-IgM colloidal gold method

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.4.75