中藥單體對胰腺癌抑制作用及機制研究進展

楊 帆，郭曉鐘（指導）

（1.遼寧中醫(yī)藥大學2014級碩士研究生，遼寧 沈陽 110032；2.遼寧省沈陽軍區(qū)總醫(yī)院消化內科，遼寧 沈陽 110016）

中藥單體對胰腺癌抑制作用及機制研究進展

楊 帆1，郭曉鐘（指導）2

（1.遼寧中醫(yī)藥大學2014級碩士研究生，遼寧 沈陽 110032；2.遼寧省沈陽軍區(qū)總醫(yī)院消化內科，遼寧 沈陽 110016）

胰腺癌是消化道最常見的惡性腫瘤之一，在發(fā)達國家中胰腺癌的發(fā)病占惡性腫瘤第5位，在我國胰腺癌的發(fā)病率也呈逐年上升趨勢［1］。胰腺癌屬中醫(yī)“伏梁”、“黃疸”、“脘痛”等范疇［2］。中藥單體是從傳統(tǒng)中藥中提取出的有效成分，因其較單味中藥或中藥復方成分單一，從而更利于進行研究，更因其有效成分更加富集，其藥理作用及臨床療效也較單味中藥或中藥復方強?，F(xiàn)將中藥單體對胰腺癌的治療作用及其機制綜述如下。

1 大黃素

大黃素（Emodin）存在多種中藥如大黃、虎杖、何首烏中，具有廣泛藥理作用，特別是抗腫瘤作用，其中對胰腺癌的抑制作用在體外實驗與體內實驗中得到驗證。有體外實驗通過建立裸鼠胰腺癌肝轉移模型及胰腺癌原位移植模型，將其隨機分成實驗組與對照組，分別給予大黃素及對照措施進行干預，結果證實了大黃素具有抗裸鼠胰腺癌肝轉移瘤的作用［3-4］。施書強等［5］在體內實驗中發(fā)現(xiàn)大黃素可顯著抑制胰腺癌生長和轉移，通過抑制NF-κB信號通路可能是其重要機制之一。陳亮等［6］則認為大黃素抑制胰腺癌作用機制可能與其對抑癌基因去甲基化發(fā)揮不同程度作用相關。

2 薏苡仁油

薏苡仁油（Coix seed oil）從薏苡仁中提取出來，具有利水滲濕、健脾消腫、除痹舒筋、清熱排膿的功效?？等R特注射液是薏苡仁提取的脂質體注射劑，主要成分為薏苡仁油。觀察發(fā)現(xiàn)，以吉西他濱化療為主，康萊特治療為輔的綜合治療，較單用西藥治療的效果好、毒副反應少、生存質量高［7-8］。王巨義等［9］用CCK8法及Hoechst 33258熒光染色法證實了康萊特注射液能夠對胰腺癌Miacapa-2細胞的增殖起到抑制作用，對其凋亡起到促進作用。

3 鴉膽子素

鴉膽子素（Bruceine）是大量存在于鴉膽子中的苦木苦味素，常用作多種癌癥的治療。王兆洪等［10］發(fā)現(xiàn)鴉膽子素D在作用于胰腺癌Panc-1細胞時，其增殖與鴉膽子素D的濃度、時間呈明顯的依賴性，并且通過流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)能夠抑制Panc-1凋亡，其作用機制可能與調控蛋白Bcl-2、Bax有關。

4 蟾毒靈

蟾毒靈（Bufalin）是從蟾酥中提取出的中藥單體，具有解毒止痛、開竅醒神功效。Xin Tian等［11］實驗研究發(fā)現(xiàn)將蟾毒靈單體以100nm濃度作用于胰腺癌細胞CAPAN-2和口腔癌細胞CAL-27中時，能夠抑制細胞增殖，并可明顯誘導細胞凋亡，同時此濃度時可明顯檢測到細胞DNA損傷，并認為其機制可能是通過激活JNK信號通路，下調人端粒酶逆轉錄酶的表達而實現(xiàn)的促細胞凋亡。胡強等［12］也通過體外實驗得到蟾毒靈是通過激活JNK信號通路來促進胰腺癌細胞凋亡的實驗結果，但其機制為下調Survivin mRNA的表達，。李梅影等［13］卻在胰腺癌細胞CAPAN-2中得到與之不同的結果，蟾毒靈雖能夠抑制細胞增殖，但通過流式細胞術（FCM）檢測到蟾毒靈能夠誘導G2/M細胞周期阻滯而非誘導細胞凋亡。

5 木犀草素

木犀草素（Luteolin）是一種天然黃酮類物質，廣泛存在于多種中藥如野菊花、金銀花、紫蘇中，具有抗癌、抗菌、抗炎、祛痰等作用。Xince huang等［14］人發(fā)現(xiàn)木犀草素作用于胰腺癌細胞PANC-1和SW1990后對其細胞活性及上皮間質轉化（EMT）呈現(xiàn)出明顯的濃度依賴性的抑制作用，且能夠抑制基質金屬蛋白酶（MMP）分泌物及胰腺癌細胞的轉移，進一步探究分子機制時發(fā)現(xiàn)木犀草素可以使磷酸化的STAT3信號通路失效，并且能夠抑制白細胞介素-6（IL-6）誘導的胰腺癌細胞EMT及MMP分泌物，影響對胰腺癌細胞的生長及轉移。

6 苦參堿

苦參堿（Sophocarpidine）是從豆科植物苦參中提取出來，具有清熱燥濕、祛風解毒功效。何春游等［15］實驗研究發(fā)現(xiàn)苦參堿對人胰腺癌細胞CFPAC-1增殖有抑制作用，通過流式細胞檢測技術發(fā)現(xiàn)苦參堿有較好的誘導胰腺癌細胞凋亡的作用，在Western blot中檢測到1.00mg/ mL苦參堿作用于胰腺癌細胞CFPAC-124 h后對Ptch、Smo、Gli-l、Bcl-2蛋白表達量具有不同程度的抑制作用，由于Ptch、Smo、Gli-l、Bcl-2基因屬于Hedgehog（Hh）信號通路成員，故認為苦參堿作用于胰腺癌細胞所產生的促進凋亡的作用可能通過影響Hh信號通路的激活，抑制Bcl-2的表達而實現(xiàn)。

7 烏索酸

烏索酸（Ursonic acid）又名熊果酸、烏蘇酸，存在于自然界多種植物中，以枇杷葉中含量較多，具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗腫瘤功效。Sahdeo Prasad等［16］在體內實驗中發(fā)現(xiàn)將人胰腺癌細胞Panc-28原位植入裸鼠中，造模成功后使裸鼠口服烏索酸可抑制腫瘤的生長及增強吉西他濱的抗胰腺癌的敏感性，并且聯(lián)合使用兩種藥物后可抑制癌細胞向遠端的肝脾轉移。在體外實驗中發(fā)現(xiàn)烏索酸可抑制胰腺癌細胞增殖、促進其凋亡、抑制NF-κB and STAT3的活性，在免疫組化實驗中發(fā)現(xiàn)標記增殖的核抗原Ki-67及標記微血管密度分子CD31在烏索酸與吉西他濱聯(lián)合使用作用下表達量明顯降低，烏索酸對胰腺癌細胞抑制作用可能與這些在腫瘤組織中的炎癥性轉錄因子相關。

8 雷公藤甲素

雷公藤甲素（Triptolide）從雷公藤中提取出來，具有祛風濕、通絡止痛、解毒功效。盛健等［17］研究發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素可降低PANC-1細胞中胰腺癌干細胞標志的表達CD+44、CD+24CD+133及ALDH1+表達，通過體外細胞球體形成實驗及NOD小鼠體內成瘤實驗，發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素作用于CD+44、CD+24、ESA+PANC-1細胞后鏡下克隆計數(shù)明顯減少，對于NOD/SCID小鼠雷公藤甲素可抑制移植瘤生長，移植瘤體積及質量都較對照組縮小更明顯，實驗結果有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。喬志新等［18］實驗中顯示雷公藤甲素作用于胰腺癌細胞BxPC-3和PANC-1后可抑制其增殖、促進凋亡，通過羅丹明123和DCFHDA染色方法測定線粒體通透性增強，同時免疫印跡實驗檢測凋亡相關蛋白Bcl-2下調、Bax上調，認為雷公藤甲素可能通過增強線粒體通透性誘導細胞凋亡。

9 冬凌草素

冬凌草素（Oridonin）是從冬凌草中提取出來，具有清熱解毒、消炎止痛、健胃活血功效。周黎明等［19］體外實驗中發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素能夠抑制胰腺癌SW1990細胞增殖、促進其凋亡，在與吉西他濱聯(lián)合使用時作用效果優(yōu)于對照組及單獨使用組，其機制可能是通過下調NF-κB基因及其下游XIAP基因實現(xiàn)。

10 姜黃素

姜黃素（Curcumin）是從姜黃中提取得到，具有破血行氣、通經止痛功效。陳龍佩等［20］實驗發(fā)現(xiàn)姜黃素可以抑制胰腺癌細胞生長，并且通過Transwell小室進行人工重組基底膜（Matrigel）的侵襲轉移。實驗發(fā)現(xiàn)姜黃素可以抑制其轉移，但具體機制不清。龐慧芳等［21］在實驗中發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠抑制胰腺癌PANC-1細胞在經過TGF-β1誘導后產生的上皮間質轉化（EMT）作用，即姜黃素通過抑制胰腺癌細胞EMT過程從而抑制其轉移。

11 蝙蝠葛酚性堿

蝙蝠葛酚性堿（P h e n o l i c a l k a l o i d s f r o m menispermum dauricum）是從蝙蝠葛中提取出來，具有清熱解毒、消腫利咽功效。周忠光等［22］通過裸鼠皮下異位移植瘤實驗發(fā)現(xiàn)給予蝙蝠葛酚性堿藥物組腫瘤生長收到抑制，并提取裸鼠成瘤組織進行免疫印記實驗得到p53蛋白表達明顯下降，認為這種抑制作用可能會與p53基因相關。劉宏等［23］同樣應用裸鼠皮下異位移植瘤實驗，分別觀察給藥組與對照組在光鏡與電鏡下裸鼠腫瘤形態(tài)差異改變，給予蝙蝠葛根性堿可以明顯改善腫瘤病理形態(tài)及超微結構。魏冬梅等［24］通過裸鼠皮下異位移植瘤實驗后發(fā)現(xiàn)Gli－1蛋白在對照組中高表達，而蝙蝠葛根性堿組表達水平有所降低，認為蝙蝠葛根性堿抑制裸鼠異位瘤的生長是與抑制Hedgehog信號通路的激活有關。

12 白藜蘆醇

白藜蘆醇（Resveratrol）一般提取于虎杖，具有利濕退黃、清熱解毒、散瘀止痛、化痰止咳的功效。秦勇等［25］實驗發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對胰腺癌細胞具有抑制作用，并且檢測到與Hedgehog（Hh）信號通路相關基因Ihh、Ptch和Smo的蛋白及mRNA表達水平均降低，認為這種抑制作用與Hedgehog（Hh）信號通路相關。李偉等［26］實驗發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對于胰腺癌細胞的表皮細胞生長因子（EGFR）具有明顯的抑制作用，并且檢測到凋亡相關基因Caspase3和Caspase7剪切體形成及抗凋亡因子Mcl-1下調，而對于人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）沒有明顯抑制，實驗顯示白藜蘆醇對正常細胞的生存沒有影響，對胰腺癌細胞通過抗凋亡蛋白的抑制而產生抑制作用。

13 和厚樸酚

和厚樸酚（Honokiol）從厚樸中提取出來，具有溫中、下氣、燥濕、消痰功效。實驗研究發(fā)現(xiàn)，和厚樸酚對胰腺癌細胞增殖具有抑制作用，對其凋亡具有促進作用，并且能夠增強對吉西他濱的藥物敏感性，降低胰腺癌細胞對吉西他濱耐藥性，分子機制上和厚樸酚能夠抑制核因子NF－κB、p65蛋白入核，同時抑制IκB－α磷酸化和IκB－α蛋白降解，即通過抑制NF－κB通路的激活產生抗胰腺癌作用及增強吉西他濱治療效果［27-28］。

14 其 它

還有如淫羊藿次苷Ⅱ，知母皂苷AⅢ，甲基蓮心堿，紅景天苷等中藥單體也有相關報道。潘會君等［29］實驗研究發(fā)現(xiàn)在PANC-1皮下移植瘤模型中，羊藿次苷Ⅱ、知母皂苷AⅢ、甲基蓮心堿、紅景天苷用于實驗治療組，通過免疫組化及RT-PCR實驗技術發(fā)現(xiàn)淫羊藿次苷Ⅱ、甲基蓮心堿、紅景天苷作用不明顯，而知母皂苷AⅢ能夠抑制腫瘤生長，并且VEGF mRNA和VEGF蛋白表達下降，其抑制機制可能與VEGF基因相關。

15 小 結

胰腺癌由于發(fā)病隱匿，多數(shù)初次診斷時已屬晚期，喪失了手術治療的機會。近年來，以吉西他濱為基礎的聯(lián)合治療方案雖然部分提高了臨床療效，但由于獲得性耐藥使治療后期效果降低。中藥單體作為胰腺癌輔助治療藥物有很好的療效，可增強放化療的治療效果，并減少其副作用。在體外試驗中藥單體對胰腺癌的作用多能夠抑制其增殖、促進其凋亡而實現(xiàn)抑制腫瘤的生長與轉移，臨床觀察與體內實驗同樣證實了這一點。抑制機制主要是通過NF-κB信號通路、JNK信號通路、STAT3信號通路、Hedgehog（Hh）信號通路及下游分子，抑制胰腺癌細胞EMT、增強線粒體通透性而發(fā)揮作用的。正如中藥單體自身的獨特優(yōu)點，從多方面、多靶點調整人體陰陽平衡、驅邪補正，中藥單體對胰腺癌的作用機制也猶如多條信號通路組成的網絡系統(tǒng)，仍需進一步的研究探索其更多的作用機制，才能使中藥單體更多的應用于胰腺癌的治療。

［1］ EHEMANC，HENLEY SJ，BALLARDBARBASH R， ETC ．Annual Report tothe Nation on the status of cancer,1975-2008,featuring cancers associated with excess weight and lack of sufficient physical activity［J］．Cancer，2012，118（9）：2338-2366．

［2］ 王麗娟，路軍章．中醫(yī)藥治療胰腺癌的研究進展［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2016，31（3）：961-964．

［3］ 徐賢綢，溫培楠，王兆洪，等．大黃素治療裸鼠胰腺癌肝轉移瘤的實驗研究［J］．浙江中西醫(yī)結合雜志，2014，24（3）：207-210．

［4］ 徐步遠，楊偉青．NF－κB在大黃素聯(lián)合吉西他濱治療裸鼠胰腺癌肝轉移中的作用［J］．中華中醫(yī)藥學刊，2014，32（10）：2500-2502．

［5］ 施書強，溫培楠，徐賢綢，等．大黃素通過NF-κB信號途徑抑制胰腺癌生長和轉移［J］．中華中醫(yī)藥學刊，2014，32（4）：897-900．

［6］ 陳亮，郭敬強．大黃素對胰腺癌細胞抑癌基因P16、RASSF1A去甲基化作用研究［J］．肝膽胰外科雜志，2014，26（4）：312-315．

［7］ 陳艷．康萊特注射液聯(lián)合吉西他濱治療晚期胰腺癌患者安全性和有效性的系統(tǒng)評價［J］．中醫(yī)臨床研究，2015，7（16）：24-27．

［8］ 姚小?。婕獖W聯(lián)合康萊特注射液治療老年晚期胰腺癌臨床觀察［J］．腫瘤基礎與臨床，2015，28（4）：350-352．

［9］ 王巨義，孔棣．康萊特注射液誘導胰腺癌Miacapa-2細胞增殖及凋亡的實驗研究［J］．山西醫(yī)藥雜志，2014，43（23）：2734-2735．

［10］ 王兆洪，童洪飛，金洲祥，等．鴉膽子素D體外對人細胞株Panc-1生長增殖的抑制作用［A］．2014年浙江省外科學學術年會論文匯編［C］．2014．

［11］ XIN TIAN，SHUNDONG DAI，JING SUN，ETC ．Bufalin Induces Mitochondria-Dependent Apoptosis in Pancreatic and Oral Cancer Cells by Downregulating hTERT Expression via Activation of the JNK/p38 Pathway［J］．Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine，2015：1-12．

［12］ 胡強，殷佩浩，陸品相，等．蟾毒靈介導JNK信號通路誘導人胰腺癌細胞的凋亡［J］．世界華人消化雜志，2012，20（1）：100-105．

［13］ 李梅影，李際盛，于學軍，等．蟾毒靈對CAPAN-2胰腺癌細胞增殖和細胞周期的影響［J］．山東大學學報，2013，51（11）：38-41．

［14］ XINCE HUANG，SHENGJIE DAI，JUJI DAI，ETC ．Luteolindecreases invasiveness,deactivates STAT3 signaling,andreversesinterleukin-6 inducedepithelial–mesenchymal transition and matrix metalloproteinasesecretion of pancreatic cancer cells．OncoTargets and Therapy，2015，8：2989–3001．

［15］ 何春游，張法燦，郭先文，等．苦參堿對胰腺癌CFPAC-1細胞增殖、凋亡及Hedgehog信號通路的影響［J］．世界華人消化雜志，2016，24（3）：338-345．

［16］ SAHDEO PRASAD，VIVEK R．YADAV，BOKYUNG SUNG ，ETC ．Ursolic acid inhibits the growth of human pancreatic cancerand enhances the antitumor potential of gemcitabine inan orthotopic mouse model through suppression of theinflammatory microenvironment［J］．Oncotarget，2016，7（11）：13182-13197．

［17］ 盛健，吳峰，夏甘霖，等．雷公藤甲素對胰腺癌干細胞的影響［J］．醫(yī)藥導報，2014，33（3）：315-318．

［18］ 喬志新，賀敏，李偉靜，等．雷公藤甲素誘導胰腺癌細胞凋亡［J］．生物技術通訊，2013，24（4）：519-523．

［19］ 周黎明，卜賀啟，劉殿雷，等．冬凌草甲素聯(lián)合吉西他濱對胰腺癌SW1990細胞［J］．天津醫(yī)藥，2014，42（9），859-864．

［20］ 陳龍佩，吳杰，孟穎，等．姜黃素對胰腺癌細胞PANC-1體外侵襲轉移的影響［J］．現(xiàn)代儀器與醫(yī)療，2015，21（4）：1-3．

［21］ 龐慧芳，覃華，趙秋，等．姜黃素對胰腺癌細胞上皮間質轉化的影響［J］．世界華人消化雜志，2014，22（18）：2565-2571．

［22］ 周忠光，白云，趙鑫，等．蝙蝠葛酚性堿對BxPC-3荷瘤裸鼠細胞凋亡相關基因P53蛋白表達的影響［J］．中醫(yī)藥學報，2011，02：35-37．

［23］ 劉宏，仲麗麗，杜徽，等．蝙蝠葛酚性堿對人胰腺癌荷瘤裸鼠移植瘤形態(tài)學的研究［J］．中國實驗方劑學雜志，2015，21（15）：107-111．

［24］ 魏冬梅，陳宏，尹鋼，等．蝙蝠葛酚性堿（PAMD）調控Gli1基因抗胰腺癌的機制研究［J］．云南中醫(yī)中藥雜志，2015，36（3）：64-66．

［25］ 秦勇，杜虹，馬清涌，等．Hedgehog通路介導的白藜蘆醇對胰腺癌Miacapa-2細胞增殖與凋亡的影響［J］．陜西醫(yī)學雜志，2015，44（10）：1286-1290．

［26］ 李偉，羅霞，馬小倩．白藜蘆醇對胰腺癌細胞增殖和凋亡影響的研究［J］．生命科學研究，2015，19（4）：294-298．

［27］ SUMIT ARORA，ARUN BHARDWAJ，SANJEEV K，ETC ．Honokiol Arrests Cell Cycle，Induces Apoptosis，andPotentiates the Cytotoxic Effect of Gemcitabine inHuman Pancreatic Cancer Cells［J］．PloSONE，2011，6（6）：1-10．

［28］ 王立文，謝夢燕，林莉莉．和厚樸酚增強吉西他濱誘導胰腺癌細胞凋亡的機制研究［J］．中國臨床藥理學雜志，2016，32（11）：1027-1031．

［29］ 潘會君，聶緒強，劉朵，等．4種中藥單體對人胰腺癌PANC-1細胞移植瘤生長的影響及分子機制探討［J］．中國中藥雜志，2013，38（2）：245-249．

R735.9

A

1004-2814（2017）03-0331-04

2016-10-28