嬰兒痙攣癥患者血清、腦脊液S-100β和膠質纖維酸性蛋白水平觀察及其相關性分析

祝善堯，葛偉，陳貴海

(安徽醫(yī)科大學附屬巢湖醫(yī)院，安徽巢湖238000)

嬰兒痙攣癥患者血清、腦脊液S-100β和膠質纖維酸性蛋白水平觀察及其相關性分析

祝善堯，葛偉，陳貴海

(安徽醫(yī)科大學附屬巢湖醫(yī)院，安徽巢湖238000)

目的觀察嬰兒痙攣癥患兒血清、腦脊液中星形膠質細胞分子標志物S-100β、膠質纖維酸性蛋白(GFAP)的相關性，并探討其臨床意義。方法選擇嬰兒痙攣癥患者29例為觀察組，同期收治的無中樞神經系統(tǒng)疾病的呼吸道感染患兒30例為對照組。采用ELISA法檢測觀察組、對照組患兒血清及觀察組患兒腦脊液中S-100β、GFAP水平。結果觀察組、對照組患兒血清S-100β水平分別為(0.80±0.16)、(0.37±0.07)μg/L，GFAP水平分別為(4.12±0.69)、(2.70±0.63)ng/L。觀察組患兒血清S-100β和GFAP水平均高于對照組(P均<0.05)。觀察組患兒腦脊液S-100β水平為(1.08±0.23)μg/L，GFAP水平為(4.85±0.42)ng/L。觀察組患兒血清S-100β水平和腦脊液S-100β水平呈正相關(r=0.883，P<0.05)，血清GFAP水平和腦脊液GFAP水平呈正相關(r=0.916，P<0.05)。結論嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β、GFAP水平升高，且與腦脊液S-100β、GFAP水平呈正相關。檢測嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β、GFAP水平有助于判斷患兒腦脊液S-100β、GFAP水平，進而估計患兒中樞神經系統(tǒng)損傷程度。

S-100β蛋白；膠質纖維酸性蛋白;癲癇；嬰兒痙攣癥；星形膠質細胞

嬰兒痙攣癥是小兒癲癇的一個特殊類型，是一種嚴重的肌陣攣發(fā)作，預后不良，表現(xiàn)為全身性肌陣攣性抽搐，上肢伸直、屈曲內收、頭和軀體前屈[1]。因為發(fā)作時神經異常放電劇烈，且往往反復發(fā)作甚至連續(xù)發(fā)作，神經損傷嚴重，有可能導致患兒智力發(fā)育遲緩、運動發(fā)育遲滯[2,3]。S-100β和膠質纖維酸性蛋白(GFAP)均為星形膠質細胞分子標志物[4]。文獻報道，癲癇患兒腦脊液S-100β、GFAP水平升高，反映患兒中樞神經系統(tǒng)損傷程度[5]。但是臨床上檢測腦脊液S-100β、GFAP水平需要進行腰穿，有損傷且患兒家長難以接受。血清S-100β、GFAP水平檢測無創(chuàng)、方便且患兒家長容易接受。本研究觀察了嬰兒痙攣癥患兒血清、腦脊液S-100β和GFAP水平變化，并分析患兒血清S-100β、GFAP水平與腦脊液S-100β、GFAP水平的相關性，探討用血清S-100β、GFAP水平檢測間接觀察腦脊液S-100β、GFAP水平的可能性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年6月～2017年3月收治的嬰兒痙攣癥患兒29例位觀察組，其中男15例，女14例，年齡(4.7±2.3)歲。均符合國際抗癲癇聯(lián)盟制定的癲癇診斷及分類標準[3]。發(fā)作次數(shù)均不少于3次。排除：①近期腦外傷和神經系統(tǒng)感染者；②有腦梗死、外傷史者；③患有免疫系統(tǒng)疾病或正在接受免疫抑制劑治療者。另選同期收治的上呼吸道感染患兒30例為對照組，其中男17例，女13例，年齡(5.1±3.1)歲，均排除中樞神經系統(tǒng)疾病。兩組患兒性別、年齡相比，P均>0.05。本研究已經醫(yī)院倫理審查委員會批準，患兒家長均已簽署知情同意書。

1.2 血清、腦脊液S-100β、GFAP檢測方法 觀察組、對照組患兒于入院后24 h內抽取靜脈血2 mL，室溫靜置30 min后置于離心機中，3 000 r/min離心20 min，吸取上層血清，置于-80 ℃環(huán)境待測。另外觀察組患兒入院后24 h行腰穿抽取腦脊液2 mL，保存于-80℃環(huán)境待測。血清、腦脊液中S-100β、GFAP檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，試劑盒購自北京天根生化科技有限公司，操作嚴格按照說明書進行。

2 結果

2.1 兩組血清S-100β和GFAP水平比較 觀察組、對照組患兒血清S-100β水平分別為(0.80±0.16)、(0.37±0.07)μg/L，GFAP水平分別為(4.12±0.69)、(2.70±0.63)ng/L。觀察組患兒血清S-100β和GFAP水平均高于對照組(P均<0.05)。

2.2 觀察組患兒血清、腦脊液S-100β和GFAP水平的相關性 觀察組患兒腦脊液S-100β水平為(1.08±0.23)μg/L，GFAP水平為(4.85±0.42)ng/L。直線相關分析結果顯示，觀察組患兒血清S-100β水平和腦脊液S-100β水平呈正相關(r=0.883，P<0.05)，血清GFAP水平和腦脊液GFAP水平呈正相關(r=0.916，P<0.05)。

3 討論

癲癇是兒童神經系統(tǒng)的常見疾病，嬰兒痙攣癥是其中一個類型，其發(fā)病機制復雜，可造成神經元、神經膠質細胞損傷，最終影響腦功能[6]。癲癇發(fā)作后的基本病理變化為神經元選擇性喪失、神經元樹突棘脫失和膠質細胞增生形成瘢痕。有學者將上述病理改變引起的腦損傷分為三個階段，微空泡形成、缺血性神經元損傷和細胞溶解。研究顯示當神經元處于微空泡形成階段時，如果采取方法終止發(fā)作，此時的神經元損傷是可以逆轉的[7]。因此，找到一種安全、可靠的生化指標用來估計腦損傷程度，在此基礎上給予合理的治療，能夠最大程度減少腦損傷，改善患者預后。

GFAP是星形膠質細胞的標志蛋白，屬細胞骨骼蛋白，分子量為50～52 kD，僅在星形膠質細胞中高度表達，是維持其形態(tài)結構的重要蛋白[8]。中樞神經系統(tǒng)損傷后，星形膠質細胞內GFAP表達增強，能夠促進周圍星形膠質細胞有絲分裂，促使原始祖細胞分化為成熟細胞，并促進纖維蛋白合成[9]。組織病理學研究顯示腦挫傷12 h內，星形膠質細胞變得肥大并開始增生，但是GFAP陽性細胞數(shù)量減少，隨后逐漸增多，7 d后星形膠質細胞形態(tài)出現(xiàn)明顯變化，邊界不清，GFAP陽性細胞大量增加[10]。嬰兒痙攣癥患兒腦脊液中GFAP水平高于中樞神經系統(tǒng)功能正常的兒童，可能是中樞神經系統(tǒng)損傷后星形膠質細胞內GFAP表達增強的結果。本研究結果顯示嬰兒痙攣癥患兒血清GFAP水平高于無中樞神經系統(tǒng)疾病的呼吸道感染患兒，說明嬰兒痙攣癥患兒血清GFAP水平的變化與腦脊液GFAP水平的變化是一致的。

S-100蛋白最早發(fā)現(xiàn)與牛腦組織中，是一類具有高生物學活性鈣結合蛋白[11]。S-100蛋白有兩種亞基，S-100α主要表達在紋狀肌、心臟和腎臟中，S-100β表達在中樞神經系統(tǒng)中，由星形膠質細胞和少突膠質細胞合成和分泌，具有調節(jié)細胞生長、能量代謝的作用，并參與細胞內的信號轉導[12]。當膠質細胞受到損傷時，S-100β會從細胞內進入腦脊液或者血液。細胞外S-100β發(fā)揮的作用取決于濃度。低濃度時可以營養(yǎng)神經。正常情況下膠質細胞會分泌少量S-100β，修復損傷促進生長[13]。大量的S-100β具有細胞毒性，能夠誘導神經元凋亡。大量研究表明腦組織損傷時，S-100β顯著增加且與損傷程度和范圍密切相關[14]。嬰兒痙攣癥患兒腦脊液中S-100β水平明顯高于中樞神經系統(tǒng)功能正常的兒童，是患兒中樞神經系統(tǒng)損傷的標志物。本研究結果顯示嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β水平高于無中樞神經系統(tǒng)疾病的呼吸道感染患兒，說明嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β水平的變化與腦脊液GFAP水平的變化是一致的。

為進一步明確嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β、GFAP水平與腦脊液S-100β、GFAP水平的相關性，本研究對觀察組嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β水平和腦脊液S-100β水平、血清GFAP水平和腦脊液GFAP水平的相關性進行了直線相關分析，結果顯示，觀察組患兒血清S-100β水平和腦脊液S-100β水平呈正相關(r=0.883，P<0.05)，血清GFAP水平和腦脊液GFAP水平呈正相關(r=0.916，P<0.05)。提示嬰兒痙攣癥患兒血清S-100β水平和腦脊液S-100β水平、血清GFAP水平和腦脊液GFAP水平存在很顯著的正相關關系。臨床中可不必抽取腦脊液，通過檢查靜脈血清S-100β、GFAP水平即能夠判斷嬰兒痙攣癥患者腦損傷的嚴重程度。因為腰穿具有損傷性，一些家長難以接受，本研究結果具有重要的現(xiàn)實意義，可以提高家長依從性，早期評估患兒中樞神經系統(tǒng)損傷程度，并給與適當干預，改善患兒預后[15,16]。

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2017-06-25)

安徽省衛(wèi)計委科技攻關計劃項目(08010302123)。

陳貴海(E-mail：chenguihai_1964@medpap360.net)