陳 飛, 曾傳琴, 歐 彬
(四川大學華西廣安醫(yī)院病理科, 四川 廣安 638001)
血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝細胞癌早期診斷中的應用
陳 飛, 曾傳琴, 歐 彬
(四川大學華西廣安醫(yī)院病理科, 四川 廣安 638001)
目的:探討血清高爾基體膜蛋白73(GP73)診斷原發(fā)性肝細胞癌(HCC)的臨床價值。方法:選取2014年7月至2015年7月期間我院接收的門診、住院和健康體檢人群300例,將其分為5組,分別為HCC組、乙肝后硬化組、其他惡性腫瘤組、乙型病毒性肝炎組、健康對照組,檢測5組的血清GP73、甲胎蛋白(AFP)水平,繪制其診斷HCC的ROC曲線。結果:HCC患者中,不同年齡、腫瘤大小、性別及不同AFP濃度患者的血清GP73水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);HCC組血清AFP、GP73水平較其他各組人群差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組及其他惡性腫瘤組患者AFP、GP73均較健康對照組差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);GP73診斷HCC的特異性、敏感性均高于AFP,P<0.05。結論:血清GP73對HCC的診斷敏感性、特異性優(yōu)于AFP,可作為HCC早期診斷的血清標記物。
原發(fā)性肝細胞癌; GP73; 慢性乙型肝炎; 乙肝后肝硬化; 惡性腫瘤; 早期診斷
原發(fā)性肝癌(PHC)是發(fā)病率位列我國第三的惡性腫瘤,其中以肝細胞肝癌(HCC)最為多見,發(fā)病率占PHC的90%[1]。HCC的預后與其發(fā)現(xiàn)階段密切相關,越早發(fā)現(xiàn),治療效果就越好,但多數(shù)肝細胞肝癌患者一經診斷基本已處于晚期,往往治愈率極低。因此盡早診斷HCC對臨床醫(yī)師制定治療方案,提高治愈率具有重要意義。甲胎蛋白(AFP)是既往早期HCC監(jiān)測的主要指標,其特異度為70%~92%,敏感性為39%~65%之間,但患有肝硬化活動期、肝炎、睪丸癌、生殖腺胎瘤、卵巢癌等疾病時,其水平也會出現(xiàn)升高,而影響其對HCC的診斷。近年來,隨著蛋白質組學、基因技術、腫瘤免疫等研究的快速發(fā)展,一系列新的肝癌腫瘤學標準物,如甲胎蛋白異質體-3(AFP-3)、肝癌缺失基因-1(DLD-1)、高爾基體蛋白-73(GP73)相繼被人們發(fā)現(xiàn),其中GP73被認為是最值得期待的肝癌血清標志物[2]。本研究中觀察GP73在不同人群血清中的表達水平及差異,判斷其在HCC早期診斷中的應用價值,現(xiàn)報道如下:
1.1 一般資料:選取2014年7月至2015年7月期間我院接收的門診、住院和健康體檢人群,共300例,將其分為5組,分別為HCC組,58例,女12例,男46例,年齡40~75歲,平均(51.8±3.3)歲;乙肝后硬化組60例,女15例,男45例,年齡20~68歲,平均(45.6±3.5)歲;乙型病毒性肝炎組65例,女20例,男45例,年齡20~68歲,平均(40.8±6.3)歲;其他惡性腫瘤組(均經病理血確診)50例,其中胰腺癌8例,胃癌19例,食管癌10例,膽囊癌1例,結腸癌4例,十二指腸癌3例,直腸癌5例,其中女14例,男36例,年齡20~86歲,平均(63.8±5.3)歲,健康對照組67例,其中女25例,男42例,年齡20~68歲,平均(36.5±4.3)歲。
1.2 方法:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測GP73,采用武漢華美生物工程有限公司提供的試劑盒;采用電化學發(fā)光法測定AFP,采用Cobas6000全自動生化免疫分析儀(瑞士羅氏公司),試劑盒為配套試劑。根據實體或影像學檢查對腫瘤病灶打下進行測量,將HCC分為瘤體<5cm和≥5cm兩組。
表1 HCC組中不同情況患者的GP73值差異
2.1 HCC組中腫瘤大小、性別、年齡及AFP濃度不同的GP73值差異:HCC患者中,不同年齡、腫瘤大小、性別及不同AFP濃度患者的血清GP73水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。
2.2 各組AFP和GP73表達水平:HCC組血清AFP、GP73水平較其他各組人群均要高(P<0.05),慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組及其他惡性腫瘤組患者AFP、GP73均較健康對照組要高(P<0.05),見表2。
表2 各組AFP和GP73表達水平差異
注:與健康對照組比較,*P<0.05;與HCC組比較,#P<0.05
2.3 血清AFP和GP73的ROC曲線分析應用:GP73曲線下面積為0.862,其用于診斷HCC的臨界值為150μg/L,診斷HCC的特異度和靈敏度達到最佳,AFP的曲線面積為0.758,其用于診斷HCC的臨界值為200μg/L時,診斷HCC的特異度、靈敏度最佳。
2.4 血清GP73和AFP檢測對HCC診斷效能差異:GP73診斷HCC的特異性、敏感性、準確度均高于AFP,P<0.05,見表3。
表3 血清GP73和AFP檢測對HCC診斷效能差異
HCC是一種惡性程度高、進展快、病死率高的惡性腫瘤,肝內小的惡性病變采用影像學檢查仍較難發(fā)現(xiàn),而腫瘤越小,則治愈率越高,因此對HCC早發(fā)現(xiàn)、早診斷尤為重要。AFP作為傳統(tǒng)肝癌標志物,大量床病例及長期觀察顯示,AFP特異性為70%~92%,敏感性為39%-65%之間[3]。理想的腫瘤標記物應具有高度的特異性,能將肝臟病變,如肝臟再生結節(jié)、肝硬化、肝炎等與原發(fā)性肝癌進行鑒別。同時它還能在HCC早期提示診斷,需要有高度的敏感性,且具有可重復、易檢測及取樣簡單、安全的特征。而AFP診斷HCC的敏感性不夠。本研究中AFP診斷HCC的敏感性、特異性分別為60.3%、71.1%,診斷價值不高。因此,尋找新的更加敏感的血清標志物顯得尤為重要。GP73是一種高爾基體跨膜蛋白,由美國學者Ⅺadney等最早發(fā)現(xiàn),并指出GP73在健康人體肝組織中,主要由膽管上皮細胞表達,而很少在肝細胞內表達甚至不表達[4]。在受到非病毒原因(自身免疫性肝炎或酒精性肝病)或病毒性感染均可引起GP73的高表達,此項研究為GP73應用于肝臟疾病的診斷提供理論依據。李慶芝[5]通過研究發(fā)現(xiàn),HCC患者血清中GP73呈高表達,是正常肝臟GP73表達量的數(shù)十倍,其早期發(fā)現(xiàn)HCC的敏感度高于AFP。在HCC患者中GP73在血清中含量升高的機制目前仍不清楚,研究指出其轉錄調控機可能與以下幾方面有關[6,7]:①血液中雌激素及骨化三醇水平;②體內乙肝病毒的復制;③血液中TNF-α和TCF-α含量;④肝硬化患者(與病原學無關);⑤急慢性肝細胞損傷;⑥機體內弗林含量的變化等。
研究發(fā)現(xiàn)[8,9],在急慢性肝炎患者,大部分肝臟細胞GP73呈高表達,而肝硬化患者其血清內GP73水平又進一步升高,發(fā)展到HCC時,GP73的表達達到高峰。本研究中,筆者得出HCC患者血清中GP73表達與患者的年齡、腫瘤大小、性別及AFP濃度等無明顯相關性。而HCC組血清GP73水平較慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組均要高(P<0.05),提示GP73可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關,隨著病情的進展,其血清內水平不斷增高。另外,研究發(fā)現(xiàn),GP73的病理表達不止是在肝臟。最近研究指出,在各種類型的腺癌組織中可見高爾基磷酸蛋白呈高表達,包括腎上腺癌、前列腺癌、結腸癌腺癌等,這可能會影響GP73對HCC的特異性。而本研究中,HCC患者血清GP73含量高于其他腫瘤患者,可見GP73可作為HCC早期診斷的血清標記物。GP73對HCC診斷的敏感性、特異性上,研究結果顯示,GP73診斷HCC的特異度達92.8%,敏感性80.2%,這項研究顯示出檢測HCC患者GP73的高特異性和高敏感性。本研究中,應用ROC曲線對GP診斷HCC的準確性進行客觀地評價,結果顯示,GP73診斷HCC的特異度、靈敏度均高于AFP(P<0.05),說明GP73對HCC的早期診斷有重要的臨床價值。
[1] 孫啟明,陳海波,顧玉明,等.比較兩種方法檢測血清高爾基體膜蛋白-73診斷肝細胞肝癌的價值[J].徐州醫(yī)學院學報,2014,34(6):364~367.
[2] 江均昌,周林福.高爾基體駐膜糖蛋白73的研究進展及其與肝癌等疾病的聯(lián)系[J].浙江大學學報(醫(yī)學版),2012,41(2):215~221.
[3] 陳海波,顧玉明,王洵,等.高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝癌患者血清中的表達及其早期診斷價值[J].介入放射學雜志,2014,23(6):528~531.
[4] 鄭盛,唐映梅,楊晉輝,等.血清GP73和AFP單項與聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的價值[J].肝臟,2013,18(3):164~166.
[5] 李慶芝.血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝細胞癌早期診斷中的應用[J].中國中西醫(yī)結合外科雜志,2016,22(5):435~437,438.
[6] 巢映暉,傅華群.肝癌新的血清標記物高爾基體蛋白73[J].中華肝膽外科雜志,2011,17(12):1027~1029.
[7] 蔡媛媛,徐霞.Ⅱ型高爾基體膜蛋白GP73的研究進展[J].中國實驗診斷學,2012,16(7):1328~1331.
[8] 童海江,王亞玲.血清高爾基體蛋白73檢測在肝病患者中的意義[J].放射免疫學雜志,2012,25(2):219~220.
[9] 聶東雷,陳亞晗.血清高爾基體蛋白73與肝臟疾病研究進展[J].中華實用診斷與治療雜志,2016,30(8):735~737.
The Application of Serum Golgi Membrane Protein 73 in Early Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma
CHENFei,ZENGChuanqin,OUbin
(TheWestChinaGuang'anHospital,SichuanUniversity,SichuanGuang'an638001,China)
Objective: To investigate the clinical value of serum Golgi membrane protein 73 (GP73) in the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma (HCC).Methods:300 people including healthy people, outpatient and inpatient in our hospital from July 2014 to July 2015 were divided respectively into five groups as HCC group, posthepatitic b cirrhosis group, other malignant tumor group, chronic hepatitis B group and healthy control group. The level of Serum GP73 and alpha fetoprotein (AFP) were determined and the ROC curve of its diagnostic HCC was drawn. Result: There was no significant difference in the level of serum GP73 of the patients with different age, tumor size, gender and concentration of serum AFP in the HCC group (P>0.05). The level of serum AFP and GP73 of the patients in the HCC group were significantly higher than that in the other groups(P<0.05), while the level of serum AFP and GP73 of the patients in the chronic hepatitis B, posthepatitic b cirrhosis group and other malignant tumor group were significantly higher than that of the healthy control group(P<0.05). The specificity and sensitivity of GP73 in the diagnosis of HCC were significantly higher than those of AFP, P<0.05. Conclusion: The sensitivity and specificity of serum GP73 in the diagnosis of HCC are better than those of AFP. GP73 can be a serum marker in the early diagnosis of HCC.
Primary hepatocellular carcinoma; GP73; Chronic hepatitis B; Posthepatitic b cirrhosis; Malignant tumor; early diagnosis
四川省科技廳科研課題,(編號:2013JY02541)
1006-6233(2017)02-0263-04
A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2017.02.026