Chemerin與IL-6在子癇前期患者血清中的表達(dá)及其相關(guān)性分析①

陸 瑤，呂敬媛，宮慶娟

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，黑龍江 佳木斯 154003；2.齊齊哈爾第一人民醫(yī)院，黑龍江 齊齊哈爾 161005)

Chemerin與IL-6在子癇前期患者血清中的表達(dá)及其相關(guān)性分析①

陸 瑤1，2，呂敬媛1，宮慶娟1

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，黑龍江 佳木斯 154003；2.齊齊哈爾第一人民醫(yī)院，黑龍江 齊齊哈爾 161005)

目的：檢測(cè)Chemerin及IL-6在子癇前期患者血清中的表達(dá)，主要從炎癥反應(yīng)方面探討其在子癇前期發(fā)病過(guò)程中的作用及發(fā)病過(guò)程中的相互作用機(jī)制。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法 ( ELISA) 分別檢測(cè)25例正常孕婦(對(duì)照組)和35例子癇前期患者(試驗(yàn)組，其中輕度子癇前期15例、重度子癇20例)血清中Chemerin及IL-6的水平。結(jié)果：① Chemerin在實(shí)驗(yàn)組患者血清中的濃度高于對(duì)照組(P<0.05)，且重度子癇前期組高于輕度子癇前期。②IL-6在實(shí)驗(yàn)組患者血清中的濃度高于對(duì)照組(P<0.05)，且重度子癇前期組高于輕度子癇前期。③Chemerin與IL-6兩者在研究對(duì)象血清中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.898，P<0.05)。結(jié)論：Chemerin與IL-6可能在妊娠過(guò)程中相互促進(jìn)表達(dá)，加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)而加速子癇前期的發(fā)生發(fā)展。

子癇前期；Chemerin；IL-6

妊娠期高血壓疾病是一種嚴(yán)重威脅母嬰的健康，可導(dǎo)致孕產(chǎn)婦和圍生兒發(fā)病及死亡的產(chǎn)科疾病，含有妊娠期高血壓、子癇前期、子癇、慢性高血壓并發(fā)子癇前期及妊娠合并慢性高血壓多種類型，我國(guó)的發(fā)病率為9.4%～10.4%，其中的子癇前期為妊娠期特有的一種疾病，妊娠中、晚期孕婦血壓持續(xù)性升高為其主要表現(xiàn)，同時(shí)可伴有全身水腫、蛋白尿、肝腎及其它器官功能損害或功能衰竭等多種并發(fā)癥，嚴(yán)重患者可出現(xiàn)抽搐、昏迷，甚至死亡。該病的病因及發(fā)病機(jī)制截至目前并未完全闡明，國(guó)內(nèi)外學(xué)者們經(jīng)過(guò)大量研究后認(rèn)為該病的發(fā)生及發(fā)展可能與炎癥反應(yīng)有關(guān)。子癇前期是孕婦機(jī)體對(duì)妊娠的一種過(guò)渡的炎性反應(yīng)。Chemerin是一種新型脂肪因子，大量研究發(fā)現(xiàn)它有參與炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)免疫、脂質(zhì)的代謝及骨骼的發(fā)育等多種功能，在脂肪細(xì)胞分化、肥胖、糖尿病、心血管疾病、腫瘤標(biāo)志物、銀屑病及血壓的調(diào)節(jié)中均扮演著重要的角色。國(guó)內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)已證實(shí)IL-6與妊娠期高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，在妊娠期高血壓疾病患者胎盤及血清中高表達(dá)，本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)檢測(cè)Chemerin及IL-6在子癇前期患者血清中的濃度，主要從炎癥反應(yīng)方面探討其在子癇前期發(fā)病過(guò)程中的作用及發(fā)病過(guò)程中的相互作用的機(jī)制，可能會(huì)對(duì)子癇前期的發(fā)生機(jī)制提供新的思路，為該病的早期預(yù)防和治療提供新的靶點(diǎn)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2013年4～12月在佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院及佳木斯婦幼保健院產(chǎn)科住院的孕婦。收集子癇前期的患者35例，其中輕度子癇前期患者15例，重度子癇前期患者20例。隨機(jī)選取同期血壓正常的妊娠晚期孕婦25例作為對(duì)照組。子癇前期的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照謝幸，茍文麗主編《婦產(chǎn)科學(xué)》第8版[1]。所有病例均為單胎初產(chǎn)并剖宮產(chǎn)終止妊娠，既往無(wú)高血壓、心臟病、糖尿病、甲亢和肝腎疾病史，無(wú)其他妊娠合并癥及并發(fā)癥，無(wú)急、慢性感染及自身免疫性疾病，無(wú)輸血及煙酒嗜好。兩組孕婦年齡及孕齡之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 標(biāo)本采集

抽取研究對(duì)象空腹8～10h肘靜脈血至無(wú)菌干燥試管內(nèi)。血標(biāo)本在室溫下放置30min后 4℃、 2500r/min離心15min，分離出血清，血清保存于-70℃冰箱中凍存以備檢測(cè)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

采用ELISA法檢測(cè)Chemerin與IL-6在實(shí)驗(yàn)對(duì)象血清中的濃度。試劑購(gòu)自武漢貝萊茵生物有限公司，具體步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書上操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

Chemerin與IL-6在子癇前期組血清中的表達(dá)均高于正常對(duì)照組(P<0.05)，且重度子癇前期組Chemerin與IL-6的表達(dá)均高于輕度子癇前期組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 Chemerin與IL-6在子癇前期組和對(duì)照組血清中的表達(dá)

經(jīng)Pearson進(jìn)行相關(guān)分析：Chemerin與IL-6在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血清中的表達(dá)呈正相關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.898,P<0.05)。

3 討論

3.1Chememrin和IL-6的生物學(xué)特性

Chemerin是一種20世紀(jì)末新發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，人體的Chemerin編碼基因全長(zhǎng)為3289bp,居于染色體7q36.1，其mRNA長(zhǎng)度為734bp，在人體多種組織尤其在脂肪組織中廣泛表達(dá)，參與調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化并且與代謝綜合征的發(fā)病相關(guān)。Chemerin最早是由Nagpal等[2]在治療銀屑病時(shí)克隆，并發(fā)現(xiàn)維甲酸類藥物可以提高Chemerin的基因表達(dá)水平，又稱其為維甲酸受體反應(yīng)元件2(RARRES2)。研究證明Chemerin是G蛋白耦聯(lián)受體chemR23的天然配體，在機(jī)體中以生物活性較低的前體prechemerin的形式由細(xì)胞分泌，在細(xì)胞外蛋白酶作用下變成生物學(xué)活性較強(qiáng)的的Chemerin，其生物學(xué)本質(zhì)是一種趨化蛋白，對(duì)表達(dá)chemR23的巨噬細(xì)胞和未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞有趨化作用。大量研究表明，活化的Chemerin通過(guò)與其受體相結(jié)合后，通過(guò)活化相關(guān)炎性細(xì)胞釋放炎性因子(IL-1、IL-6及TNF-α等)及其它細(xì)胞因子在炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)的起始、發(fā)展及消退中發(fā)揮著重要的作用；通過(guò)信號(hào)途徑的轉(zhuǎn)導(dǎo)、血管內(nèi)皮因子的再生及對(duì)腎臟功能的調(diào)節(jié)參與血壓的調(diào)節(jié)，通過(guò)參與胰島素抵抗和影響脂肪細(xì)胞的代謝在代謝綜合征的發(fā)病中發(fā)揮重要作用；在脂質(zhì)代謝、炎癥、免疫、新血管疾病及腫瘤等各方面的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中均起到一定的作用。

炎癥因子白介素-6(IL-6)是一種糖蛋白, 其分子量為26kDa，可由巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞合成和分泌，其生物學(xué)作用廣泛,可誘導(dǎo)B細(xì)胞分化并合成免疫球蛋白,誘導(dǎo)Tc細(xì)胞的增殖和分化,誘導(dǎo)IL-2、IL-4、IL-17及CRP等的生成，促進(jìn)粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖，抑制某些腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞分化[3]，在免疫應(yīng)答、炎癥及急性期反應(yīng)、組織損傷修復(fù)、正常細(xì)胞蛋白及脂代謝、細(xì)胞程序化死亡、抗病毒、抗感染、抗腫瘤、造血等方面發(fā)揮重要作用。

3.2Chemerin和IL-6在子癇前期患者血清中的表達(dá)及意義

本研究顯示，Chemerin在子癇前期患者血清中的濃度明顯高于對(duì)照組，并隨病情加重而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。子癇前期是孕婦對(duì)妊娠的一種過(guò)度的炎性反應(yīng)[4]。內(nèi)皮細(xì)胞活化是炎性反應(yīng)的一部分,可致使感染部位的血供增加、毛細(xì)血的通透性增加及白細(xì)胞黏附,此后導(dǎo)致滲出、趨化及吞噬現(xiàn)象。研究表明Chemerin與其受體相結(jié)合后，可促進(jìn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞活化，釋放大量的炎性因子，促進(jìn)并加重炎癥反應(yīng)，使血管內(nèi)皮受到損害，導(dǎo)致其釋放大量的收縮血管物質(zhì)，而舒張血管的物質(zhì)明顯減少；亦可通過(guò)促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子的顯著表達(dá)，使大量的白細(xì)胞聚集至炎癥區(qū)域，大量釋放活性氧、溶酶體酶等，使炎癥反應(yīng)加劇，最終導(dǎo)致小血管強(qiáng)烈痙攣；還可通過(guò)促進(jìn)脂肪細(xì)胞的脂解，大量釋放游離的脂肪酸，從而使胰島素抵抗增強(qiáng)；此外，Chemerin還在作為人體血壓調(diào)節(jié)的重要器官腎臟組織中呈高表達(dá)，通過(guò)與其受體結(jié)合從而誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的鈣離子釋放引起血管收縮，參與血壓的上升及尿蛋白的漏出。而且曾有研究表明血壓的升高與血漿中的Chemerin表達(dá)水平呈正相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)表明，IL-6在子癇前期患者血清中的濃度明顯高于正常孕婦，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨著病情的加重IL-6的表達(dá)越高。研究發(fā)現(xiàn)IL-6可通過(guò)提高血中血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)的濃度,誘導(dǎo)血管內(nèi)的中性粒細(xì)胞T黏附、聚集、活化，進(jìn)而損傷血管內(nèi)皮，主要表現(xiàn)為內(nèi)皮細(xì)胞間隙的增大，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)細(xì)胞的壞死、脫落，致使血管通透性增加，體液及蛋白外滲，最終出現(xiàn)組織水腫。國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)IL-6水平與高血壓的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可能通過(guò)以下兩種途徑參與血壓改變：一是導(dǎo)致血管內(nèi)皮的功能失調(diào)，外周血管阻力增加，從而血壓升高；二是由于體液及蛋白的外滲激活凝血系統(tǒng)，使乳酸脫氫酶及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的含量有所增加，從而導(dǎo)致全身小動(dòng)脈痙攣，進(jìn)而出現(xiàn)子癇前期的一系列臨床表現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Chemerin與IL-6在子癇前期患者血清中的表達(dá)呈正相關(guān)且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這一結(jié)果與LehrkeM[5]等研究發(fā)現(xiàn)，Chemerin血清濃度與CRP、IL-6、TNF-a呈正相關(guān),且TNF-α、IL-6可以上調(diào)Chemerin的表達(dá)相符，表示Chemerin在子癇前期患者血清中的表達(dá)增加，Chemerin-ChemerinR系統(tǒng)通過(guò)活化炎癥細(xì)胞釋放IL-6、TNF-α等炎癥因子，致使炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，反之，IL-6 、TNF-α等炎癥因子使Chemerin表達(dá)增加，進(jìn)一步加強(qiáng)炎癥反應(yīng)，從而惡性循環(huán)導(dǎo)致出現(xiàn)子癇前期的一系列臨床表現(xiàn)。

綜上所述，Chemerin和IL-6均與子癇前期的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，但兩者之間具體的相互作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究，因此通過(guò)對(duì)孕婦血清中兩者的檢測(cè)，可為子癇前期的早期診斷、預(yù)測(cè)病情及早期治療提供新的路徑。

[1]謝幸，茍文麗主編.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013：64

[2]NagpalS,PatelS,JacobeH,etal.Tazarotene-inducedgene2 (TIG2),anovelretinoid-responsivegeneinskin[J].JInvestDernatol, 1997, 109(1):91-95

[3]田志剛,李康生.白介素一6與免疫異常疾病[J].上海免疫學(xué)雜志，1996，6:189

[4]呂敬媛,徐海蓮，陳鶴.Glycodelin與IL-17在子癇前期患者底蛻膜中的表達(dá)及相關(guān)性分析[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2012,35(1):8-10

[5]LehrkeM,BeckerA,GreifM,etal.Chemerinisassociatedwithmarkersofinflammationandcomponentsofthemetabolicsyndromebutdoesnotpredictcoronaryatherosclerosis[J].EurJEndocrinol,2009,161(2):339-344

陸瑤(1987～)女,黑龍江黑河人,在讀碩士研究生。

呂敬媛(1968～)女,黑龍江佳木斯人,碩士,副主任醫(yī)師,碩士研究生導(dǎo)師。 E-mail:luyao19870426@163.com。

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