SRC-3 和PAX2在乳腺浸潤癌組織中的表達 ①

周 昱，王 新，廉奇鑫

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院腫瘤科，黑龍江 佳木斯 154003)

SRC-3 和PAX2在乳腺浸潤癌組織中的表達①

周 昱，王 新，廉奇鑫

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院腫瘤科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：通過對女性乳腺癌癌旁正常組織、乳腺浸潤癌中PAX2與SRC-3相關蛋白分析是否相關并且有無臨床意義。方法：通過免疫組化SP法研究乳腺癌及正常組織中SRC-3，PAX2是否有表達。結果：SRC-3在乳腺浸潤癌中的陽性表達率為78.89%，在正常乳腺組織的陽性表達率為21.11%，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。PAX2在乳腺浸潤癌組織的陽性表達率為30.00%，在癌旁正常組織的陽性表達率為94.44%，其在癌旁正常組織的表達明顯高于乳腺浸潤癌組織中，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:SRC-3與PAX2可能是乳腺浸潤癌的不良預后因素；二者共同參與了乳腺癌細胞增殖、侵襲及轉移。

乳腺浸潤癌；SRC-3；PAX2

近年來，我國經(jīng)濟保持高速增長，中國和世界發(fā)達國家的對接能力越來越接近，無論是在經(jīng)濟還是民生或者醫(yī)療建設都有巨大的突破，在人民生活質量提高的今天，疾病已經(jīng)成為現(xiàn)代關注討論的熱詞，其中“乳腺疾病”的爆發(fā)率呈現(xiàn)擴散趨勢[1]。類固醇受體輔助活化因子-3(steroidreceptor-coaetivator-3SRC-3)[2]，由p160類固醇受體輔助活化因子SRC構成，定位于人染色體20q12[3]，在1997年Anzick等人尋找并發(fā)現(xiàn)了與乳腺癌有關的擴增基因SRC-3又名AIB-1(amplifiedinbreastcancer-1)、ACTR(activatorofthyroidhornone)、TRAM-1、NCoA3、RAC-3，以及P/CIP[4]。人類最初發(fā)現(xiàn)SRC-3是在人類乳腺癌染色體區(qū)域，SRC-3基因擴增過度表達與很多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有一定聯(lián)系，最常見的腫瘤是乳腺癌，其次卵巢癌、子宮內膜癌、胰腺癌和胃癌等。PAX家族中有一個因子PAX2(Pairedbox2)它以一個亞型的形式出現(xiàn)，而且學著研究出它定位于人類染色體10長臂25短臂上，它PAX家族一員特點包含高度保守的成對球型結構域的,在泌尿系統(tǒng)中PAX2編碼的轉錄因子起了重不可少的作用它不僅對泌尿生殖系統(tǒng)、而且對中樞神經(jīng)系統(tǒng)等重要器官的發(fā)生發(fā)展中起決定性作用,而且它也經(jīng)常出現(xiàn)在性腫瘤中。此次實驗在乳腺浸潤癌中SRC-3；PAX2是否有的表達及兩者之間有無意義，為乳腺癌早期診斷及預后提供科學依據(jù)。

1 資料與方法1.1 標本來源

收集我院2012-09～2015-09乳腺浸潤性癌組織標本，共90例，每例樣品分別于肉眼可見的淋巴結、手術切緣的正常乳腺組織及癌灶取材。其中60例患者無淋巴結轉移，30例患者有淋巴結轉移?；颊呔鶠榕?，年齡30～68歲，中位年齡49歲。腫瘤大小以最大截面剖開腫瘤后測得的最大橫徑為計，淋巴結轉移均由病理證實。TNM分期采用國際抗癌聯(lián)盟(UICC)2002年的分期系統(tǒng)分期。所有患者均有完整的臨床資料，包括年齡、一般情況、腫瘤大小、淋巴結狀態(tài)、疾病分期及脈管浸潤情況。

1.2 主要試劑

北京中杉生物技術有限公司購買SRC-3兔抗單克隆抗體以及PAX2兔抗單克隆抗體。

1.3 免疫組化

通過免疫組化SP法研究乳腺癌及正常組織中SRC-3；PAX2是否有表達。

1.4 結果判定

SRC-3蛋白主要位于細胞質，部分位于細胞膜，陽性者可見細胞質染色呈棕黃色顆粒，在腫瘤組織中呈彌漫或片狀分布。采用二級計分法: 根據(jù)陽性細胞所占5個以上高倍鏡視野比例計數(shù): <5%為0分； 5%～25%為1分；26%～50%為2分；>50%為3分。染色強度分類: 淡黃色為1分；黃或深黃色為2分； 褐或棕褐色為3 分。兩者計分相乘大于1 分為陽性。PAX2蛋白主要表達于細胞質，免疫組化結果可見細胞膜與細胞質分別呈猩紅色和暗紫色。以高倍鏡( 400×) 觀察5 個視野，每個視野觀察100個細胞。染色強度分級為: 陰性(-):細胞不顯色或顯色<25%；弱陽性(+):25%～50%細胞顯色；中度陽性() :51%～75%細胞顯色，著色較深；強陽性():>75%細胞顯色，著色深。弱陽性、中度和強陽性均記為陽性。所有免疫組化結果由兩位高年資病理醫(yī)師雙盲閱片，對于不一致的判定結果，經(jīng)討論后得出一致結果。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結果

本次90例病例均是女性，平均年齡為49歲，(30～68歲)。術前均未行放療和化療。腫瘤組織學分級Ⅰ級+Ⅱ級32例(35.56%)，Ⅲ級58例(64.44%)。無淋巴結轉移30例(33.33%)，有淋巴結轉移60例(66.67%)，其中15例(16.67%)患者轉移淋巴結都大于10枚。按照NCCN制定的乳腺癌TNM分期，Ⅰ期8例(8.89%)，Ⅱ期47例(52.22%)，Ⅲ期及以上35例(38.89%)，見表1。

表1 患者的一般資料

2.1SRC-3在癌旁正常組織、乳腺癌組織中的表達

SRC-3在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌的陽性染色于細胞質。SRC-3在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌組織中的陽性表達見表2。從表中可以看到SRC-3在癌旁正常組織中的陽性率為21.11%(19/90)，在浸潤癌組織中表達的陽性率為78.89%(71/90)，SRC-3蛋白在乳腺浸潤癌中的表達明顯高于癌旁正常組織，兩者差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 SRC-3在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌組織的表達

2.2PAX2在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌組織中的表達

PAX2在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌組織的陽性染色于細胞質。PAX2在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌中的陽性表達見表3。從表中可以看到PAX2在癌旁正常組織中的陽性率為94.44%(85/90)，在乳腺浸潤癌組織中表達的陽性率為30.00%(27/90)，PAX2蛋白在乳腺浸潤癌組織中的表達明顯低于癌旁正常組織組織，兩者差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表3 PAX2在癌旁正常組織、乳腺浸潤癌組織的表達

2.3SRC-3表達與乳腺癌淋巴結轉移的關系

如表4所示，SRC-3蛋白在無淋巴結轉移的乳腺癌中陽性表達率為63.33%(38/60)，SRC-3蛋白在有淋巴結轉移的乳腺癌組織中陽性表達率為93.33%(28/30)，兩實驗對照組組間比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表4 SRC-3表達與乳腺癌淋巴結轉移的關系

2.4PAX2表達與乳腺癌淋巴結轉移的關系

如表5所示，PAX2蛋白在無淋巴結轉移的乳腺癌中陽性表達率為38.33%(23/60)，PAX2蛋白在有淋巴結轉移的乳腺癌組織中陽性表達率為13.33%(4/30)，兩實驗對照組組間比較差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表5 PAX2與乳腺癌淋巴結轉移的關系

2.5SRC-3表達與PAX2表達的相關性分析

SRC-3表達與PAX2表達的相關性分析見表6；乳腺浸潤癌組織71例SRC-3陽性表達中有18例PAX2呈陽性表達；乳腺浸潤癌組織63例PAX2陰性表達中有10例SRC-3呈陰性表達；SRC-3表達與PAX2表達具有明顯的負相關性(r=-0.635，P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學意義。

表6 SRC-3表達與PAX2表達的相關性分析

3 討論

到現(xiàn)在為止，全球對乳腺癌的綜合治療已經(jīng)取得了廣泛的認識，目前國內外專家對乳腺癌治療必須原發(fā)灶以及控制全身轉移，還要兼顧功能和外形，注重人性化的綜合治理[5～7]。國內外研究顯示，在所有研究表名有31%～64% 的乳腺癌中呈高表達[8～10]。中國學者周濤等[11]研究表明，乳腺浸潤癌中SRC-3陽性表達率為54.59%。本研究發(fā)現(xiàn)，SRC-3 在乳腺浸潤癌中的陽性表達率為75.00%，該實驗結果明顯高于國外學者研究及國內學者周濤等的實驗結果，并且這幾個實驗都提示SRC-3的陽性表達率可能與乳腺癌病理類型有關，本次實驗有一次證明且證明了乳腺浸潤癌中SRC-3的陽性表達率可能更高。Silberstein[12]等人應用免疫組化法監(jiān)測PAX2發(fā)現(xiàn)38例乳腺浸潤癌患者表達水平呈低表達。發(fā)現(xiàn)腫瘤的惡性越高則陰性表達率越高，腫瘤組織學分級越低，則陽性表達率越高。本測試結果發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中該蛋白未發(fā)現(xiàn)PAX2表達的與其相關性(P=0.590)，最后分析可能跟數(shù)據(jù)樣本個數(shù)量不足有關。

PAX2、SRC-3在乳腺浸潤癌中的臨床意義、組織學類型、TNM分期在同一類腫瘤中，即使治療方案一樣，但對患者預后治療效果都是不一樣的，它們之間的差別被大部分學著認為是由于腫瘤分子生物學的本質是不同的。惡性腫瘤具有獨特的異型性，它們的形態(tài)盡管相同腫瘤的分子遺傳學卻千姿百態(tài)它們表達的水平也各有各樣，進而更進一步使腫瘤發(fā)生及其對預后差異較大。因此大部分學著期待在未來研究中對分子水平上的腫瘤進行分型并且研究，希望以后會更加明確的判斷惡性腫瘤生物學行為以及在預后的治療方案及個體化治療策略。

實驗樣本量僅有 90例，只能初步研究了PAX2、SRC-3在乳腺浸潤性癌中的表達、與臨床中的特征的關系、以及兩者的相關性，對乳腺浸潤癌的預后判斷提供了新的思路，但PAX2、SRC-3 在腫瘤形成過程中的明確的機制還不完善，還需要更深層次的實驗研究。

[1]王新，范立君，李壯,等.GRP78、GRP94在乳腺癌中的表達及其意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學，2014，37(6):89-91

[2]廉奇鑫,蘇俊強,王新.FBXW7和SRC-3在乳腺癌中的表達及臨床意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學,2015,38(3):72-74

[3]LahusenT,HenkeRT,KaganBL,etal.Theroleandregulationofthenuclearreceptorco-activatorAIB1inbreastcancer[J].BreastCancerResTreat,2009, 116:225-237

[4]ZhangH,YiX,SunX,etal.DifferentialgeneregulationbytheSRCfamilyofcoactivators[J].Genes&Devdopment,2004,18(14):1753-1765

[5]BeelenK.PI3K/AKT/mTORpathwayactivationinprimaryandcorrespondingmetastaticbreasttumorsafteradjuvantendocrinetherapy[J].IntJCancer，2009，135：1257-1263

[6]Beca,F.p-mTORexpressionisassociatedwithbetterprognosisinluminalbreastcarcinoma[J].JClinPathol，2014， 67： 961-967

[7]Andrade-VieiraR,GoguenD,BentleyHA,etal.Pre-clinicalstudyofdrugcombinationsthatreducebreastcancerburdenduetoaberrantmTORandmetabolismpromotedbyLKB1loss[J].Oncotarget, 2014，12738-12752

[8]IwaseH，OmotoY，ToyarnaT，etal．ClinicalsignificanceofAIB-1expressioninhumanbreastcancer[J]．BreastCancerResTreat，2003，80(3):339-345

[9]ShibataA，HayashiY，ImaiT，etal．SomaticgenealterationofAIB1geneinpatientswithbreastcancer[J]．EndocrJ，2001，48 (2):199-204

[10]BourasT，SoutheyMC，VenterDI．Over-expressionofthesteroidreceptorcoactivatorAIB-linbreastcancercorrelateswiththeabsenceofestrogenandprogesteronereceptorsandpositivityforp53andHER-2 /neu[J]．CancerRes，2001，61(3):903-907

[11]周濤，李云濤，范忠林． 乳腺癌組織中AIB-1 蛋白表達與臨床病理指標的相關性[J]． 腫瘤防治研究，2009，36( 9) : 750-753

[12]GaryBSilberstein.ExpressionofthePAX2oncogeneinhumanbreastcanceranditsroleinprogesterone-dependentmammarygrowth[J].Oncogene,2002,21:1009-1016

1.黑龍江省青年基金批準號，編號：QC2013C013；2.佳木斯大學青年基金，編號：sq2013-013。

周昱(1969～)男，黑龍江雙鴨山人，本科，副主任醫(yī)師，副教授，碩士研究生導師。

王新(1963～ )男，黑龍江佳木斯人，碩士，主任醫(yī)師，教授，碩士研究生導師。E-mail:1502136777@qq.com。

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1008-0104(2017)01-0048-02

2015-11-20)