東北地區(qū)鹿源大腸桿菌耐藥性的檢測

薛 原 ， 王曉菲 ， 劉偉石

(東北林業(yè)大學(xué)野生動物資源學(xué)院 ， 黑龍江哈爾濱150040)

東北地區(qū)鹿源大腸桿菌耐藥性的檢測

薛 原 ， 王曉菲 ， 劉偉石

(東北林業(yè)大學(xué)野生動物資源學(xué)院 ， 黑龍江哈爾濱150040)

對東北地區(qū)鹿源大腸桿菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，開展耐藥性調(diào)查。采用紙片擴(kuò)散法測定各分離菌株對22種抗生素的敏感性。結(jié)果表明：鹿源大腸桿菌各分離株對各種抗生素的敏感性不同。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強(qiáng)力霉素的耐藥率均在60%以上，對氨曲南和亞胺培南敏感率均在90%以上。

大腸桿菌 ； 耐藥性 ； 藥敏試驗(yàn)

鹿科動物是最有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的動物種群之一。中國是世界上鹿類資源最豐富的國家之一。隨著抗菌藥物在臨床上的普遍應(yīng)用，加上使用不規(guī)范或使用方法不當(dāng)，使得耐藥性菌株不斷出現(xiàn)，對鹿源大腸桿菌進(jìn)行耐藥性的檢測具有重要意義。國內(nèi)外對家畜家禽的耐藥性報(bào)道有很多,但對鹿源大腸桿菌的耐藥性研究卻很少[1-2]。本試驗(yàn)以東北地區(qū)鹿源大腸桿菌為研究對象，進(jìn)行了耐藥性的分析，掌握其大腸桿菌流行情況，旨在為抗菌藥物的正確使用和控制耐藥性提供重要的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 藥敏質(zhì)控菌株大腸桿菌ATCC 25922，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。試驗(yàn)用大腸桿菌于2015年6～12月從黑龍江、吉林、遼寧的鹿養(yǎng)殖場分離大腸桿菌150株。分離菌株用于藥敏試驗(yàn)。

1.1.2 培養(yǎng)基 杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)，批號151023 ： 普通瓊脂和水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(Mueller-Hinton,MH)。

1.1.3 藥敏紙片 共22種藥敏片，均購自杭州天和微生物試劑有限公司和OXIOD公司。包括β-內(nèi)酰胺類：阿莫西林/克拉維酸鉀(AMC)、阿莫西林(AMX)、氨芐西林(AMP)、氨曲南(ATM)、頭孢他啶(CAZ)、頭孢噻吩(KF)、亞胺培南(IPM)；氨基糖苷類：阿米卡星(AK)、慶大霉素(CN)、卡那霉素(K)、新霉素(NEO)、安普霉素(APR)；喹諾酮類： 諾氟沙星(NOR)、恩諾沙星(ENR)、環(huán)丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFX)；四環(huán)素類：強(qiáng)力霉素(DO)、四環(huán)素(TE)；磺胺類：復(fù)方新諾明(SXT)；氯霉素類：氯霉素(C)、氟苯尼考(FFC)；多肽類：多黏菌素B(PB)。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗(yàn) 采用WHO推薦的Kirby-Bauer法[3]。依據(jù)CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，只有當(dāng)質(zhì)控菌株的抑菌圈直徑在允許范圍內(nèi)測試菌株結(jié)果才有效。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 按抗菌藥物敏感性試驗(yàn)擴(kuò)散法標(biāo)準(zhǔn)[4]判定各菌株的敏感度，對所分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。以敏感(Susceptible)、中介(Intermediate)、耐藥(Resistant)3種形式對抑菌圈大小作出判定。

2 結(jié)果

2.1 大腸桿菌的耐藥性 150株鹿源大腸桿菌均可產(chǎn)生耐藥性。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強(qiáng)力霉素的耐藥率均在60%以上，對氨曲南和亞胺培南敏感率均在90%以上

2.2 大腸桿菌的多重耐藥性 150株受試鹿源大腸桿菌對22種抗菌藥物均存在耐藥性。4耐菌株所占比例最大為22%。分離菌株存在耐藥現(xiàn)象，最少為1種，最多為13種(見圖2)。

3 討論

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，在抗菌藥物的選擇壓力下，細(xì)菌不斷發(fā)生耐藥性變異。目前我國畜禽大腸桿菌耐藥性嚴(yán)重而復(fù)雜，對大多數(shù)抗菌藥物都已經(jīng)產(chǎn)生了耐藥性。閉興明報(bào)道[2]，鹿源致病性大腸桿菌對抗生素的耐藥性以多重耐藥為主。這與規(guī)模化鹿場由于疾病的壓力而大量使用抗生素， 細(xì)菌的耐藥性通過染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)在細(xì)菌間傳播和擴(kuò)散有關(guān)。

受試鹿源大腸桿菌對試驗(yàn)所采用的22種抗生素均有不同程度耐藥性。其中最少的耐藥1種，最多的耐藥13種。150株耐藥大腸桿菌中耐4種抗生素的占22%。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強(qiáng)力霉素的耐藥率較高。這與梅妹等報(bào)道相似[1]。2002 年中國已經(jīng)禁止氯霉素用于食品動物，但是值得注意的是仍有19.46%的檢測菌株對氯霉素耐藥，這個耐藥表型的流行可能與攜帶cmlA基因的質(zhì)粒廣泛傳播有關(guān)[5]。受試大腸桿菌對亞胺培南敏感性相對較高，敏感比例達(dá)到99.3%。在動物飼養(yǎng)過程中抗生素的不規(guī)范使用或?yàn)E用，從而導(dǎo)致大腸桿菌的多重耐藥，這將會對人畜大腸桿菌病的控制產(chǎn)生不利影響，應(yīng)引起高度重視。為控制耐藥性大腸桿菌的發(fā)展，應(yīng)加強(qiáng)對其耐藥性監(jiān)測力度。

[1] 梅妹,范君文,鄧旭明,等.長春地區(qū)鹿源性大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008,24(8 ):11-16.

[2] 閉興明 ,飄周,白春蘭,等. 中國鹿源性大腸桿菌的耐藥性監(jiān)測及血清定型[J]. 云南畜牧獸醫(yī)，2008,1:8-10.

[3] Khan A , Dass C , Ramamurthy T ,etal. Antibiotic resistance ,virulence gene , and molecular profiles of Shiga toxin producingEscherichiacoliisolates from diverse sources in calcutta [J ] .India J Clin Microbiol , 2002 , 40 (6) : 2009-2015.

[4] Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[C] 16th informational supplement.Document M100-S16 , Wayne ,PA :CLSI, 2009:15-19 .

[5] Schroeder C M, Zhao C, DebRoy C,etal. Antimicrobial resistance of Escherichia coli O157 isolated from humans, cattle, swine,and food. Appl. Environ[J]. Microbiol,2002,68(2):576-581.

2016-01-18

國家自然科學(xué)基金(31502119)；黑龍江省博士后科研啟動金(LBH-Q14002)；中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(2572015CA21)

薛原(1978—)，女，講師，博士，主要從事細(xì)菌耐藥性方面的研究.E-mail:xueyuan-1978@163.com

S852.61

B

0529-6005(2017)02-0084-02