Sysmex XN-9000血液分析儀前體白細(xì)胞通道(WPC)原始/異常淋巴細(xì)胞報(bào)警可靠性的評價(jià)

洪俊，饒永彩

(1.武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430060；2.武漢生物制品所，武漢 430060)

·臨床檢驗(yàn)技術(shù)研究·

Sysmex XN-9000血液分析儀前體白細(xì)胞通道(WPC)原始/異常淋巴細(xì)胞報(bào)警可靠性的評價(jià)

洪俊1，饒永彩2

(1.武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430060；2.武漢生物制品所，武漢 430060)

目的 評價(jià)Sysmex XN-9000血液分析儀(簡稱“XN-9000”)前體白細(xì)胞通道(WPC)檢測外周血觸發(fā)WBC報(bào)警的可靠性。方法 采用與手工血涂片白細(xì)胞形態(tài)鏡檢結(jié)果比對的方法，復(fù)核520例分別經(jīng)Sysmex XE-2100血液分析儀(簡稱“XE-2100”)和XN-9000檢測觸發(fā)WBC報(bào)警的標(biāo)本，按報(bào)警種類統(tǒng)計(jì)判讀結(jié)果。結(jié)果 XN-9000 WPC通道的Blast(原始細(xì)胞)報(bào)警比XE-2100特異性高(χ2=6.98,P<0.05)，XN9000將假陽性率從XN2100的64%降低至36%(χ2=6.18，P<0.05)。XN-9000 WPC的Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細(xì)胞)綜合有效率90.4%、94.4%，高于XE2100的72.2%和80.1%(χ2分別為5.6、6.33，P均<0.05)。在WPC通道自動(dòng)復(fù)測模式下，在所有被檢標(biāo)本 (體驗(yàn)健康者和患者，包括新生兒)中，WPC通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的特異性和總有效率高于WDF(χ2=6.15、4.14、6.02、4.88，P<0.05)，降低了WDF通道誤報(bào)率；XN-9000(WDF/WPC)總報(bào)警復(fù)片率低于XE-2100(χ2=4.33，P<0.05)；而XN-9000(WDF/WPC)Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的復(fù)片率為32%(84/260)，低于XE-2100的41%(107/260)(χ2=4.38，P<0.05)。結(jié)論 XN-9000 WPC通道相較于XE-2100，提高了Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的綜合有效性，降低了誤報(bào)率和復(fù)片率，提高了臨床實(shí)驗(yàn)室的工作效率。

血液分析儀；白細(xì)胞；前體白細(xì)胞通道

標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果周轉(zhuǎn)時(shí)間(TAT)是評價(jià)臨床實(shí)驗(yàn)室服務(wù)質(zhì)量的重要指標(biāo)[1-3]。血常規(guī)標(biāo)本復(fù)片率高低直接影響TAT長短；血液分析儀白細(xì)胞報(bào)警信號(hào)是血常規(guī)標(biāo)本復(fù)片的重要參考信息之一，其可靠性直接影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果TAT和臨床服務(wù)質(zhì)量。XN-9000血液分析儀(Sysmex公司，以下簡稱“XN-9000”)在白細(xì)胞分類通道(WDF)基礎(chǔ)上增加了1個(gè)白細(xì)胞前體通道(WPC)，能對白細(xì)胞群完成較高精度的分析。XN-9000綜合了2個(gè)通道檢測結(jié)果，其白細(xì)胞報(bào)警信號(hào)的可靠性是否提高，國內(nèi)尚無相關(guān)臨床研究報(bào)道。本研究采用與手工血涂片白細(xì)胞形態(tài)鑒別與計(jì)數(shù)對比的方法評價(jià)XE-2100血液分析儀(Sysmex公司，以下簡稱“XE-2100”)和XN-9000異常白細(xì)胞報(bào)警的可靠性和有效性，并評價(jià)使用WPC通道的XN-9000能否通過降低白細(xì)胞誤報(bào)警率來減少臨床標(biāo)本的復(fù)片率。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2015年1月至2016年6月本院住院和門診患者EDTA-K2抗凝血標(biāo)本520例，包括192例健康者和328例患者(包括骨髓增生異常綜合征、鐮狀細(xì)胞病、噬血細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多癥、特發(fā)性血小板減少性紫癜患者接受化療或造血干細(xì)胞移植、敗血癥或腎功能衰竭、術(shù)后患者和其他類型白血病)。520例中含57例新生兒?；颊邩?biāo)本主要用于評價(jià)XN-9000 WPC通道報(bào)警的有效性。

1.2 XE-2100、XN-9000檢測外周血標(biāo)本白細(xì)胞數(shù)量和分類 取研究對象外周血標(biāo)本，測試項(xiàng)目選擇“CBC”、“Diff”，XN-9000加選“WPC”。WPC分析可采用手動(dòng)設(shè)定和自動(dòng)復(fù)測分析[即只有WDF通道產(chǎn)生Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警時(shí)才觸發(fā)WPC通道進(jìn)行二次分析]2種模式，WPC分析后校正WDF報(bào)警，結(jié)果有3種：(1)Blast(原始細(xì)胞)；(2)Abn Lympho(疑似異常淋巴細(xì)胞)；(3)刪除初始報(bào)警。因XN-9000僅WPC通道有2種分析模式，而WDF通道只有自動(dòng)分析1種分析模式，所以在評價(jià)WPC通道時(shí)將標(biāo)本平均分成2組，260例為手動(dòng)預(yù)先設(shè)定WPC測定，260例為WPC自動(dòng)復(fù)測分析。

1.3 人工光學(xué)顯微鏡下血涂片白細(xì)胞鏡檢 由本實(shí)驗(yàn)室具備形態(tài)學(xué)分析資質(zhì)的檢驗(yàn)技師按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》方法判讀上述血涂片2次。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。率的比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 XE-2100和XN-9000 WDF通道WBC報(bào)警有效性 結(jié)果見表1。二者綜合有效率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。但XN-9000 WDF通道Atypical lympho(異型淋巴細(xì)胞)報(bào)警的敏感性高于XE-2100(χ2=6.13，P<0.05)。

表1 XE-2100和XN-9000(WDF) WBC報(bào)警有效性評價(jià)

2.2 XE-2100和XN-9000 WPC通道手動(dòng)預(yù)先設(shè)定摸式下WBC報(bào)警的有效性 結(jié)果見表2。XN-9000 WPC通道Blast(原始細(xì)胞)報(bào)警的特異性高于XE-2100(χ2=6.98，P<0.05)；假陽性率為36%(24/67)，低于XE-2100的64%(68/106)(χ2=6.18，P<0.05)；而假陰性和敏感性分別為0.51%(1/193)和97.5%，與XE-2100的3.2%(5/154)和89.3%差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為0.20、0.31，P均>0.05)。

XN-9000 WPC的Blast(原始細(xì)胞)、Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)綜合有效率(90.4%和94.4%)高于XE-2100(72.2%和80.1%)(χ2別為5.6、6.33，P均<0.05)。XN-9000的Atypical lympho(異型淋巴細(xì)胞)報(bào)警均來自WDF通道，二者Atypical lympho(異型淋巴細(xì)胞)的比對結(jié)果與表1一致(P>0.05)。

表2 XE-2100和XN-9000(WPC)手動(dòng)預(yù)設(shè)摸式下WBC報(bào)警有效性評價(jià)

注：*，包括Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細(xì)胞)。

2.3 XN-9000 WPC自動(dòng)復(fù)測分析模式下的WDF和WPC通道WBC報(bào)警有效性 根據(jù)XN-9000 WPC檢測原理，260例標(biāo)本中有128例觸發(fā)了WPC通道自動(dòng)復(fù)測分析，結(jié)果見表3。在所有被檢測標(biāo)本(體檢健康人和患者，包括新生兒)中，與WDF通道相比，WPC 通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的特異性和總有效率均提高(χ2分別為6.15、4.14、6.02、4.88、5.66，P均<0.05)，WDF通道誤報(bào)率明顯降低。

表3 XN-9000 WDF通道和WPC通道自動(dòng)分析模式WBC報(bào)警有效性評價(jià)

注：*，包括體檢健康者和患者；**，無真陽性標(biāo)本。

2.4 復(fù)片率 按照WBC報(bào)警手工復(fù)片原則，XN-9000(WDF/WPC)總報(bào)警復(fù)片率32%(166/520)，低于XE-2100的38%(198/520)，χ2=4.33，P<0.05；而Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警，XN-9000(WDF/WPC)的復(fù)片率32%(84/260)，低于XE-2100的復(fù)片率41%(107/260)，χ2=4.38，P<0.05。

3 討論

研究資料顯示，因血液分析儀WBC報(bào)警所致復(fù)片占總復(fù)片量的30%[4]，而儀器WBC報(bào)警中部分經(jīng)復(fù)片證實(shí)為誤報(bào)。因此，如果能提高WBC報(bào)警的準(zhǔn)確性，將減少不必要的復(fù)片從而縮短TAT。

XN-9000分析白細(xì)胞在原有WDF通道基礎(chǔ)上增加了WPC通道。在自動(dòng)復(fù)測模式下，當(dāng)WDF通道報(bào)警時(shí)激活WPC通道以進(jìn)一步分析標(biāo)本，修正WDF的報(bào)警結(jié)果。WPC原理是采用WPC試劑lysercell溶解白細(xì)胞膜上脂質(zhì)讓熒光染料fluorocell滲入細(xì)胞從而使細(xì)胞核DNA染色。因未成熟細(xì)胞的細(xì)胞膜(如原始細(xì)胞)比正常成熟或反應(yīng)性細(xì)胞的細(xì)胞膜有更低的脂質(zhì)含量，從而導(dǎo)致不同細(xì)胞吸收的染料和產(chǎn)生的熒光信號(hào)存在差異，使原始細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞和正常白細(xì)胞被分離和鑒定。此外，較以往的血液分析儀，XN-9000的WDF通道還采用了改進(jìn)的溶血?jiǎng)?，能提高淋巴?xì)胞和單核細(xì)胞區(qū)分能力。但這些改變在臨床上是否真正有效，目前國內(nèi)尚缺乏足夠的相關(guān)臨床資料予以證實(shí)。

本研究結(jié)果顯示，僅用XN-9000 WDF通道時(shí)XE-2100和XN-9000(WDF)Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的綜和有效性基本一致，見表1。而Atypical lympho(異型淋巴細(xì)胞)報(bào)警，XN-9000(WDF)的敏感性高于XE-2100近兩倍，且XN-9000(WDF)假陽性報(bào)警并沒有明顯增加；可能與XN-9000(WDF)使用了改進(jìn)的溶血?jiǎng)┯嘘P(guān)，與國外的相關(guān)報(bào)道一致[5-6]。

XN-9000 WPC通道手動(dòng)預(yù)先設(shè)定摸式下，XN-9000 Blast(原始細(xì)胞)報(bào)警的特異性優(yōu)于XE-2100；相較于XE-2100，XN-9000 WPC假陽性減少，敏感性提高。XN-9000 WPC僅有1例Blast(原始細(xì)胞)假陰性報(bào)警，該病例后被確診為急性前體B細(xì)胞淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)早期復(fù)發(fā)，血膜復(fù)片鏡檢可見9%小淋巴母細(xì)胞(形態(tài)與成熟淋巴細(xì)胞相似)；而XE-2100有5例假陰性。在Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)報(bào)警方面，XN-9000 WPC較XE-2100也有明顯優(yōu)勢，見表2。需要說明的是，由于XE-2100不能將Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)單獨(dú)從Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細(xì)胞)單獨(dú)區(qū)分開來，而XN-9000可以。因此，二者無法真正有效對比Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)報(bào)警。

根據(jù)制造商的報(bào)警定義，儀器Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)報(bào)警是特指腫瘤性淋巴細(xì)胞；最近一份關(guān)于血細(xì)胞形態(tài)識(shí)別的歐洲共識(shí)報(bào)告明確指出應(yīng)避免使用Abn Lympho(異常淋巴細(xì)胞)，建議在描述與正常形態(tài)有差異細(xì)胞的時(shí)應(yīng)采用“atypical lymphocytes，suspect reactive”(非典型淋巴細(xì)胞疑似反應(yīng)性增生)或“atypicallymphocytes，suspect neoplastic”(非典型性淋巴細(xì)胞疑似惡性增生)[7]。盡管當(dāng)前關(guān)于此命名還有部分爭議，本研究認(rèn)為儀器軟件細(xì)胞形態(tài)報(bào)警提示名稱應(yīng)采納和接受淋巴細(xì)胞國際命名指南，以便于使報(bào)警命名更準(zhǔn)確和科學(xué)，同時(shí)也便于國際交流。

在XN-9000 WPC的自動(dòng)復(fù)測分析模式下(此種方式更貼近臨床實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際使用方式) 與自身WDF通道比較結(jié)果表明，WPC通道提高了WDF Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警的特異性(見表3)，降低了WDF道的誤報(bào)率，且敏感性與WDF一致；在Atypical lympho(異型淋巴細(xì)胞)報(bào)警方面，二者差異雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但WPC無論在敏感性還是在特異性上都比WDF有提高。

國外研究表明[8-9]住院新生兒外周血中含有0.5%～6%(重癥嬰幼兒的比例可能更高)的形態(tài)與淋巴母細(xì)胞十分相似的B祖細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞(haematogone-like lymphocytes，HLL)[10]，而這種細(xì)胞極易引起血液分析儀的假陽性報(bào)警[11]。鑒于此，本研究對比分析新生兒標(biāo)本的測定數(shù)據(jù)，結(jié)果與成人一樣，WPC通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警特異性顯著提高(表3)，有利于嬰幼兒標(biāo)本的檢測。

XE-2100和XN-9000總復(fù)片率結(jié)果顯示：XN-9000(WDF/WPC)總報(bào)警復(fù)片率低于XE-2100;而Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報(bào)警，XN-9000(WDF/WPC)的復(fù)片率低于XE-2100近9個(gè)百分點(diǎn)，而敏感性卻無影響，對于血常規(guī)日平均測試量近千例的大型綜合性醫(yī)院而言，其復(fù)片量減少相當(dāng)可觀。

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(本文編輯：海燕)

Reliability evaluation of the blast/abnormal lymphocyte alarm tested through white precursor cell (WPC) channel on the Sysmex XN-9000 analyzer

HONGJun1,RAOYong-cai2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan430060,Hubei; 2.WuhanInstituteofBiologicalProducts,Wuhan430060,Hubei,China)

Objective To evaluate the reliability of the white precursor cell (WPC) channel on the Sysmex XN-9000 hematology analyzer (XN-9000) in giving the abnormal white blood cell (WBC) alarm. Methods A total of 520 blood samples with abnormal WBC alarm from the Sysmex XE-2100 (XE-2100) and XN-9000 were performed the manual peripheral blood smear review, and their results were analyzed. Results The specificity of the XN-9000 WPC channel in the blast alarm was significantly higher than that of XE-2100 (χ2=6.98,P<0.05), while the false positive rate of the XN-9000 (36%) significantly lower than that of XE-2100 (64%,χ2=6.18,P<0.05). The overall efficiency of the XN-9000 WPC channel in identifying blasts and abnormal lymphocytes (90.4% and 94.4%) was significantly higher than that of the XE-2100 (72.2% and 80.1%,χ2=5.6 and 6.33,P<0.05). Under the automatic reflex analysis mode of WPC channel, the specificity and overall efficiency of the WPC channel in identifying blasts and abnormal lymphocytes of all the detected samples were significantly higher than those of the WDF channel (χ2=6.15, 4.14, 6.02 and 4.88,P<0.05). The total review rate of the XN-9000 (WDF/WPC) was significantly lower than that of the XE-2100 (χ2=4.33,P<0.05). Similarly, the review rate of the XN-9000 for the blast/abnormal lymphocyte alarm (84/260, 32%) was significantly lower than that of the XE-2100 (107/260, 41%) (χ2=4.38,P<0.05). Conclusion Compared with the XE-2100, the XN-9000 WPC channel can improve the overall efficiency of the blast/abnormal lymphocyte alarm, reduce the false positive rate and the review rate, and then improve the efficiency of clinical laboratories.

hematology analyzer; white blood cell; white precursor cell channel

10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.05

洪俊，1973年生，男，副主任技師，博士，主要從事臨床免疫及血液學(xué)研究。

R446

A

2016-12-26)