慢性乙型肝炎病毒感染者血清流行病學研究

陳紅英，丁 潔，游 晶

·論著·

慢性乙型肝炎病毒感染者血清流行病學研究

陳紅英，丁 潔，游 晶*

背景 隨著慢性乙型肝炎(CHB)臨床治愈的提出及研究，乙型肝炎病毒(HBV)血清免疫標志物和HBV DNA載量檢測可以為其治療提供依據(jù)。目的 探討慢性HBV感染者血清學模式及其與HBV DNA載量之間的關系。方法 選取2015年3—12月就診于昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染科門診、住院的HBV DNA載量陽性的慢性HBV感染者2 425例為研究對象，采用ARCHITECT i2000SR全自動免疫發(fā)光分析儀檢測HBV血清免疫標志物，采用PGQ-PCR擴增儀檢測HBV DNA載量。分別以1、2、3、4、5代表乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗體(HBeAb)、乙型肝炎核心抗體(HBcAb)，分析其血清學模式。結果 2 425例慢性HBV感染者共有7種血清學模式，所占比例>1.00%的血清學模式有5種：“1、3、5”“1、4、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式分別占55.05%、37.69%、3.26%、1.86%、1.53%；“1、2、4、5” 和“2、4、5” 模式分別占0.53%和0.08%。5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡、HBV DNA載量比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡構成比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=266.625，P<0.001)?！?、3、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式主要發(fā)生于21～30歲及31～40歲，“1、4、5”模式主要發(fā)生于31～40歲及41～50歲?！?、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg呈正相關，與HBcAb呈負相關(P<0.05)；HBsAg與HBeAg呈正相關(P<0.05)?！?、4、5”“1、3、4、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBeAg、HBcAb呈正相關(P<0.05)?！?、2、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg、HBcAb呈正相關，HBsAg與HBeAg呈正相關(P<0.05)。結論 在HBV DNA載量陽性的慢性HBV感染者中，存在7種血清學模式，以“1、3、5”和“1、4、5”模式為主，5種主要血清學模式患者年齡和HBV DNA載量均存在差異。

乙型肝炎病毒；病毒載量；血清流行病學研究

陳紅英，丁潔，游晶.慢性乙型肝炎病毒感染者血清流行病學研究[J].中國全科醫(yī)學，2017，20(8)：939-942，947.[www.chinagp.net]

CHEN H Y，DING J，YOU J.Seroepidemiologic study of chronic HBV-infected patients[J].Chinese General Practice，2017，20(8)：939-942，947.

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染呈世界性流行，據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球約20億人感染HBV，其中2.4億人為慢性HBV感染者[1]。HBV血清免疫標志物主要包括乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(hepatitis B surface antibody，HBsAb)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)、乙型肝炎e抗體(hepatitis B e antibody，HBeAb)、乙型肝炎核心抗體(hepatitis B core antibody，HBcAb)，與HBV DNA載量聯(lián)合，是臨床上診斷與分析HBV感染的重要指標?；瘜W發(fā)光法在HBV血清免疫標志物檢測中具有靈敏度高、線性寬、影響因素少、結果準確等優(yōu)點[2-3]，近年來應用越來越多。本研究采用ARCHITECT i2000SR全自動免疫發(fā)光分析儀檢測HBV血清免疫標志物，同時檢測HBV DNA載量，分析慢性HBV感染者的血清流行病學特點。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年3—12月就診于昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染科門診、住院行HBV血清免疫標志物檢測，同時HBV DNA載量陽性的慢性HBV感染者為研究對象。納入和剔除標準：(1)HBV DNA載量可檢測到，同時為陽性；(2)同姓名同年齡者采納第一次檢測結果；(3)剔除1歲以下兒童(考慮到母親HBV血清免疫標志物陽性可能對嬰幼兒檢測結果產(chǎn)生影響)；(4)剔除檢測結果在灰區(qū)的標本[4]。符合納入和剔除標準者共2 425例，其中男1 596例，女 829例；年齡1～91歲，平均年齡(34.9±12.1)歲。

1.2 儀器與試劑 HBV血清免疫標志物檢測采用ARCHITECT i2000SR全自動免疫發(fā)光分析儀(美國雅培公司)，并使用配套化學發(fā)光法試劑，試驗均使用配套標準品及質控品進行定標、質量控制。HBV DNA載量采用PGQ-PCR擴增儀(德國凱杰公司)，使用凱杰生物工程(深圳)有限公司的HBV核酸定量檢測試劑盒，并在有效期內使用，試驗均使用配套標準品及質控品進行定標、質量控制。

本研究背景：

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染肝臟引起的對生命有潛在危害的疾病，是重要的全球性問題。因此對慢性乙型肝炎治愈方法的研究是一項重要的課題。目前隨著科技的進步，提出了對慢性乙型肝炎患者“臨床治愈”的概念，即停止治療后持續(xù)的病毒學應答、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)消失、并伴有丙氨酸氨基轉移酶(ALT)恢復至參考范圍和肝組織學的改善。因此在治療過程中，需要定時監(jiān)測HBV DNA載量、HBV血清免疫標志物和ALT，綜合性地觀察療效，選擇合適的治療方案，盡可能地追求慢性乙型肝炎的臨床治愈。不同的血清學模式可以反映HBV在機體活動的狀況，結合HBV DNA載量和ALT可以為治療方案的選擇提供依據(jù)。在臨床工作中不常見的血清學模式常被忽視，本研究基于HBV DNA載量陽性，歸納總結了不同的血清學模式及其相關性，以期為臨床研究及治療提供參考。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集 采用威高紅色促凝真空試管采集患者晨起肘靜脈血2～3 ml，并及時檢測。

1.3.2 陽性臨界值 HBV血清免疫標志物HBsAg和HBsAb分別以U/ml、mU/ml為單位，HBsAg≥0.05 U/ml為陽性，HBsAb≥10 mU/ml為陽性；HBeAg以PEIU/ml為單位，HBeAg≥0.18 PEIU/ml為陽性；HBeAb和HBcAb以S/CO為單位，HBeAb以≤1 S/CO為陽性，HBcAb以≥1 S/CO為陽性。HBV DNA載量以U/ml為單位，以≥100 U/ml為陽性。

1.3.3 血清學模式 對HBV血清免疫標志物按習慣方式進行表述，分別以1、2、3、4、5代表HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，并以陽性項目出現(xiàn)的序號作為該模式代表。如某份標本的檢測結果為HBsAg陽性、HBsAb陰性、HBeAg陽性、HBeAb陰性、HBcAb陽性，則該模式表述代碼為“1、3、5”模式[5]。

2 結果

2.1 血清學模式 2 425例慢性HBV感染者共有7種血清學模式，以“1、3、5” 模式和“1、4、5”模式為主，分別占55.05%和37.69%。所占比例>1.00%血清學模式有5種；“1、2、4、5” 模式和“2、4、5” 模式分別占0.53%和0.08%(見表1)。5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡、HBV DNA載量比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，見表2)。

2.2 5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡構成比較 5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡構成比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=266.625，P<0.001)。“1、3、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式主要發(fā)生于21～30歲及31～40歲，“1、4、5” 模式主要發(fā)生于31～40歲及41～50歲(見表3)。

2.3 相關性分析 “1、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg呈正相關，與HBcAb呈負相關(P<0.05)；HBsAg與HBeAg呈正相關(P<0.05)?！?、4、5”“1、3、4、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBeAg、HBcAb呈正相關(P<0.05)?！?、2、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg、HBcAb呈正相關，HBsAg與HBeAg呈正相關(P<0.05，見表4)。

表1 慢性HBV感染者血清學模式(n=2 425)

注：HBsAg=乙型肝炎表面抗原，HBsAb=乙型肝炎表面抗體，HBeAg=乙型肝炎e抗原，HBeAb=乙型肝炎e抗體，HBcAb=乙型肝炎核心抗體

表2 5種主要血清學模式慢性HBV感染者性別、年齡、HBV DNA載量比較

注：HBV=乙型肝炎病毒；a為χ2值，b為F值，余檢驗統(tǒng)計量值為H值

表4 5種主要血清學模式慢性HBV感染者HBV DNA載量和HBV血清免疫標志物相關性分析(r值)

注：a為P<0.05

表3 5種主要血清學模式慢性HBV感染者年齡構成比較〔n(%)〕

3 討論

有關慢性HBV感染者血清學模式的各種文獻報道不一，本研究共檢出7種血清學模式，與高衛(wèi)亞等[5]報道的HBsAg陽性13種血清學模式不完全一致，但是主要以“1、3、5” “1、4、5”模式為主是一致的。5種主要血清學模式慢性HBV感染者在性別上沒有差異，與王景鴻等[6]報道的HBsAg陽性率存在性別差異不同，但是年齡具有差異，與HBsAg陽性率存在年齡差別[5-6]是一致的。表明HBV DNA載量與HBsAg在臨床診斷中的作用是有差異的。

臨床上將“1、3、5”模式(即傳統(tǒng)的“大三陽”)轉變?yōu)椤?、4、5”模式(即傳統(tǒng)的“小三陽”)稱為HBeAg/HBeAb血清學轉換。文獻報道，自發(fā)性HBeAb血清學轉換的平均年齡為(31.1±7.0)歲，在26歲前發(fā)生的概率為26.5%，40歲前累計為90%[7]。同時有學者報道，在40歲前實現(xiàn)HBeAg血清學轉換的患者肝硬化的發(fā)生率顯著降低，否則將增加肝硬化、肝細胞癌(HCC)發(fā)生的風險[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，“1、3、5”模式慢性HBV感染者41～50歲、51～60歲、>60歲分別占12.44%、4.50%、1.72%。對于此類患者應盡早治療，并增加肝硬化和HCC(尤其有肝硬化和HCC家族史)實驗室及影像學相關指標監(jiān)測，必要時行肝組織活檢。

本研究發(fā)現(xiàn)，慢性HBV感染者中“1、3、5”模式所占比例最大，這可能與云南地區(qū)居民對乙型肝炎缺乏較深層次的認識有關[9]?！?、3、5”模式多為急性乙型肝炎，患者體內HBV復制活躍，傳染性較強，應積極治療，并防止傳染給他人[10]。本研究還發(fā)現(xiàn)，“1、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg呈正相關，與HBcAb呈負相關；HBsAg與HBeAg呈正相關，臨床中應進行聯(lián)合檢查及隨訪。“1、4、5”模式一般為急性乙型肝炎趨向恢復或慢性乙型肝炎攜帶，隨著血清中HBeAb的出現(xiàn)，常伴隨著HBeAg血清學轉陰，HBV的復制減低甚至轉陰，傳染性下降。本研究中“1、4、5”模式慢性HBV感染者占37.69%，且各項指標的相關性不佳，可能與HBV基因發(fā)生變異有關[11]，因此對于此類患者應定期進行監(jiān)測。另有文獻報道，“1、4、5”模式慢性HBV感染者是肝癌的高危人群，更要警惕HCC的發(fā)生，應重視該人群的定期體檢和復查[12]。本研究還檢測出了2例“2、4、5”模式慢性HBV感染者，1例HBV DNA載量為3.70×103U/ml；另1例HBV DNA載量為4.03×102U/ml，更值得注意的是，這例患者的HBsAb>1 000 mU/ml，因此在臨床中，發(fā)現(xiàn)3個抗體陽性的患者應建議完善高精度的HBV DNA載量檢測。

2015年《慢性乙型肝炎防治指南》指出，對于部分適合的患者應盡可能追求臨床治愈，即停止治療后持續(xù)的病毒學應答、HBsAg消失、并伴有ALT恢復至參考范圍和肝臟組織學改善[13]。因此，對于慢性乙型肝炎患者應定期進行血清免疫標志物、高精度的HBV DNA載量、肝臟生化和肝纖維化掃描檢查，及時評估患者情況，選擇正確的治療時機及正確的治療方案，以達到臨床治愈。另外對于少發(fā)的血清學模式，應進行HBV DNA載量檢測，排除隱匿性慢性HBV感染。本文存在不足之處是未結合ALT和肝組織學進行分析，這也將是本課題下一步進行的研究。

作者貢獻：陳紅英、游晶進行文章的構思與設計，研究的實施與可行性分析，撰寫論文；陳紅英、丁潔進行數(shù)據(jù)收集；丁潔進行數(shù)據(jù)整理，統(tǒng)計學處理；陳紅英進行結果的分析與解釋；游晶負責文章的質量控制及審校，對文章整體負責，監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。

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(本文編輯：陳素芳)

Seroepidemiologic Study of Chronic HBV-infected Patients

CHENHong-ying，DINGJie，YOUJing*

DepartmentofInfectiousDiseases，F(xiàn)irstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity，Kunming650032，China

*Correspondingauthor：YOUJing，Professor；E-mail:jingyoukm@126.com

Background With the development and research of clinical cure of chronic hepatitis B (CHB)，testing of serum immune markers of HBV and HBV DNA load can provide reference for the clinical treatment study of CHB.Objective To analyze the serological pattern in chronic HBV-infected patients and its correlation with HBV DNA load.Methods The subjects enrolled in this study were the chronic HBV-infected outpatients and inpatients(n=2 425) who received treatment in Department of Infectious Diseases，F(xiàn)irst Affiliated Hospital of Kunming Medical University from March to December 2015.Serum immune markers and HBV DNA load were measured in the subjects by ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer with matched chemiluminescence reagent，and PGQ-PCR Amplification with HBV nucleic acid quantitative detection kit，respectively.HBsAg，HBsAb，HBeAg，HBeAb and HBcAb was labeled as 1，2，3，4，and 5，respectively.And their serological patterns were analyzed.Results Of the 7 serological patterns found in the 2 425 patients with chronic HBV infection，there were 5 patterns which occupied a proportion more than 1.00%，respectively;the patterns of "1，3，5""1，4，5""1，3，4，5""1，5" and "1，2，3，5" accounting for 55.05%，37.69%，3.26%，1.86% and 1.53%，respectively.The rare for other patterns of "1，2，4，5" and "2，4，5" was 0.53% and 0.08%，respectively.The age and HBV DNA load were significant differences among the 5 main patterns (P<0.05)，but the gender was no significant differences among them (P>0.05).Notable difference in age distribution was observed among the 5 main patterns(χ2=266.625，P<0.001).Patterns of "1，3，5""1，3，4，5""1，5" and "1，2，3，5" mainly occurred in age groups of 21-30 and 31-40，while the pattern of "1，3，5" chiefly in age groups of 31-40 and 41-50.In chronic HBV-infected patients with pattern of "1，3，5"，the HBV DNA load was positively correlated with HBsAg and HBeAg(P<0.05)，while negatively correlated with HBcAb(P<0.05);HBsAg was positively related to HBeAg(P<0.05).Among chronic HBV-infected patients with pattern of "1，4，5" "1，3，4，5"，the HBV DNA load was positively associated with HBeAg and HBcAb (P<0.05).HBV DNA load was positively associated with HBsAg，HBeAg and HBcAb，HBsAg was positively associated with HBeAg in chronic HBV-infected patients with pattern of "1, 2, 3, 5"(P<0.05).Conclusion There were 7 kinds of patterns in chronic HBV-infected patients with positive HBV DNA，predominated by the patterns of "1，3，5" and "1，4，5".Significant differences by age and HBV DNA load existed among the 5 main patterns.

Hepatitis B virus；Viral load；Seroepidemiologic studies

云南省科技計劃資助項目(2011WS0053，2011FZ121，2012WS0028)

R 512.62

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.08.010

2016-08-18；

2017-01-05)

650032云南省昆明市，昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染科

*通信作者：游晶，教授；E-mail:jingyoukm@126.com