不同商品規(guī)格等級羌活的鎮(zhèn)痛抗炎作用對比研究

陳虹宇，尹顯梅，陳玲，王瀟霖，鄭瀟瀟，余梅，馬逾英，蔣桂華

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不同商品規(guī)格等級羌活的鎮(zhèn)痛抗炎作用對比研究

陳虹宇，尹顯梅，陳玲，王瀟霖，鄭瀟瀟，余梅，馬逾英，蔣桂華

［摘要］目的：擬對不同商品等級的羌活進(jìn)行鎮(zhèn)痛、抗炎等藥效作用的對比研究，找到不同商品等級羌活在鎮(zhèn)痛、抗炎作用方面的差異。方法：通過醋酸致小鼠扭體法、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法進(jìn)行家種羌活、蠶羌、竹節(jié)羌、條羌、尾羌和疙瘩頭鎮(zhèn)痛、抗炎方面的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。鎮(zhèn)痛作用比較潛伏期和扭體次數(shù)；抗炎作用比較腫脹度和腫脹抑制率。結(jié)果：與空白組相比，蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在潛伏期和扭體次數(shù)上有極顯著性差異（P＜0.01），竹節(jié)羌水提液組和家種羌活水提液組在扭體次數(shù)上有顯著差異（P＜0.05），條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異；與空白對照組相比，蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在耳腫脹度和腫脹抑制率上有極顯著性差異（P＜0.01），竹節(jié)羌水提液組及家種羌活水提液組有顯著差異（P＜0.05），條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異。結(jié)論：不同商品等級的羌活在鎮(zhèn)痛、抗炎作用上有差異，以蠶羌和疙瘩頭作用最強(qiáng)，竹節(jié)羌和家種羌活作用其次，條羌和尾羌作用不明顯。本實(shí)驗(yàn)為羌活的商品規(guī)格等級的劃分提供科學(xué)依據(jù)。

［關(guān)鍵詞］羌活；等級；鎮(zhèn)痛；抗炎；藥效學(xué)

［作者單位］成 都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

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羌活為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T Chang或?qū)捜~羌活Notopterygium forbesii Boiss.的干燥根及根莖［1］。其藥性溫，祛寒濕，無毒，具有祛除風(fēng)濕疼痛，解表散寒等功效，主要分布于中國的青海、四川、西藏、陜西、甘肅［2］。現(xiàn)代研究表明，羌活根莖中含有多類活性成分，如香豆素類、揮發(fā)油類、氨基酸、糖類等［3-9］。羌活具有抗炎、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)免疫等的作用［10-13］。

1984年制定的部頒標(biāo)準(zhǔn)《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》［14］中將羌活劃分為川羌活和西羌活，川羌又分為一等蠶羌和二等條羌，西羌分為一等蠶羌、二等大頭羌和三等條羌。隨著野生羌活資源的減少，目前市場上羌活商品大部分以統(tǒng)貨銷售，部分分為蠶羌、頭羌和尾羌，且隨著野生撫育技術(shù)的成熟，藥市上已有家種羌活銷售。為了探討野生與家種羌活、傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)劃分的羌活商品等級與藥效作用的相關(guān)性，在進(jìn)行不同規(guī)格等級羌活的化學(xué)成分含量對比研究的同時(shí)（另文報(bào)道），本實(shí)驗(yàn)考察不同商品等級羌活的藥效作用差異，從而為修訂羌活藥材商品規(guī)格等級標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

1　儀器和試藥

1.1 儀器

BP211D十萬分之一電子天平（瑞士Sartorius）；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（瑞士BUCHI）；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)）；KQ320e型超聲波清洗器（江蘇昆山）；0.9mm的打孔器。

1.2 試藥

1.3 材料

實(shí)驗(yàn)所用羌活于2013年自采于四川小金縣兩河鄉(xiāng)，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)蔣桂華教授鑒定為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H. T. Chang.的干燥根及根莖。按照性狀不同，參考《中國藥典》及《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》，將羌活分為野生和家種兩類，野生羌活又分為蠶羌、竹節(jié)羌、條羌、尾羌、疙瘩頭五種等級。將藥材分別粉碎，稱其重量，按1∶10（m:V）將羌活粉末與蒸餾水混合，100 ℃水浴1 h，冷卻后兩層紗布過濾，收集濾液，殘?jiān)糜谠俅翁崛?，重?fù)提取兩次，第二次水浴加水量及時(shí)間同第一次，合并所得濾液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，濃縮所得體積，備用。

1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR級昆明種小鼠（體重22±2g），由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，動(dòng)物合格證號：SCXK（川）2014-15。雌雄各半，稱重標(biāo)記。

2　方法

經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)［12］，得出不同等級羌活均有鎮(zhèn)痛、抗炎作用，因同等實(shí)驗(yàn)條件對比考察，故進(jìn)行最大給藥量測定，即給藥實(shí)驗(yàn)組只進(jìn)行高劑量組研究。

2.1 鎮(zhèn)痛作用對比研究

取ICR級昆明種小鼠80只小鼠，雌雄各半，稱重標(biāo)記，隨機(jī)分為8組，每組10只，分別為陽性對照組、空白對照組、羌活水提液組（蠶羌水提液組、條羌水提液組、竹節(jié)羌水提液組、尾羌水提液組、疙瘩頭水提液組、家種羌活水提液組）。環(huán)境適應(yīng)性喂養(yǎng)七天后，以小鼠耐受的濃度（0.2 mL/10 g），灌胃給藥，并且空白對照組給予等量的蒸餾水，陽性對照組給予等量的0.50%的阿司匹林混懸液。給藥后即可常規(guī)飲食與飲水，連續(xù)灌胃5天。第4天灌胃后，禁食禁水8小時(shí)，第5天灌胃后給藥30 min后，各鼠分別腹腔注射0.6%的冰乙酸溶液0.1 mL/10 g，計(jì)時(shí)，觀察15 min內(nèi)各鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期和扭體反應(yīng)次數(shù)，用SPSS19.0處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一為腹部收縮、軀體扭曲、后肢伸展及蠕行。

（1）人力投資。蘇州工業(yè)園特別注重人才的培養(yǎng)和引進(jìn)，不僅引進(jìn)了諸中科大、中國人民大學(xué)等26所國內(nèi)高等教育院校，還引進(jìn)了如美國加州伯克利大學(xué)、加拿大滑鐵盧大學(xué)等世界名校資源。此外，園區(qū)出臺各種優(yōu)惠政策引進(jìn)高層次人才，如2017年人才薪酬補(bǔ)貼每人3萬元、4萬元、5萬元不等，共有787名碩士及以上學(xué)位的領(lǐng)軍、高層次和緊缺骨干人才獲得了此項(xiàng)補(bǔ)貼，此舉為園區(qū)發(fā)展提供源源不斷的動(dòng)力。

鎮(zhèn)痛率（%） = （對照組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù)） /對照組平均扭體次數(shù)×100%

2.2 抗炎作用對比研究實(shí)驗(yàn)

ICR級昆明種小鼠80只，全為雄性，稱重標(biāo)記，隨機(jī)分為8組，每組10只，分別為空白對照組、陽性對照組、蠶羌水提液組（條羌水提液組、竹節(jié)羌水提液組、尾羌水提液組、疙瘩頭水提液組、家種羌活水提液組）。環(huán)境適應(yīng)性喂養(yǎng)七天后，連續(xù)給藥灌胃5天，除陽性對照組，每日灌胃0.2 mL/10 g，空白對照組給予同體積的蒸餾水，陽性對照組于第三天連續(xù)腹腔注射地塞米松磷酸鈉注射液0.1 mL/10 g，于第5天將小鼠灌胃或腹腔注射給藥半個(gè)小時(shí)后，將小鼠右耳涂抹上50 μL二甲苯，左耳不涂予以對照，過半小時(shí)后將小鼠拖脊椎猝死，用打孔器分別在左、右耳同一部位打下等大的圓形耳片，用分析天平稱重，記錄數(shù)據(jù)，用SPSS19.0處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

腫脹抑制率（%）=（對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度）/對照組平均腫脹度×100%

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1鎮(zhèn)痛作用

采用冰醋酸致小鼠扭體法，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1。

表1 羌活水提液對醋酸致小鼠扭體的影響（x±SD）

注:與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

從表1可以看出，與空白組相比，蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在潛伏期和扭體次數(shù)上有極顯著性差異（P＜0.01）；竹節(jié)羌水提液組和家種羌活水提液組在扭體次數(shù)上有顯著差異（P＜0.05）；條羌水提液組、尾羌水提液組無明顯差異。

3.2 抗炎作用

采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2。

表2 羌活水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)的影響（x±SD）

從表2可以看出，與空白對照組相比，蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在耳腫脹度和腫脹抑制率上有極顯著性差異（P＜0.01），而竹節(jié)羌水提液組及家種羌活水提液組有顯著差異（P＜0.05），條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異。

4　結(jié)論與討論

4.1 鎮(zhèn)痛作用

蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組鎮(zhèn)痛作用最明顯；竹節(jié)羌水提液組和家種羌活水提液組有鎮(zhèn)痛作用，但作用較蠶羌、疙瘩頭弱；條羌水提液組和尾羌水提液組鎮(zhèn)痛作用不明顯。

4.2 抗炎作用

蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組抗炎作用最明顯；竹節(jié)羌水提液組和家種羌活水提液組抗炎作用明顯；條羌水提液組及尾羌水提液組抗炎作用不明顯。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同商品等級羌活在抗炎鎮(zhèn)痛方面有一定的差異，蠶羌在抗炎鎮(zhèn)痛方面效果均最優(yōu)，這與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)劃分的羌活規(guī)格等級標(biāo)準(zhǔn)基本符合。在抗炎鎮(zhèn)痛作用上蠶羌（疙瘩頭）＞竹節(jié)羌（家種羌）＞條羌（尾羌）。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果對羌活規(guī)格等級的修訂提供參考。

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［15］徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］. 北京:人民衛(wèi)生出版社，1991.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

Comparison of analgesic and anti-inflammatory effects of Qianghuo of different commercial specification

CHEN Hong-yu， YINXian-mei， CHEN Ling， WANG Xiao-lin， ZHENG Xiao-xiao， YU Mei， MA Yu-ying， JIANG Gui-hua//（ School of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine； Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine， Ministry of Education； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137， Sichuan）

［Abstract］Objective: This study aimed to compare analgesic and anti-inflammatory effects of Qianghuo of different commercial specification to find whether differences exist. Method: Acetic acid-induced writhing test in mice and xylene-induced mouse ear swelling were used to investigate analgesic and anti-inflammatory effects of cultivated Qianghuo， Chanqiang， Zhujieqiang， Tiaoqiang， Weiqiang and Gedatou. Latency and writhing times were used as indexes of analgesic effect. Swelling degree and swelling suppression rate were used as indexes of anti-inflammatory effects. Result: Compared with the control group， significant difference （p＜0.01） of latency and writhing times can be found in Chanqiang water extract and Gedatou water extract group. Significant difference （p＜0.05） of writhing times was found in Zhujieqiang and cultivated Qianghuo water extract group compared with control group， but no significant difference was found in Tiaoqiang and Weiqiang water extract. Compared with the control group， significant difference （p＜0.01） of ear swelling degree and the inhibition rate was found in Chanqiang water extract and Gedatou water extract group. Significant difference （p＜0.05） was found in Zhujieqiang and cultivated Qianghuo water extract group compared with control group， but no significant difference was found in Tiaoqiang and Weiqiang water extract. Conclusion: Different analgesic， anti-inflammatory effects can be found in different commodity grades of Qianghuo. Chanqiang and Gedatou show the strongest effect. Zhujieqiang and cultivated Qianghuo show medium effect. But no effect can be found in Tiaoqiang and Weiqiang. The results provide experimental evidence for the division of Qianghuo commercial specification.

［Key words］Qianghuo； commercial specification； analgesic； anti-inflammatory； pharmacology

［中圖分類號］R 285.5

［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］A

［文章編號］1674-926X（2016）02-005-03

［基金項(xiàng)目］中 國中醫(yī)科學(xué)院-中央本級重大增減支項(xiàng)目：中藥資源區(qū)域質(zhì)量和商品規(guī)格（項(xiàng)目編號：20603020108）

［作者簡介］陳 虹宇（1989- ），女，在讀碩士研究生，主要從事中藥品種與質(zhì)量研究

［通訊作者］蔣 桂華（1970- ），女，四川成都人，教授，主要從事中藥品種與質(zhì)量研究

［收稿日期］2015-11-11