石斛組培苗假植煉苗技術(shù)

李衛(wèi)東，肖光輝

（1.湖南省園藝研究所，湖南 長沙 410125；2.湖南省農(nóng)業(yè)信息與工程研究所，湖南 長沙410125；3.特色木本花卉湖南省工程實驗室，湖南 長沙 410125）

石斛組培苗假植煉苗技術(shù)

李衛(wèi)東1,3，肖光輝2

（1.湖南省園藝研究所，湖南 長沙 410125；2.湖南省農(nóng)業(yè)信息與工程研究所，湖南 長沙410125；3.特色木本花卉湖南省工程實驗室，湖南 長沙 410125）

為了解決石斛組培苗移栽成活率低這一困擾石斛規(guī)模化生產(chǎn)的技術(shù)難題，從假植苗床的選擇、基質(zhì)配方篩選、主要原料的發(fā)酵處理與基質(zhì)的配制、組培苗的室內(nèi)煉苗適應(yīng)與假植后的管理等方面創(chuàng)新現(xiàn)有組培苗的假植技術(shù)，發(fā)明的“一種石斛組培苗的假植煉苗方法”獲得中華人民共和國發(fā)明專利。

石斛；組培苗；假植煉苗；設(shè)施栽培

石斛（Dendrobium）又名石斛蘭，為蘭科（Orchidaceace）石斛屬（Dendrobium）多年生附生草本植物，是重要的藥用和觀賞植物，屬于《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》附錄Ⅱ的物種，原產(chǎn)地主要分布于亞洲熱帶和亞熱帶，澳大利亞和太平洋島嶼，目前世界范圍內(nèi)已發(fā)現(xiàn)約有1 500種以上，中國約有76種，大部分分布于西南、華南、臺灣等地，其中有將近40種具有藥用價值。野生石斛主要生長在熱帶、亞熱帶原始森林及類似的溫暖濕潤環(huán)境，常附生于半陰濕的密林樹干或巖石上，并常與苔蘚、石葦和地衣等低等生物伴生，主要生長在高山峻嶺懸崖峭壁和巖石縫隙中，生長條件要求溫暖、濕潤、通風(fēng)、透氣、漏水。由于石斛對生長環(huán)境的特殊要求以及分布的局限性，在自然環(huán)境條件下自身繁殖率很低，且石斛的生長發(fā)育緩慢，所以野生石斛數(shù)量稀少，野生資源非常有限。傳統(tǒng)的人工繁殖方式如分株、扦插等，繁殖速度慢，增殖率很低，遠不能滿足商品化生產(chǎn)的要求。因此，從20世紀70年代起，國內(nèi)外就開始了石斛的組培快繁技術(shù)和人工栽培技術(shù)的研究。目前石斛的組培技術(shù)已基本成熟，但由于組織培養(yǎng)環(huán)境與人工栽培環(huán)境存在較大差異，組培苗需要由無菌環(huán)境全面適應(yīng)外界自然環(huán)境、由異養(yǎng)過渡到自養(yǎng)，組培苗的移栽成活率低，特別是石斛進行仿生態(tài)栽培時成活率更低。例如霍山石斛組培苗出瓶后直接栽培到仿生態(tài)栽培基地的成活率約為30%左右[1]；在野外仿生態(tài)栽培時或在簡易大棚中栽培時，鐵皮石斛組培苗的直接移栽成活率一般低于50%，且生長緩慢[2-3]。因此，組培苗移栽成活率低一直是困擾石斛規(guī)?；a(chǎn)的一個瓶頸。錢文林等[4]的研究認為，利用保水性能好且透氣性強的栽培基質(zhì)可使霍山石斛組培苗的移栽成活率提高，且分層基質(zhì)的種植效果更好；當基質(zhì)下部3/10為樹皮，上部7/10為木屑時，霍山石斛的移栽成活率和萌芽數(shù)較高，但該研究使用分層基質(zhì)栽培的操作較復(fù)雜，且移栽后70 d統(tǒng)計的成活率也只有78%。為了解決石斛組培苗移栽成活率低這一困擾石斛規(guī)?；a(chǎn)的技術(shù)難題，筆者進行組培苗假植煉苗技術(shù)的研究。

1 石斛組培苗假植煉苗的技術(shù)要點

根據(jù)石斛組培苗假植煉苗期對環(huán)境條件的要求和生長發(fā)育特點，利用石斛或一些花卉設(shè)施栽培普通架空栽培床的床下適宜于進行石斛假植煉苗的小氣候條件，通過配制合適的栽培基質(zhì)、加強假植煉苗期的管理，研究出了石斛組培苗的假植煉苗技術(shù)，解決了組培苗移栽成活率低這一困擾石斛規(guī)?；a(chǎn)的瓶頸?！耙环N石斛組培苗的假植煉苗方法”[5]已獲中華人民共和國發(fā)明專利，專利號為：ZL 201410401064.2。其技術(shù)要點如下。

1.1 石斛假植苗床的選擇

選擇石斛或一些花卉如蝴蝶蘭等設(shè)施栽培普通架空栽培床的床下地面作為假植苗床。適合進行假植煉苗的石斛種類包括：鐵皮石斛（D. officinale）、霍山石斛（D. huosanness）、金釵石斛（D. nobile）、流蘇石斛（D. fimbiratum）或鼓槌石斛（D. chrysotourn）。

1.2 栽培基質(zhì)配方篩選與主要原料的發(fā)酵處理

1.2.1 基質(zhì)配方篩選 為了獲得價廉物美、適合當?shù)氐淖顑?yōu)石斛栽培基質(zhì)配方，選用當?shù)亓畠r易得的松樹皮、雜木屑、楓樹鋸木屑、香菇菌渣、平菇菌渣和干牛糞等為主要原料，配以市場上易得的珍珠巖，共配制了15個不同的基質(zhì)配方，經(jīng)過3 a的配方篩選試驗，不斷改進基質(zhì)配方，獲得適合石斛假植煉苗的基質(zhì)配方為：松樹皮、楓樹鋸木屑、干牛糞的體積比=4～5︰4～5︰0.5～1，珍珠巖的體積比為3～4︰1。同時，對比了栽培基質(zhì)主要原料的自然發(fā)酵處理和蒸煮消毒處理對石斛組培苗生長的影響，結(jié)果表明發(fā)酵處理是比較實用的基質(zhì)處理方法。

1.2.2 主要原料的發(fā)酵處理 選用顆粒大小為0.5～1.2 cm的松樹皮、楓樹鋸木屑和干牛糞作為栽培基質(zhì)的主要原料，栽培基質(zhì)主要原料的組成成分是松樹皮、楓樹鋸木屑、干牛糞的體積比為4～5︰4～5︰0.5～1。松樹皮先用清水浸泡1 d，然后按比例與楓樹鋸木屑和干牛糞混合均勻，調(diào)節(jié)含水量至65%～70%，堆成高1.2～1.5 m、寬2.5～3.0 m的堆，用塑料薄膜覆蓋進行發(fā)酵，發(fā)酵期一般為2～3個月，發(fā)酵期間需翻堆5～6次，一般每隔10～15 d揭開薄膜翻堆1次，翻堆時如發(fā)現(xiàn)基質(zhì)變干應(yīng)適當加水。在夏季高溫季節(jié)發(fā)酵時發(fā)酵期較短，而在低溫季節(jié)發(fā)酵時發(fā)酵期應(yīng)適當延長。發(fā)酵完成后將基質(zhì)攤開曬干后裝袋備用。

1.3 栽培基質(zhì)的配制與育苗穴盤裝盤

1.3.1 栽培基質(zhì)的配制 先將發(fā)酵處理后的栽培基質(zhì)主要原料用800～1 000倍多菌靈或甲基托布津藥液噴灑拌勻到含水量為60%～65%，堆起來用塑料薄膜覆蓋悶3～5 d，珍珠巖用清水浸泡1～2 d后瀝干明水，再將栽培基質(zhì)主要原料與珍珠巖按體積比3～4︰1均勻混合，然后就可裝盤。

1.3.2 基質(zhì)裝盤 育苗穴盤可選用市售的普通塑料育苗穴盤，一般選用規(guī)格為長54 cm、寬25 cm、高5 cm的50孔或32孔的育苗穴盤。裝盤時先將配好的基質(zhì)均勻倒入育苗穴盤內(nèi)，抖動育苗穴盤，讓基質(zhì)充填在育苗穴盤的孔穴中，然后用1 cm厚、50 cm長的小木板將育苗穴盤表面的基質(zhì)壓實刮平，假植前1 d澆透底水，待用。

1.4 石斛組培苗的室內(nèi)煉苗適應(yīng)

當石斛組培苗每叢有3～5株，每株有根3～5條、根長2～3 cm，葉4～6片、莖粗0.3 cm以上、高4～7 cm時，將組培苗從組培室移至與栽培環(huán)境條件一致的大棚或溫室內(nèi)進行常溫?zé)捗邕m應(yīng)。溫度控制在15～28℃，相對濕度50%～80%，光照強度3 000～7 000 Lx，即遮光50%～70%，并逐漸增加光照強度，保持棚內(nèi)通風(fēng)透氣，讓組培苗從封閉穩(wěn)定的環(huán)境向開放變化的環(huán)境過渡，使其逐漸適應(yīng)自然散射光照和變溫的環(huán)境，煉苗時間為2～4周。具體操作時1周內(nèi)遮光70%，1周后視天氣情況遮光50%～60%，以石斛組培苗的葉色翠綠或濃綠、莖段肥厚粗壯且莖干稍硬化時為宜。組培苗出瓶前2～3 d將瓶口逐漸敞開，即先只擰松瓶蓋，敞開程度逐漸加大，最后1 d將瓶蓋全部揭開，讓其適應(yīng)自然的溫、濕度條件。組培苗出瓶時，用手側(cè)拍瓶子，使培養(yǎng)基與根之間松動，然后用手指或鑷子從瓶邊將組培苗夾出，用清水輕輕洗去粘附在根上的培養(yǎng)基，特別要洗掉瓊脂，以免瓊脂發(fā)霉引起爛根，再換清水清洗1次。瀝干水后用1 000倍多菌靈或甲基托布津浸泡整株小苗10 min，防止假植后的石斛苗根部腐爛。然后在陰涼通風(fēng)處晾根半天至根部發(fā)白，便可進行假值。

1.5 假植與假植后的管理

1.5.1 組培苗的假植 當氣溫不低于15℃時開始假植，適宜假植的時期一般為3月中旬至5月下旬或9月中旬至10月中旬。假植時通常以3～5個單株為1叢，每穴假植1叢，假植后將育苗穴盤整齊擺放到假植苗床上，立即用噴霧器在育苗穴盤上噴3 000倍農(nóng)用鏈霉素和1 000倍多菌靈進行消毒，同時使幼苗與基質(zhì)緊密結(jié)合。為了提高假植成活率，可將待假植的石斛組培苗根部浸泡于100 mg/L的ABT3號生根粉中15 min以誘導(dǎo)生根，再進行假植。

1.5.2 假植后的管理 由于剛假植的石斛組培苗十分嬌嫩，最初幾天每天要定時噴霧清水1～2次，假植后1周內(nèi)空氣濕度保持80%～90%，不澆水。假植1周后植株開始發(fā)新根，可減少噴霧次數(shù)，空氣濕度保持70%～80%?；|(zhì)保持干濕交替有利于發(fā)根長芽，基質(zhì)的水分管理應(yīng)掌握干透濕透的原則，假植2周后如果基質(zhì)發(fā)干可用噴壺澆施基質(zhì)至濕透（含水量65%左右）。假植20 d后，每1～2周噴施1次葉面肥，用0.2%～0.3%的磷酸二氫鉀和1 500～2 000倍液的花多多1號交替噴施。進入秋冬季隨著氣溫的降低，石斛幼苗生長放緩甚至停止，對水分的要求也逐漸降低，所以應(yīng)逐漸減少噴水和施肥的次數(shù)，在基質(zhì)不明顯缺水（基質(zhì)含水量不低于30%時）的情況下不澆水，冬季一般每15～20 d選晴天上午9︰00～10︰00澆水1次即可，噴水后適當通風(fēng)。一般假植煉苗5～12個月可出圃定植。

2 石斛組培苗假植煉苗技術(shù)的效果與先進性

在湖南長沙地區(qū)分別對鐵皮石斛、霍山石斛、金釵石斛、流蘇石斛、鼓槌石斛的組培苗采用本方法進行了假植煉苗試驗，每個處理假植200叢，設(shè)3次重復(fù)，假植60 d后的調(diào)查結(jié)果表明，成活率平均達96.7%（見表1），且培育的穴盤苗生長健壯、整齊一致，定植后緩苗快。以假植煉苗后12個月的穴盤苗為材料，進行設(shè)施床栽試驗（以直接定植組培苗為對照）和仿生態(tài)栽培試驗，每個處理200叢，設(shè)3次重復(fù)，試驗結(jié)果表明，假植穴盤苗定植后可比組培苗直接定植提早1 a采收商品石斛，采用設(shè)施基質(zhì)栽培時定植60 d后的成活率平均達98.6%（直接用組培苗定植對照的平均成活率為83.4%），仿生態(tài)栽培定植60 d后的成活率平均也可達93.5%（見表1），比報道的霍山石斛組培苗出瓶后直接進行仿生態(tài)栽培的成活率30%左右[1]提高60個百分點以上。

表1 石斛組培苗的假植成活率與假植煉苗后穴盤苗的定植成活率 （%）

3 小 結(jié)

為了解決石斛組培苗移栽成活率低這一制約產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的瓶頸問題，我國已有不少研究報道[1,6-8]，這些研究的主要貢獻在于：把一般用于蔬菜育苗的穴盤育苗技術(shù)或假植技術(shù)應(yīng)用到石斛的栽培中，使石斛組培苗的移栽成活率得到了明顯提高。其缺陷在于：多以泥炭作為基質(zhì)的主要原料[1,6-7]，而我國的泥炭資源較少，而且是不可再生的自然資源；劉士輝等[8]的研究雖然沒有用泥炭作為基質(zhì)的主要原料，但因該基質(zhì)的營養(yǎng)不豐富，假植后對施肥管理要求較高，要求“薄肥勤施”，不僅需要多次噴施液體肥，而且還要施加顆粒緩釋肥，才能幫助鐵皮石斛茁壯成長；同時，這些研究都需要有專門的設(shè)施進行假植煉苗，由于組培苗的適應(yīng)性較差，對環(huán)境條件的要求較高，因此對設(shè)施的要求和栽培管理的水平也較高，如果假植煉苗的設(shè)施比較簡陋或管理粗放，組培苗的假植成活率仍然比較低。然而，我國目前石斛設(shè)施栽培的方式一般都是采用架空的栽培床進行栽培，許多設(shè)施栽培的花卉，特別是一些高檔的蘭花品種如蝴蝶蘭等，也是采用架空栽培床進行栽培，栽培床下的地面和空間一般都閑置，為充分利用資源可將其用作石斛組培苗假植煉苗的場所。

該石斛組培苗假植煉苗技術(shù)的創(chuàng)新點在于：選用石斛設(shè)施栽培普通架空栽培床或一些設(shè)施花卉架空栽培床的床下地面作為假植苗床，為石斛組培苗假植后的生長發(fā)育創(chuàng)造比較適宜的環(huán)境條件；同時，以價格低廉、容易獲得的基質(zhì)原料配制疏松透氣，排水性良好，所含肥料養(yǎng)分適量，保水、保肥能力強的栽培基質(zhì)，可達到提高組培苗假植成活率的目的。不僅不需要專門另建栽培設(shè)施，而且還避免使用泥炭等不可再生的自然資源。

綜上所述，采用石斛組培苗的假植煉苗方法，不僅操作簡便、實用性強，能使石斛組培苗盡快由無菌環(huán)境適應(yīng)自然環(huán)境、提高組培苗的抗逆性和生存能力，而且可以提高設(shè)施的利用率。該技術(shù)可以培育石斛設(shè)施栽培和仿生態(tài)栽培規(guī)模化生產(chǎn)所需的植株苗，解決了石斛組培苗移栽成活率低這一困擾石斛規(guī)?；a(chǎn)的瓶頸，實現(xiàn)了石斛組培苗人工栽培的規(guī)模化生產(chǎn)。

[1] 徐光濤. 提高霍山石斛仿生態(tài)栽培成活率方法的研究[J]. 安徽林業(yè)科技，2011，37（6）：62-64.

[2] 鄭寬瑜，鄧君浪，趙 輝. 鐵皮石斛試管苗栽培技術(shù)研究[J]. 云南農(nóng)業(yè)科技，2010，（3）：21-22.

[3] 宋 順，許 奕，李敬陽. 鐵皮石斛的組織培養(yǎng)與快速繁殖研究進展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2013，29（33）：286-290.

[4] 錢文林，張建霞，吳坤林，等. 霍山石斛種苗繁殖與栽培研究[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報，2013，21（3）：240-246.

[5] 肖光輝，李衛(wèi)東，丁桂花，等. 一種石斛組培苗的假植煉苗方法[P].中國專利：ZL 201410401064.2，2016-03-16.

[6] 孔德棟，黃沖平，周建華，等. 鐵皮石斛穴盤育苗基質(zhì)的優(yōu)化篩選[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2010（8）：70-72.

[7] 肖 穎，張耀洲. 基質(zhì)煉苗季節(jié)對鐵皮石斛試管苗假植的影響[J].信陽農(nóng)業(yè)高等?？茖W(xué)校學(xué)報，2013，23（2）：93-94.

[8] 劉士輝，黃丹楓，姚永康，等. 鐵皮石斛組培苗溫室馴化技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（17）：7477-7478，7495.

（責(zé)任編輯：成 平）

A Technology of Hardening off Tissue Culture Seedlings of Dendrobium with the Method of Temporary Transplanting

LI Wei-dong1,3，XIAO Guang-hui2
（1. Hunan Horticulture Research Institute, Changsha 410125, PRC; 2. Hunan Institute of Agricultural Information and Engineering, Changsha 410125, PRC; 3. The Distinctive Woody Flower Engineering Laboratory of Hunan Province, Changsha 410125, PRC）

In order to solve the technical problems of low survival rate of transplanting of tissue culture seedlings of Dendrobium, which was confronted by the large-scale production, the author invented the existing technology of temporary transplanting of tissue culture seedlings from the aspects of temporary seedbed selection, media formulation screening, fermentation processing of main raw materials, media preparation, indoor training of tissue culture seedlings, management of temporary transplanted seedlings and so on. A method of hardening off tissue culture seedlings of Dendrobium with the method of temporary transplanting won the People’s Republic of China invention patent.

Dendrobium; tissue culture seedling; hardening off seedlings with the method of temporary transplanting; facility cultivation

Q945.52

：A

：1006-060X（2017）02-0032-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2017.002.009

2016-12-19

湖南省科技計劃項目（2015NK3048；2016NK2194）；科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目（2013GB2D200329）；湖南省林業(yè)專項資金項目（湘財農(nóng)指[2015]157號）

李衛(wèi)東（1964-），男，湖南永州市人，研究員，主要從事園林、觀賞園藝、休閑農(nóng)業(yè)與鄉(xiāng)村旅游規(guī)劃方面的研究。

肖光輝