豬腰豆化學(xué)成分研究

陸安梅，晏和貴，胡軍，伏雪梅，秦澤敏，郭潔，楊明惠

（大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000）

豬腰豆化學(xué)成分研究

陸安梅，晏和貴，胡軍，伏雪梅，秦澤敏，郭潔，楊明惠*

（大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000）

目的：對藥用豬腰豆植物的化學(xué)成分進行研究，以期尋找活性成分。方法：豬腰豆乙醇提取物分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，利用硅膠柱層析、Sephadex LH-20等方法進行分離純化，依據(jù)理化性質(zhì)及波譜特征進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從豬腰豆乙酸乙酯和正丁醇部位分離得到8個化合物，分別是尿囊素（1）、對甲氧基苯丙酸（2）、芒柄花苷（3）、（反式）-3，2'，4'，6'-四羥基-4-甲氧基查爾酮-2'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、蠶豆苷（5）、蔗糖（6）、D-3-O-甲基肌醇（7）、正三十三烷醇（8）。結(jié)論：化合物1～8均首次從該種植物中分離得到。

豬腰豆；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

豬腰豆屬（Whitfordiodendron）植物屬豆科（Leguminosae）灰毛豆族，本屬約9種，分布亞洲熱帶，我國有1種及1變種，產(chǎn)于我國南部及西南部，豬腰豆（原變種）和毛葉豬腰豆（變種）產(chǎn)于云南，生于海拔1 100～1 300 m的林中。豬腰豆（Whitfordiodendron filipes（Dunn）Dunn），又名大莢藤、細梗惠特木、白藤花、豬腰子〔1-3〕。豬腰豆在云南作藥食兩用而被廣泛應(yīng)用，民間作清熱解毒、補腎助陽之藥物；藤莖用于祛風(fēng)補血、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)等方面；花可供食用。目前國內(nèi)外對豬腰豆屬植物的化學(xué)成分及其生物活性的研究甚少，據(jù)劉玉嬌〔4〕報道，豬腰豆屬植物中含有黃酮、異黃酮、二氫黃酮、查爾酮、生物堿等類型的化合物。研究表明黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗病毒、抗炎、抑菌、鎮(zhèn)痛、抗氧化、抗衰老、抗過敏、抗輻射、抗糖尿病、抗心血管疾病等活性〔5〕。鑒于豬腰豆既有明顯的藥用價值和食療特征，為最大限度的開發(fā)和利用這類稀有資源，本文對產(chǎn)自云南大理的豬腰豆植物的化學(xué)成分進行了研究。

1 儀器與材料

1.1 實驗材料植物豬腰豆樣品于2012年購買自大理州永平縣，由大理大學(xué)生藥教研室馬曉匡教授鑒定為豬腰豆屬植物豬腰豆（Whitfordiodendron filipes（Dunn）Dunn）。

1.2 儀器與試劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE-5205、RE-5203、RE-2000A（上海亞榮生化儀器廠）、SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限公司）、Bruker-AM-400型核磁共振波譜儀、Bruker-Compact-HDTM質(zhì)譜儀（Bruker公司）、AS-10200BT超聲波清洗器（天津奧特恩斯儀器有限公司）、X-4數(shù)字顯微熔點測定儀、CP-114電子天平，5 L梨形分液漏斗，Sephadex LH-20（Pharmacia）、薄層色譜硅膠和柱色譜硅膠，均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離取粉碎后的豬腰豆3.0 kg用80%乙醇冷浸提取3次（每次48 h），再加熱回流提取1次（自沸騰后保持2 h），提取液合并，減壓濃縮得浸膏（153.8 g）。粗提物分散于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓濃縮后分別得石油醚部分（6.1 g），乙酸乙酯部分（10.2 g），正丁醇部分（88.0 g）。其中乙酸乙酯部分用硅膠柱層析，氯仿-甲醇（95：5～0：100）梯度洗脫，用TLC（薄層層析色譜）進行檢測，合并相同餾分，得到10個餾分（Fr. A～Fr.J）。Fr.D（1.73 g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離得到化合物1（48 mg）；Fr.E（1.90 g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析分離得化合物2（31 mg）和化合物3（45 mg）。正丁醇部分用硅膠柱層析，氯仿-甲醇（9：1～0：10）梯度洗脫，得到15個餾分（Fr.1～Fr.15），其中Fr.6（0.14 g）、Fr.9（0.55 g）、Fr.10（0.42 g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析分離得到化合物4（18 mg）、5（42 mg）、6（37 mg）；將Fr.4（3.65 g），F(xiàn)r.3（4.31 g）再反復(fù)經(jīng)硅膠柱層析和Sephadex LH-20凝膠柱層析分離得相對應(yīng)的化合物7（93 mg）、8（84 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定化合物（1）：白色晶體（甲醇），分子式C4H6O3N4，mp：234～235℃。EI-MS（m/z）：130（100，M+-CO），115（87），87（75），70（43），60（35），44（42）；1H NMR（400 MHz，Methanol-d4）δ：10.58（1H，brs，NH-1），8.31（1H，s，NH-3），6.66（1H，d，J=8.2 Hz，NH-6），5.09（1H，d，J=6.5 Hz，H-4），3.34（2H，s，NH2-8）；13C NMR（100 MHz，Methanol-d4）δ：174.7（C-5），157.1（C-7），157.0（C-2），77.3（C-4）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔6〕基本一致，鑒定該化合物為尿囊素。

化合物（2）：無色粉末（DMSO），分子式C10H12O3，mp：101～102℃。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：7.20（2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′），6.48（2H，d，J=8.3 Hz，H-3′，5′），3.79（3H，s，4′-OCH3），2.93（2H，t，J=7.6 Hz，H-α），2.65（2H，t，J= 7.2 Hz，H-β）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：176.1（C-1），157.8（C-4′），131.9（C-1′），129.4（C-2′，6′），114.1（C-3′，5′），53.2（4′-OCH3），35.1（C-α），29.2（C-β）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔7〕基本一致，鑒定該化合物為對甲氧基苯丙酸。

化合物（3）：白色粉末（DMSO），分子式C22H22O9，mp：215～216℃。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ： 8.44（1H，s，J=8.9 Hz，H-2），8.05（1H，d，J= 9.0 Hz，H-5），7.53（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），7.24（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），7.16（1H，dd，J= 8.9，2.1 Hz，H-6），7.00（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），5.11（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），3.79（3H，s，4′-OCH3），3.18～3.73（6H，m，sugar-H）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：174.8（C-4），161.5（C-7），159.1（C-4′），157.1（C-9），153.8（C-2），130.2（C-2′，6′），127.1（C-5），124.1（C-1′），123.5（C-3），118.5（C-10），115.7（C-6），113.7（C-3′，5′），103.5（C-8），100.1（C-1″），77.3（C-5″），76.6（C-3″），73.2（C-2″），69.7（C-4″），60.7（C-6″），55.3（4′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔8〕基本一致，故鑒定該化合物為芒柄花苷。

化合物（4）：淺黃色無定形粉末（甲醇），分子式C29H38O17，mp：124～125℃。其紫外光譜（甲醇）：230，283，377 nm；1H NMR（400 MHz，Methanol-d4）δ：7.68（1H，d，J=15.9 Hz，H-β），7.64（1H，d，J=15.9 Hz，H-α），7.23（1H，brs，H-2），7.11（1H，d，J=9.0 Hz，H-6），6.84（1H，d，J=9.0 Hz，H-5），6.43（1H，d，J=2.1 Hz，H-3′），6.39（1H，d，J=2.1 Hz，H-5′），5.87（1H，d，J=4.2 Hz，H-1″），3.91（3H，s，4-OCH3），3.42～4.49（6H，m，sugar-H）；13C NMR（100 MHz，Methanol-d4）δ：192.2（C-4），169.3（C-2′），167.7（C-4′），159.5（C-6′），148.1（C-4），146.0（C-3），140.3（C-β），129.1（C-1），123.2（C-α），121.2（C-6），115.0（C-5），113.6（C-2），107.3（C-1′），103.9（C-1″），100.3（C-3′），98.1（C-5′），76.1（C-5″），74.9（C-2″），73.1（C-3″），72.3（C-4″），62.8（C-6″），55.2（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔9〕比較，鑒定該化合物為（反式）-3，2′，4′，6′-四羥基-4-甲氧基-查爾酮-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物（5）：白色結(jié)晶（甲醇），分子式C10H16N4O7，mp：237～238℃。1H NMR（400 MHz，Methanol-d4）δ：10.21（1H，s，N-H），6.30（1H，s，H-4″），6.18（2H，s，N-H），5.95（2H，s，N-H），4.23（1H，s，J=7.2 Hz，H-5），4.56（1H，t，J=12.2 Hz，H-1″），2.90～4.58（6H，m，sugar-H）；13C NMR（100 MHz，Methanol-d4）δ：159.6（C-4），158.9（C-5），152.4（C-2），113.9（C-6），108.5（C-1″），78.0（C-5″），76.5（C-3″），73.5（C-2″），70.2（C-4″），61.7（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔10〕報道基本一致，故鑒定化合物為蠶豆苷（vicioside）。

化合物（6）：白色粉末（甲醇），分子式C12H22O11，mp：184～186℃。TLC紫外燈（254 nm）下無熒光，噴5%磷鉬酸溶液顯藍色，與對照品蔗糖共薄層色譜，Rf值斑點顏色一致，相互混合熔點不下降。13C NMR（100 MHz，Methanol-d4）δ：104.5（C-1），92.2（C-1′），83.0（C-2），77.5（C-3），74.8（C-4），73.3（C-5′，3′），72.1（C-2′），70.3（C-4′），62.6（C-6），62.5（C-6′），61.0（C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔11〕基本一致，鑒定該化合物為蔗糖（D-sucrose）。

化合物（7）：無色針狀晶體（甲醇），分子式C7H14O7，mp：180℃。1H NMR（400 MHz，Methanol-d4）δ：4.73（1H，d，J=3.0 Hz，-OH），4.64（1H，d，J=3.0 Hz，-OH），4.52（1H，d，J=4.8 Hz，-OH），4.47（2H，dd，J= 7.2 Hz，-OH），4.35（1H，d，J=5.6 Hz，-OH），3.64（3H，s，3-OCH3），2.98～3.62（6H，m，C1～6-H）；13C NMR（100 MHz，Methanol-d4）δ：84.8（C-3），73.2（C-4），72.1（C-1），71.0（C-5，6），70.6（C-2），60.3（3-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔12〕基本一致，鑒定該化合物為D-3-O-甲基肌醇。

化合物（8）：白色粉末（氯仿），分子式C33H68O，mp：84～85℃。IR譜圖中有3 300 cm-1（OH）及2 920，2 850，1 460，1 063，723 cm-1等長鏈烷烴的特征吸收峰。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.76（2H，t，H-1），1.40～1.61（6H，m，H-2），1.26（56H，m，28CH2），0.86（3H，t，H-33）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：63.2（C-1），32.8（C-2），31.9（C-31），29.7（C-4～30），24.8（C-3），22.7（C-32），14.1（C-33）。以上數(shù)據(jù)與文獻〔13〕基本一致，鑒定化合物為正三十三烷醇。

3 討論

本文對豬腰豆屬植物豬腰豆種子進行了初步的化學(xué)研究，從中分離得到8個化合物，主要為黃酮類、生物堿類化合物。據(jù)劉玉嬌文獻〔4〕報道，豬腰豆屬植物主要富含黃酮類化合物。黃酮類化合物是眾多中草藥、天然保健品和食品中重要的功能性成分，因具有廣譜的藥理活性和較低毒性而引人矚目，是目前人們比較關(guān)注的一類天然化合物，已成為國內(nèi)外天然藥物開發(fā)利用研究的熱點，在醫(yī)藥及食品工業(yè)上具有重大貢獻（如大豆黃素和染料木素，是近代生命科學(xué)和醫(yī)藥學(xué)研究已確認(rèn)了的優(yōu)良的抗乳腺癌活性成分）。黃酮類化合物可治療心血管疾病、糖尿病及其并發(fā)癥；同時能增強機體的非特異性免疫和體液免疫功能；還具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗輻射等功效；也是人體體內(nèi)自由基的猝滅劑和抗氧化劑。生物堿結(jié)構(gòu)多樣，生理活性廣泛，可用于抗菌、抗腫瘤、抗氧化、抗HIV、抗心律失常、抗血小板聚集、降血壓、調(diào)節(jié)免疫、鎮(zhèn)痛等方面。多年來，人們對生物堿類化合物的生理活性研究比較活躍，尤其是活性及構(gòu)效關(guān)系的研究已成為目前科研人員所關(guān)注的熱點。如萘基異喹啉骨架的化合物有望成為新型的抗瘧先導(dǎo)化合物；茚并異喹啉生物堿抗腫瘤機制類似喜樹堿，可作為TOP I新型抑制劑，還可用于耐喜樹堿的腫瘤治療中等?？梢婞S酮類和生物堿類化合物對人體具有多種重要生理活性，不良反應(yīng)少，本文的研究為稀有的豬腰豆屬植物中黃酮類和生物堿類化合物中新的特征性基團或結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)、合成、活性篩選提供了一定的基礎(chǔ)，為發(fā)現(xiàn)該屬植物中的特色新藥、活性先導(dǎo)化合物提供了依據(jù)。

〔1〕中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志：第40卷〔M〕.北京：北京科學(xué)出版社，1999：130-132.

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〔3〕李時珍.本草綱目：第35卷〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：2060.

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Study on ChemicalConstituents of Whitfordiodendron filipes

Lu Anmei,Yan Hegui,Hu Jun,Fu Xuemei,Qin Zemin,Guo Jie,Yang Minghui*
（College ofPharmacy and Chemistry,DaliUniversity,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:The chemicalcomponents of Whitfordiodendron filipes were studied in order to search for bioactive ingredients.Methods:The seed of the plant were extracted in the cold-soaked way with ethanol,and the ethanol extraction was partitioned with petroleum ether,acetic ether（EtOAc）and n-butylalcohol（n-BuOH）.The fraction was separated using silica gel,Sephadex LH-20 column chromatography methods,and their structures were identified based on spectroscopic analyses and chemical properties.Results:Eight compounds of EtOAc and n-BuOH fraction were purified and identified as allantoin（1）,3-（4-methoxyphenyl）propionic acid（2）,formononetin-7-O-β-D-glucopyranoside（3）,（E）-3,2′,4′,6′-fourhydroxy-4-methoxy-chalcone-2′-O-D-glucopyranoside（4）,vicioside（5）,D-sucrose（6）,D-3-O-Quebrachitol（7）,n-tritriacontanol（8）.Conclusion:All these compounds were identified and isolated from the plantforthe firsttime.

Whitfordiodendron filipes;Chemicalconstituent;structuralidentification

R284

A

2096-2266（2017）06-0045-04

10.3969∕j.issn.2096-2266.2017.06.011

（責(zé)任編輯李楊）

國家自然科學(xué)基金資助項目（81160393）

2017-01-09

2017-01-25

陸安梅，碩士研究生，主要從事藥物分析研究. *通信作者：楊明惠，教授，博士.