沾化冬棗核中多糖的體外抗氧化活性研究

朱華+趙娜+劉香紅+王滕+方菁菁

摘要：利用濱州沾化冬棗棗核為試驗材料，進(jìn)行了冬棗核多糖體外抗氧化活性的試驗研究，結(jié)果表明：沾化冬棗核對ABTS自由基、羥基自由基、DPPH自由基均有良好的清除作用，對幾種自由基的抑制能力為ABTS+自由基清除率>DPPH自由基>羥基自由基，為沾化棗核的應(yīng)用提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：冬棗核；多糖；體外抗氧化活性

中圖分類號：TS255.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1674-9944（2016）22-0149-02

1引言

沾化冬棗（Zyzyhpusjujuhadates）是鼠李科棗屬的植物，屬于鮮食的一種優(yōu)質(zhì)的棗類資源[1]。當(dāng)前，多糖作為植物中一種重要活性物質(zhì)，有研究顯示具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗衰老、降血糖等多種功效[2]。沾化冬棗棗核中的體外抗氧化能力，需要通過測定棗核中多糖對ABTS+自由基清除率、羥基自由基、DPPH自由基的清除能力來研究的。研究采用浸提法提取冬棗棗核中的水溶性多糖，再以棗核粗多糖為原料通過一系列反應(yīng)制備出冬棗核多糖，通過冬棗核多糖對ABTS+自由基清除率、羥基自由基、DPPH自由基的清除效果來分析研究冬棗核多糖的抗氧化活性[3]。

2試驗材料和方法

2.1材料的來源

從市場上采購濱州沾化冬棗，取棗核，烘干至恒重后用微型試樣粉碎機(jī)粉粹，置于棕色瓶中并低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2實驗材料

2.2.1藥品及試劑

30%過氧化氫、硫酸亞鐵、鐵氰化鉀、水楊酸、三氯化鐵、鹽酸、鄰苯三酚、氯化鐵、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、無水乙醇、三羥甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸（EDTA）等。

2.2.2實驗儀器

所用實驗儀器及生產(chǎn)廠家如表1所示。

2.3實驗方法

2.3.1多糖的提取

采用微波輔助浸提法提取多糖，每次稱取冬棗棗核粉4g，按一定的料液比混合成溶液，微波處理后濃縮至原體積的1/4，再經(jīng)過離心、去雜蛋白、真空干燥、脫色、乙醇沉淀等步驟得到多糖浸提液。

2.3.2對DPPH自由基清除能力的測定

參考Luo等[4]的方法，同時又有一定程度上修改。將試驗重復(fù)3次求得清除率的平均值。

2.3.3對羥基自由基（·OH）清除能力的測定

用Fenton氧化法產(chǎn)生羥基自由基（·OH），H2O2/Fe2+體系可以通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生如下化學(xué)反應(yīng)H2O2+Fe2+→·OH+OH-+Fe3+，F(xiàn)enton反應(yīng)是在酸性條件下進(jìn)行的，H2O2在Fe2+的催化作用下氧化產(chǎn)生有色物質(zhì)和具有強氧化能力的·OH，同時，F(xiàn)e2+被氧化成為Fe3+產(chǎn)生有色物質(zhì)[5，6]。

2.3.4對ABTS+自由基清除能力測定

將ABTS水溶液與過硫酸鉀水溶液在暗處反應(yīng)一定時間，得到ABTS+·離子液；使用前將離子液在734nm波長處的吸光度進(jìn)行調(diào)整，30℃條件下平衡30min；取2.0mLABTS+·，加入一定量待測樣品，室溫混勻反應(yīng)一段時間后，于同樣波長處測定吸光度[7]。

3結(jié)果與分析

3.1沾化冬棗核多糖提取液對DPPH·清除作用

DPPH自由基清除能力的測定作為一種普遍的抗氧化能力的測定方法?？寡趸瘎┠軌蚪o穩(wěn)定的DPPH自由基提供氫離子使其失去穩(wěn)定性，由藍(lán)色變成黃色[8]。

水提醇沉多糖液對DPPH·清除效果見圖1。由圖1可以看出，棗核多糖對DPPH·自由基的清除率，在試驗濃度范圍內(nèi)，隨樣品質(zhì)量濃度升高而增大，隨濃度的增大有一定的效量關(guān)系。

3.2沾化冬棗核多糖提取液對ABTS+·的清除作用

由圖2可知，對ABTS+·的清除率，在相應(yīng)的溶液質(zhì)量范圍內(nèi)，隨樣品質(zhì)量濃度升高而逐步增強，最高可達(dá)65.32%；與同質(zhì)量濃度的VC標(biāo)準(zhǔn)品相比，冬棗核多糖對ABTS+·的清除能力相對較弱[9]。

3.3沾化冬棗核多糖提取液對·OH的清除作用

以空白對照作為基準(zhǔn)，測量各濃度樣品的吸光值，可得多糖對羥基自由基的清除效果（圖3）。由圖3所示，棗核中的多糖在比較低的濃度范圍時，對羥基自由基有一定的清除能力，并且可以從該圖看出，在所測定的范圍內(nèi)，清除率與多糖的含量有一定的量效關(guān)系。當(dāng)多糖濃度高達(dá)120μg/mL時，清除率為36.28%[10]。

4結(jié)論和展望

4.1結(jié)論

通過研究，可得以下結(jié)論：棗核多糖具有良好的抗氧化活性，并且其抗氧化能力呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴關(guān)系。從這次試驗中可得，本研究從ABTS+自由基清除率、羥基自由基、DPPH自由基3個方面測定了多糖的體外抗氧化活性，均具有很好的清除作用，對幾種自由基的抑制能力由大到小依次為ABTS+自由基清除率>DPPH自由基>羥基自由基。

4.2展望

棗核多糖具有很高的自由基清除活性，即沾化冬棗棗核是一種新型的天然的抗氧化劑，可用于棗核多糖藥物和功能性食品的開發(fā)。

參考文獻(xiàn)：

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