劉 瑾,袁懷志
(1.重慶市人民醫(yī)院病理科 400013;2.重慶三峽中心醫(yī)院病理科 404000)
·經(jīng)驗交流·
自動組織脫水機乙醇濃度變化對組織脫水的影響及采取對策的探討
劉 瑾1,袁懷志2△
(1.重慶市人民醫(yī)院病理科 400013;2.重慶三峽中心醫(yī)院病理科 404000)
目的 檢測自動組織脫水機中乙醇濃度的變化對組織脫水的影響及采取的對策。方法 實驗采用重慶市人民醫(yī)院病理科購置的TSJ-QD型全自動封閉式組織脫水機的脫水試劑;在監(jiān)測時段內(nèi),每隔1小時用乙醇濃度計測定梯度乙醇濃度的變化,同時了解試劑乙醇濃度的變化情況對組織的影響。結(jié)果 第一缸75%的乙醇每次下降2°,19次后第一缸乙醇只有50°。結(jié)論 由于第一缸75%的乙醇濃度下降在后期對組織脫水有明顯的影響。應及時調(diào)整試劑脫水時間以彌補這種影響。
脫水;乙醇;濃度;組織
自動組織脫水機在處理組織脫水的時段內(nèi),乙醇試劑濃度變化情況對組織固定效果的影響還未見相關報道。傳統(tǒng)的做法就是定時更換,作者采用乙醇濃度計測定梯度乙醇濃度的變化情況,及時調(diào)整對策來減少對組織脫水的影響,保證整個組織脫水的時段內(nèi)組織脫水效果不受到影響,同時又充分發(fā)揮試劑最大效能,降低成本和減少廢液對環(huán)境的影響,為病理診斷提供了優(yōu)良的切片。
1.1 材料
1.1.1 儀器設備 TSJ-QD型全自動封閉式組織脫水機購于常州中威電子儀器有限公司,1°~100°的乙醇濃度計購于河北省武強縣同輝儀表廠。
1.1.2 標本 重慶市人民醫(yī)院所有手術標本,活檢及內(nèi)鏡等標本(重慶市人民醫(yī)院30次共計處理1 789個蠟塊,平均每次59個)。
1.1.3 試劑 10%甲醛固定液購于無錫市江源實業(yè)技貿(mào)總公司,切片石蠟(熔點為56~58 ℃)購于國藥集團化學試劑有限公司,松節(jié)油購于湖南爾康制藥股份有限公司,無水乙醇購于重慶川東化工集團有限公司。
1.2 方法
1.2.1 工作原理 TSJ-QD型全自動封閉式組織脫水機共12缸,每缸容量3 L,其中,1缸為10%甲醛,2、3缸均為75%的乙醇,4、5缸均為95%的乙醇,6、7缸均為100%的無水乙醇,8、9缸均為透明試劑松節(jié)油,10、11、12缸均為56~58 ℃的切片石蠟。
1.2.2 脫水處理時間、試劑更換次數(shù)及方法 脫水處理時間為每缸1 h,每脫水30次更換新試劑,每次更換試劑步奏為:1缸為10%的甲醛,將1缸倒掉,更換新液體;2、3缸均為75%的乙醇,4、5缸均為95%的乙醇,6、7缸均為100%的無水乙醇,把2缸倒掉,依次前移,2缸更換新液放在7缸;8、9缸均為透明試劑,將8缸倒掉,9缸前移,將8缸更換新液放在9缸;10、11、12缸均為56~58 ℃的切片石蠟,更換時將10缸倒掉,依次前移,12缸更換新蠟液[1-2]。
1.2.3 檢測濃度 先檢測基礎濃度,從第二次開始每隔一次組織處理完后定時上午10:00用0~100 ℃的乙醇濃度計測量每一缸的試劑濃度,然后記錄每缸的濃度[3-4]。測定次數(shù)為15次。用500 mL的量筒測定,便于觀察和測量準確,每次將液體倒?jié)M量筒測定。
2.1 測定乙醇濃度變化結(jié)果 表1中,橫排是脫水機6缸不同的乙醇濃度和數(shù)量,豎排1~15是次數(shù),乙醇濃度下的1、2、3分別表示測定的3個周期,就是本實驗第一個脫水周期結(jié)束后,把第一缸乙醇倒掉依次前移后測每缸乙醇濃度的數(shù)字。每缸乙醇濃度的變化如表1所示。
2.2 實測每缸3周期乙醇濃度變化趨勢 見圖1~6。
表1 測定每缸乙醇濃度變化結(jié)果表
圖2 第2缸(3缸)75%乙醇3個周期濃度變化
圖3 第3缸(4缸)95%乙醇3個周期濃度變化
圖4 第4缸(5缸)95%乙醇3個周期濃度變化
圖5 第5缸(6缸)100%乙醇3個周期濃度變化
圖6 第6缸(7缸)100%乙醇3個周期濃度變化
2.3 組織脫水效果 組織在前1~19次(即表1中1~10次的檢測數(shù)據(jù))的時間段內(nèi),任何組織,包括宮內(nèi)膜、壞死組織和厚塊組織脫水都無影響,20~29次(即表1中11~15次的檢測數(shù)據(jù))這段時間特別是宮內(nèi)膜,壞死組織和厚塊組織脫水較差,表現(xiàn)在組織塊的中間是膨脹的,用鑷子壓有彈性,切片時,蠟塊的中間可能切不下來,切片后的蠟塊中間很快會出現(xiàn)凹陷。
以前,脫水試劑乙醇濃度的變化其實際濃度操作者并不確定,每個周期的運行是按照經(jīng)驗把第一缸倒掉,依次前移,把最后一缸換無水乙醇,作者按照這種方式處理組織,在周期的后段時間組織脫水不理想,特別是宮內(nèi)膜、壞死組織和厚塊組織脫水更差,作者通過幾個周期的脫水試劑濃度的測定,了解濃度變化,作者及時調(diào)整脫水時間,來彌補濃度下降對組織脫水的影響,保證了脫水后期的組織處理和制片質(zhì)量[5-7]。
根據(jù)濃度下降的時間,乙醇濃度的變化,作者在周期的第10次檢測開始,出現(xiàn)乙醇濃度下降,因此調(diào)整脫水時間,把第1缸75%乙醇減少30 min,把第2缸75%增加30 min,同時在第1缸100%乙醇(脫水的倒數(shù)第二缸)增加20 min,通過這種時間的調(diào)整,組織脫水取得了很好的效果[8-9],直至第15次檢測乙醇濃度明顯下降,對組織的后期處理和制片質(zhì)量造成影響,需要進行試劑的更換,進入下一個檢測周期。
因為第二缸75%乙醇的第2、3周期起始濃度為第一缸95%乙醇的第一、二周期終末濃度,所以1~15次中周期2和周期3所測數(shù)據(jù)均大于75%。
作者通過測定乙醇試劑濃度,了解濃度變化情況,有針對性地調(diào)整脫水時間,彌補脫水周期中試劑濃度下降對組織脫水的影響,通過脫水時間的調(diào)整,改變了以前后段時間組織脫水效果差,組織脫水不徹底的局面[10-12]。
作者通過測定濃度觀察到,如果試劑更換太勤,低濃度乙醇的濃度不斷提高,最終組織脫水的整個濃度都高,這樣反不好,在組織處理標本數(shù)量中,筆者認為使用30次后更換試劑比較適宜。組織標本數(shù)量多的醫(yī)院,最好是進行脫水試劑濃度檢測,更換試劑的適宜間隔時間需要進一步探索。
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劉瑾(1972-),主管技師,本科,主要從事病理技術研究?!?/p>
,E-mail:4488366@sina.com。
10.3969/j.issn.1671-8348.2017.06.035
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1671-8348(2017)06-0829-03
2016-10-04
2016-11-05)