桔梗多糖提取純化工藝研究進展

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摘要：在查閱、收集國內桔梗多糖提取、分離純化工藝文獻基礎上，綜述近幾年桔梗多糖的提取、分離純化工藝研究進展，旨在為進一步開展桔梗相關研究提供參考。

關鍵詞：桔梗；多糖；提?。患兓?/p>

中圖分類號：R932 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2016）09-0032-02

桔梗為桔?？浦参锝酃＃≒latycodon grandiflorum A. DC）的干燥根，具有降血脂、降血糖、抗炎、止咳化痰、抗腫瘤、抗氧化等功效。桔梗是藥食同源的佳品，全國各地均有栽培。研究表明，桔梗多糖是桔梗中重要的生物活性物質之一，具有較好的抗腫瘤及增強機體免疫活性等作用，廣泛應用于醫(yī)藥、保健食品。國內對桔梗多糖的提取純化進行了大量研究，在查閱收集大量文獻的基礎上，綜述近幾年桔梗多糖的提取、分離純化等研究進展，旨在為進一步進行相關研究提供參考。

1 提取方法

1.1 水浸提法

水浸提桔梗多糖是傳統(tǒng)方法之一，成本低、不破壞生物活性、方便實用且安全性高，但耗時、提取率低。張晶等分析不同提取溫度對桔梗多糖提取率及抗氧化性的影響，結果表明：50 ℃時桔梗多糖的提取率最高，為35.82%；提取率大小依次為50 ℃﹥40 ℃﹥60 ℃﹥30 ℃﹥20 ℃，與40 ℃的提取率相比差異不顯著，與60 ℃的提取率相比差異顯著，與20 ℃、30 ℃的提取率相比差異極顯著。

韓美艷采用傳統(tǒng)的水煮醇沉法提取桔梗多糖，分別考察提取溫度、提取時間、料液比、提取次數(shù)對桔梗多糖提取率的影響，在單因素試驗的基礎上采用4因素3水平正交試驗優(yōu)化到的桔梗多糖提取工藝為：提取溫度80 ℃，提取時間為2 h，提取次數(shù)為2次，料液比為1‥25。通過3次平行驗證試驗得出該方案下桔梗多糖的提取率為42.51%。

1.2 超聲輔助提取法

超聲波輔助提取是在水浸提的同時加超聲波輔助。此法不僅縮短提取時間，提高提取率，同時避免高溫對有效成分的影響。于侃超等采用單因素和正交試驗，比較熱水浸提法、超聲波提取法和微波提取法提取桔梗多糖的最優(yōu)條件，為其深入開發(fā)利用提供依據(jù)，結果表明，超聲波提取法、微波提取法和水提取法的提取率分別為34.16%，31.30%和25.57%；超聲波提取法和微波提取法優(yōu)于傳統(tǒng)的水提取方法，其中超聲波提取法提取率最高，為34.16%；微波提取法提取時間最短，為4 min。

1.4 微波輔助提取法

微波輔助是在水浸提的同時加入微波，此法具有高效、快速、節(jié)能的優(yōu)點。劉暢以桔梗多糖為研究對象，采用單因素分組試驗法對桔梗多糖提取工藝（熱水法、微波輔助提取法及超聲輔助提取法）進行初步研究，比較料液比、溫度、提取時間、微波功率、粒度等因素對多糖提取率的影響。結果表明，微波輔助提取時間最短且多糖提取率最高的最佳工藝條件為：微波功率250 W，微波時間4 min，粒度60目，料液比1‥40。

1.5 其它提取方法

除上述提取方法外，很多研究也嘗試采用超聲波輔助熱水浸提法和微波協(xié)同酶解提取法、超臨界二氧化碳提取法等提取桔梗多糖，均取得了較好的提取率。

劉暢采用單因素及正交實驗對微波輔助熱水浸提桔梗多糖工藝進行了研究，分析了料液比、溫度、提取時間、微波功率、粒度、微波時間等因素對多糖提取率的影響。實驗結果表明傳統(tǒng)熱水提取法的最佳工藝條件：浸提溫度80℃，提取時間240 min，粒度80目，料液比1：20；微波輔助熱水浸提桔梗多糖的最佳工藝條件：料液比1‥20，微波處理時間2 min，微波功率400 W，熱水浸提溫度80℃，粒度80目，熱水浸提時間240 min。采取短時高頻微波前處理利于多糖析出，再通過后續(xù)熱水浸提，其多糖提取率為32.85%，高于傳統(tǒng)熱水浸提（16.59%）和微波提取（22.83%）。

遲宗磊等采用微波協(xié)同酶解法提取桔梗多糖，實驗步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過40-80目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1‥5-10，在水中浸泡8～16 h，加入纖維素酶酶解，再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，在微波條件下酶解，酶解后濃縮并脫色，離心，取上清液濃縮醇沉，再離心，采用乙醇清 洗沉淀，冷凍干燥后并粉碎，得桔梗多糖。

2 分離純化方法

要想得到較純的多糖，則需要除去粗多糖中非多糖組分。通過有機溶劑沉淀得到的多糖帶有一些色素、蛋白質等雜質，所以粗多糖需進行脫色和脫蛋白處理。常用的脫蛋白的方法有Sevag法、鹽酸法、三氟三氯乙烷、酶解等；常用的脫色的方法有雙氧水脫色、樹脂脫色、活性炭脫色、聚酰氨脫色等；純化多糖的方法有分級沉淀法、季銨鹽沉淀法、離子交換層析法、凝膠柱層析法等，但較為常用的是離子交換層析法和凝膠層析法。

華芳等以多糖損失率、蛋白脫除率為指標，比較Sevag法和三氯乙酸法（TCA）的桔梗多糖脫蛋白效果；以脫色率、多糖保留率為指標，比較不同質量分數(shù)的活性炭的桔梗多糖脫色效果；采用柱層析分離純多糖的結果表明：用Sevag法脫蛋白、2%活性炭脫色，依次過DEAE-52纖維素和SephadexG-200，分離純化得到PG和PG2兩個多糖組分。

廖春燕等以蛋白去除率和多糖損失率為指標，比較Sevag法、三氯乙酸-正丁醇法、正丁醇法、AB-8大孔吸附樹脂法去除桔梗多糖中蛋白質的效果。以脫色率和多糖保留率為指標，在單因素的基礎上，采用正交試驗對活性炭脫色工藝進行優(yōu)化。結果表明：AB-8大孔吸附樹脂脫蛋白的效果最好，蛋白去除率為90.1%，多糖損失率為17.4%；活性炭脫色的最佳條件為60 ℃下，調節(jié)pH6.0，加體積分數(shù)為0.5%的活性炭脫色20 min，脫色率為80.47%，多糖保留率為83.51%。

韓美艷采用Sevag法、鹽酸法、三氯乙酸法、酶法、酶法與Sevag結合法等5種方法進行粗多糖脫蛋白，以蛋白清除率和多糖損失率為指標得到的最適方法為三氯乙酸法，蛋白清除率為89.35%，多糖損失率僅8.55%。脫色采用H2O2氧化法，條件為：多糖液‥H2O2=4‥1，用濃氨水或0.1%NaOH調pH值為8.8，37 ℃保溫12 h。采用Sephadex G-25柱層析法脫鹽及小分子物質。純化后的桔梗多糖采用DEAE-纖維素52進行分離得到3種多糖。

3 結語

桔梗是藥食兼用植物，具有極高的保健功效及生物活性，其中桔梗多糖是桔梗的有效成分之一。開展大棗多糖的提取、分離純化等方面的研究，對大棗資源的進一步開發(fā)利用具有重要意義。

參考文獻

[1] 韓美艷.桔梗多糖的提取、分離純化和結構研究[D].鄭州：鄭州大學，2010.

[2] 廖春燕，黃惠.桔梗多糖脫蛋白方法的研究[J].食品工業(yè)科技，2011（9）：246-248.

[3] 劉暢.熱水法？微波輔助法及超聲輔助法提取桔梗多糖的比較研究[J] .當代化工，2016（7）：25-35.

[4] 華芳，王舉濤，桂雙英.桔梗邊角料中桔梗多糖的分離純化研究[J].中成藥，2012，34（7）：1 380-1 382.