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    雞大腸桿菌對(duì)12種抗菌藥的藥敏試驗(yàn)

    2017-03-08 03:38:59楊立姚小青陳海婷常州市金壇區(qū)金城獸醫(yī)站
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2017年3期
    關(guān)鍵詞:麥康凱病狀平皿

    楊立 姚小青 陳海婷/常州市金壇區(qū)金城獸醫(yī)站

    雞大腸桿菌對(duì)12種抗菌藥的藥敏試驗(yàn)

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    雞大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生,但以冬春寒冷和氣溫多變季節(jié)多發(fā)。在自然條件下,本病可發(fā)生于各種年齡的雞,但多發(fā)生于雛雞,特別是3~6周齡內(nèi)的雛雞最為易感。發(fā)病率一般在30%~69%之間,死亡率42%~75%,致死率可高達(dá)100%。隨糞便污染蛋殼的E.coli可感染雞胚,造成雞胚在孵化期死亡。或者被感染的雞胚雖可孵出雛雞,但在第1周內(nèi)即死于臍炎或以卵黃感染而引起生長緩慢。一般情況下,養(yǎng)殖場的大腸桿菌病可通過呼吸道感染而引起。本病常與某些細(xì)菌及病毒同時(shí)感染。傳染源主要是被上述血清型的致病病性E.coli所污染的卵、病雞及其分泌物、排泄物,被污染的飼料、飲水、墊草和塵土等。感染途徑為消化道和呼吸道,鼠和臭蟲是該病病原體的攜帶者。

    一、臨床癥狀

    病禽精神不振,不愛活動(dòng),常呆立于禽舍一隅,羽毛松亂,兩翅下垂,食欲減少等一般性病狀。由于大腸桿菌病的臨診病型不同,可以出現(xiàn)腸炎、敗血癥、呼吸道炎、輸卵管炎、眼炎、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)癥狀、腫頭綜合征等為主的相應(yīng)的癥狀。如雞發(fā)生氣囊炎時(shí),則見病雞呼吸困難,咳嗽,有羅音,羽毛松亂,精神差,食欲減少,肉仔雞則增重緩慢。腸炎型病雞除見一般病狀外,主要是拉稀,消瘦,最后衰竭死亡。關(guān)節(jié)炎時(shí),則見關(guān)節(jié)腫大,跛行。眼炎時(shí),則見流淚,結(jié)膜潮紅,角膜混濁,有膿性分泌物,瞳孔縮小,重者眼前房破潰,失明。神經(jīng)型(腦型)病雞。1986年廣東省首次報(bào)道了大腸桿菌引起的腦炎(現(xiàn)國內(nèi)已有多次報(bào)道),除一般病狀外,主要癥狀是昏睡及神經(jīng)紊亂,歪頭、斜頸,轉(zhuǎn)圈,共濟(jì)失調(diào),抽搐等神經(jīng)癥狀,以及下痢。除以上原發(fā)性感染時(shí)的病型外,如有繼發(fā)或并發(fā)病時(shí),則有其相應(yīng)的病狀。

    二、藥敏試驗(yàn)

    本文就金壇地區(qū)3個(gè)雞場5周齡雞發(fā)生本發(fā)生的以精神不振,采食減少、拉稀等為病癥,部分死亡,剖檢有疑似大腸桿菌病的病例進(jìn)行病原分離鑒定,從分離出的菌株中挑選9株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),旨在為雞大腸桿菌病的診斷和治療提供參考?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果報(bào)告。

    三、試驗(yàn)方法和結(jié)果

    (一)細(xì)菌的分離和培養(yǎng)

    剖解病雞觀察病變,取病變部位(如肝、小腸)進(jìn)行細(xì)菌的分離。用滅菌的接種環(huán)挑取部分組織在麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行三區(qū)劃線。37℃培養(yǎng)24 h,觀察時(shí)候有單個(gè)紅色菌落,同時(shí)取一小部分組織放到LB液體培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24 h進(jìn)行增菌。如麥康凱培養(yǎng)基沒有形成菌落,用LB培養(yǎng)的菌液在麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行三區(qū)劃線,37℃培養(yǎng)24 h觀察是否形成單個(gè)紅色菌落。

    (二)細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)

    對(duì)分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),采用紙片擴(kuò)散法。在“超凈臺(tái)”中,用經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物,以劃線方式將細(xì)菌均勻涂布到麥康凱瓊脂平板上。

    用滅菌接種環(huán)取適量細(xì)菌分別在平皿邊緣相對(duì)四點(diǎn)涂菌,以每點(diǎn)開始劃線涂菌至平皿的二分之一。然后,找到第二點(diǎn)劃線至平皿的二分之一,依次劃線,直至細(xì)菌均勻密布于平皿。

    將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停,去藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面。為了使藥敏片與培養(yǎng)基緊密相貼,可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果,要求藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上;一般可在平皿中央貼一片,外周可等距離貼若干片(外周一般可貼七片),每種藥敏片的名稱要記住。將平皿培養(yǎng)基置于37℃溫箱中培養(yǎng)24 h后,觀察效果。

    (三)藥敏試驗(yàn)結(jié)果

    判定標(biāo)準(zhǔn):抑菌圈直徑(φ)≥18 mm為高度敏感;抑菌圈直徑18 mm>(φ)≥14 mm為中度敏感;抑菌圈直徑14>(φ)≥10 mm為低度敏感;抑菌圈直徑10 mm>(φ)為耐藥。

    四、討論

    此項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果證實(shí):不論是標(biāo)準(zhǔn)菌株還是所分離的大腸桿菌對(duì)安普霉素、阿米卡星具有高度敏感性;新霉素、慶大霉素、頭孢噻肟鈉、恩諾沙星、環(huán)丙沙星敏感性居中;而對(duì)氟苯尼考、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、頭孢氨芐抑菌作用較低,甚至已產(chǎn)生耐藥性。安普霉素、阿米卡星、慶大霉素及新霉素均為氨基糖苷類抗生素,對(duì)金葡菌、綠膿桿菌、大腸桿菌及變形桿菌等均有效。此項(xiàng)試驗(yàn)證實(shí):氨基糖苷類抗生素不僅對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株具有較強(qiáng)的抗菌活性,而且對(duì)各種臨床菌株也具有較強(qiáng)的抗菌活性。掌握雞致病性大腸桿菌的耐藥情況,通過藥敏試驗(yàn)尋找療效最好的藥物,是解決大腸桿菌病的主要手段。

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