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    CellaVision DM96血細胞數(shù)字圖像分析儀計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的性能評價

    2017-03-07 12:18:02張磊張彥平張雯王金華黃倫徐陽
    臨床檢驗雜志 2017年2期
    關鍵詞:網(wǎng)織數(shù)字圖像分析儀

    張磊,張彥平,張雯,王金華,黃倫,徐陽

    (西安交通大學第二附屬醫(yī)院檢驗科,西安 710004)

    ·產(chǎn)品應用研究·

    CellaVision DM96血細胞數(shù)字圖像分析儀計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的性能評價

    張磊,張彥平,張雯,王金華,黃倫,徐陽

    (西安交通大學第二附屬醫(yī)院檢驗科,西安 710004)

    目的 評價CellaVision DM96血細胞數(shù)字圖像分析儀(簡稱“DM96”)計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的性能。方法 隨機選取116例EDTA-K2抗凝全血標本,用DM96、手工法、Sysmex XE-2100(簡稱“XE-2100”)和Beckman Coulter LH750(簡稱“LH750”)計數(shù)網(wǎng)織紅細胞并比較。結果 用DM96紅細胞分析模塊計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,與XE2100、LH750、手工法差異無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 用DM96紅細胞分析模塊計數(shù)網(wǎng)織紅細胞性能良好。

    網(wǎng)織紅細胞;Cella Vision DM96;紅細胞分析模塊

    基于人工神經(jīng)網(wǎng)絡(artificial neural network)智能技術的CellaVision DM96血細胞數(shù)字圖像分析儀(以下簡稱“DM96”)運用影像法分析外周血細胞,針對白細胞(WBC)檢測表現(xiàn)良好。DM96對中性粒細胞(Ne)、淋巴細胞(Ly)、單核細胞(Mo)、嗜酸性粒細胞(Eo)、嗜堿性粒細胞(Ba)和原始細胞(Blast)識別能力較高,但對早幼粒細胞、中幼粒細胞、晚幼粒細胞的鑒別缺乏準確性[1-2]。在紅細胞識別方面,DM96基礎版本可鑒別部分異常RBC形態(tài),升級版本紅細胞分析模塊依據(jù)RBC大小、著色程度、形狀、內(nèi)含物及均一度等可識別更多的異常RBC形態(tài),且給出定量結果[3]。與人工檢測費時相比,該功能準確高效的性能已在各種異常RBC形態(tài)檢測中得到驗證[4]。本研究利用DM96升級版本紅細胞分析模塊自動識別RBC內(nèi)含物的原理定量檢測網(wǎng)織紅細胞,并與手工法、Sysmex XE-2100(以下簡稱“XE-2100”)和Beckman Coulter LH750(以下簡稱“LH750”)計數(shù)網(wǎng)織紅細胞比較。

    1 材料與方法

    1.1 標本來源 收集西安交通大學第二附屬醫(yī)院2016年1至4月門診和住院患者EDTA-K2抗凝全血標本共116例,室溫(18~22 ℃)放置,2 h內(nèi)完成檢測。

    1.2 儀器與試劑 XE-2100全自動血液分析儀、SP-1000i自動推片染色儀及其原裝配套試劑(日本Sysmex公司);LH750全自動血液分析儀及其原裝配套試劑(美國Beckman Coulter公司);DM96 自動化血細胞數(shù)字圖像分析儀(瑞典Cellavision AB 公司);煌焦油藍染液、瑞氏染液(珠海BASO公司);微量移液器等。

    1.3 實驗方法 儀器法:用XE-2100和LH750嚴格按血液分析儀的操作規(guī)程檢測116例標本。手工法:用微量移液器吸取EDTA-K2抗凝全血標本100 μL于反應杯中,與煌焦油藍按1∶1混勻染色,室溫下放置30 min。將反應杯中標本混勻放入SP-1000i自動推片染色機中,選擇手動模式中微量模式制作血涂片,用瑞氏染液復染(染色過程:甲醇固定2 min,瑞氏染液染色1 min,加緩沖液2 min,沖洗1 min,干燥1 min)。由兩位中級職稱以上的從事血液形態(tài)學檢驗的技師在顯微鏡下計數(shù)1 000個RBC中網(wǎng)織紅細胞的比例,取平均值為手工法網(wǎng)織紅細胞結果。

    DM96自動計數(shù)法:將制作好的涂片放入DM96讀片盒中,按標準操作規(guī)程將讀片盒放入DM96中掃描、定位及細胞分類計數(shù)。DM96紅細胞形態(tài)分析模塊可預判RBC內(nèi)含物(inclusions)的形態(tài)分類結果,即:Howell-Jolly(豪焦小體)、Pappenheirner(帕彭漢姆小體)、basophilic stippling(嗜堿性點彩紅細胞)、paracites(瘧原蟲)。將這4種預判形態(tài)RBC個數(shù)與總數(shù)N(number of RBCs used for pre-characterization)比值作為預判網(wǎng)織紅細胞結果。點擊RBC形態(tài)分析(individual cells)界面人工復檢含有煌焦油藍著色的RBC,將判定沒有著色的RBC補充計數(shù),歸類校準為最終DM96的網(wǎng)織紅細胞。

    1.4 統(tǒng)計學分析 用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行。多組比較用方差分析,用Pearson相關分析相關性;以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    DM96、XE-2100、LH750和手工法網(wǎng)織紅細胞計數(shù)結果(%)分別為1.98±0.29、2.01±0.21、1.89±0.19、1.85±0.74,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。DM96與XE2100、LH750、手工法計數(shù)網(wǎng)織紅細胞結果的相關系數(shù)分別為0.854、0.584、0.816(P均<0.05)。

    3 討論

    近年來全自動流式細胞核酸染色法血液分化儀已廣泛應用于臨床。XE-2100網(wǎng)織紅細胞流式細胞核酸染色法,通過檢測前向散射光和側向熒光信息,獲得網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量和成熟參數(shù);LH750全自動血液分析儀采用VCS技術原理檢測網(wǎng)織紅細胞;網(wǎng)織紅細胞成熟參數(shù)各廠家的參考值不同,推測由于染色試劑與檢測原理不同對網(wǎng)織紅細胞靈敏度不同[5]。

    儀器法檢測網(wǎng)織紅細胞具有一定的局限。Brown等[6]發(fā)現(xiàn),Howell-Jolly小體、瘧原蟲、大血小板、紅細胞聚集、冷凝集素或藥物均直接干擾儀器法網(wǎng)織紅細胞參數(shù)的檢測;在網(wǎng)織紅細胞比例增高(約 20.0%)時,流式細胞儀法檢測結果與鏡檢法相差甚遠;鏡檢法直接觀察細胞形態(tài)可排除此類干擾和偏差,故儀器計數(shù)網(wǎng)織紅細胞仍需推片復檢。

    傳統(tǒng)手工顯微鏡法計數(shù)網(wǎng)織紅細胞影響因素較多。本研究采用SP-1000i全自動推片染色儀可排除因手工推片而造成的血涂片薄厚不均、細胞分布不均勻、染色時間長等因素。煌焦油藍染色外周血涂片,在DM96上自動化識別網(wǎng)織紅細胞可排除人為影響因素。

    Mahe等[7]用CellaVision DM96紅細胞形態(tài)分析模塊計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,與流式細胞核酸染色法的檢測結果無差異;本研究結果與其報道一致。目前國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)CellaVision DM96對網(wǎng)織紅細胞計數(shù)做過相關報告,亦未有網(wǎng)織紅細胞復染DM96閱片的相關報告。本研究用SP-1000i自動推片染色儀和網(wǎng)織紅細胞復染進行半自動化的血涂片制作,用CellaVision DM96自動化紅細胞形態(tài)分析模塊計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,其圖片可永久性保存并具備良好的溯源性。另外,DM96紅細胞分析模塊所檢測分析的紅細胞數(shù)量>2 000,與人工抽樣檢測相比更具準確性。

    [1]Lee LH, Mansoor A, Wood B,etal. Performance of CellaVision DM96 in leukocyte classification[J]. J Path Informatics, 2013, 4:14.

    [2]Egelé A, Stouten K, Van der Heul-Nieuwenhuijsen L,etal. Classification of several morphological red blood cell abnormalities by DM96 digital imaging[J]. Int J Lab Hematol, 2016, 38(5):e98-e101.

    [3]Criel M, Godefroid M, Deckers B,etal. Evaluation of the Red Blood Cell Advanced Software Application on the CellaVision DM96[J]. International Int J Lab Hematol, 2016, 38(4):366-374.

    [4]BreReton M, Mccafferty R, Marsden K,etal. Recommendation for standardization of haematology reporting units used in the extended blood count[J]. Int J Lab Hematol, 2016, 38(5):472-482.

    [5]時永輝, 王鋒, 洪駿,等. LH750與XE2100血液分析儀檢測未成熟網(wǎng)織紅細胞指數(shù)的比較[J]. 臨床檢驗雜志, 2012, 30(6):424-425.

    [6]Brown M, Wittwer C. Flow cytometry: principles and clinical applications in hematology[J]. Clin Chem, 2000, 46(8 Pt 2):1221-1219.

    [7]Mahe ER, Higa D, Naugler C,etal. Accuracy of the CellaVision DM96 platform for Reticulocyte counting[J]. J Path Informatics, 2014, 5(1):17.

    (本文編輯:王海燕)

    10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.21

    張磊,1983年生,男,主管技師,碩士,主要從事臨床檢驗工作,E-mail:616867536@qq.com。

    R446

    A

    2016-11-24)

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