微小RNA對心力衰竭患者早期診斷價值的Meta分析

陳君 張振海 姜婷 李春雨 王魏魏 畢超 趙鵬程 張勁松孟潔 郝瑜 陳彥，

微小RNA（miRNA）是一種小分子非編碼RNA，可以通過抑制翻譯，誘導降解的方式參與多種基因調控的表達，近些年受到研究者的廣泛關注。心力衰竭被定義為一種心臟結構或功能異常所致的臨床綜合征，患者具有典型的特征（如氣短、踝部水腫和疲乏），伴有頸靜脈壓升高，肺部濕啰音和外周性水腫等體征，可導致患者靜息或應激狀態(tài)下心輸出量減少或心腔內壓力升高［1］。心衰為各種心臟疾病嚴重和終末階段，發(fā)病率高。是當今最重要的心血管病之一。此外，許多病理疾病狀態(tài)都可能發(fā)展成為心力衰竭，如心肌梗死、心肌肥大、心肌炎等［2］。目前，心力衰竭的診斷主要依靠患者的癥狀、超聲心動圖、心動圖、BNP等綜合診斷。然而近年來許多研究報道表明miRNA參與心血管系統(tǒng)多種疾病的發(fā)生發(fā)展。探討miRNA在心力衰竭中的可能的調控機制和在心力衰竭中的表達水平有助于今后對心力衰竭的臨床診斷提供新的思路。筆者采用Meta分析法匯總分析miRNAs對心力衰竭患者的診斷價值。

一、資料與方法

1.一般資料：研究類型為隨機對照試驗（RCT）［2］：納入標準［3］：（1）研究對象符合紐約心臟協(xié)會（NYHE）心衰患者及健康者對照。（2）年齡≥18周歲且≤90周歲。（3）以靈敏度（SEN）、特異度（SPE）作為主要指標的文獻，能夠提取真陽性（TP）、真陰性（TN）、假陽性（TN）、假陰性（FN）等相關數(shù)據。（4）文獻能獲取全文且原始數(shù)據具體完整。（5）相同作者發(fā)表的類似文章，選取納入病例量較大的。排除標準：（1）非隨機對照研究。（2）其他生物類型的研究文獻。（3）重復或低質量文獻。（4）文獻類型為綜述、個案報道或meta分析等。（5）不能獲得全文的文獻。

2.方法：（1）測量指標：采用靈敏度（Sen）、特異度（Spe）、診斷優(yōu)勢比（DOR）、受試者工作特征曲紅（ROC）下面積（AUC）作為評價指標。（2）網絡檢索：檢索 PubMed、Medline、Web of science、CoChrane library、中國期刊全網全文數(shù)據庫（CNKI）、萬方數(shù)據庫等，截止時間為2015年12月，檢索詞包括“MiRNAs”、“microRNA”或“微小 RNA”和“HF”、“Heart Failure”、“心力衰竭”，同時手工檢索相關雜志并在參考文獻中追蹤簡閱相關文獻，以免遺漏。（3）文獻篩查和資料提?。河蓛晌华毩⒃u價者按照納入和排除標準篩選文獻，而后進一步查找并閱讀全文復篩。完成交叉核對，意見不一致時通過專家討論解決，提取內容包括：一般資料（文題、作者姓名、發(fā)表日期和文獻來源等），患者基本信息（數(shù)量、平均年齡、性別及檢測指標等），研究的miRNAs種類，對照的生物標志物，測量指標包括靈敏度、特異度、真陽性數(shù)、假陽性數(shù)、真陰性數(shù)、假陰性數(shù)等。（4）質量評價：對于納入文獻的全文，按照Cochrane Handbook隨機對照試驗質量評價的標準，從分配序列的產生、隱藏分組、盲發(fā)、失訪4個方面對每篇文獻的質量進行評價，將每個方面按是、否和不清楚分為三級。

3.統(tǒng)計學分析：利用Meta Disc軟件進行統(tǒng)計分析和數(shù)據處理。用計算Cochran-Q統(tǒng)計量與I2值對靈敏度、特異度、診斷優(yōu)勢比進行異質性檢驗，Q值服從X2分布，若檢驗結果為P＞0.10或I2＜50%時，表明多個研究具有同質性；若多個研究結果為P≤0.10或I2＞50%時，表明存在顯著異質性。如果各研究之間無異質性，則進行效應量的合并，反之則用隨機效應模型來合并。比較參數(shù)的差異和分析是否有統(tǒng)計學意義。

二、結果

1.納入文獻基本情況：最初檢出文獻1 772篇，剔除重復文獻203篇，對篩選后的文章閱讀摘要后排除1 241篇，初步納入328篇。閱讀全文后根據納入排除標準剔除文獻520篇，最終納入8個研究［4-11］，共624例受試者。

2.總miRNAs：8個研究共牽涉及19種 miRNA，用于診斷結果的Spearman相關系數(shù)＝－0.072（P＞0.05），提示在8項研究的結果中不存在閾值效應，Q檢驗提示入選研究之間不存在出閾值效應以外的其他異質性來源，靈敏度、特異度及其可信區(qū)間（CI）以及 SROC分別為 0.75（0.72～0.78），0.67（0.63～0.70）和0.7818。見圖1～2。

3.亞組分析：共有 5篇研究［6-10］報道了 miRNA423-5p，各研究之間異質性明顯（P＜0.10），進行異質性來源分析，計算靈敏度對數(shù)與（1-特異度）對數(shù)的Spearman相關系數(shù)＝－0.103（P＞0.05），提示不存在閾值效應，根據樹狀圖可得知異質性來源主要來源于Ellis KL［8］的研究，剔除后異質性為0，計算其合并靈敏度、特異度、診斷性OR及其95%CI和ROC為0.83（0.75，0.88）、0.71（0.62，0.79）、13.69（4.31，43.52）、0.8933。見圖3～5。

圖1 總miRNAs的SROC

圖2 總miRNA的敏感度及特異度

圖3 miRNA423－5p的SROC

圖4 miRNA對心力衰竭診斷的影響

圖5 miRNA4234-P的敏感度及特異度

三、討論

心力衰竭是一種造成死亡和殘疾的全球性的心血管疾病，多見于老年人。同時心力衰竭是有多種臨床癥狀的復雜進行性疾病，其原因是由于病變的心臟不能提供維持器官代謝需要的血流量。許多病理疾病狀態(tài)都能發(fā)展成為心力衰竭。miRNA在心力衰竭診斷中的作用也日漸重要。筆者通過系統(tǒng)檢索關于miRNAs診斷心力衰竭的研究，最終納入8項研究，涉及miRNAs一共19種，其中研究較多的有1種，為miRNA423-5p。

關于miRNAs的診斷價值。就靈敏度而言，本文得到的總miRNA、miRNA-423-5p分別為0.75和0.83，可以看出miRNA-423-5p診斷心力衰竭的靈敏度較高。從特異度來講，本文得到的總miRNA及miRNA-423-5p分別為0.67和0.71，可以看出miRNA423-5p診斷心力衰竭的特異度較高。

目前，miRNA在診斷心力衰竭的作用更加重要，Watson等［13］選擇 miR-30c，-146a，-221，-328，-375等 5種 miRNA對非心力衰竭和心力衰竭患者的表達量進行分析。由于表達量在非心力衰竭及心力衰竭患者中的表達量有差異，發(fā)現(xiàn)與單純使用BNP作為診斷標準比較，BNP聯(lián)合miRNA能夠顯著區(qū)分出非心力衰竭患者及心力衰竭患者。Ellis［14］也發(fā)現(xiàn) 4種 miRNA（miR-103，miR-142-3p，miR-30b，miR-342-3p）聯(lián)合腦鈉肽前體（NT-proBNP）水平分析能提高其診斷價值。本研究中，關于miRNAs和傳統(tǒng)生物標志物的相關性，本文納入的8項研究中有4篇提到了pro-BNP，其中5篇提到了BNP，表明新型標志物miRNAs和傳統(tǒng)標志物存在較強的相關性。目前miRNA作為一種新型標志物，miRNA中的一種或多種聯(lián)合BNP診斷使用能夠顯著提高心力衰竭診斷的特異性，同時能夠明顯減少診出時間，雖然目前miRNA作用機制已經明確，但是我們能掌握的只是很小的一部分，大量miRNA的調控機制仍未清楚，尚停留在表達水平的檢測階段，真正把miRNA作為診斷方法還需要進一步的探索，但是miRNA在心力衰竭疾病的探索為以后開發(fā)新的分子水平的診斷方法提供了新的思路。

本系統(tǒng)評價仍有一些不足：首先miRNA檢驗心力衰竭的研究近年來才剛剛起步，相關報道較少，雖然盡可能采取多種途徑廣泛收集國內外文獻，但由于本文只檢索了中、英文文獻，所以部分國家及地區(qū)的文獻不能納入，從而造成了一些文獻的缺失，研究納入的心力衰竭患者嚴重程度及miRNAs的檢測儀器及方法不同將會影響Meta分析結果。未來需要大量研究來為其進入臨床應用提供理論基礎。

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