狄敏,王聰
(濰坊護(hù)理職業(yè)學(xué)院,山東 濰坊 261000)
流式細(xì)胞術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
狄敏,王聰
(濰坊護(hù)理職業(yè)學(xué)院,山東 濰坊 261000)
隨著社會發(fā)展,國家加大了醫(yī)學(xué)方面的研究力度,流式細(xì)胞術(shù)是一種具有廣闊前景的細(xì)胞分析技術(shù),其具有很多優(yōu)勢,不僅具有很高的分辨率,同時(shí)細(xì)胞數(shù)量大且參數(shù)多,準(zhǔn)確度高,因此越來越受到重視。隨著其及時(shí)不斷的發(fā)展,其應(yīng)用也在不斷的拓展,在未來都會成為臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展非常重要的部分,因此需要重點(diǎn)加強(qiáng)對其的研究?;诖吮疚姆治隽肆魇郊?xì)胞術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用。
流式細(xì)胞術(shù);臨床檢驗(yàn);應(yīng)用
從目前的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域知道,流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)是多種及時(shí)結(jié)合的高效產(chǎn)物,包括近代生物學(xué)和分子生物學(xué)、流體力學(xué)、分子免疫學(xué)、激光技術(shù)等,其最大的優(yōu)勢是能科學(xué)地進(jìn)行單細(xì)胞或者是其他細(xì)胞抗原體的檢查,并且速度非常快,能夠得到更為科學(xué)的檢測結(jié)果[1]。
在目前的醫(yī)院領(lǐng)域中FCM的結(jié)構(gòu)主要的組成分為5個(gè)部分,即:①流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng);②激光光源及成形系統(tǒng);③光學(xué)系統(tǒng);④信號檢測、存貯、顯示、分析系統(tǒng);⑤細(xì)胞分選系統(tǒng)。其具有很多特點(diǎn),主要是以下幾個(gè)方面:①速度非??欤罡叩挠涗浭悄軌蜻M(jìn)行十萬個(gè)細(xì)胞的測量。②能夠進(jìn)行多個(gè)參數(shù)的測量,并且有效地進(jìn)行信息細(xì)胞的分類,其主要的使用是將經(jīng)熒光染料標(biāo)記過的細(xì)胞樣品制成單細(xì)胞懸液,同時(shí)將其送入到流動室中,整個(gè)過程中是依靠氣壓裝置進(jìn)行的,而對于流動室主要是由兩部分組成,即試品管和鞘液管,鞘液管內(nèi)裝滿了鞘液,在這個(gè)過程中鞘液和供試品的壓力是不一樣的,當(dāng)其到達(dá)了一個(gè)程度的時(shí)候,鞘液就會使得供試品有序的進(jìn)行排練,然后每一個(gè)都需要通過噴嘴進(jìn)入在燃料中,并且在激光的檢測區(qū)域進(jìn)行檢測,還需要進(jìn)行波長選擇。最后以直方圖或二維圖的形式顯示出來。
2.1 FCM在免疫學(xué)中的應(yīng)用 隨著社會的不斷發(fā)展,進(jìn)一步促進(jìn)了單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展,F(xiàn)CM在免疫學(xué)中占據(jù)著越來越重要的位置。使用FCM進(jìn)行淋巴細(xì)胞表皮抗原的檢測,能夠有效地進(jìn)行淋巴細(xì)胞的各個(gè)數(shù)量以及之間的比例計(jì)算,同時(shí)也能夠有效的掌握相關(guān)功能,為后續(xù)的治療提供有效的保障。就目前的情況來看,健康的人外周血中CD4+T淋巴細(xì)胞與CD8+T淋巴細(xì)胞的比例為2:1,但是如果患者自身患有風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,就會進(jìn)一步增加血液中CD4+T淋巴細(xì)胞與CD8+T淋巴細(xì)胞的比例,因此需要盡早使用淋FCM進(jìn)行診斷。艾滋病患者的CD4+T淋巴細(xì)胞與CD8+T淋巴細(xì)胞的比例是比正常人的要低的,感染人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)未發(fā)病的人CD4+T過流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞亞群的計(jì)數(shù)和比例對于這類病癥的檢測具有非常重要的意義,需要引起我們的高度重視[2,3]。
人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)是人類白細(xì)胞抗原,目前將其劃分到MHCI中,其也會顯示在各個(gè)核細(xì)胞表面,尤其是表面水平非常高。就目前的情況來看,健康人群中HLA-B27的陽性率的范圍是5%-11%,強(qiáng)直性脊柱炎患者HLA-B27的陽性率的比例已經(jīng)占據(jù)了90%以上,因此在診斷的時(shí)候會因?yàn)閺?qiáng)直性脊柱炎與其他相關(guān)疾病具有很多類似,不容易被診斷出,對此HLA-B27的檢測對于強(qiáng)直性脊柱炎疾病的診斷具有非常重要的作用,需要引起我們的重視。
2.2 流式細(xì)胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用
2.2.1 急性白血病 正常的血液細(xì)胞對于不同的發(fā)育階段表面表達(dá)相應(yīng)的細(xì)胞分化抗原(cluster of differentiation,CD)。白血病細(xì)胞CD的表達(dá)如果出現(xiàn)雜亂的情況,就被叫做白血病相關(guān)表型。(1)主要是抗原的交叉表達(dá)形式,例如髓系和CD會表達(dá)在同一個(gè)細(xì)胞內(nèi)。(2)抗原表達(dá)不同步,其主要是體現(xiàn)在白血病細(xì)胞上,其能夠反映出各個(gè)抗原的狀態(tài)。(3)抗原表達(dá)不一致,時(shí)而高時(shí)而低。因此流式細(xì)胞能夠直觀地進(jìn)行白細(xì)胞的診斷和分析,并且對于白細(xì)胞的匹對也具有非常重要的作用,因此需要進(jìn)一步加強(qiáng)研究。
2.2.2 血小板減少性疾病 就目前的情況來看,外周血小板減少的原因是多方面的,主要有:(1)骨髓造血功能出現(xiàn)了問題;(2)血小板破壞的太多;(3)儲存池的問題。網(wǎng)織血小板的檢查能夠?qū)Σ∫蚱鸬椒浅V匾淖饔谩>W(wǎng)織血小板的內(nèi)部會有遺留的RNA,噻唑橙(TO)能夠有效地結(jié)合RNA,從而會發(fā)出綠色的熒光,而這個(gè)強(qiáng)度也是和RNA有著直接的聯(lián)系,能夠直接進(jìn)行血小板的含量的檢測。
2.3 流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用 隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,醫(yī)學(xué)臨床研究也得到進(jìn)一步發(fā)展,流式細(xì)胞術(shù)是腫瘤學(xué)中非常重要的部分,其主要是進(jìn)行DNA的含量測定,檢測結(jié)果有助于醫(yī)護(hù)人員選擇治療方案。使用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行腫瘤方面的研究具有很多優(yōu)勢,能夠早期的診斷惡性腫瘤,同時(shí)也能夠幫助后期腫瘤的治療以及護(hù)理。流式細(xì)胞術(shù)技術(shù)的應(yīng)用也能夠有效的對惡性腫瘤中的DNA含量進(jìn)行分析,并且顯示整體的治療效果,從而能夠在很大程度上增加患者的信心。流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用腫瘤學(xué)中具有非常重要的作用,能夠推動該領(lǐng)域的發(fā)展,因此需要進(jìn)一步對其的研究[4,5]??傊?,醫(yī)療監(jiān)測技術(shù)越來越成熟,目前在臨床檢驗(yàn)中已經(jīng)廣泛的應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù),其具有良好的發(fā)展前景,進(jìn)一步加強(qiáng)對其的研究非常有必要。
[1]崔巍,吳衛(wèi).流式細(xì)胞術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2005,7(2): 147-151.
[2]陳樹輝,黎紹仕.流式細(xì)胞術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(24): 187-189.
[3]周琳,高春芳,仲人前.流式細(xì)胞術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007,22(3): 225-229.
[4]張奇,李培武.黃曲霉毒素免疫檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全,2013(3): 42-46.
[5]王小環(huán),吳紹強(qiáng).免疫熒光檢測技術(shù)及其在寄生蟲檢測中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī),2012,39(3): 81-84.