G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)在診斷侵襲性肺部真菌感染的臨床應(yīng)用

王孟麗，劉俊曉

（洛陽(yáng)市中心醫(yī)院，河南 洛陽(yáng) 471000）

G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)在診斷侵襲性肺部真菌感染的臨床應(yīng)用

王孟麗，劉俊曉

（洛陽(yáng)市中心醫(yī)院，河南 洛陽(yáng) 471000）

目的探討1,3-β-D葡聚糖檢測(cè)（G試驗(yàn)）和半乳甘露聚糖抗原檢測(cè)（GM試驗(yàn)）在侵襲性肺部真菌感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值，尤其是慢性阻塞性肺疾?。–OPD）合并真菌感染的診斷。方法回顧性調(diào)查洛陽(yáng)市中心醫(yī)院近1年內(nèi)208例確診為侵襲性肺部真菌感染患者，此研究對(duì)象同時(shí)做G試驗(yàn)檢測(cè)、GM試驗(yàn)檢測(cè)、痰液真菌培養(yǎng)，將結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果208例患者中，128例患者真菌培養(yǎng)陽(yáng)性，酵母菌99例，曲霉菌29例。酵母菌中，白色念珠菌64例，熱帶念珠菌15例，克柔念珠菌11例，光滑念珠菌7例，近平滑假絲酵母菌2例。試驗(yàn)設(shè)定3組，第一組為G試驗(yàn)含量增高而GM試驗(yàn)正常，第二組為G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)含量均增高，第三組為G試驗(yàn)含量正常組，再分別對(duì)3組內(nèi)患者的真菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行研究。結(jié)論G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)較真菌培養(yǎng)特異性高，可作為侵襲性肺部真菌感染的輔助診斷。

侵襲性真菌感染；G試驗(yàn)；GM試驗(yàn)

侵襲性肺部真菌感染是指真菌引起的支氣管肺部真菌感染，其臨床表現(xiàn)不特異，主要表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、咯血、呼吸困難，影像學(xué)主要表現(xiàn)為雙肺多發(fā)斑片影、結(jié)節(jié)影或彌漫病變[1]。肺部真菌感染是老年慢性阻塞性肺疾病（COPD）主要的并發(fā)癥[2]。隨著抗生素的不合理應(yīng)用、糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的使用以及呼吸機(jī)輔助呼吸在COPD中的廣泛應(yīng)用，COPD合并真菌感染呈上升趨勢(shì)。1,3-β-D葡聚糖檢測(cè)（G試驗(yàn)）和半乳甘露聚糖抗原檢測(cè)（GM試驗(yàn)）較傳統(tǒng)的真菌培養(yǎng)方法快速且陽(yáng)性率高[3]，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法的不足，在G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)，觀察患者的痰培養(yǎng)培養(yǎng)和痰涂片鏡檢結(jié)果，兩者相結(jié)合可為臨床提供更精準(zhǔn)的診斷依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)研究中G試驗(yàn)是檢測(cè)血清中1,3-β-D葡聚糖的含量，檢測(cè)方法是動(dòng)態(tài)顯色法，GM試驗(yàn)是檢測(cè)血清中的半乳甘露聚糖，檢測(cè)方法是酶免法。有研究[4]表明，顯色法試劑盒較濁度法試劑盒檢測(cè)準(zhǔn)確度與臨床診斷符合率更高，可更好服務(wù)于臨床。

1 材料與方法

1.1 材料 G試驗(yàn)試劑盒和GM試驗(yàn)試劑盒均購(gòu)于丹娜公司；酶標(biāo)儀購(gòu)于上海閃譜生物科技有限公司；

1.2 方法 搜集整理2016年1月-2016年12月洛陽(yáng)市中心醫(yī)院208例確診為侵襲性肺部真菌感染患者，排除肺結(jié)核、支氣管擴(kuò)張及肺癌患者，同時(shí)對(duì)研究對(duì)象做G試驗(yàn)檢測(cè)、GM試驗(yàn)檢測(cè)和痰液真菌培養(yǎng)。根據(jù)G試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果和GM試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果將實(shí)驗(yàn)分為3組，第一組為G試驗(yàn)含量增高而GM試驗(yàn)含量正常，第二組為G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)含量均增高，第三組為G試驗(yàn)含量正常組，再分別對(duì)3組內(nèi)患者的真菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行研究，對(duì)其數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

208例研究對(duì)象中有128例患者痰液真菌培養(yǎng)陽(yáng)性，酵母菌99例，曲霉菌29例。酵母菌中其中白色念珠菌64例，熱帶念珠菌15例，克柔念珠菌11例，光滑念珠菌7例，近平滑假絲酵母菌2例。有58例患者G試驗(yàn)含量增高，陽(yáng)性率為27.8%，有150例患者G試驗(yàn)含量正常，占總數(shù)的72.2%。58例G試驗(yàn)含量增高患者中同時(shí)出現(xiàn)GM試驗(yàn)含量正常的患者是24例，GM試驗(yàn)含量增高的患者是34例。分別對(duì)3組中的痰液真菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行分析，第一組真菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者為 15例，第二組真菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者為32例，第三組真菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者為81例。此數(shù)據(jù)顯示G試驗(yàn)含量增高的兩組真菌培養(yǎng)陽(yáng)性率（81.0%）明顯高于G試驗(yàn)含量正常組（54.0%），第一組的陽(yáng)性率是62.5%，第二組的陽(yáng)性率是94.1%，第三組的陽(yáng)性率是54.0%。以真菌培養(yǎng)為標(biāo)準(zhǔn)，G試驗(yàn)的敏感度為48.3%，特異度為95.0%。G試驗(yàn)較真菌培養(yǎng)敏感度高特異性強(qiáng)，G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)能提高真菌的陽(yáng)性檢出率，在侵襲性肺部真菌感染診斷中具有較高的臨床價(jià)值。

3 討論

肺部真菌感染的診斷非常困難，因早期并沒(méi)有特征性的臨床癥狀，患者一旦發(fā)生肺部真菌感染，死亡率很高[5]，因此，及時(shí)診斷并制訂科學(xué)有效的臨床治療方案是治療肺部真菌感染的關(guān)鍵，這樣在提高臨床治療效果的同時(shí)也降低了病死率[6]。同時(shí)對(duì)老年COPD應(yīng)加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)支持、減少?gòu)V譜抗菌藥物使用種類(lèi)和時(shí)間、避免全身糖皮質(zhì)激素的使用,可減少肺部真菌感染的發(fā)生[7]。

我們都知道，G試驗(yàn)是一種真菌感染的早期重要實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)之一[8]，一般先于臨床癥狀平均4 d，是早期真菌感染診斷的重要檢測(cè)手段。G試驗(yàn)主要檢測(cè)的是念珠菌，GM試驗(yàn)主要檢測(cè)的是曲霉菌，因此，在結(jié)果判斷時(shí)，如果G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)同時(shí)增高，則考慮曲霉菌感染的可能性大，如果單純G試驗(yàn)結(jié)果增高，則考慮念珠菌感染的可能性較大。另外，G試驗(yàn)可為艾滋病合并肺孢子菌肺炎患者診斷提供一定實(shí)驗(yàn)室參考依據(jù)[9]，如果艾滋患者為肺孢子蟲(chóng)感染時(shí)，G試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果會(huì)非常高。

日常工作中我們常見(jiàn)的是血清G試驗(yàn)檢測(cè)，有文獻(xiàn)[10,11]報(bào)道，肺泡灌洗液G試驗(yàn)的特異度高于血清G試驗(yàn)。另外，G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)在檢測(cè)的過(guò)程中，對(duì)于嚴(yán)重的脂血和黃疸標(biāo)本，應(yīng)給予拒收。要注意無(wú)菌操作，不能在操作的過(guò)程中造成污染，而造成假陽(yáng)性。另外，抗腫瘤藥物的應(yīng)用以及蘑菇類(lèi)食物等都會(huì)對(duì)G試驗(yàn)造成假陽(yáng)性的結(jié)果。近平滑念珠菌、隱球菌和接合菌感染、免疫復(fù)合物形成、使用某些抗真菌藥物（如卡泊芬凈）等會(huì)對(duì)G試驗(yàn)造成假陰性的結(jié)果，但是，也有文獻(xiàn)[12]認(rèn)為有25%的隱球菌感染者G試驗(yàn)陽(yáng)性。因此檢驗(yàn)人員以及臨床醫(yī)生在對(duì)待G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮到這些影響因素，以免造成誤診。G試驗(yàn)顯色法的敏感度和特異度比濁度法都高[13]，而G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)能提高檢測(cè)的敏感度和特異度[14]，另也有文獻(xiàn)[15]報(bào)道，G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)，能提高真菌感染的診斷準(zhǔn)確性，減少假陽(yáng)性或假陰性的發(fā)生，為COPD患者的真菌感染早期快速診斷提供有效實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。因此，在臨床檢測(cè)中一般都是建議臨床醫(yī)生進(jìn)行兩項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，以提高真菌檢測(cè)的陽(yáng)性率。

[1]羅金梅,彭敏,肖毅.侵襲性肺部真菌感染的臨床分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2010,16(2): 141-146.

[2]李聯(lián)敬.對(duì)老年慢阻肺患者合并肺部真菌感染的臨床特點(diǎn)分析[J].當(dāng)代醫(yī)藥論叢,2011(1): 43-44.

[3]黃義澤,周東升,王謙,等.深部真菌感染的快速檢測(cè)-G試驗(yàn)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(1): 255-257.

[4]劉雙,陳龍琴,叢琳,等.G試驗(yàn)顯色法與濁度法對(duì)深部真菌感染診斷的比較分析[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2015,11(3): 89-91.

[5]郭鳳梅,楊毅,邱海波,等.中國(guó)重癥患者侵襲性念珠菌感染的流行病學(xué)特征[J].中華內(nèi)科雜志,2014,53(6): 491-492.

[6]石雪穎.慢性阻塞性肺疾病合并肺部真菌感染患者的臨床分析[J].中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué),2016(1): 215-217.

[7]徐靈彬,熊潔,孫莉,等.老年慢性阻塞性肺疾病急性加重患者合并肺部真菌感染危險(xiǎn)因素分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2013,16(3): 529-531.

[8]夏吉榮,牛司強(qiáng),曹炬.(1,3)-β-D-葡聚糖檢測(cè)對(duì)侵襲性真菌感染臨床價(jià)值的再評(píng)價(jià)[J].中國(guó)真菌學(xué)雜志,2016,11(5): 269-271.

[9]黃述婧,陳銘,代芳芳,等.G試驗(yàn)對(duì)艾滋病合并肺孢子菌肺炎診斷價(jià)值的探討[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2016,37(4): 504-508.

[10]朱旭華,王笑云,張華根,等.肺泡灌洗液G試驗(yàn)對(duì)侵襲性肺真菌感染的早期診斷價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2017,14(10): 75-78.

[11]揭祥.肺泡灌洗液G試驗(yàn)/GM試驗(yàn)在呼吸系統(tǒng)侵襲性真菌感染診斷中的臨床意義[J].臨床醫(yī)學(xué),2016,36(12): 63-65.

[12]Kedzierka A,Kochun P,Pietrzyk A,et al.Current status of fungal cell wall components in the immunodiagnostics of invasive fungal infections in humans: galactomannan,mannan and (1--＞3)-beta-D-glucan antigens [J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2007,26(11): 755-766.

[13]劉雙,陳龍琴,叢琳,等.G試驗(yàn)顯色法與濁度法對(duì)深部真菌感染診斷的比較分析[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2015,6(11): 283-286.

[14]于書(shū)嫻,崔學(xué)范,馬婷,等.G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)對(duì)侵襲性真菌病診斷價(jià)值的Meta分析[J].中華肺部疾病雜志,2016,9(2): 164-170.

[15]譚心娟,蘇小芬,邢秋云,等.G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)對(duì)慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者侵襲性肺真菌感染的早期診斷價(jià)值[J].廣東醫(yī)學(xué),2014(17): 2682-2685.

Clinical application of G test and GM test in the diagnosis of invasive fungal infection of the lung

Mengli WANG,JunXiao LIU
Luoyang Central Hospital,Luoyang 471000,China

ObjectiveTo investigate the value of 1,3-β-D glucan test (G test) and galactomannan antigen detection(GM test) in the diagnosis of invasive pulmonary fungal infection,especially chronic obstructive pulmonary disease (COPD)with fungal infection.MethodsA retrospective study was carried out in 208 cases of invasive fungal infection in Luoyang Central Hospital during the past 1 year.Subjects were examined with G test,GM test and sputum fungal culture.The three detection results were compared.ResultsOf the 208 patients,128 were positive for fungal culture,99 were yeast,and 29 were Aspergillus.Candida albicans was found in 64 cases,Candida tropicalis in 15 cases,Candida in 11 cases,Candida in 7 cases,and Candida albicans in 2 cases.The experiment set 3 groups,the first group was the content increased in G test but normal in GM test,the second group was content increased in both G test and GM test,the third group was content normal in G test.The results of fungal culture in 3 groups were studied.ConclusionThe combination of G test and GM test is more specific than fungal culture,and can be used as an auxiliary diagnosis for invasive pulmonary fungal infection.

Invasive fungal infections; G test; GM test