調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用

曹艷玲 楊書彥

（內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010017）

為探究其在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的參與作用，選取本院類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者與正常者進(jìn)行對(duì)照研究，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

病例來(lái)源于2015年3月—2017年3月本院收治的50例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者，作為觀察組，男22例，女28例，年齡27～64歲，平均年齡（48.5±6.6）歲，該組患者符合類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。對(duì)照組為在我院健康體檢的30名正常者，其中男12例，女18例，年齡25～69歲，平均年齡（48.9±6.3）歲。醫(yī)學(xué)倫理會(huì)批準(zhǔn)此次研究，納入病例均自愿參與研究，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在重要臟器疾病者及伴隨心、肝、腎功能疾病者；（2）意識(shí)模糊及精神紊亂者；（3）合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變者；（4）合并感染、腫瘤及其他結(jié)締組織疾病者。兩組患者一般資料經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下取患者外周靜脈血2 mL保存于EDTA抗凝管中流式送檢，從中抽取100 μL放入另一試管，分別加入 20 μL抗CD19-PE-CY5、20 μL抗 CD24-PE以及5 μL抗CD38-APC，充分搖勻，避光狀態(tài)下放置室內(nèi)，以15 min為宜。在其中加入2 mL紅細(xì)胞裂解液，避光10 min，給予2 000 r/min低溫離心處理，時(shí)間為5 min，去除上清液，采用2 mL磷酸鹽緩沖液洗滌2次，在其中加入0.5 mL PBS重懸，給予上流式細(xì)胞儀檢測(cè)，測(cè)定淋巴細(xì)胞表面熒光素?zé)晒鈴?qiáng)度，給予Cellquest軟件分析，對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞百分率予以記錄。CD19+B淋巴細(xì)胞采用CD19單抗及SSC參數(shù)標(biāo)記。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有的計(jì)數(shù)資料均用%表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料選擇標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采取t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)計(jì)算在統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPPSS18.0上進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義表示為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs在CD19+B中的占比分析

CD24hi、CD38hi在CD19+B淋 巴 細(xì) 胞 的 百 分 率 為6.47%±4.83%，略低于對(duì)照組的7.24%±3.42%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見圖1。

圖1 兩組外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs

2.2 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs與各項(xiàng)臨床指標(biāo)相關(guān)性

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現(xiàn)為明顯負(fù)相關(guān)，與晨僵時(shí)間正相關(guān)（P＜0.05）。見圖2-4。

3 討論與結(jié)論

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究顯示通過(guò)負(fù)向調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，能夠有效緩解因外周血等引起的自身免疫疾病[2]。本研究探究了調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的參與機(jī)制，結(jié)果顯示類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現(xiàn)為明顯負(fù)相關(guān)，與晨僵時(shí)間正相關(guān)（P＜0.05），研究結(jié)果能夠?yàn)榕R床治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎提供參考。綜上所述，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制與調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞相關(guān)，能夠?yàn)轭愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療提供新思路。

圖2 與年齡的相關(guān)性分析

圖3 與抗CCP抗體滴度的相關(guān)性

圖4 與晨僵時(shí)間的相關(guān)性分析

[1] 薛麗佳，黃巧容，林輝，等.B淋巴細(xì)胞微粒在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血和關(guān)節(jié)液中的表達(dá)及臨床意義[J].西部醫(yī)學(xué)，2016，28（11）：1502-1505.

[2] 張智賢，何秋瑩，方偉禎，等.CD19、CD27和 CD38標(biāo)記的B淋巴細(xì)胞亞群在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血中的變化及意義[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2015（5）：382-386.