天然植物中草藥添加劑對(duì)豬常見致病菌的體外抑菌試驗(yàn)

堯國(guó)榮，黃新恒，鄒志恒（.江西農(nóng)業(yè)工程職業(yè)學(xué)院，江西 宜春 00；.江西省南昌市新建區(qū)農(nóng)業(yè)局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，南昌 000；.江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，宜春 000）

營(yíng)養(yǎng)與飼料

天然植物中草藥添加劑對(duì)豬常見致病菌的體外抑菌試驗(yàn)

堯國(guó)榮1，黃新恒2，鄒志恒3
（1.江西農(nóng)業(yè)工程職業(yè)學(xué)院，江西 宜春 331200；2.江西省南昌市新建區(qū)農(nóng)業(yè)局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，南昌 330100；3.江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，宜春 330200）

為了檢測(cè)自制天然植物中草藥添加劑對(duì)豬常見致病菌的體外抑菌效果，試驗(yàn)以紙片法浸取不同濃度中草藥方劑煎出液，檢測(cè)其對(duì)不同菌種的抑菌圈大小，判定其敏感性。結(jié)果表明，中草藥方劑煎出液對(duì)豬大腸桿菌和沙門氏菌抑菌效果較好，對(duì)金黃色葡萄球菌和鏈球菌抑菌效果及敏感性較低。

中草藥；致病菌；抑菌試驗(yàn)

自制天然植物中草藥添加劑由王不留行、漏蘆、路路通、馬鞭草、益母草、當(dāng)歸、黃芪和甘草8味組成。本劑根據(jù)中獸醫(yī)原理對(duì)母豬補(bǔ)氣養(yǎng)血、滋陰補(bǔ)陽、通絡(luò)活血、益肝補(bǔ)腎，祛瘀生新，重在調(diào)節(jié)繁殖母豬的生殖生理機(jī)能，改善母豬微循環(huán)和內(nèi)分泌系統(tǒng)，促進(jìn)母豬乳腺細(xì)胞的發(fā)育，提高母豬泌乳繁殖性能效果的同時(shí)，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和造血機(jī)能，表現(xiàn)消炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、清除自由基及抗氧化等活性。本試驗(yàn)通過所配方劑的水煎劑分別對(duì)豬大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和鏈球菌進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，以檢測(cè)該中草藥制劑臨床抗菌效果，為臨床應(yīng)用提供參考。

1 試驗(yàn)儀器與材料

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于2016年10—11月在江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)儀器

10 mL玻璃試管、250 mL玻璃三角燒瓶、敞口傾斜式夾層鍋、手提式壓力蒸汽消毒鍋、自動(dòng)雙重純水蒸餾器、電熱恒溫干燥箱、SXP-250B-C型微電腦培養(yǎng)箱、YG-1型層析試驗(yàn)冷柜、超凈工作臺(tái)、微量移液器、AE-200電子分析天平、抑菌圈讀數(shù)測(cè)量器、麥?zhǔn)媳葷嵊?jì)、醫(yī)用紗布、濾紙、6 mm打孔器、90 mm平皿、L涂菌棒、鑷子等。

1.3 培養(yǎng)試劑

胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯培養(yǎng)基（TSB-YE）和水解酪蛋白（MH）瓊脂培養(yǎng)基，分別購自青島海博生物技術(shù)有限公司和杭州微生物試劑有限公司。

1.4 試驗(yàn)菌種

豬大腸桿菌、沙門氏菌、鏈球菌和金黃色葡萄球菌均由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家重點(diǎn)微生物實(shí)驗(yàn)室提供，江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所冷藏保存。試驗(yàn)前在斜面培養(yǎng)基上接種復(fù)活。

1.5 試驗(yàn)藥液與試劑

1.5.1 中草藥濃縮藥液的制備 中草藥方劑由王不留行15份、漏蘆14份、路路通14份、馬鞭草10份、益母草10份、當(dāng)歸8份、黃芪8份、甘草6份制備，藥材均購自江西省樟樹市中藥材交易市場(chǎng)。各味中草藥經(jīng)晾干、切片后，粉碎過100目篩，再分別按比例共稱取成品100 g加蒸餾水600 mL，室溫浸泡30 min，加熱煮沸后改用文火煎煮30 min，晾至常溫用4層醫(yī)用紗布過濾，濾渣重新加蒸餾水400 mL，同法煎煮，過濾藥液，合并2次所得藥液，將其冷藏6～12 h，再取上清液濾過，將濾液水浴濃縮至100 mL，使其藥物含量為1 g/mL（濃度為100%原液）。由于一般中藥煎劑pH偏低（2～2.5），煎好后用氫氧化鈉水溶液調(diào)整至pH 7.4～7.6，濃縮后的水煎劑裝入100 mL生理鹽水瓶中，高壓滅菌15 min，4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.2 不同濃度中草藥煎液制備 試驗(yàn)時(shí)以蒸餾水將原煎藥液分別稀釋為1∶2、1∶5、1∶10、1∶20 4個(gè)不同濃度的中藥煎液，測(cè)定各濃度對(duì)不同菌種的抑菌效果。

1.5.3 藥敏紙片的制備 用6號(hào)新華濾紙經(jīng)打孔器打成直徑為6 mm的圓形濾紙片，置于121℃的高壓蒸汽滅菌30min，用無菌鑷子分別夾取滅菌的濾紙片浸入不同濃度的中藥煎劑中，5min后取出，并盡量使之干燥。

1.5.4 菌液制備 將豬大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和鏈球菌分別接種TSB-YE培養(yǎng)液，經(jīng)37℃恒溫培養(yǎng)箱中24 h培養(yǎng)后，用無菌生理鹽水稀釋，并用麥?zhǔn)媳葷嶂撩亢辽繛?.0×106個(gè)。

1.5.5 抑菌試驗(yàn)方法 稱取水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基溶于蒸餾水，高壓滅菌后傾注入無菌平皿約15～20min，待培養(yǎng)基凝固后，每平皿加入0.2 mL供試菌液，用無菌L棒涂布均勻。再將浸有不同濃度的紙片貼在含菌培養(yǎng)基上，每菌種做3個(gè)重復(fù)。預(yù)擴(kuò)散15 min后，倒置于37℃培養(yǎng)25 h。用抑菌圈讀數(shù)測(cè)量器測(cè)量其抑菌圈直徑的大小，判斷藥液對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和鏈球菌的抑菌效果。

1.5.6 藥物敏感性判定標(biāo)準(zhǔn) 抑菌圈直徑d＞20 mm為極敏，15 mm＜d≤20 mm為高敏，10 mm＜d≤15 mm為中敏，d≤10 mm為低敏，無抑菌圈為不敏感[1]。

2 結(jié)果與分析

從表1中可看出，本方劑的水煎劑對(duì)豬大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和鏈球菌有一定的抑菌作用，但抑菌效果不同。對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌的抑菌效果較好，隨著其稀釋濃度降低由原液的中度敏感降至1∶20時(shí)低敏感。對(duì)金黃色葡萄球菌和鏈球菌抑菌效果較大腸桿菌和沙門氏菌敏感性低，金黃色葡萄球菌的抑菌效果始終處于低敏感，而當(dāng)中藥煎液濃度降至1∶10時(shí)對(duì)鏈球菌為不敏感。

表1 不同濃度中草藥煎液對(duì)不同菌種的體外抑菌效果

3 討論與小結(jié)

（1）由上述天然植物中草藥制備飼料添加劑在哺乳母豬生產(chǎn)試驗(yàn)中表明，對(duì)哺乳母豬泌乳量與乳質(zhì)有明顯提升，對(duì)哺乳仔豬生長(zhǎng)發(fā)育與成活率均有顯著提高，表現(xiàn)出哺乳期仔豬的腹瀉指數(shù)與健康狀況有明顯改善[2]。說明本組方添加劑在提高母豬泌乳繁殖性能的同時(shí)，對(duì)仔豬亦具有明顯的保健促生長(zhǎng)功能。如方劑中馬鞭草具有抗菌、消炎、鎮(zhèn)咳、止血作用；漏蘆表現(xiàn)抗氧化、保肝和提高免疫功能；當(dāng)歸具有增強(qiáng)免疫力、抗炎鎮(zhèn)痛、降血脂、利肝保膽、抗腫瘤、抗微生物等作用，可促進(jìn)紅細(xì)胞生成和造血干細(xì)胞增殖作用；黃芪具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗病毒、抗腫瘤、促進(jìn)機(jī)體造血機(jī)能等；甘草具有抗?jié)?、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、鎮(zhèn)咳止痰作用，對(duì)藥物、食物和體內(nèi)代謝產(chǎn)物中毒及細(xì)菌毒素所致的中毒均有一定的解毒作用，還具有廣泛的抗微生物、抗腫瘤等作用[3]。

（2）本試驗(yàn)表明，本方劑煎出液對(duì)豬大腸桿菌和沙門氏菌抑菌效果較好，應(yīng)用于哺乳母豬能改善母豬乳汁的質(zhì)量，也同步提高哺乳仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育和健康狀況。

[1]袁婷，鐘學(xué)穗.常見中草藥的體外抑菌活性[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2009（9）：23-25.

[2]堯國(guó)榮，朱錢龍，曾作財(cái)，等.天然植物中草藥飼料添加劑對(duì)哺乳母豬泌乳性能的影響[J].養(yǎng)豬，2016（6）：25-28.

[3]田允波，周家容.天然植物飼料添加劑[M].廣州：中山大學(xué)出版社，2008：228-274.

（編輯：郭玉翠）

旱蓮草治老年人夜間口干

旱蓮草40克，生地黃12克，加水700毫升，水煎30分鐘，頻服代茶飲，每日1劑，連服7劑為1個(gè)療程。服藥14天后，夜間口干癥可緩解。

老年人夜間口干，常由肝腎陰虛引起津液不足所致。旱蓮草又叫“墨旱蓮”，有養(yǎng)陰益腎、涼血止血的功效，生地黃能滋陰潤(rùn)燥、生津止渴。此方對(duì)老年人夜間口干兼頭暈、目眩、耳鳴、鼻出血等癥狀有一定療效。

（轉(zhuǎn)自《保健與生活》2016年第1期）

In Vitro Bacteriostasis Test of Natural Plant Chinese Herbal Medicine Additives on Common Pathogenic Bacteria in Swine

YAO Guorong1,HUANG Xinheng2,ZOU Zhiheng3
(1.Jiangxi Vocational College of Agricultural Engineering,Yichun 331200,China;2.Nanchang New District Agricultural Bureau of Animal Health Supervision and Administration,Nanchang 330100,China;3.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Jiangxi Academy of Agricultural Sciences,Yichun 330200,China)

In order to detect the self-made Chinese herbal medicine additive of natural plant common antibacterial effect in vitro pathogens of swine,experiment with paper method leaching of different concentrations of Chinese herbal medicine decoction,to detect the size of inhibition zone of different strains, determine its sensitivity.The results showed that the decoction of Chinese herbal medicine had good bacteriostatic effect on Escherichia coli and salmonella,and had low inhibitory effect on staphylococcus aureus and streptococcus.

Chinese herbal medicine;pathogenic bacteria;inhibition test

S816.7

A

1002-1957(2017)01-0011-02

2017-01-02

江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（GJJ151481）

堯國(guó)榮（1965-），男，江西臨川人，副教授，主要從事畜禽養(yǎng)殖與疾病防治教學(xué)與研究工作.E-mail:yaoguorong_65@126.com