蒲公英和苦參苦寒藥物對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠模型的影響※

尹建康 陳建章 王小平 侯春久 唐春紅 湯燦輝

（江西中醫(yī)藥高等專科學(xué)校藥學(xué)系，撫州344000）

蒲公英和苦參苦寒藥物對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠模型的影響※

尹建康 陳建章 王小平 侯春久 唐春紅 湯燦輝

（江西中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校藥學(xué)系，撫州344000）

目的觀察常見兩種苦寒藥物蒲公英、苦參不同劑量提取液對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠模型的影響。方法制備脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠模型，以兩種苦寒藥物不同劑量的提取液為受試物，檢測胃重、胃排空率以及利用酶聯(lián)免疫法測定血清當(dāng)中的胃泌素（GAS）、胃動素（MTL）和前列腺素E2（PGE2）指標(biāo)在不同組別的變化情況。結(jié)果蒲公英高劑量組對胃排空、PGE2、GAS有非常顯著性差異，對胃重指數(shù)、MTL有顯著性差異。蒲公英中劑量組對胃排空、GAS與模型組有非常顯著性差異，對胃重指數(shù)、PGE2、MTL有顯著性影響。蒲公英低劑量組對胃排空率、GAS、PGE2有顯著性差異，對其它指標(biāo)無顯著性差異?？鄥⒏邉┝拷M和中劑量組對所有指標(biāo)與模型組比較均無顯著性差異。苦參低劑量組對胃重指數(shù)、GAS、MTL有顯著性差異，其它指標(biāo)無顯著性差異。結(jié)論蒲公英高、中、低劑量組對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠均有很好的治療作用，說明具有健胃功效，且中劑量組作用比較明顯?？鄥⒌蛣┝拷M對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠有一定的治療作用，表現(xiàn)出健胃功效。

蒲公英；苦參；脾胃虛寒；動物實(shí)驗(yàn)

蒲公英，干燥全草入藥，味苦甘、性寒，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋之功效。蒲公英主要含甾醇類、膽堿、有機(jī)酸、菊糖、橡膠等?，F(xiàn)代藥理研究表明：蒲公英具有抗病原微生物；促進(jìn)胃及十二指腸的收縮和抗胃酸分泌；抗腫瘤；降血糖等作用[1]。中藥苦參根類入藥，性寒味苦，具有清熱燥濕、殺蟲、利尿的功能，主要含有氨基酸類、糖類、脂肪酸類、三萜皂苷類、甾醇類、生物堿類等主要成分?，F(xiàn)代藥理研究表表明：苦參具有抗寄生蟲作用；抗菌，作用；抗腫瘤；抗病毒；抗炎等作用[2]。以上兩種常見苦寒藥物符合不少學(xué)者認(rèn)為的苦寒藥有傷胃之弊，尤其是脾胃虛寒者。同時，有的學(xué)者認(rèn)為苦寒藥傷胃主要與其寒性、用量和某些藥物的毒副作用有關(guān)[3]。本次研究通過具體的實(shí)驗(yàn)來說明苦寒藥物對脾胃虛寒大鼠的影響。探究苦寒藥物健胃與傷胃的具體情況。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物SPF級健康SD大鼠，體重：180～220 g，雌雄兼用，許可證號：SCXK(湘)2009-0012，飼料證號：SCXK(湘)2009-0013，以上動物由湖南長沙天勤生物科技服務(wù)部提供。

1.1.2 藥物及試劑蒲公英、苦參（均購于江西省中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校附屬醫(yī)院）；經(jīng)本校中藥鑒定教研室鑒定為正品。2-硫代巴比妥酸（TBA）；雷尼替丁（成都永康制藥有限公司）；胃泌素（GAS）、胃動素（MTL）、以上試劑盒均購于南京建成生物工程研究所；其它試劑均為分析純。

1.1.3 儀器UV-2250島津紫外可見分光度計（島津公司）；電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）；離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）；移液槍（大龍醫(yī)療設(shè)備有限公司）；酶標(biāo)儀（北京普天新橋技術(shù)有限公司）；洗板機(jī)（北京普天新橋技術(shù)有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 蒲公英、苦參提取液的制備取蒲公英200 g，加入足量的水使水的液面超過藥材大約2 cm，浸泡30 min后，武火加熱至沸騰，再微沸30 min，過濾，待藥材稍涼后再加入適量的水再一次加熱至沸騰后微沸30 min。過濾并合并兩次濾液。濃縮濃度至含2 g/mL生藥備用。苦參提取液的制備方法同蒲公英。

1.2.2 SD大鼠脾胃虛寒模型的制備SD大鼠，體重180～220 g，雌雄各半，除空白組10只動物外，其它大鼠分別編號后，自由飲水，喂食。每天兩次灌胃，上午冷白醋（約4℃）1.2 ml/100 g[4]，下午精煉豬油脂1 ml/100 g[4-5]。連續(xù)10天后，觀察動物出現(xiàn)進(jìn)食減少、倦臥少動、大便稀溏、肢體溫度降低、體重增長減慢等，即為模型成立。造模期間統(tǒng)計記錄每天大鼠的飲食量，體重情況和飲水量。對造模成功的動物按照體重進(jìn)行隨機(jī)分組。具體分組情況見表1。

1.2.3 給藥及實(shí)驗(yàn)動物的處理根據(jù)臨床上蒲公英和苦參的最少使用劑量，按照大鼠與人的體表面積計算公式分別確定蒲公英和苦參在實(shí)驗(yàn)大鼠的低劑量，并乘以相關(guān)的系數(shù)確定中劑量和高劑量，具體給藥劑量詳見表1。除空白組，模型組外，其它各組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃，1次/d，連續(xù)7 d。末次給藥前一天停止進(jìn)食，但飲水自由。末次給藥2 h后，除空白對照組及模型對照組灌服等體積蒸餾水外，每只大鼠灌服2 mL0.01%酚紅溶液(含20%明膠)，20 min后切割頸靜脈處死大鼠，將血漿置于3500 rpm離心15 min，吸取上清液采用酶聯(lián)免疫法分別測定血漿中胃泌GAS，MTL。解剖大鼠取胃，結(jié)扎幽門和賁門。稱重后，將其置于50 mL 0.5 mol/LNaOH溶液中，沿胃大彎剪開胃，充分洗下胃內(nèi)容物，取5 mL離心(3000 rpm，10分鐘)。吸上層溶液用UV-2250島津紫外可見分光光度計于560 nm波長測其吸光度，計算胃排空率。大鼠胃排空率=（1-實(shí)測酚紅吸光度/標(biāo)準(zhǔn)酚紅吸光度）×100%。并將洗凈的胃在濾紙上吸干水分，測定胃重，并計算胃重指數(shù)。大鼠胃重指數(shù)=胃重/體重×100%。將胃用生理鹽水洗凈后刮取胃粘膜約200 mg，加生理鹽水2 mL于冰浴下制成勻漿，勻漿液3500 rpm離心15 min取上清液。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理，雙側(cè)檢驗(yàn)，劑量資料用（±s）D表示，其中符合正態(tài)性，采用兩兩比較的t檢驗(yàn)；不符合，采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05即認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義；P＜0.01即認(rèn)為差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠胃排空、胃重指數(shù)的影響蒲公英高劑量組對胃排空有非常顯著性差異，對胃重指數(shù)有顯著性差異。蒲公英中劑量組對胃排空與模型組有非常顯著性差異，對胃重指數(shù)有顯著性影響。蒲公英低劑量組對胃排空率有顯著性差異，對其它指標(biāo)無顯著性差異?？鄥⒏邉┝拷M和中劑量組對所有指標(biāo)與模型組比較均無顯著性差異。苦參低劑量組對胃重指數(shù)有顯著性差異，其它指標(biāo)無顯著性差異。詳細(xì)結(jié)果見表1

表1 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠胃排空、胃重指數(shù)的影響（n=10，±s）

表1 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠胃排空、胃重指數(shù)的影響（n=10，±s）

注：與模型對照組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別劑量（g / k g）胃排空空白組模型組蒲公英高劑量組蒲公英中劑量組蒲公英低劑量組苦參高劑量組苦參中劑量組苦參低劑量組雷尼替丁組--1 2 . 3 3生藥4 . 1 1生藥1 . 3 7生藥1 2 . 3 3生藥4 . 1 1生藥1 . 3 7生藥0 . 0 2 8 0 . 7 6 4 9 ± 0 . 0 9▲▲0 . 5 0 0 8 ± 0 . 1 1 0 . 6 8 7 7 ± 0 . 1 2▲▲0 . 6 5 0 9 ± 0 . 1 5▲▲0 . 6 0 2 3 ± 0 . 0 7▲0 . 5 2 1 3 ± 0 . 1 5 0 . 5 2 8 5 ± 0 . 0 7 0 . 5 9 9 8 ± 0 . 1 3 0 . 5 9 3 5 ± 0 . 0 6▲胃重指數(shù)（%）0 . 2 0 ± 0 . 0 7▲▲0 . 3 4 ± 0 . 0 9 0 . 2 5 ± 0 . 0 7▲0 . 2 3 ± 0 . 0 8▲0 . 2 6 ± 0 . 0 5 0 . 3 2 ± 0 . 1 1 0 . 3 0 ± 0 . 0 9 0 . 2 6 ± 0 . 0 8▲0 . 2 2 ± 0 . 0 5▲▲

2.12 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影響蒲公英高劑量組對PEG2、GAS有非常顯著性差異，對MTL有顯著性差異。蒲公英中劑量組對GAS與模型組有非常顯著性差異，對PGE2、MTL有顯著性影響。蒲公英低劑量組對GAS、PGE2有顯著性差異，對MTL無顯著性差異。苦參高、中劑量組對所有指標(biāo)與模型組比較均無顯著性差異，苦參低劑量組對GAS、MTL有顯著性差異，對PGE2無顯著性差異。詳細(xì)結(jié)果見表2

表2 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影響（n=10±s）

表2 蒲公英、苦參提取液對脾胃虛寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影響（n=10±s）

注：與模型對照組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別劑量（g / k g）P G E2( p g / m l )空白組模型組蒲公英高劑量組蒲公英中劑量組蒲公英低劑量組苦參高劑量組苦參中劑量組苦參低劑量組雷尼替丁組--1 2 . 3 3生藥4 . 1 1生藥1 . 3 7生藥1 2 . 3 3生藥4 . 1 1生藥1 . 3 7生藥0 . 0 2 8 1 0 0 . 2 1 ± 7 . 0 2▲▲7 9 . 8 3 ± 1 0 . 2 5 9 4 . 2 3 ± 9 . 5 5▲▲8 9 . 2 3 ± 6 . 4 1▲8 8 . 9 5 ± 7 . 0 6▲8 3 . 1 9 ± 6 . 9 3 8 6 . 9 7 ± 8 . 1 5 8 7 . 2 2 ± 9 . 7 4 9 3 . 4 5 ± 7 . 0 4▲▲G A S ( p g / m l ) 6 2 . 4 4 ± 1 0 . 8 1▲▲4 3 . 5 4 ± 9 . 1 2 5 7 . 6 3 ± 8 . 3 2▲▲5 3 . 7 7 ± 6 . 0 9▲▲5 0 . 7 3 ± 6 . 7 8▲4 6 . 9 9 ± 1 1 . 0 3 4 7 . 8 5 ± 8 . 3 2 5 0 . 8 6 ± 7 . 7 2▲5 8 . 0 7 ± 6 . 3 5▲▲M T L ( p g / m l ) 8 7 . 8 2 ± 1 2 . 5 1▲▲6 3 . 4 0 ± 1 1 . 7 5 7 3 . 8 5 ± 1 0 . 1 6▲7 5 . 3 6 ± 9 . 0 6▲7 0 . 2 1 ± 9 . 7 7 6 6 . 8 7 ± 9 . 2 5 6 7 . 5 3 ± 1 1 . 0 9 7 2 . 9 7 ± 8 . 5 6▲8 2 . 6 5 ± 8 . 7 1▲▲

3 討論

本次研究以蒲公英和苦參兩種常見的苦寒藥物為代表。而苦寒傷胃之說也一直是歷代醫(yī)藥學(xué)者非常重視的問題。過用苦寒藥導(dǎo)致患者納呆、脘痞、便溏、乏力等的臨床事實(shí)說明苦寒傷胃現(xiàn)象的客觀存在。本研究立足在經(jīng)典的脾胃虛寒模型[9]的基礎(chǔ)上對兩種不同藥物，三種不同劑量，選擇了能夠客觀反映胃部變化的五個指標(biāo)進(jìn)行了研究。其中胃重指數(shù)是指胃的濕重與大鼠體重的比值的百分比，實(shí)驗(yàn)胃重指數(shù)增加可能是因?yàn)槲赋溲?、水腫和炎癥等導(dǎo)致，也可能是因?yàn)榇笫篌w重下降而導(dǎo)致的假性增大。具體原因還需要進(jìn)一步研究確定。

蒲公英高、中劑量組對所有的指標(biāo)與模型組組均有顯著性差異，有的指標(biāo)存在非常顯著性差異，可以看出蒲公英的高、中劑量對實(shí)驗(yàn)大鼠有很好的治療作用。從指標(biāo)的變化趨勢上看，高劑量組對指標(biāo)的變化比中劑量更加明顯。蒲公英低劑量組對PGE2、GAS和胃排空也有明顯的變化，只是效果的程度還需要進(jìn)一步的研究證明?？鄥⒏邉┝亢椭袆┝繉?shí)驗(yàn)動物指標(biāo)沒有明顯改善，且實(shí)驗(yàn)中動物的行為表現(xiàn)也沒有改善。苦參低劑量對GAS、MTL和胃重指數(shù)有明顯變化，苦參低劑量對實(shí)驗(yàn)大鼠有改善作用，具體的效果還需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)來證明。

通過以上兩種苦寒藥物對脾胃虛寒實(shí)驗(yàn)大鼠模型的影響結(jié)果分析，苦寒藥存在著健胃之功效，同時也佐證了傳統(tǒng)意義上苦寒藥的傷胃作用，且大劑量應(yīng)用苦寒藥物傷胃作用可能更加明顯。苦寒藥物傷胃與健胃的對應(yīng)劑量和作用大小，與苦寒藥物自身苦寒性的強(qiáng)弱有較密切的關(guān)系?？嗪幬飩概c健胃的具體結(jié)論，還需要更深入的苦寒藥物實(shí)驗(yàn)研究來確定。

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Effect of Dandelion and Lightyellow Sophora Root Bitter Cold Medicine on Experimental Rat Model of Deficient Cold of Spleen and Stomach

YIN Jiankang,CHEN Jianzhang,WANG Xiaoping,HOU Chunjiu,TANG Chunhong,TANG Canhui
(Department of Pharmacy,Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine,Jianxi Province,Fuzhou 344000,China)

Objective To observe the effect of two common drugs Dandelion and lightyellow sophora root bitter different doses of scutellaria baicalensis georgi extract of spleen and stomach cold on experimental rat model.Methods Preparation of spleen and stomach cold experimental model of rats,with two kinds of bitter cold drug decoction of different doses for the test drug,by detecting the rate of gastric emptying,gastric mass index and serum gastrin(GAS),motilin(MTL),prostaglandin E2(PGE2)indicators observe the effects of the two drugs on the bitter cold of spleen and stomach rats.Results Dandelion high dose group of gastric emptying,PGE2,GAS has a very significant difference,the stomach weight index,MTL had significant difference;Dandelion medium dose group of gastric emptying,GAS compared with model group,there was a very significant difference,the stomach weight index,PGE2, MTL had significant difference.Dandelion low dose group of gastric emptying rate,GAS,PGE2have significant difference,and there was no significant difference on other indicators.Bitter high and medium dose group of all indicators compared with model group,and there was no significant difference.Bitter low dose group of stomach weight index,GAS,MTL has significant difference,and other indicators had no significant difference.Conclusion Dandelion high,medium and low dose group of spleen and stomach cold experimental rat all have very good therapeutic effect.And the medium dose group effect is more noticeable.Bitter low dose group of spleen and stomach cold experimental rats has a certain therapeutic effect,and show a good effect.

Dandelion;lightyellow sophora root;deficient cold of spleen and stomach;animal experiment

10.3969/j.issn.1672-2779.2017.04.059

1672-2779（2017）-04-0133-03

：張文娟本文校對：王小平

2016-10-27）

江西省衛(wèi)生廳中醫(yī)藥基金重點(diǎn)課題項(xiàng)目【No：2010Z04】