實驗室動物化療性靜脈炎研究進(jìn)展

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實驗室動物化療性靜脈炎研究進(jìn)展

馬榮華，惠薏，張琪，劉曉梅

就實驗室動物化療性靜脈炎(CP)研究進(jìn)行綜述，指出CP研究主要集中于護(hù)理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機(jī)制研究甚少，缺乏對防護(hù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究，可通過實驗室基礎(chǔ)研究從細(xì)胞分子學(xué)水平探索常用化療藥所致CP的形成機(jī)制，探尋CP防護(hù)新思路。

化療性靜脈炎；動物實驗；化療藥物；干預(yù)機(jī)制；誘發(fā)因素

化療性靜脈炎(chemotherapeuticphlebitis，CP)指由于化療藥物強(qiáng)刺激性和細(xì)胞毒性作用等因素導(dǎo)致穿刺局部血管壁發(fā)生化學(xué)炎性反應(yīng)，嚴(yán)重時病人可出現(xiàn)潰瘍、硬結(jié)，甚至壞死、功能障礙，給病人帶來巨大痛苦，影響化療方案的實施，增加醫(yī)療費(fèi)用。目前有關(guān)CP的護(hù)理研究主要集中于各措施臨床防護(hù)效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP的形成機(jī)制研究甚少，缺乏具體干預(yù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究?，F(xiàn)就實驗室動物CP研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在為CP形成機(jī)制及防護(hù)研究提供可借鑒之處，為改進(jìn)臨床護(hù)理措施提供基礎(chǔ)理論支持。

1 實驗動物

1.1 建立兔耳緣靜脈CP模型 兔子耳大較平坦，皮膚菲薄，耳緣靜脈清晰可見，有利于觀察給藥反應(yīng)，除了疼痛指標(biāo)無法評估外，CP癥狀均可呈現(xiàn)。且兔耳相對平坦，有利于藥物涂抹、濕敷、貼服等各種臨床常用護(hù)理措施的實施，常被作為CP動物模型之首選。國內(nèi)學(xué)者[1-6]先后通過兔耳緣靜脈單次推注長春瑞濱注射液，分別于用藥后48 h、72 h、7 d形成穩(wěn)定的CP模型。章飛飛[7]向兔耳緣靜脈單次輸注長春新堿48 h后建立CP模型。各品種兔耳緣靜脈普遍較細(xì)，對靜脈穿刺技術(shù)要求較高，一旦穿刺失敗或藥物外滲可致局部組織壞死被迫剔除實驗動物，增加樣本量與實驗費(fèi)用。兔耳緣靜脈較細(xì)，模仿臨床反復(fù)給藥存在一定難度，顯著制約著實驗觀察時限，現(xiàn)有研究觀察時限也僅7 d[4]。如需模擬臨床給藥方案，反復(fù)多次給藥以探索CP形成機(jī)制變化及具體干預(yù)機(jī)制則存在一定難度。

1.2 小鼠尾靜脈CP模型 小鼠尾靜脈較兔耳緣靜脈粗、長、直、表淺、被毛少，穿刺難度小，適宜反復(fù)多次靜脈給藥，便于實驗觀察。小鼠個體小，易固定，繁殖能力強(qiáng)，可成批獲得，有利于控制體重、年齡等影響因素，且飼養(yǎng)方便,便于擴(kuò)大樣本量。國內(nèi)學(xué)者利用小鼠尾靜脈先后建立5-氟尿嘧啶、長春瑞濱、吡柔比星致CP動物模型[8-11]。馬麗娟等[12]進(jìn)一步優(yōu)化實驗條件，模擬臨床反復(fù)多次給藥方案成功建立長春瑞濱致小鼠尾靜脈CP動物模型。

目前以小鼠尾靜脈建立CP動物模型的實驗方法較為成熟，其研究領(lǐng)域重點(diǎn)集中于腫瘤學(xué)、藥物學(xué)等基礎(chǔ)學(xué)科。但由于小鼠重量小，給藥劑量少，臨床用微量輸液泵難以實現(xiàn)精準(zhǔn)的流速控制，需借助精密的流速控制器控制給藥速度，且小鼠重量小，對化療藥物十分敏感,穿刺等輕微刺激即可致小鼠全身肌肉緊張、尾巴強(qiáng)直、煩躁不安、尖叫亂動致穿刺失敗[13]。此外，小鼠尾巴成圓錐樣，臨床常用CP防護(hù)措施如熱敷、冷敷、敷貼外用等護(hù)理措施執(zhí)行困難，制約著小鼠尾靜脈CP模型在護(hù)理實驗研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。

2 建模藥物

基于化療藥物的強(qiáng)刺激性與血管毒性作用，大多數(shù)化療藥物均可導(dǎo)致CP形成，CP建模藥物選取主要取決于具體研究目的。目前關(guān)于長春瑞濱致CP研究最為多見，其次有長春新堿、紫杉醇、吡柔比星、5-氟尿嘧啶等所致CP。所有研究均可獲取良好CP模型。由于長春瑞濱具有強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性作用與發(fā)皰性能，CP發(fā)生率高達(dá)10%～30%[14]，是臨床常用化療藥，用途廣、效果好、價格低廉，因此常被作為CP研究的代表性藥物。目前關(guān)于各類化療藥致CP的形成及干預(yù)機(jī)制研究甚少，長春瑞濱致CP與其他化療藥致CP作用機(jī)制是否一致尚不明確，長春瑞濱致CP的防護(hù)措施對其他類化療藥致CP是否具有防護(hù)作用，仍有待探索。

3 給藥方式

現(xiàn)有研究中偶見反復(fù)多次靜脈用藥，多采用單次靜脈給藥建立CP模型，且給藥速度、濃度、劑量及持續(xù)時間尚無定論。姚遠(yuǎn)兵等[3]以濃度10 mg/mL、速度12 mL/h向小鼠尾靜脈輸注長春瑞濱24 h后形成良好CP模型。王紅等[1]依據(jù)人體給藥劑量25 mg/m2于48 h后建立長春瑞濱致家兔耳緣靜脈CP模型。楊文琴等[15]以給藥劑量12 mg/(kg·d)、給藥容量12 mL/(kg·d)向兔耳緣靜脈輸注5-氟尿嘧啶72 h可100%形成CP。張蕻等[16]以15 mg/mL給藥濃度建立了5-氟尿嘧啶致小鼠尾靜脈CP模型，建模成功率100%，當(dāng)濃度增至17.5 mg/mL時出現(xiàn)動物死亡現(xiàn)象。高文等[9]以20 mg/kg向兔耳緣靜脈輸注長春新堿48 h后建立CP模型，且無動物死亡。Emiko等[17]研究顯示：快速輸注、稀釋濃度可有效緩解長春瑞濱致CP的嚴(yán)重程度，降低發(fā)生率。Yoh等[14]臨床研究認(rèn)為快速輸注及給藥后生理鹽水沖管可有效降低長春瑞濱致CP的發(fā)生率。

4 研究指標(biāo)

4.1 局部組織病理觀察 組織病理觀察方法成熟，操作簡單、經(jīng)濟(jì)直觀，常被作為CP實驗研究的基礎(chǔ)性觀察指標(biāo)。可從血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、血管周圍水腫、炎細(xì)胞浸潤、靜脈管壁損傷、纖維組織增生、周圍組織出血、血栓形成7個方面評估靜脈炎損傷程度[8]。長春瑞濱可致炎細(xì)胞浸潤、組織水腫、表皮組織變性，未見明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞脫落，阿霉素可致明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞脫落、壞死，地塞米松預(yù)處理可有效降低長春瑞濱致CP的發(fā)生率，而且快速靜脈輸注長春瑞濱可有效減輕穿刺導(dǎo)管遠(yuǎn)端組織水腫程度，稀釋給藥濃度可明顯減輕穿刺導(dǎo)管近端上皮組織退行性變[17]。

4.2 細(xì)胞間黏附分子1和血管內(nèi)皮生長因子 細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1) 是介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的一類糖蛋白，主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞中，正常情況下呈低表達(dá)或不表達(dá)，當(dāng)刺激、感染等因素導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞受損時呈高表達(dá)，參與血小板聚集、白細(xì)胞粘附、穿越和血栓形成，其表達(dá)量與內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度、炎癥程度和血栓形成[18]密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種多功能細(xì)胞因子，既可特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞[19]，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞移行、遷移,促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，利于血管修復(fù)[20]，又是一種血管通透性因子，增加血管通透性，增加滲出[21]。國外學(xué)者發(fā)現(xiàn)ICAM-1在抗生素致輸液性靜脈炎的形成中發(fā)揮重要作用[22-23]。國內(nèi)研究認(rèn)為馬鈴薯汁聯(lián)合地塞米松外涂可有效抑制血管損傷早期局部ICAM-1與VEGF表達(dá)，防護(hù)5-氟尿嘧啶、長春瑞濱致CP[4,15,17]。水膠體透明貼外敷可通過抑制損傷血管局部ICAM-1和VEGF表達(dá)，抑制白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附，減輕血管通透性，減輕甘露醇致輸液性靜脈炎的癥狀[24]。 延胡索合劑可抑制血管損傷局部ICAM-1表達(dá)，上調(diào)VEGF表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生修復(fù)，防治CP的發(fā)生[25]。

4.3 E-選擇素 E-選擇素是一種特異性表達(dá)在活化內(nèi)皮細(xì)胞膜上的粘附分子，在白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、向炎癥部位游走和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。炎癥時內(nèi)皮細(xì)胞表面E-選擇素可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞沿血管壁滾動[26]。腫瘤壞死因子α(TNF-α)，白介素、熱刺激等均可誘導(dǎo)E-選擇素高表達(dá)[27]。Edelstein等[28]發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞受刺激后，E-選擇素呈現(xiàn)快速而短暫的高表達(dá)，4 h達(dá)高峰，24 h后從胞膜上開始脫落進(jìn)入血液，成為可溶性E-選擇素。日本學(xué)者Kobayshi等[29]動物研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可通過下調(diào)E-選擇素表達(dá)抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。Vassilomanolakis等[30]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可有效預(yù)防長春瑞濱致CP。國內(nèi)學(xué)者柴琴等[31]也再次驗證了這一臨床效果。研究證實長春瑞濱輸注5 h后E-選擇素顯著升高，而E-選擇素基因敲除小鼠則表現(xiàn)出明顯的炎癥反應(yīng)缺陷，再次表明E-選擇素與長春瑞濱致CP的形成密切相關(guān)[32]。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)長春瑞濱可通過激活核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)通路，啟動E-選擇素基因表達(dá)，啟動炎癥反應(yīng)，西咪替丁預(yù)處理可有效抑制E-選擇素表達(dá)，干預(yù)長春瑞濱致CP形成[33]。

4.4 腫瘤壞死因子 腫瘤壞死因子α(tumor necrosisi factor α，TNF-α)是一種由單核巨噬細(xì)胞分泌的炎性介質(zhì)，在細(xì)菌感染、腫瘤等病理狀態(tài)下呈高表達(dá)，可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，改變內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)，激活內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生多種炎性介質(zhì)，增加內(nèi)皮細(xì)胞表面血栓形成能力，促進(jìn)中性粒細(xì)胞聚集，釋放蛋白溶解酶，導(dǎo)致炎癥、細(xì)胞壞死、新生血管形成，并可促進(jìn)內(nèi)皮素-1高表達(dá)，損傷血管壁[34]。有研究顯示長春瑞濱輸注后局部組織中腫瘤壞死因子α表達(dá)逐漸升高，48 h后其表達(dá)呈下降趨勢[1,35]，但相關(guān)研究較少。

5 小結(jié)

目前，關(guān)于CP研究主要集中于各護(hù)理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機(jī)制研究甚少，缺乏對干預(yù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究。有關(guān)E-選擇素、腫瘤壞死因子α在CP領(lǐng)域的研究尚處于實驗室探索階段，可通過實驗室基礎(chǔ)研究從細(xì)胞分析學(xué)水平探索常用化療藥所致CP的形成機(jī)制，探尋CP防護(hù)新思路，明確各種常見護(hù)理措施的干預(yù)機(jī)制，為臨床護(hù)理措施改進(jìn)提供實驗室基礎(chǔ)理論支持。

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2016-07-16；

2017-09-05)

(本文編輯 崔曉芳)

Researchprogressonlaboratoryanimalchemotherapyphlebitis

MaRonghua,HuiYi,ZhangQi,etal

(Suzhou Vocational Health College,Jiangsu 215009 China)

R47

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.35.003

1009-6493(2017)35-4459-04

蘇州市科技局指導(dǎo)課題資助項目項目，編號：SYSD2015067；江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目資助，編號：201512688016X；蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院解剖學(xué)優(yōu)秀教學(xué)團(tuán)隊。

馬榮華，講師，主管護(hù)師，碩士研究生，單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院；惠薏、張琪、劉曉梅(通訊作者)單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院。

信息馬榮華，惠薏，張琪，等.實驗室動物化療性靜脈炎研究進(jìn)展[J].護(hù)理研究，2017，31(35)：4459-4462.