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    小麥對(duì)土壤鉻富集和轉(zhuǎn)運(yùn)的品種差異性研究

    2022-02-14 07:40:24王彥蘇李士偉于學(xué)臻李合蓮馬義兵
    關(guān)鍵詞:潮土紅壤江西

    王彥蘇,李士偉,于學(xué)臻,李合蓮*,馬義兵

    (1.濟(jì)南大學(xué)水利與環(huán)境學(xué)院,濟(jì)南 250022;2.澳門科技大學(xué)澳門環(huán)境研究院,澳門 999078)

    鉻(Cr)存在多種形態(tài)(-2~+6),環(huán)境中最常見(jiàn)和最穩(wěn)定的形態(tài)是六價(jià)鉻[Cr(Ⅵ)]和三價(jià)鉻[Cr(Ⅲ)]。Cr(Ⅲ)被認(rèn)為是對(duì)人和動(dòng)物有益的微量營(yíng)養(yǎng)元素,而Cr(Ⅵ)被認(rèn)為是A類人類致癌物。農(nóng)田土壤Cr污染不僅會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境造成影響,還會(huì)增加Cr在作物可食部分的累積,進(jìn)而通過(guò)食物鏈給人類健康帶來(lái)潛在危害。

    作物對(duì)Cr的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)因品種而異。例如CAO等研究了水稻基因型對(duì)Cr吸收的影響,發(fā)現(xiàn)天優(yōu)805、Ⅱ優(yōu)904,甬優(yōu)412(甬優(yōu)17號(hào))為Cr的高累積品種,春江糯6、嘉優(yōu)08-1和川香優(yōu)H11為Cr的低累積品種。陳惠君等比較了37個(gè)菜心品種對(duì)Cr/Pb復(fù)合污染土壤中Cr和Pb的累積,發(fā)現(xiàn)累積量最高和最低的品種可食用部分Cr含量之比為4.2,低累積品種根際分泌的溶解性有機(jī)碳和H少,鈣離子通道不活躍,對(duì)重金屬的活化和吸收能力弱。李智鳴通過(guò)田間試驗(yàn)比較了347個(gè)花生品種籽粒中Cr的富集情況,發(fā)現(xiàn)花生籽粒中Cr的含量為0.02~10.62 mg·kg,高、低累積品種之間累積能力差異巨大。

    物種敏感性分布方法(SSD)是采用統(tǒng)計(jì)分布函數(shù)對(duì)試驗(yàn)中獲得的不同物種的毒理數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,以獲得不同保護(hù)水平對(duì)應(yīng)的濃度閾值或者對(duì)應(yīng)不同濃度的風(fēng)險(xiǎn)水平的方法。SSD方法常用于制定環(huán)境質(zhì)量基準(zhǔn)及進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。近年來(lái),SSD方法也用于化學(xué)物質(zhì)毒性的比較。此外,若以生物富集系數(shù)(BCF)為評(píng)價(jià)終點(diǎn),SSD曲線還可以用于比較不同作物品種對(duì)污染物的富集能力差異,這為鑒定低累積品種提供了可能性。

    小麥在世界各地廣泛種植且品種繁多,不同品種對(duì)Cr的富集情況尚不清楚。因此,本研究選擇土壤性質(zhì)差異較大的山東潮土和江西紅壤作為受試土壤,外源添加一定濃度的Cr(Ⅵ),通過(guò)盆栽試驗(yàn)研究了12個(gè)品種的小麥對(duì)Cr的累積和轉(zhuǎn)運(yùn),以BCF作為評(píng)價(jià)終點(diǎn),構(gòu)建SSD曲線,對(duì)不同小麥品種的富集能力進(jìn)行比較。研究結(jié)果可以為Cr的低累積小麥品種篩選及中、低濃度污染土壤中農(nóng)產(chǎn)品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 土壤采集及理化性質(zhì)分析

    供試土壤(山東潮土和江西紅壤)均采自未受污染的農(nóng)田表層(0~20 cm)。樣品風(fēng)干,混勻,過(guò)2 mm的尼龍篩后備用。土壤pH使用0.01 mol·LCaCl(固液比為1∶2.5)提取,用pH計(jì)測(cè)定;土壤有機(jī)質(zhì)使用重鉻酸鹽法測(cè)定;土壤陽(yáng)離子交換量(CEC)用乙酸銨法測(cè)定;土壤中黏粒含量用移液管法測(cè)定;土壤無(wú)定形Fe、Al用草酸銨溶液提取,并用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定;土壤中總Cr采用硝酸-高氯酸-氫氟酸(體積比為15∶2∶2)進(jìn)行消解,并利用火焰原子吸收光譜法測(cè)定。土壤理化性質(zhì)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 土壤基本理化性質(zhì)Table 1 Selected physicochemical properties of soil

    1.2 污染土壤的制備及老化處理

    本研究重點(diǎn)關(guān)注的是中、低污染水平的非毒害效應(yīng)濃度下小麥對(duì)土壤Cr的吸收和富集,而非生態(tài)毒害作用。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,外源Cr(Ⅵ)添加濃度為45mg·kg并老化3個(gè)月后,山東潮土中小麥幼苗的生長(zhǎng)仍然有明顯的毒害效應(yīng)產(chǎn)生。此外,CHEN等發(fā)現(xiàn),土壤中Cr(Ⅵ)濃度為20 mg·kg時(shí),小麥根系生長(zhǎng)受到明顯的抑制。綜合以上結(jié)果,本研究最終確定設(shè)置3個(gè)Cr(Ⅵ)添加濃度:0(CK)、5.6 mg·kg(T1)和10 mg·kg(T2)。將一定量的KCrO以溶液形式分多次加入土壤,混勻,在70%的田間持水量下老化90 d。

    1.3 盆栽試驗(yàn)

    供試小麥共計(jì)12個(gè)品種,其中濟(jì)麥22、石麥14、百農(nóng)AK58、山農(nóng)17、魯原502、中麥895、周麥27、良星77和輪選988為半冬性品種,煙農(nóng)19為冬性品種,揚(yáng)麥20和川麥104為春性品種。將小麥種子在去離子水中浸泡24 h,然后在25℃的潮濕條件下催芽12 h。將萌發(fā)的種子進(jìn)行播種,每盆播種10顆,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。盆栽前,所有處理均施加N 0.15 g·kg(尿素)、P 0.05 g·kg(磷酸二氫鈣)、K 0.10 g·kg(硫酸鉀)作為底肥。盆栽試驗(yàn)于2018年10月中旬至2019年6月初在濟(jì)南大學(xué)溫室進(jìn)行。試驗(yàn)期間土壤含水量保持在田間持水量的70%左右。

    1.4 樣品采集和分析

    小麥成熟后收獲秸稈和麥穗,對(duì)麥穗進(jìn)行脫殼,獲取小麥籽粒。分別用自來(lái)水和去離子水進(jìn)行徹底清洗,用濾紙吸去表面水分,稱取鮮質(zhì)量。鮮樣在105℃下殺青20 min,然后70℃條件下烘干至恒質(zhì)量,記錄干質(zhì)量,將樣品粉碎,裝入紙袋中儲(chǔ)于干燥器內(nèi)。稱取0.3 g秸稈或0.8 g小麥籽粒于消解管中,加入10 mL 1∶1硝酸和1 mL雙氧水,用石墨消解儀進(jìn)行消解,消解液經(jīng)趕酸、定容至50 mL后過(guò)濾、稀釋,用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS,Agilent-7500a)測(cè)定Cr濃度。

    收獲小麥的同時(shí)進(jìn)行土壤采樣,樣品風(fēng)干后研磨過(guò)2 mm篩,用于測(cè)定有效態(tài)Cr含量。準(zhǔn)確稱取土壤樣品1.00 g于50 mL離心管中,加入10.0 mL 0.050 mol·LEDTA-Na,40℃恒溫?fù)u床內(nèi)180 r·min振蕩12 h,13 500離心,取上清液過(guò)0.45μm濾膜,稀釋后利用ICP-MS進(jìn)行有效態(tài)Cr(EDTA-Cr)含量的測(cè)定。

    整個(gè)分析過(guò)程中,用小麥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW10046)和土壤標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW07424)進(jìn)行質(zhì)量控制,小麥中Cr的回收率為92%~103%,土壤中總Cr的回收率為95%~110%。

    1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

    1.5.1 數(shù)據(jù)處理

    由于本研究中外源Cr(Ⅵ)添加水平遠(yuǎn)低于土壤的總Cr背景值,在計(jì)算小麥秸稈或籽粒對(duì)土壤中Cr的生物富集系數(shù)(BCF)時(shí),采用土壤EDTA-Cr含量而不是總Cr含量來(lái)計(jì)算:

    式中:為小麥秸稈或籽粒中Cr的含量,mg·kg;為土壤EDTA-Cr的含量,mg·kg。

    土壤Cr從小麥秸稈向籽粒的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)(TF):

    式中:和分別為小麥籽粒和秸稈中Cr的含量,mg·kg。

    1.5.2 SSD曲線的擬合

    SSD方法中累積概率分布的擬合常采用loglogistic、log-normal和Burr-Ⅲ分布函數(shù),而Burr-Ⅲ分布是一種更靈活的函數(shù),可以對(duì)log-logistic、log-nor?mal等分布函數(shù)進(jìn)行很好的逼近。因此本研究采用Burr-Ⅲ函數(shù)對(duì)1/BCF數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,建立12種小麥對(duì)Cr元素的富集能力敏感性分布曲線。SSD曲線的擬合采用BurrliOZ軟件(http://www.cmis.csiro.au/en?vir/burrlioz/)完成。

    1.5.3 統(tǒng)計(jì)分析

    用SPSS 22軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析(ANOVA)檢驗(yàn)不同處理間的差異,運(yùn)用多因素方差分析檢驗(yàn)小麥品種與土壤類型及其交互作用對(duì)小麥秸稈和籽粒Cr含量的影響,秸稈和籽粒Cr含量的相關(guān)性以及籽粒Cr含量和TF之間的相關(guān)性通過(guò)皮爾遜相關(guān)分析進(jìn)行確定。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同土壤中有效態(tài)Cr含量的差異

    土壤中EDTA-Cr濃度見(jiàn)表2。小麥品種影響土壤中EDTA-Cr含量,山東潮土中T1和T2處理的EDTA-Cr含量分別為0.39~0.76 mg·kg和0.68~1.84 mg·kg;江西紅壤中T1和T2處理的EDTA-Cr含量分別為0.20~0.75 mg·kg和0.26~1.26 mg·kg。除T1處理下種植山農(nóng)17和周麥27的土壤和T2處理下種植山農(nóng)17、中麥895和輪選988的土壤外,都表現(xiàn)出山東潮土中EDTA-Cr含量高于江西紅壤的現(xiàn)象。

    表2 山東潮土和江西紅壤中有效態(tài)Cr含量(mg·kg-1)Table 2 Available Cr concentration in Shandong fluvo-aquic soil and Jiangxired soil(mg·kg-1)

    山東潮土中,除種植濟(jì)麥22、石麥14、百農(nóng)AK58和良星77的T1處理土壤外,其余土壤中EDTA-Cr含量均顯著高于對(duì)照土壤。江西紅壤中,除種植濟(jì)麥22的土壤及種植煙農(nóng)19和百農(nóng)AK58的T1處理土壤外,其余土壤中EDTA-Cr含量均顯著高于對(duì)照土壤。此外,除個(gè)別小麥品種外,T2處理土壤中EDTA-Cr含量均顯著高于T1處理土壤??傮w上看,盡管本研究外源Cr(Ⅵ)添加濃度較低,卻顯著增加了土壤中EDTA-Cr的含量。

    2.2 小麥中Cr含量及影響因素

    圖1為山東潮土和江西紅壤中12個(gè)品種小麥秸稈和籽粒Cr含量。T1和T2處理下,山東潮土中秸稈Cr含量分別為0.73~2.45 mg·kg和0.97~2.56 mg·kg,籽粒Cr含量分別為0.31~0.59 mg·kg和0.31~0.58 mg·kg。不同品種小麥秸稈Cr含量無(wú)顯著差異。T1處理下,良星77和輪選988與其他小麥品種籽粒Cr含量有顯著差異;T2處理下,除輪選988和百農(nóng)AK58兩種小麥外,其他小麥品種間籽粒Cr含量有顯著差異(<0.05)。T1和T2處理下,江西紅壤中12個(gè)品種小麥秸稈Cr含量分別為0.97~6.33 mg·kg和0.22~5.19 mg·kg,籽粒Cr含量分別為0.21~0.37 mg·kg和0.22~0.31 mg·kg。揚(yáng)麥20和輪選988與其他小麥品種間秸稈Cr含量有顯著差異;不同小麥品種籽粒Cr含量無(wú)顯著差異。

    圖1 小麥秸稈和籽粒Cr含量Figure 1 Contents of Cr in wheat straw and grain

    根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》(GB 2762—2017),谷物中總Cr的最高允許含量為1 mg·kg。山東潮土和江西紅壤中的小麥籽粒Cr含量分別僅為限量值的31%~59%和21%~37%。總體來(lái)說(shuō),山東潮土中12個(gè)品種的小麥籽粒中Cr含量均顯著高于江西紅壤中相應(yīng)品種的籽粒Cr含量,山東潮土中小麥籽粒Cr含量是江西紅壤中的1.07~2.50倍。

    圖2為小麥對(duì)Cr的TF計(jì)算結(jié)果。相同濃度Cr(Ⅵ)處理下,山東潮土和江西紅壤中秸稈到籽粒的TF值在不同品種的小麥間均存在顯著差異(0.05),同一品種的小麥在兩種土壤中的TF值也有較大的差異。外源添加Cr(Ⅵ)處理下,山東潮土和江西紅壤中不同小麥品種的TF值變化范圍為0.14~0.61和0.04~0.49,其變異系數(shù)為2.50%~67.36%。小麥籽粒Cr含量與Cr從秸稈到籽粒的TF值呈極顯著正相關(guān)(0.01)。

    圖2 小麥對(duì)Cr的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)(TF)Figure 2 Translocation factor(TF)from wheat straw to grain

    表3為小麥品種和土壤類型對(duì)小麥籽粒Cr含量影響的方差分析結(jié)果。T1和T2處理下,品種和土壤類型及品種和土壤類型互作均顯著影響小麥籽粒中Cr含量。從各因子和兩個(gè)因子互作對(duì)Cr含量變化的貢獻(xiàn)(平方和,SS)可以看出,土壤類型對(duì)小麥籽粒Cr含量影響最大。

    表3 品種和土壤類型對(duì)小麥籽粒Cr含量影響的方差分析Table 3 Variance analysison the effects of cultivars,soil types,and their interaction on the Cr contents in wheat grains

    2.3 不同品種小麥對(duì)土壤Cr的富集能力差異

    根據(jù)公式(1)計(jì)算不同品種小麥基于土壤EDTA-Cr濃度的BCF值,用BurrliOZ軟件對(duì)1/BCF進(jìn)行累積概率分布擬合,分別得到T1和T2處理下不同品種小麥BCF值的SSD曲線(圖3)。兩種土壤中不同品種的小麥對(duì)Cr的富集能力存在很大差異。此外,小麥對(duì)Cr的富集受土壤中Cr(Ⅵ)添加濃度的影響,隨著Cr(Ⅵ)添加濃度增大,小麥的BCF值降低。

    圖3 基于土壤有效態(tài)Cr的小麥生物富集系數(shù)物種敏感性分布曲線Figure 3 Species sensitivity distribution curve of wheat bioconcentration factor based on soil available Cr

    山東潮土中的魯原502、濟(jì)麥22、川麥104、揚(yáng)麥20、石麥14和江西紅壤中的濟(jì)麥22在敏感性分布曲線中的位置在不同Cr(Ⅵ)添加濃度下變化較大,這可能是因?yàn)楸狙芯緾r(Ⅵ)總體添加濃度較低,導(dǎo)致富集規(guī)律性不夠明顯。輪選988對(duì)Cr的富集在兩種土壤中差異較大,在江西紅壤中富集較少,位于敏感性分布曲線的上端,而在山東潮土中富集較多,位于敏感性分布曲線的下端;山農(nóng)17對(duì)Cr的富集在兩種土壤中變化較小,均位于敏感性分布曲線的上端。山東潮土和江西紅壤中12個(gè)品種的小麥BCF值分別為0.19(石麥14)~1.38(百農(nóng)AK58)和0.18(山農(nóng)17)~1.62(濟(jì)麥22)。

    在山東潮土中,T1和T2處理下,百農(nóng)AK58位于SSD曲線的下端,富集Cr的能力最強(qiáng),其BCF值分別為1.01和0.60。魯原502和濟(jì)麥22位于SSD曲線的上端,富集Cr的能力較弱,其BCF值分別為0.50和0.26。在江西紅壤中,低濃度Cr(Ⅵ)處理下,揚(yáng)麥20位于SSD曲線底端,是富集Cr最高的品種(BCF=1.42),山農(nóng)17位于SSD曲線頂端,是富集Cr最低的品種(BCF=0.20)。高濃度Cr(Ⅵ)處理下,濟(jì)麥22是富集Cr最高的品種(BCF=1.11),輪選988為富集Cr最低的品種(BCF=0.20)。

    百農(nóng)AK58在兩種土壤中T1和T2處理下均位于SSD曲線的下端,富集Cr的能力較強(qiáng),是Cr的高累積小麥品種;山農(nóng)17在兩種土壤中T1和T2處理下均位于SSD曲線的上端,富集Cr的能力較弱,是Cr的低累積小麥品種。

    3 討論

    3.1 土壤類型對(duì)小麥Cr含量的影響

    本研究發(fā)現(xiàn)小麥Cr含量受土壤類型影響最大,這與張國(guó)慶的研究結(jié)果一致。此外,程旺大等研究了水稻籽粒中Cr含量與基因型和環(huán)境變異的關(guān)系,亦發(fā)現(xiàn)環(huán)境對(duì)籽粒Cr含量的影響最大。而伍鈞等則發(fā)現(xiàn)影響玉米籽粒富集Cr能力的因素排序?yàn)榄h(huán)境與品種互作>品種>環(huán)境。以上不同的結(jié)論可能是源于供試作物種類不同以及土壤理化性質(zhì)的差異。

    本研究中,山東潮土中的小麥籽粒Cr含量顯著高于江西紅壤中的小麥籽粒Cr含量,這與土壤中Cr的存在形態(tài)和土壤性質(zhì)有著密切關(guān)系。相同Cr(Ⅵ)污染水平下,土壤老化1 a后,山東潮土中有效態(tài)Cr的濃度顯著高于江西紅壤。這可能是因?yàn)閮煞N土壤對(duì)Cr(Ⅵ)的還原容量存在較大差異。Cr(Ⅵ)向Cr(Ⅲ)的還原反應(yīng)是影響土壤中Cr(Ⅵ)生物有效性的關(guān)鍵過(guò)程,該過(guò)程與土壤pH、有機(jī)質(zhì)含量及土壤顆粒組成等因素關(guān)系密切。低pH值、高有機(jī)質(zhì)及高黏粒含量有利于Cr(Ⅵ)向Cr(Ⅲ)的還原。由于江西紅壤與山東潮土相比pH較低,有機(jī)質(zhì)含量高,黏粒占比大,因此還原Cr(Ⅵ)能力較強(qiáng),這在本課題組先前的研究中已經(jīng)得到證實(shí)。因此,Cr在山東潮土中具有更高的生物有效性,更容易在小麥中累積。

    3.2 品種對(duì)小麥Cr含量的影響

    大多數(shù)Cr是通過(guò)植物吸收必需離子的載體而進(jìn)入植物體內(nèi)的,植物吸收Cr的能力取決于植物類型。本研究中同一濃度下,山東潮土中良星77和輪選988兩個(gè)品種籽粒Cr含量和江西紅壤中輪選988和揚(yáng)麥20秸稈Cr含量與其他絕大多數(shù)小麥品種間存在顯著差異。與本研究的結(jié)果類似,陳啟航發(fā)現(xiàn)不同品種的小麥對(duì)土壤背景Cr中Cr(Ⅲ)及總Cr的富集程度存在很大差異,這主要是因?yàn)椴煌贩N的生理特性及基因差異。

    一般來(lái)說(shuō),土壤源重金屬在植物各器官中的分布規(guī)律為根>秸稈>籽粒。本研究中也發(fā)現(xiàn)了同樣的規(guī)律,山東潮土和江西紅壤中的小麥秸稈Cr含量分別約為籽粒Cr含量的8倍和4倍,秸稈和籽粒Cr含量之間存在顯著差異,這說(shuō)明秸稈和籽粒富集Cr的能力不同。與本研究結(jié)果類似,TIWARI等發(fā)現(xiàn)Cr在豌豆不同器官中的累積順序?yàn)椋焊?莖>葉>籽粒。同時(shí),本研究發(fā)現(xiàn),不同品種小麥籽粒中Cr含量的差異主要是秸稈中的Cr遷移轉(zhuǎn)運(yùn)到籽粒能力的差異引起的。這與YE等的觀點(diǎn)類似,即稻米對(duì)鎘(Cd)的累積與莖葉到籽粒的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)相關(guān)。

    3.3 土壤污染水平對(duì)小麥Cr含量的影響

    在本研究中,由于外源Cr(Ⅵ)添加水平較低,且土壤老化時(shí)間較長(zhǎng),小麥秸稈和籽粒Cr含量在CK、T1和T2處理下未觀察到顯著差異。而趙魯?shù)妊芯堪l(fā)現(xiàn),隨土壤中Cr添加量的增加,小麥籽粒Cr含量呈逐漸升高的趨勢(shì),且顯著高于對(duì)照處理。這說(shuō)明小麥籽粒Cr含量受土壤Cr含量的影響。

    4 結(jié)論

    (1)小麥品種的富集順序受土壤性質(zhì)的影響,在山東潮土和江西紅壤中呈現(xiàn)出不同的規(guī)律。外源添加Cr(Ⅵ)后,山東潮土(堿性)中Cr的化學(xué)浸提性和生物有效性都高于江西紅壤(酸性)。

    (2)不同小麥品種對(duì)Cr的吸收富集和轉(zhuǎn)運(yùn)能力存在顯著差異。不同品種籽粒Cr含量的差異主要源于轉(zhuǎn)運(yùn)能力的不同。

    (3)山農(nóng)17是Cr的低累積小麥品種,百農(nóng)AK58是Cr的高累積小麥品種。

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