旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布在大鼠腦出血模型中的應(yīng)用研究

張緒新 梁 燕 李彥釗 任 剛 孫丕通 鄧東風(fēng)(通訊作者)

大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院 大連 116001

旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布在大鼠腦出血模型中的應(yīng)用研究

張緒新 梁 燕 李彥釗 任 剛 孫丕通 鄧東風(fēng)(通訊作者)

大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院 大連 116001

目的 觀察旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布在大鼠腦出血模型中的止血效果。方法 選用健康成年Wistar大鼠，分為自凝組、止血紗布壓迫止血組、旱蓮草超微粉止血組及旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組，每組12只，造成大鼠出血模型，觀察每組的止血時(shí)間及再出血率。結(jié)果 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組的平均止血時(shí)間短于對照組，再出血率亦低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗止血效果優(yōu)于單一止血材料的應(yīng)用。

旱蓮草超微粉；止血紗；聯(lián)合

旱蓮草是雙子植物菊科，又稱“墨旱草”，在臨床上是一種常用于治療出血癥的中草藥；止血紗是一類在手術(shù)中廣泛應(yīng)用的生物醫(yī)學(xué)材料，其作用主要是加速傷口血液凝固，從而達(dá)到快速止血的目的。本實(shí)驗(yàn)研究旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗對大鼠外傷腦出血模型止血效果影響。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠48只，雌雄不限，體質(zhì)量300～350 g，由大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，分籠喂養(yǎng)，每籠6只，保持籠內(nèi)清潔，動(dòng)物房溫度控制在20～23 ℃。試劑：本實(shí)驗(yàn)過程中止血紗由大連永興醫(yī)用材料有限公司制備，采用純棉纖維經(jīng)羥甲基化處理后滅菌制成，為不可吸收產(chǎn)品。主要結(jié)構(gòu)是羧甲基纖維素。止血紗布重金屬含量不應(yīng)超過10 μg/g。止血紗布應(yīng)無皮膚致敏反應(yīng)，無皮膚刺激反應(yīng)，細(xì)胞毒性反應(yīng)不超過稍微細(xì)胞毒性。旱蓮草超微粉委托大連鴻峰生物科技有限公司制備。經(jīng)掃描電鏡檢測其粒徑5～1 0 μm，呈正態(tài)分布。

1．2 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。10%水合氯醛(300 mg/kg)腹腔注射麻醉后，將大鼠固定在鼠板上，備皮，消毒后沿頭部中線縱行切開皮膚，在右側(cè)頂骨(距矢狀縫，冠狀縫各5 mm)處用磨鉆磨出一大小約5 mm×5mm的骨窗，保持硬膜完整。應(yīng)用外科縫合針輕輕劃開硬膜，充分暴露腦組織，不傷及皮層，如硬膜出血，用濕鹽水棉片壓迫止血。應(yīng)用神經(jīng)外科顯微取瘤鑷夾取大腦皮層約2 mm×2 mm×1 mm，造成外傷出血模型。

1．3 分組 Wistar大鼠分為4組，每組12只，A組為自凝組；B組為采用止血紗布壓迫止血組；C組為采用旱蓮草超微粉止血組；D組為采用旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組。

1．4 標(biāo)本采集與觀察指標(biāo) 大鼠造成腦出血模型，完全止血后縫合切口。術(shù)后給予大鼠正常進(jìn)食，不能進(jìn)食者糖水灌胃。于術(shù)后5 d、10 d、15 d分別處死大鼠。主要觀察止血效果，用秒表記錄完全止血時(shí)間，即創(chuàng)面彌漫滲血被吸凈后局部給予止血?jiǎng)┗蛭唇o予任何處理至創(chuàng)面無任何形式出血時(shí)所需的時(shí)間(計(jì)算各組平均止血時(shí)間)；另外，觀察不同組間術(shù)后再出血發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2．1 各組大鼠平均止血時(shí)間比較 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗止血時(shí)間明顯小于其他3組對照組。見表1。

表1 各組大鼠平均止血時(shí)間比較

注：與A組比較，aP<0.01；與B組比較，bP<0.01；與C組比較，cP<0.05

2．2 各組大鼠再出血發(fā)生率比較 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗術(shù)后大鼠再出血發(fā)生率低于其他3組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 各組大鼠再出血率比較 (n)

3 討論

顱腦手術(shù)術(shù)中的止血至關(guān)重要，止血除與手術(shù)技術(shù)密切相關(guān)外，還與所采用的局部止血材料有關(guān)。有效的止血材料不僅可以在術(shù)中迅速止血，減少手術(shù)時(shí)間，還可以降低術(shù)后再出血并發(fā)癥的發(fā)生。在顱腦手術(shù)中，目前大血管等一般性出血已有較好的止血方法，如用雙極電凝及動(dòng)脈瘤夾夾閉等，但對腦組織表面及創(chuàng)面出血的治療仍是神經(jīng)外科領(lǐng)域面臨的難題[1-4]，常借助于外用止血裝置，如明膠海綿、止血酶、纖維蛋白粘膠、高分子粘合膠等。然而，各種止血材料各有其優(yōu)劣點(diǎn)，國內(nèi)外研發(fā)公司均致力于研究出新型止血材料，這種可吸收材料能對腦組織表面出血及創(chuàng)面滲血能迅速止血。美國Medafor公司研制的Arista止血粉，是用馬鈴薯為原料制備而成的淀粉微球，在臨床治療中雖然具有較好的止血效果，但其價(jià)格昂貴[5]，國際上認(rèn)為理想的止血材料[6]需具備以下特點(diǎn)：不僅止血迅速，還可以體內(nèi)降解吸收；使用簡便，操作容易；質(zhì)量體積小，易于保存；無潛在的病源性；價(jià)格低；不增加感染風(fēng)險(xiǎn)；不影響組織愈合，甚至能促進(jìn)組織愈合等。

旱蓮草是雙子葉植物菊科，又稱“墨旱蓮”，在我國分布極其廣泛且生長環(huán)境要求低。不僅來源廣泛，且安全可靠，因其止血效果顯著，被廣泛用于治療出血癥，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，旱蓮草具有止血、抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種作用。

本研究設(shè)計(jì)大鼠腦出血模型，通過不同止血材料止血效果比較得出旱蓮草組平均止血時(shí)間及術(shù)后再出血發(fā)生率優(yōu)于其他組。王建[7]通過對不同劑量的墨旱蓮水煎劑對小鼠熱盛胃出血的止血作用進(jìn)行研究表明，墨旱蓮止血機(jī)制與提高血小板數(shù)量、血小板聚集率、纖維蛋白原含量，縮短凝血酶原及部分凝血活酶時(shí)間有關(guān)。凝血酶原時(shí)間和部分凝血活酶時(shí)間的影響比血小板與纖維蛋白原的影響更顯著。劉世望等[8]將旱蓮草提取物溶液分為不同劑量后與抗凝兔血混合，測凝血時(shí)間，發(fā)現(xiàn)旱蓮草提取物濃度為0.5%時(shí)，有最強(qiáng)促凝血活性，凝血時(shí)間16 s，凝血時(shí)間縮短率99.6%，證明旱蓮草提取物有顯著的止血效果和促凝血活性，中溫水提取物在提取液用量0.03 mL/坑時(shí)凝血時(shí)間最短，促凝血活性最強(qiáng)，研究表明，天然黃酮類物質(zhì)可能是旱蓮草最主要的天然止血活性成分[9-12]。

止血紗的止血機(jī)制是以紗布網(wǎng)眼作為基質(zhì)，血小板遇到能迅速聚集，進(jìn)而迅速凝結(jié)血塊，而達(dá)到止血目的，通過物理作用迅速使血液凝固，而不依賴于人體內(nèi)的凝血機(jī)制，研究表明，止血紗能有效控制微小、小血管出血[13-14]。本研究結(jié)果表明止血紗聯(lián)合旱蓮草超微粉效果優(yōu)于單一止血效果。

[1] Achneck HE，Sileshi B，Jamiolkowski RM，et al．A comprehensive review of topical hemostatic agents：efficacy and recommendations for use[J]．Ann Surg，2010， 25(1)：217-228．

[2] Gegel B，Burgert J，Cooley B，et al．The effects of Bleed Arrest，Celox and Trauma Dex on hemorrhage control in a porcine model[J]．J Surg Res，2010，16(4)：el25-el29．

[3] Recinos G，Inaba K，Dubose J，et al．Local and systemic hemostatics in trauma：a review[J]．Ulus Travma Acil Cerrahi Derg，2008，14(2)：175-181．

[4] Sondeen JL，Pusateri AE，Coppes VG，et al．Comparison of 10 different hemostatic dressings in an aortic injury[J]．J Trauma，2003，54(3)：280-285．

[5] Humphreys MR，Lingeman JE，Terry C，et al．Renal injury and the application of polysaccharide hemospheres：a laparoscopic experimental model[J]．J Endourol，2008，22(5)：1 371-1 381．

[6] Peng HT．Novel wound sealants：biomaterials and applications[J]．Expert Rev Med Devices，2010，7(5)：639．

[7] 王建．墨旱蓮對小鼠熱盛胃出血止血作用的研究[D]．錦州：錦州醫(yī)學(xué)院，2005．

[8] 劉世望，徐艷霞，徐霞玲，等．墨旱蓮葉水提物止血活性初探[J]．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36(31)：13 673-13 674．

[9] 趙越平，湯海峰，蔣永培，等．墨旱蓮化學(xué)成分的研究[J]．中國藥學(xué)雜志，2002，37(1)：17-19．

[10] Le MK，Yang H，Sung SH，et al．Antiproliferative activity of triterpenoids from Ecliptaprostrate on hepatic stellate cells[J]．Phytomedicine，2008，15(10)：775-780．

[11] Zhang CF，Sun ZH，Zhang D，et al．Sulphur compounds from the aerialparts of Eclipta prostrate[J]．Biochem Syst Ecol，2010，38(6)：1 253-1 256．

[12] 袁繼承，蔣永和，沈志濱．旱蓮草化學(xué)成分的研究進(jìn)展[J]．亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5(1)：125-127．

[13] Krizova P，Masova L，Suttnar J，et al．The influence of intrinsic coagulation pathway on blood platelets activation by oxidized cellulose[J]．J Biomed Mater A，2012，82(2)：274-280．

[14] 余雪松，黃赤兵，張艮甫，等．局部止血材料臨床應(yīng)用現(xiàn)狀[J]．創(chuàng)傷外科雜志，2010，14(6)：23-26．

(收稿2016-10-09)

大衛(wèi)科教發(fā)[2015]1號，編號98

R-332

A

1673-5110(2017)03-0045-03