中草藥聯(lián)用對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌作用的研究

王德強(qiáng)，佟延南，李芳遠(yuǎn)，劉宏偉，李忠琴

（1.海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院，海南?？?70100；2.國(guó)家羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系海口綜合試驗(yàn)站，海南?？?570100；3.集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院廈門市漁用藥物工程技術(shù)研究中心，福建廈門 361021）

中草藥聯(lián)用對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌作用的研究

王德強(qiáng)1，2，佟延南1，2，李芳遠(yuǎn)1，2，劉宏偉3，李忠琴3

（1.海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院，海南?？?70100；2.國(guó)家羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系?？诰C合試驗(yàn)站，海南?？?570100；3.集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院廈門市漁用藥物工程技術(shù)研究中心，福建廈門 361021）

本文利用BIOLOG自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)對(duì)所分離保存的羅非魚(yú)致病菌株進(jìn)行生化鑒定，確定為無(wú)乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae），進(jìn)而測(cè)定虎杖、五倍子、地榆、黃連、大黃、白頭翁、黃芩等14種中草藥單用及聯(lián)用復(fù)方對(duì)該致病菌株的抑菌效果。結(jié)果表明，從14種中草藥中篩選出6種中草藥（中草藥A、中草藥B、中草藥C、中草藥D、中草藥E、中草藥F）對(duì)無(wú)乳鏈球菌有良好的抑制作用；隨后考察此6種中草藥組合成雙聯(lián)用、三聯(lián)用及四聯(lián)用復(fù)方的抑菌效果，其中雙聯(lián)用中的2種復(fù)方具有顯著協(xié)同作用，4種復(fù)方具有協(xié)同作用；三聯(lián)用中的8種復(fù)方具有顯著協(xié)同作用，3種復(fù)方具有協(xié)同作用；四連用中的1種復(fù)方具有顯著協(xié)同作用，1種復(fù)方具有協(xié)同作用。

羅非魚(yú)；無(wú)乳鏈球菌；中草藥；單用；聯(lián)用

羅非魚(yú)是海南省主要的淡水養(yǎng)殖品種，年養(yǎng)殖產(chǎn)量約35萬(wàn)t，年出口創(chuàng)匯上億元。在目前高密度集約化生產(chǎn)過(guò)程中，羅非魚(yú)鏈球菌病時(shí)有發(fā)生，據(jù)調(diào)查發(fā)現(xiàn)羅非魚(yú)鏈球菌病的暴發(fā)可造成80%以上的病死率，經(jīng)濟(jì)損失慘重[1]。疾病發(fā)生時(shí)，生產(chǎn)者難免不得不使用一些化學(xué)藥物進(jìn)行防治，加之盲目的單用或混用，其結(jié)果不僅浪費(fèi)成本，使疾病無(wú)法得到有效控制，而且造成了羅非魚(yú)生理代謝障礙，病情加劇以及藥物殘留，水環(huán)境污染，養(yǎng)殖生態(tài)中的正常菌群失調(diào)，耐藥性甚至多重耐藥性增強(qiáng)，給今后疾病的控制帶來(lái)更大的困難。

中草藥是一種天然環(huán)保型綠色藥物具有高效、毒不良反應(yīng)少、安全性高、殘留少等諸多優(yōu)點(diǎn)。目前用中草藥代替抗生素是水產(chǎn)病害防治的發(fā)展趨勢(shì)[2-4]，研究中草藥對(duì)致病菌的作用效果以指導(dǎo)合理用藥越發(fā)重要，因此推廣中草藥防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病，有著極其重要的意義[5]。已有研究表明，中草藥防治羅非魚(yú)鏈球菌病綠色環(huán)保[6]，且具有較好的抑菌和殺菌效果[7-8]。本文選取14種具有廣譜抗菌活性的中草藥，研究其單方和復(fù)方對(duì)無(wú)乳鏈球菌的體外抑制作用，以期為羅非魚(yú)鏈球菌病的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中草藥采集《中華人民共和國(guó)藥典》具有抗菌、清熱解毒特性的虎杖、五倍子、地榆、黃連、大黃、白頭翁、黃芩、鉤藤、白茱萸、龍舌草、黃柏、苦參、使君子及檳榔14種中草藥用于試驗(yàn)。

1.1.2 菌株1株羅非魚(yú)致病性無(wú)乳鏈球菌，由海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院淡水漁業(yè)研究所和珠江水產(chǎn)研究所從海南省羅非魚(yú)主產(chǎn)區(qū)患病的羅非魚(yú)腦部分離、鑒定并保存。

1.1.3 培養(yǎng)基酵母粉（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司），腦心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）、瓊脂粉（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）、葡萄糖（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 方法

1.2.1生理生化鑒定運(yùn)用BIOLOG自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)對(duì)所保存的羅非魚(yú)致病性無(wú)乳鏈球菌進(jìn)行鑒定。

1.2.2 藥材預(yù)粉碎處理將所選的中藥用中藥粉碎機(jī)粉碎至100目左右，然后放入超微粉碎機(jī)進(jìn)一步粉碎，收集超微藥粉備用。在掃描電子顯微鏡下觀察，90%以上的顆粒粒徑大小在5～10μm。

1.2.3 平板稀釋法采用瓊脂擴(kuò)散法，在復(fù)合培養(yǎng)基添加中藥超微粉，以濃度1mg/mL開(kāi)始進(jìn)行兩倍稀釋，配置不同濃度梯度的藥敏培養(yǎng)基。將無(wú)乳鏈球菌接種至斜面，35℃培養(yǎng)24 h后，使用無(wú)菌水將其洗下，并調(diào)節(jié)菌液濃度調(diào)至107CFU/m L，取菌液2μL以涂布的方法接種在經(jīng)過(guò)121℃20 min滅菌后的藥敏培養(yǎng)基平板上，每個(gè)藥物濃度梯度做三組平行。將接種好的平板放置35℃培養(yǎng)，分別記錄為該菌株的最低抑菌濃度（MIC）值，48 h后觀察藥板上菌落的生長(zhǎng)情況最低殺菌濃度（MBC）值。

1.2.4 中草藥雙聯(lián)用抑菌試驗(yàn)根據(jù)中藥單用的數(shù)據(jù)結(jié)果選出了6種中藥進(jìn)行中藥雙聯(lián)用復(fù)方的篩選。

試驗(yàn)組：以復(fù)合培養(yǎng)基為溶劑，用瓊脂稀釋法，采用棋盤交叉法，將參與雙聯(lián)用的兩種中藥的單用最低抑菌濃度1/16 MIC、1/8 MIC、1/4 MIC、1/2 MIC，兩兩混合配比制備雙聯(lián)用藥敏培養(yǎng)基。

對(duì)照組：聯(lián)用的兩種中藥的單用MIC的藥敏平板作為單用藥物的對(duì)照。

1.2.5 中草藥三聯(lián)用抑菌試驗(yàn)根據(jù)雙聯(lián)用的基礎(chǔ)跟第三種中藥進(jìn)行聯(lián)用。

試驗(yàn)組：以復(fù)合培養(yǎng)基為溶劑，用瓊脂稀釋法，采用棋盤交叉法，將參與三聯(lián)用的三種中藥的單用最低抑菌濃度1/16MIC、1/8MIC、1/4MIC，先雙聯(lián)用，再與第三種中藥進(jìn)行雙聯(lián)用的混合配比制備三聯(lián)用藥敏培養(yǎng)基。

對(duì)照組：聯(lián)用的三種中藥的單用MIC的藥敏平板作為單用藥物的對(duì)照。將細(xì)菌接種至斜面，35℃培養(yǎng)24 h后，使用無(wú)菌水將其洗下，并調(diào)節(jié)菌液濃度調(diào)至107CFU/mL，取菌液2μL接種在經(jīng)過(guò)121℃20 min滅菌后的藥敏培養(yǎng)基平板上，每個(gè)藥物濃度梯度做三組平行。

1.2.6 中草藥四連用抑菌試驗(yàn)根據(jù)三聯(lián)用的基礎(chǔ)跟第四種中藥進(jìn)行聯(lián)用。

試驗(yàn)組：以復(fù)合培養(yǎng)基為溶劑，用瓊脂稀釋法，采用棋盤交叉法，將參與四聯(lián)用的四種中藥的單用最低抑菌濃度1/32 MIC、1/16 MIC、1/8 MIC、1/4 MIC，先三聯(lián)用，再與第四種中藥進(jìn)行雙聯(lián)用的混合配比制備中藥四聯(lián)用藥敏培養(yǎng)基。

對(duì)照組：聯(lián)用的四種中藥的單用MIC的藥敏平板作為單用藥物的對(duì)照。

1.2.7 聯(lián)用指數(shù)（FIC）計(jì)算

①FIC指數(shù)計(jì)算：

FIC指數(shù)=MIC甲藥聯(lián)合/MIC甲藥單用+ MIC乙藥聯(lián)合/MIC乙藥單用

②指數(shù)判讀方法：

FIC≤0.5為顯著協(xié)同作用，F(xiàn)IC＞0.5～1為協(xié)同作用，F(xiàn)IC=1為相加作用，F(xiàn)IC＞1～2為無(wú)關(guān)作用，F(xiàn)IC＞2拮抗作用。

2 結(jié)果

2.1 菌株的生理生化鑒定

利用BIOLOG自動(dòng)微生物系統(tǒng)進(jìn)行菌株鑒定，結(jié)果為Streptococcus agalactiae（gp B）。該菌株能利用葡萄糖、半乳糖、甘露糖、麥芽糖、果糖、海藻糖、蔗糖，不能分解乳糖、巖藻糖、鼠李糖、肌醇、山梨醇、D，L-絲氨酸、L-組氨酸、L-丙氨酸和L-精氨酸，明膠和檸檬酸等指標(biāo)為陰性。

2.2 中草藥單用結(jié)果

14種中藥采用瓊脂擴(kuò)散法，以濃度1mg/mL開(kāi)始進(jìn)行兩倍稀釋，根據(jù)MIC值和MBC值確定了6種單用抑制羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌效果較好的中藥。

2.3 中藥雙聯(lián)用結(jié)果

6種中藥兩兩聯(lián)用，有15種組合，每個(gè)中藥組合，做了16種配方。六種中藥的雙聯(lián)用總共做了480個(gè)平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示：雙聯(lián)復(fù)方D1、D2顯著協(xié)同作用；雙聯(lián)復(fù)方C1、C2、D3、F1、F2為協(xié)同作用；雙聯(lián)復(fù)方B1為相加作用；雙聯(lián)復(fù)方A1、B2、B3、D4、F3、F4、F5為無(wú)關(guān)作用。

2.4 中藥三聯(lián)用結(jié)果

6種中藥三三聯(lián)用，有20種組合，每種中藥組合，做了64種配方。六種中藥的三聯(lián)用總共做了2560個(gè)平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示，三聯(lián)復(fù)方E1、E2、E3、E4、A1、A2、A3、A4顯著協(xié)同作用；三聯(lián)復(fù)方C1、E5、B1為協(xié)同作用；三聯(lián)復(fù)方A5為相加作用；三聯(lián)復(fù)方E6、E7、E8、B2、C2、C3、E9、A6為無(wú)關(guān)作用。

表1 15種中藥雙聯(lián)用藥敏試驗(yàn)結(jié)果

表2 20種中藥三聯(lián)用藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.5 中藥四聯(lián)用結(jié)果

6種中藥四聯(lián)用，有15種組合，每種中藥組合，做了256種配方。六種中藥的四聯(lián)用總共做了7680個(gè)平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示四聯(lián)復(fù)方E1顯著協(xié)同作用；四聯(lián)復(fù)方E2為協(xié)同作用；四聯(lián)復(fù)方E10為相加作用；四聯(lián)復(fù)方A1、A2、C1、A3、E3、E4、E5、E6、E7、E8、E9為無(wú)關(guān)作用。

表3 15種中藥四聯(lián)用藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1 中藥單用體外抑菌效果分析

近年來(lái)，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中中草藥越來(lái)越多的被用于提高水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)、防治疾病和提高機(jī)體免疫力等方面。特別是防病方面，因中草藥具有毒性低、毒不良反應(yīng)小、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)，已成為替代抗生素類藥物的首選。藥理學(xué)研究表明，單味中藥在抑制魚(yú)源病原微生物上有獨(dú)特的功效，并且是水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治用藥的基礎(chǔ)，已有不少學(xué)者采用不同方法研究了中藥對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物病原菌的體外抑菌效果。本研究首先從虎杖、五倍子、地榆等14種中草藥中篩選出抑制作用較好的中草藥單方，結(jié)果表明有6種中草藥抑制效果較佳。研究結(jié)果與某些文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致，如張彬等[7]報(bào)道了金銀花、黃芩、大黃、連翹、黃柏對(duì)羅非魚(yú)海豚鏈球菌具有一定的抑菌作用。吳穎瑞等[8]報(bào)道了博落回、紫草、田基黃、補(bǔ)骨脂、三顆針、田七須、五倍子對(duì)無(wú)乳鏈球菌和海豚鏈球菌均表現(xiàn)出一定的抑菌活性。

3.2 中藥聯(lián)用體外抑菌效果分析

針對(duì)中藥聯(lián)用所產(chǎn)生的協(xié)同或拮抗作用，目前大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是由于中藥的有效成分不同、抑菌機(jī)制不同造成。將兩種抑菌作用途徑或靶點(diǎn)不同的中藥聯(lián)用，就可以多位點(diǎn)、多途徑攻擊致病細(xì)菌的細(xì)胞，提高藥物的殺傷力。中藥聯(lián)用產(chǎn)生拮抗減效的原因可能是每種中藥發(fā)揮藥效的化學(xué)成分在聯(lián)用時(shí)，發(fā)生多種有效成分相互結(jié)合、吸附等物理作用，從而降低藥物的溶出、吸收，甚至發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致藥物失去原有的抑菌活性。

從中醫(yī)藥學(xué)角度來(lái)說(shuō)，中藥講求的是藥物的組方配伍，通過(guò)合理的配伍可以增強(qiáng)原有的功用，如何明等[9]發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方制劑抑制作用優(yōu)于單味中藥。因此，本研究分別研究了單用效果較好的6種中藥的雙聯(lián)用、三聯(lián)用和四連用復(fù)方，根據(jù)不同配伍選出了抑菌效果更佳的2種雙聯(lián)用復(fù)方、8種三聯(lián)用復(fù)方和1種四連用復(fù)方，可見(jiàn)，科學(xué)配伍不同的藥物組成復(fù)方制劑，能明顯的提高療效。

本試驗(yàn)雖然篩選出了對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌有較好抑制作用的中草藥單方和復(fù)方，但中草藥有效成分的分析和能否開(kāi)發(fā)為有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的水產(chǎn)藥物仍需進(jìn)一步深入研究。

[1]曾凡美.羅非魚(yú)鏈球菌病重在防治——“羅非魚(yú)鏈球菌病流行風(fēng)險(xiǎn)分析與對(duì)策研討會(huì)”廣州[J].海洋與漁業(yè)，2009（11）：16-17．

[2]何愛(ài)華，張曦，陶琳麗，等.6種中草藥對(duì)4種淡水魚(yú)致病菌體外抑菌作用的研究[J].南方水產(chǎn)科學(xué)，2011，7（2）：73-76. [3]童國(guó)忠，石亞素，馬劍茵，等.中草藥對(duì)海水養(yǎng)殖黃魚(yú)病原弧菌抑菌效果研究[J].水產(chǎn)科學(xué)，2007，26（8）：436-439.

[4]鄭天倫，王國(guó)良，金珊．網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚(yú)弧菌病的中草藥防治[J].水產(chǎn)科學(xué)，2005，24（2）：24-25.

[5]程志斌，葛長(zhǎng)榮，韓建眾.中草藥有效成分對(duì)動(dòng)物免疫系統(tǒng)功能的影響及其應(yīng)用[J].動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)，2002，19（1）：11-13.

[6]溫周瑞，裴家田，王文博，等.一種中草藥復(fù)方制劑對(duì)羅非魚(yú)非特異性免疫力的影響[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，24（2）：136-140．

[7]張彬，黃婷，陳福艷，等.10種中草藥及4種組方對(duì)羅非魚(yú)致病性海豚鏈球菌體外抑菌試驗(yàn)[J].淡水漁業(yè)，2011，41（5）：35-39.

[8]吳穎瑞，龔慶芳，方宏，等.153種中草藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌和海豚鏈球菌的抑制活性研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào).2013，41（1）：25-32.

[9]何明，張永跟.中藥抑菌作用研究現(xiàn)狀[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)：中醫(yī)臨床版，2007，14（6）：44-46.

新疆巴里坤縣鹵水淡化試養(yǎng)對(duì)蝦首次獲得成功

2016年12月1日，記者在巴里坤縣海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社養(yǎng)殖基地看到，鹵水淡化后工廠化養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦首次獲得成功，填補(bǔ)了哈密地區(qū)對(duì)蝦養(yǎng)殖的空白，令人興奮的是，地處內(nèi)陸深處的巴里坤人在今年春節(jié)可以吃到當(dāng)?shù)禺a(chǎn)的海產(chǎn)品。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社技術(shù)總監(jiān)張建波介紹，11月12號(hào)投的這茬苗，從P5的苗到現(xiàn)在一共是19 d了，現(xiàn)在大的能有3 cm，小的也有2 cm，應(yīng)該說(shuō)試養(yǎng)成功了。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社理事長(zhǎng)盛軍先是江蘇省連云港市人，來(lái)哈密市創(chuàng)業(yè)工作已30多年，涉足過(guò)許多行業(yè)。當(dāng)他看到近年來(lái)興起的工廠化海產(chǎn)品養(yǎng)殖項(xiàng)目紛紛獲得了良好的效益，而且了解到農(nóng)業(yè)設(shè)施化、水產(chǎn)養(yǎng)殖工廠化是當(dāng)今低碳、環(huán)保的國(guó)際大趨勢(shì)，盛軍先毅然決定在巴里坤縣投資創(chuàng)辦海產(chǎn)品養(yǎng)殖。巴里坤湖是咸水湖，盛產(chǎn)鹵蟲(chóng)，鹵蟲(chóng)是養(yǎng)殖對(duì)蝦最好的餌料。盛軍先提取了巴里坤湖的水樣，歷時(shí)一年多，先后在哈密市環(huán)保局、地質(zhì)六大隊(duì)、中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所等地進(jìn)行了全項(xiàng)目分析檢測(cè)，結(jié)果顯示湖水水質(zhì)優(yōu)良，水中的各種微量元素完全適合海產(chǎn)品養(yǎng)殖，而且不含重金屬。盛軍先邀請(qǐng)專家實(shí)地進(jìn)行了考察，又在國(guó)內(nèi)各水產(chǎn)品養(yǎng)殖基地進(jìn)行了深入考察和市場(chǎng)分析，與中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所簽訂了合作協(xié)議，由黃海水產(chǎn)研究所提供技術(shù)支持，實(shí)施了“鹵水淡化海產(chǎn)品養(yǎng)殖西北示范基地”項(xiàng)目，開(kāi)始嘗試海產(chǎn)品的養(yǎng)殖。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社理事長(zhǎng)盛軍先說(shuō)，新疆的市場(chǎng)是很大的，而且養(yǎng)的是純的海鮮，這個(gè)海產(chǎn)品的口感和淡水養(yǎng)殖的水產(chǎn)品的口感那是不一樣的，所以他對(duì)這個(gè)市場(chǎng)很有信心。

2016年5月，盛軍先注冊(cè)成立了巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社。在距離巴里坤湖1.3 km遠(yuǎn)的海子沿鄉(xiāng)尖山子修建了2座1 000m2的養(yǎng)殖車間以及配套設(shè)施，完成投資300多萬(wàn)元。11月12號(hào)，合作社放養(yǎng)了第一批南美白對(duì)蝦苗種。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社理事長(zhǎng)盛軍先說(shuō)，今年這一批蝦看這個(gè)長(zhǎng)勢(shì)，春節(jié)絕對(duì)可以豐富我們哈密人民的餐桌，長(zhǎng)勢(shì)良好。

海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社計(jì)劃一期項(xiàng)目投資1 300萬(wàn)元，除了養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦，還計(jì)劃養(yǎng)殖多寶魚(yú)、梭子蟹等。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社理事長(zhǎng)盛軍先說(shuō)，明年大概還要投資1 000萬(wàn)，有3個(gè)池子，其中有一個(gè)大池子，中間搞一個(gè)觀光通道，讓客人來(lái)了從觀光通道可以很直觀的看到，就像那個(gè)水族館一樣，透明的，可以看到蝦、多寶魚(yú)、梭子蟹在水里頭游。

一期項(xiàng)目完工后，海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社對(duì)蝦、多寶魚(yú)、梭子蟹的年產(chǎn)量將預(yù)計(jì)達(dá)到100 t、50 t和30 t。在合作社發(fā)展的同時(shí)，盛軍先還打算帶動(dòng)更多的當(dāng)?shù)剞r(nóng)牧民一同致富，海產(chǎn)品養(yǎng)殖將成為巴里坤農(nóng)牧民增收的一條新途徑。

巴里坤海立德水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社理事長(zhǎng)盛軍先說(shuō)，我們這個(gè)項(xiàng)目也是個(gè)創(chuàng)新，會(huì)給我們合作社帶來(lái)很好的經(jīng)濟(jì)效益，并且它將帶來(lái)更大的是社會(huì)效益，周圍環(huán)湖四個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的農(nóng)牧民跟著我們來(lái)做，就能夠?qū)崿F(xiàn)增收致富。對(duì)愿意參加我們合作社的這些農(nóng)牧民技術(shù)指導(dǎo)，或者讓他干脆入股這種方式，我們來(lái)帶著他走這條路。

（www.bbwfish.com）

Study on combination of Chinese herbalmedicin against tilapia streptococcus disease in vitro

Wang Deqiang，Tong Yannan，Li Fangyuan，Liu Hongwei，Li Zhongqin
（1.Hainan Academy of Ocean and fisheries Sciences，Haikou 570100，China；2.National tilapia indu s t r ial t ech nolo gy sys t em，H ai k ou S tatio，H ai k ou 570100，Ch ina；3.E n g in eer in g Tech nolo gy Rese a rch Ce nt re o f F i sheryme di c in e f o rX ia me n，X ia me n 361021，Ch ina）

The pathogenic strain isolated from tilapia was identified asStreptococcus agalactiaby BIOLOG system.Then fourteen kinds of Chinese herbalmedicines such asPolygonum cuspidatum，Rhus chinensisMill，Sanguisorba officinalis，Coptis chinensisFranch，Rheum officinaleBaill，Radix Pulsatillae Chinensis，Baical Skullcap Root were chosen for the bacteriostasis test.The results showed herbs A，herbs B，herbal C，herbal D，herbs E and herbal F had obvious inhibiting effect.Then we investigated antibacterial effect of this six kinds of Chinese herbal medicine in combination with a double-linked，triple-linked and quadruple-linked.Among them，there is 2 kinds of double-linked with having significant synergies and 4 kindswith having synergies;thereis 8 kinds of triple-linked with having significant synergies and 3 kindswith having synergies;there is 1 kind of quadruple-linked with having significant synergies and 1 kind with having synergies.

tilapia；Streptococcus agalactia；Chinese herbalmedicine；alone；combined with

Q176

：A

：1004-2091（2017）01-0047-05

10.3969/j.issn.1004-2091.2017.01.010

2016-03-14）

海南省海洋與漁業(yè)廳項(xiàng)目；福建省教育廳項(xiàng)目（JA15260）

王德強(qiáng)（1957-），高級(jí)工程師，主要從事海淡水漁業(yè)育種及養(yǎng)殖研究.E-mail：wangyq789@163.com

李忠琴，副教授.E-mail:zhqinli@jmu.edu.cn