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    不同香青菜品種苗期耐熱性分析與評(píng)價(jià)

    2017-02-05 19:28王桃云蔣偉娜顧華杰沈雪林
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年10期
    關(guān)鍵詞:生理指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)

    王桃云++蔣偉娜++顧華杰++沈雪林++袁榮斌++呂海超

    doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.055

    摘要:以3種香青菜為試驗(yàn)材料,研究高溫處理后香青菜幼苗的抗氧化酶活性、電解質(zhì)滲透率、根系活力及滲透調(diào)節(jié)物、丙二醛、葉綠素含量的變化。結(jié)果表明,高溫脅迫后,香青菜的各項(xiàng)生理指標(biāo)變化趨勢(shì)各不相同。通過(guò)綜合評(píng)價(jià)得出幾種香青菜耐熱性能大小排序是黃種>黑種>青種。

    關(guān)鍵詞:高溫脅迫;香青菜幼苗;生理指標(biāo);綜合評(píng)價(jià)

    中圖分類號(hào): S634.01文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2016)10-0211-02

    收稿日期:2015-08-31

    基金項(xiàng)目:蘇州科技計(jì)劃——應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃(編號(hào):SYN201322);江蘇省蘇州市基礎(chǔ)類研究項(xiàng)目(編號(hào):SZP201313)。

    作者簡(jiǎn)介:王桃云(1973—),男,江西吉安人,博士,副教授,主要從事植物資源與食品功能成分研究。E-mail:wangtaoyun@usts.edu.cn。香青菜(Brassica chinensis)具有特殊的濃郁香味,并由此得名[1],是蘇州市特有的珍稀蔬菜品種,主要分布在蘇州市太湖西南岸的部分地區(qū)[1-2]。香青菜栽培歷史悠久,早在100多年前,蘇州市已經(jīng)開(kāi)始栽培香青菜了,目前香青菜是蘇州市第一個(gè)申報(bào)農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志的蔬菜品種。有關(guān)香青菜研究主要集中在香青菜的特征特性、常規(guī)栽培技術(shù)與品種選育等工作。然而,有關(guān)香青菜種苗耐熱性研究到目前為止還是一片空白,這就使得香青菜生產(chǎn)過(guò)程中因缺乏耐熱品種而無(wú)法在炎熱季節(jié)進(jìn)行正常生產(chǎn),嚴(yán)重制約了香青菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本研究采用隸屬函數(shù)法對(duì)幾種香青菜幼苗的耐熱性能進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[3],以期為香青菜耐熱品種篩選及耐高溫栽培提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料與主要試劑

    香青菜品種為黑種、青種和黃種,3個(gè)品種的幼苗均由蘇州市維生種苗提供。

    鄰苯三酚、次硫酸鈉、氯化三苯基四氮唑(TTC)、蔗糖、蒽酮、考馬斯亮藍(lán)、牛血清蛋白(BSA)、愈創(chuàng)木酚、琥珀酸、磺基水楊酸、脯氨酸等均為分析純。

    1.2主要儀器設(shè)備

    EYELA N-1100S-W旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(東京理化器械株式會(huì)社);GXZ-260B智能光照培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠);UV-2450 紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)(島津儀器有限公司);Fa2004N型電子分析天平(上海恒平科學(xué)儀器有限公司);GL-12B 型臺(tái)式離心機(jī)(上海飛鴿離心機(jī)廠)等。

    1.3試驗(yàn)方法

    1.3.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)將各品種的幼苗置于光照培養(yǎng)箱中,光照度為4 000 lx,每天07:00升溫至40 ℃后維持4 h,然后再將溫度降至25 ℃,持續(xù)到次日07:00。在熱脅迫3 d采樣,測(cè)定相關(guān)形態(tài)和生理指標(biāo)。測(cè)定時(shí)每個(gè)試驗(yàn)材料隨機(jī)取樣5株,3次重復(fù)。

    1.3.2測(cè)定指標(biāo)與方法超氧化物歧化酶(SOD)活性采用NBT還原法[4]測(cè)定;過(guò)氧化物酶(POD)活性采用愈創(chuàng)木酚法[5]測(cè)定;過(guò)氧化氫酶(CAT)活性參照Aebi的方法[6]測(cè)定;脯氨酸(Pro)含量采用磺基水楊酸法[7]測(cè)定;可溶性總糖含量采用蒽酮法[8]測(cè)定;可溶性蛋白含量采用Bradford的方法[7]測(cè)定;葉綠素含量測(cè)定采用丙酮提取法[9];根系活力采用TTC法[10]測(cè)定;采用電導(dǎo)儀法[11]測(cè)定相對(duì)電導(dǎo)率;丙二醛(MDA)含量測(cè)定采用硫代巴比妥酸法[7]。

    1.4數(shù)據(jù)分析處理

    測(cè)定樣品均做3組重復(fù)試驗(yàn)后取平均值,采用 SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。同時(shí)將整理后的數(shù)據(jù)用模糊數(shù)學(xué)隸屬度公式進(jìn)行定量轉(zhuǎn)換,再將各指標(biāo)隸屬函數(shù)值取平均值進(jìn)行相互比較。隸屬函數(shù)法的計(jì)算公式:

    Zij=(Xij-Ximin)/(Ximax-Ximin)。

    式中:Zij為i香青菜j營(yíng)養(yǎng)成分的隸屬函數(shù);Xij為i青菜j營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定值;Ximin、Ximax分別是香青菜各測(cè)定指標(biāo)的最小值、最大值。

    如果某一指標(biāo)與綜合評(píng)判結(jié)果為負(fù)相關(guān),則用反隸屬函數(shù)進(jìn)行定量轉(zhuǎn)換,計(jì)算公式:

    Zij=1-[(Xij-Ximin)/(Ximax-Ximin)。

    將不同香青菜各測(cè)定指標(biāo)的平均隸屬函數(shù)值進(jìn)行排序,平均隸屬函數(shù)值越大,說(shuō)明該品種的耐熱性能越好[12]。

    2結(jié)果與分析

    2.1高溫脅迫下不同香青菜品種抗氧化酶活性差異

    植物細(xì)胞中的SOD和CAT能夠清除植物體內(nèi)的過(guò)氧化氫(H2O2)、羥基自由基(·OH)和超氧陰離子自由基(O-2· )等,維持體內(nèi)代謝平衡,保護(hù)膜結(jié)構(gòu),減輕自由基對(duì)細(xì)胞的毒害,保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)免于或少遭到破壞,耐熱品種在高溫脅迫下保持較高的抗氧化物酶活性水平,對(duì)植物免受熱傷害具有十分重要的意義[13]。因此,通常把SOD和CAT活性的變化作為植物耐熱性鑒定指標(biāo)。由表1可知,黃種香青菜的2種抗氧化酶活性都是最高的,而黑種和青種香青菜抗氧化酶活性則出現(xiàn)交替變化,其中青種香青菜的CAT活性要高于黑種香青菜,但其SOD活性要低于黑種香青菜。青種的SOD活性與黑種、黃種存在顯著性差異,黑種的CAT酶活性與青種、黃種間也存在顯著性差異。

    2.2高溫脅迫下不同香青菜品種滲透調(diào)節(jié)物的差異

    脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白是植物體內(nèi)重要的有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),可以保持原生質(zhì)與環(huán)境的滲透平衡,同時(shí)有助于保持膜結(jié)構(gòu)的完整性,從而增強(qiáng)植物的抗逆性。由表2可知,高溫脅迫下,3種香青菜中幾種滲透調(diào)節(jié)物的含量不一,其中黑種的脯氨酸含量最高,其脯氨酸含量與黃種有顯著差異,但與青種無(wú)顯著差異;青種的可溶性糖含量最高,但與黑種、黃種的可溶性糖含量均無(wú)顯著性差異;黃種的可溶性蛋白含量最高,與青種有顯著差異,但與黑種差異不顯著。

    2.3高溫脅迫下不同香青菜品種中丙二醛的含量

    MDA是膜脂質(zhì)過(guò)氧化的最終產(chǎn)物,MDA能與蛋白質(zhì)結(jié)合引起蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間的交聯(lián),從而對(duì)生物膜產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p傷[14],MDA含量越大,對(duì)細(xì)胞的損傷越嚴(yán)重。表3結(jié)果表明,高溫脅迫后黑種、青種和黃種香青菜中的丙二醛含量相差不大,3者之間沒(méi)有顯著性差異。

    2.4高溫脅迫下不同香青菜品種的相對(duì)電導(dǎo)率

    相對(duì)電解率反映外滲程度和膜受損傷程度,一般認(rèn)為耐熱性強(qiáng)的品種在高溫處理后細(xì)胞外滲液的相對(duì)電導(dǎo)率較低[3]。如表4所示,高溫脅迫下黑種的相對(duì)電導(dǎo)率最大,為 20.81%,其次是青種,黃種電導(dǎo)率最小,只有17.36%,但三者之間沒(méi)有顯著性差異。

    2.5高溫脅迫后不同香青菜品種葉綠素含量的測(cè)定

    葉綠素含量是常用來(lái)判定植耐熱性的指標(biāo)之一,一般情況下,高溫脅迫會(huì)導(dǎo)致葉片葉綠素含量下降。由表5可知,高溫處理下黑種香青菜的葉綠素含量最高,青種香青菜葉綠素含量最低,但3種香青菜的葉綠素含量無(wú)顯著性差異。

    2.6高溫脅迫下不同香青菜品種根系活力的差異

    植物根系活力強(qiáng)弱直接影響植物個(gè)體的生長(zhǎng)情況、營(yíng)養(yǎng)狀況和產(chǎn)量水平,從而也影響植物的抗逆性能。一般而言,植物根系活力越強(qiáng),植物體的抗逆能力也越強(qiáng)。由表6可知,高溫處理下不同品種香青菜的根系活力相差不大,其中黃種根系活力最大,黑種根系活力最小,三者之間無(wú)顯著性差異。

    2.73個(gè)香青菜品種耐熱性能的綜合評(píng)價(jià)

    利用公式將各指標(biāo)的平均值換算成隸屬函數(shù)值,取各指標(biāo)隸屬度的平均值作為香青菜耐熱性能相對(duì)優(yōu)劣的綜合評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。從表7中不同生理指標(biāo)的綜合分析可知,3個(gè)品種的香青菜的耐熱性能由高到低排序?yàn)辄S種>黑種>青種,3個(gè)香青菜品種之間的綜合耐熱性能均有較大差異。

    表7高溫脅迫后不同香青菜品種的隸屬函數(shù)值

    生理指標(biāo)隸屬函數(shù)值黑種青種黃種SOD0.4001.00POD00.541.00CAT00.691.00脯氨酸1.000.860可溶性糖010.24可溶性蛋白0.8601.00葉綠素1.0000.15根系活力00.751.00相對(duì)電導(dǎo)率00.491.00MDA1.0000.30隸屬函數(shù)總值4.263.795.69

    3結(jié)論與討論

    生理生化分析是鑒定植物抗逆性的重要方法,不同種類植物的抗熱機(jī)理也不同,單一的耐熱性指標(biāo)不能完全反映一種植物的耐熱性,因而根據(jù)不同的植物品種有針對(duì)性地選擇耐熱性指標(biāo)去測(cè)定是非常必要的。本研究對(duì)香青菜生長(zhǎng)的9個(gè)重要指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,然后利用隸屬函數(shù)消除個(gè)別指標(biāo)帶來(lái)的片面性,得到的[0,1]閉區(qū)間的隸屬函數(shù)值進(jìn)行綜合比較,可較準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)香青菜苗期的耐熱性。研究結(jié)果表明,3個(gè)

    品種香青菜苗期生理指標(biāo)的大小趨勢(shì)有明顯變化,黃種香青菜的耐熱指標(biāo)要優(yōu)于黑種、青種香青菜。3種香青菜耐熱性能排序?yàn)辄S種>黑種>青種。

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