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    基于MspA蛋白質(zhì)納米孔傳感器的主客體化學(xué)研究

    2017-02-04 14:05段靜卓莎姚付軍張亞妮亢曉峰
    分析化學(xué) 2016年12期
    關(guān)鍵詞:主客體結(jié)果表明納米

    段靜+卓莎+姚付軍+張亞妮+亢曉峰

    摘 要 以大腸桿菌原核系統(tǒng)表達(dá)的方法制備了MspA蛋白質(zhì)納米孔, 并利用表面活性劑高溫提取獲得高活性MspA蛋白納米孔。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 0.5%的提取劑90℃提取30 min為最佳提取條件。利用制備的MspA納米孔在單分子水平上研究了其與多種環(huán)糊精的相互作用, 結(jié)果表明, 在眾多環(huán)糊精分子中, 全6氨基β環(huán)糊精(am7βCD)與MspA蛋白納米孔相互作用較強(qiáng)且阻塞平臺(tái)較一致, 其滯留時(shí)間隨電壓增大而逐漸減小, 但阻塞電流受電壓影響不大。篩選使用am7βCD作為適配體非共價(jià)鍵裝配MspA納米孔, 在單分子水平上研究主客體化學(xué)反應(yīng)。加入am7βCD后, 當(dāng)鹽酸金剛烷胺小分子濃度為50 nmol/L時(shí),即出現(xiàn)二級(jí)阻塞平臺(tái), 其滯留時(shí)間隨電壓增大而逐漸減小。這種新型蛋白質(zhì)納米孔單分子傳感器可用于有機(jī)小分子的檢測(cè)識(shí)別, 極大拓寬了MspA納米孔分析技術(shù)的的應(yīng)用范圍。endprint

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