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    營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測方法研究進展綜述

    2017-02-02 04:18:44龍口市檢驗檢測中心
    食品安全導刊 2017年15期
    關(guān)鍵詞:阪崎凝膠電泳米粉

    □ 呂 晨 龍口市檢驗檢測中心

    營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測方法研究進展綜述

    □ 呂 晨 龍口市檢驗檢測中心

    在我國經(jīng)濟發(fā)展的大趨勢下,食品工業(yè)也進入了迅猛發(fā)展的黃金階段。然而,部分食品企業(yè)在加工生產(chǎn)中沒有樹立良好的食品安全意識,致使食品在生產(chǎn)中發(fā)生污染,產(chǎn)生一些對消費者造成健康隱患的致病菌,阪崎腸桿菌就是其中之一。以營養(yǎng)米粉為例,本文主要探討食品檢測環(huán)節(jié)中阪崎腸桿菌檢測方法的發(fā)展現(xiàn)狀,并通過積極思考,展望營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測的未來方向,以供參考。

    營養(yǎng)米粉;阪崎腸桿菌;檢測方法;

    食品檢測一直是幫助質(zhì)監(jiān)部門保證食品安全的一種手段,而食品中致病菌的檢測和防控更是提升食品質(zhì)量和保障消費者安全的一種重要的技術(shù)方式[1]。作為營養(yǎng)食品,營養(yǎng)米粉在生產(chǎn)環(huán)節(jié)中容易被一些致病菌污染,對消費者的健康造成不良影響。因此,我們必須要強化營養(yǎng)米粉中致病菌的檢測技術(shù)管理,尤其是阪崎腸桿菌這種極易引發(fā)嬰幼兒嚴重病癥的病菌。目前,很多醫(yī)學報告已經(jīng)將嬰幼兒營養(yǎng)粉作為感染阪崎腸桿菌的主要渠道[2-4]。因此,審視營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測方法的研究現(xiàn)狀并理性展望已成為研究阪崎腸桿菌檢測方法的重要目標。

    1 營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測常用方法

    1.1 定量PCR方法

    這是在阪崎腸桿菌檢測中最常用的分子生物學定量檢測方法之一,它是由常規(guī)PCR檢測方法發(fā)展而來的,這種方法的原理較易理解,即在PCR體系中引入一個熒光基團,并利用熒光基團發(fā)出的信號累積量來實時記錄PCR的反映過程,然后將記錄結(jié)果繪制成標準曲線來定量分析樣本數(shù)據(jù)。定量PCR檢測法存在兩種衍生方法:①探針類。也就是利用一種生物學雜交探針來指示PCR擴增產(chǎn)物的增加,這種方法對于特異性檢測較為適用;②非探針類。這種方法是利用一些擴增產(chǎn)物的特征來進行反映指示的,這種方法較為簡便,所以應用范圍也較為廣泛。目前,熒光定量的PCR方法在嬰幼兒食品的細菌污染檢測方面應用較廣[5]。我國學界已建立起了嬰兒奶粉的阪崎腸桿菌熒光定量PCR法,該方法就是采用先增菌后檢測的模式,利用TaqMan熒光探針和SYBRGreen熒光染料兩種方法,針對基因序步驟列為16S-23SrDNA的ITS序列。這種方法的靈敏度極高。

    1.2 脈沖場凝膠電泳檢測法

    檢測中,常用脈沖場凝膠電泳法來分離必須的DNA大分子,這是由于在傳統(tǒng)的凝膠電泳里的大分子DNA向同一方向移動的速度差別不大,也就不會形成區(qū)分度較大的條帶。加入脈沖場之后,電場中的電極不斷發(fā)生變換,凝膠電泳中的小分子可以隨著電極變動迅速做出反映,而大分子DNA卻很難迅速轉(zhuǎn)向,利用這一原理就可以分離出較大分子DNA。到目前為止,脈沖場凝膠電泳法已經(jīng)成為基因分型的重要檢測方式,在微生物檢測中的應用也越來越廣泛。

    1.3 其他檢測方法

    此外,還有多種細菌學檢測方法可應用于阪崎腸桿菌的檢測和分型,包括核糖體分型、質(zhì)粒指紋圖譜分析、限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)分析、抗生素抗性譜分析、毒素分析、血清學分型和噬菌體分型等[6]。有專家提議,采用分子微生物檢測技術(shù)對所分離的阪崎腸桿菌菌株進行系統(tǒng)鑒定,以促進阪崎腸桿菌流行病學調(diào)查工作發(fā)展。

    2 營養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測的未來展望

    當前,我國食品中的阪崎腸桿菌檢測依然是運用傳統(tǒng)方法,經(jīng)過我國技術(shù)科研人員的不斷努力,已經(jīng)大大縮短測試時間。而利用先進的分子生物學檢測技術(shù),不僅可以幫助阪崎腸桿菌檢測環(huán)節(jié)的進一步提速,而且對阪崎腸桿菌分型也十分有利。因此,我們要積極發(fā)展分子生物學技術(shù),將之與傳統(tǒng)方法相結(jié)合,促進阪崎腸桿菌檢測向更加快速、準確的方向發(fā)展。

    3 結(jié)語

    營養(yǎng)米粉生產(chǎn)中強化阪崎腸桿菌的防止固然非常重要,加強阪崎腸桿菌檢測的標準化和精細化發(fā)展也是約束營養(yǎng)米飯企業(yè)、保障食品安全的重要舉措。我們通過審視和梳理阪崎腸桿菌的檢測方法,了解了阪崎腸桿菌檢測的發(fā)展現(xiàn)狀,只有在現(xiàn)有檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上進行深化研究,才能幫助阪崎腸桿菌檢測技術(shù)走向更加精準、成熟的未來。

    [1]羅茂凰,張海英,張海濱,等.奶粉中坂崎腸桿菌檢測方法研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2005(11):69-71.

    [2]朱永紅.奶粉中坂崎腸桿菌檢測方法研究進展[J].中國乳品工業(yè),2005(12):39-43.

    [3]王羽,侯俊如,馬波,等.建立PCR檢測奶粉中坂崎腸桿菌的方法[A].2007中國農(nóng)業(yè)工程學會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會學術(shù)年會暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學研研討會論文集[C].中國農(nóng)業(yè)工程學會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會、河北農(nóng)業(yè)大學食品科技學院,2007.

    [4]齊哲,于志彬,陳珊珊,等.PCR檢測奶粉中坂崎腸桿菌的模版制備的幾種方法[A].2007中國農(nóng)業(yè)工程學會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會學術(shù)年會暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學研研討會論文集[C].中國農(nóng)業(yè)工程學會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會、河北農(nóng)業(yè)大學食品科技學院,2007.

    [5]關(guān)嶸,顧鳴.坂崎腸桿菌(E.sakazakii)的危害及其檢測方法[J].檢驗檢疫學刊,2003(3):56-57.

    [6]朱永紅,彭燕,孔樹全,等.乳粉中坂崎腸桿菌的快速檢驗[J].中國乳品工業(yè),2006(9):57-59.

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