伴有慢性腹瀉的HIV感染患者糞便標(biāo)本病原學(xué)檢測(cè)分析

郭靜

伴有慢性腹瀉的HIV感染患者糞便標(biāo)本病原學(xué)檢測(cè)分析

郭靜

目的探討伴有慢性腹瀉的人類免疫缺陷病毒（HIV）感染患者糞便標(biāo)本的病原微生物檢測(cè)結(jié)果。方法將醫(yī)院收取的91例伴有慢性腹瀉的HIV感染患者作為研究對(duì)象，收集糞便標(biāo)本進(jìn)行標(biāo)本病原微生物檢測(cè)，分析檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果檢出病原微生物感染標(biāo)本53份，陽(yáng)性率為58．2%；真菌、隱孢子蟲、結(jié)核分枝桿菌、難辨梭狀芽孢桿菌、空腸彎曲菌、沙門菌感染率分別為47．2%、24．5%、15．1%、7．5%、3．8%、1．9%。結(jié)論真菌、隱孢子蟲等病原微生物是HIV感染患者伴發(fā)慢性腹瀉的主要原因，臨床中要針對(duì)性加強(qiáng)防范。

人類免疫缺陷病毒；慢性腹瀉；糞便標(biāo)本；病原微生物

隨著病情進(jìn)一步發(fā)展，人類免疫缺陷病毒（HIV）CD4+細(xì)胞水平會(huì)逐步下降導(dǎo)致免疫力遭到破壞，為各種病原微生物的入侵創(chuàng)造了有力條件，據(jù)資料顯示，約超過(guò)一半患者會(huì)并發(fā)肺部感染，約1/3患者會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)損害，嚴(yán)重時(shí)危及生命[1]。消化道是HIV患者并發(fā)機(jī)會(huì)性感染時(shí)常見(jiàn)受累部位，其中約有90%患者伴有消化道癥狀，本研究以91例伴有慢性腹瀉的HIV感染患者為研究對(duì)象，對(duì)其糞便標(biāo)本進(jìn)行檢查，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

樣本選取時(shí)間：2014年1月—2016年8月；樣本對(duì)象：91例伴有慢性腹瀉的HIV感染患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者均簽署知情同意書；（2）患者經(jīng)檢查均符合HIV感染合并慢性腹瀉的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期采用蛋白酶類抑制劑、抗病毒藥物治療、腸道腫瘤等患者?，F(xiàn)將患者資料整理如下：男64例、女27例，平均年齡（46.2±5.3）歲。

1.2 方法

1.2.1 微生物培養(yǎng) 將標(biāo)本接種至弱選擇性培養(yǎng)基（麥康凱瓊脂培養(yǎng)基）、強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基（SS瓊脂平板）、含有氯霉素的沙保羅瓊脂平板各1塊，然后將其放置于35℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h，主要檢測(cè)菌種：沙門菌、真菌、志賀菌等。

1.2.2 涂片檢測(cè) 將所有標(biāo)本進(jìn)行涂片以檢測(cè)原蟲，采用革蘭染色法進(jìn)行真菌孢子以及菌絲檢測(cè)，采用含有氯霉素的沙保羅瓊脂平板進(jìn)行標(biāo)本培養(yǎng)，如檢出陽(yáng)性即可在顯微鏡下檢出上述病原菌。分枝桿菌采用萋-尼抗酸染色法進(jìn)行檢測(cè)，然后采用甲醛-乙酸乙酯沉淀法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行集卵，然后采用改進(jìn)之后的抗酸染色法對(duì)標(biāo)本染色以檢測(cè)隱孢子蟲卵囊，具體操作方法參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》相關(guān)步驟完成[2]。

1.2.3 微需氧培養(yǎng)檢測(cè) 搜集標(biāo)本后在3 h內(nèi)接種于SKIRROW選擇性培養(yǎng)基中，之后將其放入微需氧的產(chǎn)氣袋中封閉，置于42℃孵育箱中進(jìn)行培養(yǎng)，時(shí)間48 h。如果檢出為陽(yáng)性，在培養(yǎng)基平板上可見(jiàn)無(wú)色半透明毛玻璃樣小菌落，且單個(gè)菌落中心凸起，周邊呈現(xiàn)不規(guī)則形狀，并未發(fā)生溶血情況，采用革蘭染色則會(huì)發(fā)現(xiàn)空腸彎曲菌體呈現(xiàn)逗點(diǎn)“S”形狀。

1.2.4 金標(biāo)法 采用Xpect難辨梭菌毒素A/B檢測(cè)卡進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)，標(biāo)本搜集后要于3 h內(nèi)及時(shí)送檢，如果不能按時(shí)檢測(cè)需要將其放置于2～8℃冰箱中，但必須在72 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

將所得例數(shù)均采用構(gòu)成比或者率描述。

2 結(jié)果

91例伴有慢性腹瀉的HIV感染患者糞便標(biāo)本中，檢出病原微生物感染標(biāo)本53份，陽(yáng)性率為58.2%，病原菌分別為真菌25份（47.2%）、隱孢子蟲13份（24.5%）、結(jié)核分枝桿菌8份（15.1%）、難辨梭狀芽孢桿菌4份（7.5%）、空腸彎曲菌2份（3.8%）、沙門菌1份（1.9%），其中真菌的構(gòu)成比最高，其次為隱孢子蟲。

3 討論

本研究結(jié)果顯示：91份糞便標(biāo)本中檢出病原微生物感染標(biāo)本53份，陽(yáng)性率達(dá)58.2%，說(shuō)明病原微生物感染是導(dǎo)致HIV患者感染伴發(fā)慢性腹瀉的重要原因。其中真菌感染占比最高，可見(jiàn)真菌感染是誘發(fā)消化道疾病的重要原因。在臨床檢驗(yàn)過(guò)程中不管采用真菌培養(yǎng)還是革蘭染色圖片均顯示存在真菌感染，與部分學(xué)者研究成果相一致，主要源于：正常情況下人體免疫功能能夠抵御真菌的入侵，但是HIV患者自身免疫功能遭到破壞，導(dǎo)致抵御真菌的功能明顯下降，在一定程度上造成了真菌的大肆入侵[3-4]。

隱孢子蟲是一種能夠侵襲腸道的寄生蟲，主要傳播源：飲用被污染的水、食物在污染水源中由于含有隱孢子蟲引起感染，該類型感染病癥危重且多變，患者大便性質(zhì)明顯改變，病程長(zhǎng)，部分患者甚至持續(xù)幾年，嚴(yán)重時(shí)危及生命。有學(xué)者研究報(bào)道，HIV慢性腹瀉患者中存在隱孢子蟲感染，尤其是中晚期患者隨著病情進(jìn)一步惡化，CD4+細(xì)胞水平、T淋巴細(xì)胞水平會(huì)明顯降低，在一定程度上會(huì)增加其發(fā)生消化道感染的危險(xiǎn)性，因此臨床實(shí)踐中可加以重視[5]。另外也有學(xué)者對(duì)某市HIV感染伴發(fā)慢性腹瀉患者的隱孢子蟲感染率進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果顯示為21.3%，與本研究結(jié)果相近，分析可能與受試者的衛(wèi)生習(xí)慣、生活環(huán)境相關(guān)[6]。

除了上述兩種病原微生物之外，要注意結(jié)核分枝桿菌感染，本研究中其感染率為15.1%，致病性源于：細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)大量繁殖容易引起炎癥，對(duì)免疫功能造成損傷。此外難辨梭狀芽孢桿菌能夠誘導(dǎo)患者發(fā)生嚴(yán)重腹瀉、結(jié)腸穿孔等疾病，嚴(yán)重者甚至死亡，且傳播速度快，也具有明顯的危害性；雖然空腸彎曲菌、沙門菌索然占比較少，但是空腸彎曲菌屬于當(dāng)前國(guó)內(nèi)外人畜共患病原菌，容易導(dǎo)致急性腸炎以及食物中毒，誘發(fā)腹瀉頻率較高，沙門菌會(huì)導(dǎo)致人體出現(xiàn)嚴(yán)重的腹瀉癥狀，因此臨床也不容忽視[7-8]。

綜上所述，病原微生物檢測(cè)顯示真菌、隱孢子蟲等病原微生物是HIV感染患者伴發(fā)慢性腹瀉的主要原因，臨床實(shí)踐中要針對(duì)性加強(qiáng)防范。

[1]蘇映瓊．HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標(biāo)本的病原微生物檢測(cè)分析[J]．中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2014，11（6）：24-25．

[2]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]．東南大學(xué)出版社，2006：274-278．

[3]王慧珠，華文浩，李敏，等．253例HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標(biāo)本的病原微生物檢測(cè)分析[J]．中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志（電子版），2012，6（2）：135-138．

[4]李敏，劉穎，王慧珠，等．艾滋病慢性腹瀉患者隱孢子蟲及病原菌感染調(diào)查[J]．中國(guó)公共衛(wèi)生，2012，28（8）：1099-1101．

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[7]吳鷹軍，何靜．嬰幼兒腹瀉病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析[J]．深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，24（10）：23-24．

[8]蘆珂，秋潔．某市21例兒童細(xì)菌性腹瀉的病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析[J]．中國(guó)醫(yī)藥指南，2016，14（27）：155-155．

Analysis of Pathogen Detection of Stool Samples of HIV Infected Patients Complicated With Chronic Diarrhea

GUO Jing Clinical Laboratory, Tuberculosis Control Center at Changyi District, Jilin Jilin 132001, China

ObjectiveTo investigate the pathogen detection results of stool samples of HIV patients complicated with chronic diarrhea. Methods 91 cases of HIV patients with chronic diarrhea admitted in our hospital were enrolled as research objects, then collected the fecal specimens for pathogenic microorganisms, and the results were analyzed and compared.Results53 cases of detection data showed pathogenic microorganism infection, the positive rate was 58.2%. Fungi, cryptosporidium, mycobacterium tuberculosis, clostridium difficile, campylobacter jejuni, salmonella infection rates were 47.2%, 24.5%, 15.1%, 7.5%, 3.8%, 1.9% respectively.ConclusionFungi, cryptosporidium and other pathogenic microorganisms are major causes of chronic diarrhea in HIV patients. In clinical, The prevention of these pathogen infection should be strengthened.

HIV infection; chronic diarrhea; stool specimen; pathogenic microorganism

R446．5

A

1674-9308（2017）13-0063-02

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．13．032

吉林市昌邑區(qū)結(jié)核病防治所檢驗(yàn)科，吉林 吉林 132001