荔枝果皮細(xì)胞壁組成與裂果發(fā)生關(guān)系的研究

葛涵濤，林詩雅，王惠聰

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，廣東 廣州 510642）

【研究意義】荔枝(LitchichinensisSonn.)的種植面積在我國果樹面積中排第六，屬于大宗果樹，產(chǎn)業(yè)地位重要。然而，一些優(yōu)質(zhì)荔枝品種裂果高發(fā)是制約荔枝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素，亟需對裂果發(fā)生的內(nèi)在機制深入研究，以研發(fā)減輕荔枝裂果的技術(shù)策略，為抗裂育種提供重要參考，促進(jìn)荔枝產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】裂果是一種生理性病害，是果實對內(nèi)部生長與外界環(huán)境不協(xié)調(diào)而作出的應(yīng)激反應(yīng)［1］。果實從膨大期到采收期都可能發(fā)生裂果現(xiàn)象，多集中在果實膨大期，但部分果實也可能在采后出現(xiàn)開裂現(xiàn)象［2-4］。裂果的發(fā)生主要是由果皮的生理失調(diào)導(dǎo)致［5］，其破壞了果實的外觀，使果實內(nèi)部水分流失、病原菌入侵，影響果實的采收，從而降低果實的商品性［6］。果實開裂的現(xiàn)象常見于柑橘、荔枝、棗和葡萄等果樹中［7-10］。與裂果相關(guān)因素的研究大多集中在生理生化方面，關(guān)于水分、赤霉素、脫落酸、鈣等因素對裂果的影響已有大量研究報道［5］。荔枝果實的發(fā)育始于果皮和種皮的發(fā)育，荔枝果實生長上著名的“球皮對球膽效應(yīng)”［11］認(rèn)為，荔枝果皮在為假種皮提供生長空間的同時又限制了假種皮的生長。當(dāng)果皮生長接近最大值時，假種皮開始快速生長［12］。大量研究表明，環(huán)境因素、礦質(zhì)營養(yǎng)、植物激素、細(xì)胞壁修飾酶、果皮組織結(jié)構(gòu)和遺傳因素都可能與荔枝裂果的發(fā)生有關(guān)［13-15］。【本研究切入點】在裂果高發(fā)期，假種皮的突發(fā)性生長是裂果的直接原因，但對裂果起關(guān)鍵作用的果皮生長情況已在果實發(fā)育的早中期決定了。使用2,4-D 對荔枝處理后可以促使荔枝提前成熟［16］，而關(guān)于2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）對荔枝裂果的作用則報道較少。還有研究表明，荔枝裂果與果皮細(xì)胞壁的降解代謝關(guān)系密切，但有關(guān)細(xì)胞壁合成代謝方面研究也較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究比較裂果易感性不同的荔枝品種細(xì)胞壁組分的差異，通過外源浸泡2,4-D，揭示細(xì)胞壁組分與裂果發(fā)生的關(guān)系，初探荔枝裂果發(fā)生機制，為荔枝防裂果栽培技術(shù)的研發(fā)提供重要的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

于2021 年4 月— 6 月在華南農(nóng)業(yè)大學(xué)長崗山荔枝種質(zhì)資源圃，選取樹齡約20 年、樹體健壯、長勢良好、花期相近的‘懷枝’‘嶺豐糯’‘桂味’‘糯米糍’各3 株作為比較試驗樹，其中‘桂味’和‘糯米糍’屬于易裂品種，在果實成熟期每株隨機采取狀態(tài)相似的10 穗果實，帶回實驗室后，立即將果皮分離并用清水清洗，用紗布吸干后放入液氮，后轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2021 年在深圳南山西麗果場第二分場和華南農(nóng)業(yè)大學(xué)荔枝種質(zhì)資源圃各選擇樹體健壯、長勢良好且相似的3 株‘糯米糍’作為試驗樹，進(jìn)行生長素類似物2,4-D 浸泡試驗，并跟蹤調(diào)查果實落果和開裂情況。

1.2 外源2,4-D 浸泡處理

從每株‘糯米糍’試驗樹上隨機選取長勢一致的果穗80 穗進(jìn)行掛牌，在花后28 d 分別用10、20、40 mg/L 的2,4-D 浸泡，以清水為對照，每個濃度處理20 穗，處理后每周對落果數(shù)和裂果數(shù)進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計。在果實轉(zhuǎn)色的裂果高發(fā)期（花后75 d）將果實采下，將果皮分離并用清水清洗，用紗布吸干后放入液氮，后轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 荔枝果皮組織結(jié)構(gòu)觀察

1.3.1 透射電鏡樣品制備與觀察 在田間用干凈的雙面刀片將果皮切成長×寬約為0.3 cm×0.2 cm的小塊，放入裝有4%戊二醛溶液的2 mL 離心管中，并用針管抽氣至樣品完全沉在管底，密封后置于4 ℃，固定過夜，用0.1 mol/L 磷酸緩沖液（pH=7.0）漂洗4 次，每次20 min。將樣品轉(zhuǎn)至1% 鋨酸溶液中固定2～4 h，ddH2O 漂洗4 次，每次20 min。用1% 醋酸雙氧鈾塊染色，4 ℃ 過夜，ddH2O 漂洗4 次，每次20 min。依次用30、50、70、85、95%的乙醇進(jìn)行脫水，每次15 min，再用100%的乙醇脫水2 次，每次20 min。將樣品轉(zhuǎn)至純丙酮中浸泡2 次，每次20 min。依次用3∶1、1∶1、1∶3 的丙酮：樹脂滲透，每次2～8 h，再用純樹脂滲透2 次，每次12 h。將滲透后的樣品轉(zhuǎn)至包埋板上用樹脂包埋，置于常溫干燥器，3 h后放入烘箱，70 ℃ 聚合24～48 h。

使用Leica UC7 冷凍超薄切片機（德國徠卡公司）對包埋好的樣品進(jìn)行切片，厚度為70～90 nm，用醋酸雙氧鈾溶液和檸檬酸鉛溶液對切片分別染色30 min。在Talos L120C 型透射電鏡（美國FEI公司）中觀察切片中果皮的組織結(jié)構(gòu)，并測量不同部位細(xì)胞壁的厚度。

1.3.2 果皮組織木質(zhì)素染色與分布觀察 參照Yi等［17］的方法進(jìn)行。

1.4 碳水化合物的提取和含量測定

參照Yi 等［17］的方法測定荔枝果皮中非結(jié)構(gòu)性碳水化合物（白堅木皮醇、果糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、淀粉）、結(jié)構(gòu)性碳水化合物（果膠、纖維素和半纖維素）和木質(zhì)素的含量，所測定的值均為鮮重含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同裂果易感性荔枝品種果皮碳水化合物含量比較

2.1.1 果皮非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量 花后75 d是各品種果實開始轉(zhuǎn)色的時期，也是裂果高發(fā)期。比較裂果高發(fā)期4 個品種果皮中非結(jié)構(gòu)碳水化合物的含量（圖1）發(fā)現(xiàn)，易裂荔枝品種‘桂味’和‘糯米糍’的白堅木皮醇含量分別為9.8、8.5 mg/g，顯著高于‘懷枝’的7.5 mg/g；而‘桂味’和‘糯米糍’的果糖含量（20.4、22.6 mg/g）則顯著低于‘懷枝’（32.3 mg/g）?！鹞丁衅咸烟桥c半乳糖含量顯著低于‘懷枝’中的葡萄糖與半乳糖含量?！疵佐佟姓崽呛偷矸酆恳诧@著低于‘懷枝’的蔗糖和淀粉含量。

圖1 不同荔枝品種果皮非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量比較Fig.1 Comparison of non-structural carbohydrate contents in the pericarp of different litchi varieties

2.1.2 果皮結(jié)構(gòu)性碳水化合物和木質(zhì)素含量 比較裂果高發(fā)期4 個品種果皮中結(jié)構(gòu)性碳水化合物和木質(zhì)素含量（圖2A），發(fā)現(xiàn)‘懷枝’果皮中的果膠含量（7.8 mg/g）顯著高于‘嶺豐糯’（1.5 mg/g）和‘糯米糍’（1.1 mg/g），‘桂味’果皮中果膠含量（4.3 mg/g）也顯著高于‘嶺豐糯’和‘糯米糍’，其中‘糯米糍’果皮中果膠含量最低。‘懷枝’‘嶺豐糯’‘桂味’‘糯米糍’的半纖維素和纖維素含量分別為12.7、11.8、17.8、10.3 mg/g，其中‘桂味’果皮中的半纖維素和纖維素含量顯著高于其他3 個品種，‘糯米糍’果皮中的半纖維素和纖維素含量最低，顯著低于‘懷枝’?！鹞丁ぶ械哪举|(zhì)素含量（9.7 mg/g）也顯著高于‘懷枝’（6.6 mg/g）和‘糯米糍’（6.7 mg/g）。

圖2 不同的荔枝品種果皮結(jié)構(gòu)性碳水化合物和木質(zhì)素含量比較Fig.2 Comparison of structural carbohydrate and lignin contents in the pericarp of different litchi varieties

2.1.3 果皮組織結(jié)構(gòu)和木質(zhì)素分布 為更加直觀地觀察不同品種荔枝果皮組織結(jié)構(gòu)和木質(zhì)素的分布，用間苯三酚-鹽酸對4 個品種花后60～85 d的果皮進(jìn)行染色觀察。發(fā)現(xiàn)（圖3）隨著果實的發(fā)育，花后70～75 d，4 個品種的果皮都顯著變薄，這與裂果高發(fā)期的時間相符，花后80 d 后，‘嶺豐糯’和‘糯米糍’的果皮繼續(xù)變薄，而‘懷枝’和‘桂味’則變化不大。另外，花后75 d 后，‘懷枝’的果皮整體被染得較紅，而‘糯米糍’的果皮中則出現(xiàn)略微變褐的情況，表明該時期‘懷枝’果皮中的木質(zhì)素含量高于‘糯米糍’。

圖3 不同荔枝品種果皮組織結(jié)構(gòu)和木質(zhì)素分布Fig.3 Tissue structure and lignin distribution in the pericarp of different litchi varieties

2.2 2,4-D 處理對‘糯米糍’荔枝落果率和裂果率的影響

2.2.1 落果率 在花后28 d 用10、20、40 mg/L的2,4-D處理‘糯米糍’的果穗，在西麗果場（圖4），處理后7 d，3 個處理的落果率分別為26.5%、32.2%、13.9%，處理后14 d，3 個處理的落果率分別為52.8%、57.3%、33.9%，均極顯著低于對照的52.8%和64.5%；處理后25 d，20 mg/L 和40 mg/L 處理落果率分別為64.5%、70.6%、仍顯著低于對照（78.2%），但10 mg/L 處理的落果率（76.3%）已與對照無顯著差別；處理后42 d，20 mg/L 處理累積落果率（87.4%）甚至顯著高于對照（80.6%）；處理后52 d，處理與對照間的落果率無顯著差異。在華農(nóng)果場的處理中（圖4），處理后7 d，3 個處理的落果率分別為86.3%、85.9%、86.4%，均極顯著低于對照（87.9%）；處理后14 d，20 mg/L 和40 mg/L 處理落果率為93.1%和93.2%、仍極顯著低于對照（96.4%），但10 mg/L的處理與對照無顯著差異；處理后21 d，處理與對照間的落果率無明顯差異。這些結(jié)果表明，2,4-D 在果實發(fā)育前期可保果，且濃度較大保果效果較好，但2,4-D 只是延遲果實的脫落，對最終的座果率無顯著的影響。

圖4 2,4-D 處理對‘糯米糍’荔枝落果率的影響Fig.4 Effect of 2,4-D treatment on fruit dropping rate of ‘Nuomici’ litchi

2.2.2 裂果率 對裂果率進(jìn)行調(diào)查時發(fā)現(xiàn)（圖5），在西麗果場的處理中，10 mg/L 處理后的果實沒有出現(xiàn)開裂情況，20、40 mg/L 處理后的果實裂果率分別為2.78%和3.05%，均高于對照（1.08%），但由于果穗之間的差異較大，處理與對照之間裂果率差異均未達(dá)到顯著水平。在華農(nóng)果場的處理中，3 個不同濃度的2,4-D 處理均增加了裂果率，且隨著2,4-D 濃度增加裂果率升高，40 mg/L 2,4-D處理后的累積裂果率達(dá)10.75%，顯著高于對照的1.9%。上述結(jié)果表明，高濃度的2,4-D 處理顯著增加裂果的發(fā)生。

圖5 2,4-D 處理對‘糯米糍’荔枝裂果率的影響Fig.5 Effect of 2,4-D treatment on fruit cracking rate of ‘Nuomici’ litchi

2.2.3 2,4-D 處理對果皮組織結(jié)構(gòu)的影響 2,4-D處理后果實開裂時間大大提早，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)荔枝園40 mg/L 處理的果實，在處理后42 d 就開始出現(xiàn)裂果。本研究取處理后42 d 的樣品進(jìn)行透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)（圖6），2,4-D 處理后，果皮細(xì)胞層數(shù)增多，內(nèi)果皮細(xì)胞輪廓變模糊，內(nèi)中果皮細(xì)胞較大且大小不均。果皮組織結(jié)構(gòu)變化程度與處理濃度呈正相關(guān)，說明果皮細(xì)胞層數(shù)、內(nèi)果皮細(xì)胞輪廓清晰度和內(nèi)中果皮細(xì)胞大小與果皮應(yīng)力相關(guān)，進(jìn)而影響了裂果。另外，外中果皮的薄壁細(xì)胞明顯變小、數(shù)量增多，40 mg/L 2,4-D 處理的外中果皮的細(xì)胞壁明顯增厚。

圖6 2,4-D 處理對‘糯米糍’荔枝果皮組織結(jié)構(gòu)的影響Fig.6 Effect of 2,4-D treatment on the tissue structure in pericarp of ‘ Nuomici’ litchi

2.2.4 2,4-D 處理對果皮細(xì)胞壁組分的影響進(jìn)一步測定2,4-D 處理后的每克鮮質(zhì)量果皮中細(xì)胞壁組分的含量，結(jié)果如圖7 所示，隨著果實發(fā)育，處理組中果皮果膠含量逐漸下降，對照組中的果膠含量則逐漸上升。在處理后7 d 3 個濃度2,4-D處理的果膠含量分別為6.0、8.9、12.1 mg/g，對照組中的果膠含量僅為2.7 mg/g，表明2,4-D 處理后顯著增加果皮果膠含量，且隨著處理濃度增加，增加幅度加大。在處理后42 d 除40 mg/L 的果膠含量（10.3 mg/g）仍顯著高于對照（5.9 mg/g）外，兩個低濃度處理果皮中的果膠（4.8、6.7 mg/g）均與對照無顯著差異。到花后52 d，隨著對照樣品果膠的增加和處理樣品果膠的減少，兩個低濃度處理果膠含量（2.2、4.6 mg/g）均顯著低于對照（7.7 mg/g），而裂果最嚴(yán)重的40 mg/L處理中果皮的果膠（8.9 mg/g）與對照無顯著差異。不同濃度2,4-D 處理對荔枝果皮半纖維素和纖維素的含量（圖7B）影響較小，高濃度處理在不同的階段似乎會降低半纖維素和纖維素的水平，但未達(dá)到顯著。處理對木質(zhì)素含量（圖7C）的影響也不明顯，在處理后7 d，20、40 mg/L 處理的木質(zhì)素含量（8.6、9.4 mg/g）均明顯低于對照和10 mg/L（10.7、11.3 mg/g）的處理果皮，在其余發(fā)育階段，對照和處理之間木質(zhì)素的含量無顯著差異。

圖7 2,4-D 處理對果皮細(xì)胞壁組分的影響Fig.7 Effect of 2,4-D treatment on the components of pericarp cell wall

3 討論

3.1 不同品種荔枝果皮碳水化合物與細(xì)胞壁代謝和裂果易感性的關(guān)系

碳水化合物是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是植物生長發(fā)育過程的重要營養(yǎng)因子。葉片是光合作用的主要場所，光合作用的同化產(chǎn)物從葉片（源器官）運輸?shù)焦麑崳◣炱鞴伲┖蟊环纸獬杉禾?，磷酸戊糖途徑和糖酵解途徑進(jìn)一步將己糖代謝，為植物提供生長發(fā)育所需的能量及代謝中間產(chǎn)物，同時也為植物提供細(xì)胞碳架、調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)與酶活性，從而影響植物的生長發(fā)育［18-20］。己糖包含果糖、葡萄糖和半乳糖等，其中葡萄糖是果膠與半纖維素和纖維素的重要合成前體，而半乳糖是組成果膠的重要單體。有研究發(fā)現(xiàn)，在果膠降解的過程中，果膠的合成前體半乳糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖等含量也會減少［21-24］，說明己糖與細(xì)胞壁之間有著密不可分的關(guān)系。本研究對裂果易感性不同的荔枝品種果皮中非結(jié)構(gòu)性碳水化合物的變化趨勢與含量進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，裂果率低的‘懷枝’3 種己糖的含量明顯高于易裂果的‘糯米糍’和‘桂味’。相對于己糖，白堅木皮醇和蔗糖的含量與裂果沒有明顯規(guī)律性的聯(lián)系，表明果皮中的己糖水平與裂果的發(fā)生有重要聯(lián)系，可能在果皮的細(xì)胞壁代謝和發(fā)育中發(fā)揮重要作用［17］，影響果皮細(xì)胞壁的強度與完整性，進(jìn)而影響裂果的易感性。

細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)性多糖組成的變化可能通過影響細(xì)胞壁的完整性與機械性來影響果皮的結(jié)構(gòu)與狀態(tài)，進(jìn)而影響裂果的發(fā)生［25］。原果膠在細(xì)胞壁代謝過程中被降解成可溶性果膠，導(dǎo)致細(xì)胞壁胞間層與初生壁分解，細(xì)胞間黏合力下降，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)［26］。果皮中原果膠與纖維素的減少，會引起細(xì)胞壁總體結(jié)構(gòu)的破壞，降低果皮的硬度與應(yīng)力，增加果實的開裂［27-29］。本研究中，‘懷枝’的果膠含量明顯高于其他3 個品種，易裂果的‘糯米糍’果皮中的果膠基本上均低于其余3 個品種。半纖維素和纖維構(gòu)成了細(xì)胞壁的基本骨架，兩者連接形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)保持細(xì)胞壁的穩(wěn)定性［24］，同時纖維素微纖絲的排列方式也決定了細(xì)胞壁的致密性［30］，果皮纖維素含量較高或纖維素酶活性較低的果實一般開裂率較低［12］。本研究中，易裂果的‘糯米糍’果皮半纖維素和纖維素含量均明顯低于其他品種。次生壁中木質(zhì)素的沉積造成木質(zhì)化，提高了細(xì)胞壁的強度［31］。觀察果皮組織結(jié)構(gòu)和木質(zhì)素的分布可發(fā)現(xiàn)，‘糯米糍’果皮纖維中的木質(zhì)素一直比‘懷枝’少，然而‘桂味’中卻比‘懷枝’中多，表明裂果高發(fā)期果皮中果膠含量可能更顯著影響裂果的發(fā)生。此外，在易裂品種‘糯米糍’與‘桂味’中的細(xì)胞壁組成成分含量與代謝可能存在差異（特別是半纖維素與纖維素和木質(zhì)素），不同品種誘發(fā)果實開裂的具體原因可能存在差異。

3.2 2,4-D 處理對‘糯米糍’荔枝細(xì)胞壁代謝和裂果率的影響

2,4-D是生產(chǎn)上常用的一種保果生長調(diào)節(jié)劑，在荔枝上使用的濃度一般為10 mg/L，一些生產(chǎn)者會提高2,4-D 的濃度，以求達(dá)到更好的保果效果。本研究設(shè)置了10、20、40 mg/L 濃度的2,4-D 對‘糯米糍’進(jìn)行處理，發(fā)現(xiàn)在果實發(fā)育前期，2,4-D處理可顯著降低落果率，但在果實發(fā)育后期，落果率與對照沒有顯著差異，且隨著使用濃度的增加裂果率明顯上升。上述結(jié)果說明，2,4-D 可以減少荔枝落果是果實發(fā)育前期的表象，后期反而會增加裂果的風(fēng)險。

果皮組織結(jié)構(gòu)的差異與完整性程度是裂果發(fā)生的重要影響因素。表皮細(xì)胞的厚度、細(xì)胞壁的厚度和角質(zhì)層的厚度都是影響裂果的因素［7,32］。本研究中，2,4-D 處理在增加裂果率的同時，也加厚了果皮的厚壁組織、外中果皮和內(nèi)果皮，說明2,4-D 可能誘導(dǎo)了細(xì)胞壁厚度的增加，而果皮細(xì)胞壁的增厚可能限制細(xì)胞的膨大，降低了果皮的延展性從而增加了開裂的發(fā)生。果皮的機械性是保證果實完整性的重要性質(zhì)，果皮組織結(jié)構(gòu)的差異與裂果息息相關(guān)［33-35］。易裂的荔枝果實外果皮細(xì)胞較細(xì)長，而內(nèi)果皮的細(xì)胞層數(shù)較多且細(xì)胞的輪廓不清晰，果實開裂處果皮組織的排列連接變得模糊不清［36-38］。本研究對果皮進(jìn)行透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)2,4-D 處理后果皮細(xì)胞層數(shù)增多，內(nèi)果皮的細(xì)胞輪廓變模糊，內(nèi)中果皮細(xì)胞較大且大小不均，同時外中果皮的薄壁細(xì)胞明顯變小、數(shù)目增多，果皮組織結(jié)構(gòu)的變化和差異與前人研究結(jié)果一致，說明果皮的細(xì)胞層數(shù)和中果皮的細(xì)胞大小及均勻程度會影響果實的開裂。比較細(xì)胞壁組分含量與變化，發(fā)現(xiàn)在裂果高發(fā)期時，在2,4-D 誘導(dǎo)下的裂果果皮中半纖維素和纖維素含量比對照低但差異不顯著；處理的果皮果膠含量顯著高于對照，但發(fā)育過程中的果膠含量變化動態(tài)有明顯區(qū)別，對照明顯增加，而處理明顯下降。處理顯著增加果皮果膠的含量可能與細(xì)胞壁明顯增厚有關(guān)，植物細(xì)胞的生長涉及細(xì)胞壁組成的降解和重新合成，在生長發(fā)育過程中細(xì)胞壁代謝是一個動態(tài)的過程，僅測定細(xì)胞壁的組分可能很難判定2,4-D 如何影響細(xì)胞壁代謝，進(jìn)一步的研究需要探討處理后細(xì)胞壁代謝相關(guān)基因表達(dá)和酶活性的變化。

4 結(jié)論

裂果易感性不同的荔枝品種果皮中非結(jié)構(gòu)性碳水化合物與結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量存在明顯差異，其中果皮中己糖和果膠的含量與裂果的發(fā)生密切相關(guān)。易裂果的‘糯米糍’果皮中的果糖（22.6 mg/g）和蔗糖（18.6 mg/g）含量明顯低于不易裂果的‘懷枝’（32.3、21.5 mg/g）；果膠與裂果的關(guān)系較為復(fù)雜，本研究的4個品種中，易裂的‘糯米糍’果皮果膠含量（1.1 mg/g）低于不易裂果的‘懷枝’（7.8 mg/g）和‘嶺豐糯’（1.5 mg/g），而同是易裂果的‘桂味’果皮果膠含量（4.3 mg/g）則高于‘懷枝’和‘嶺豐糯’，說明果膠含量過低或過高都可能導(dǎo)致裂果高發(fā)。2,4-D 處理后果皮果膠增多，裂果率增加，進(jìn)一步表明高含量果膠會增加裂果風(fēng)險。