納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、血清免疫和生化指標(biāo)及蛋黃中硒含量的影響

楊清麗 彭豫東 曲湘勇* 彭燦陽(yáng) 曹冬梅 孫安權(quán)

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南省畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長(zhǎng)沙410128；2.奧格生物技術(shù)(上海)有限公司，上海201203)

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納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、血清免疫和生化指標(biāo)及蛋黃中硒含量的影響

楊清麗1彭豫東1曲湘勇1*彭燦陽(yáng)1曹冬梅2孫安權(quán)2

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南省畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長(zhǎng)沙410128；2.奧格生物技術(shù)(上海)有限公司，上海201203)

本試驗(yàn)旨在研究納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、血清免疫和生化指標(biāo)及蛋黃中硒含量的影響。選取324只29周齡體重相近的健康產(chǎn)蛋雞，隨機(jī)分為6個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)9只雞。對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(B、C、D、E、F組)分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/kg納米硒的飼糧。預(yù)試期為7 d，正試期為63 d。結(jié)果表明：1)與對(duì)照組相比，第21天C組的料蛋比顯著降低(P<0.05)，第42、63天B、D組的破殼率顯著降低(P<0.05)。各組產(chǎn)蛋率、平均蛋重均無(wú)顯著差異(P>0.05)。2)與對(duì)照組相比，第42天，E組血清免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)含量顯著提高(P<0.05)；各組血清免疫球蛋白G(IgG)含量差異不顯著(P>0.05)；第63天，各組血清IgM、IgA、IgG含量均差異不顯著(P>0.05)。3)與對(duì)照組相比，第42天，D組血清白蛋白(ALB)含量顯著提高(P<0.05)，D組血清甘油三酯(TG)和葡萄糖(Glu)含量極顯著降低(P<0.01)，F(xiàn)組血清總蛋白(TP)含量顯著升高(P<0.05)，E、F組血清尿酸(UA)含量顯著降低(P<0.05)；第63天，F(xiàn)組血清TP含量顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)組血清堿性磷酸酶(ALP)活性和Glu含量顯著降低(P<0.05)。4)與對(duì)照組相比，第21天，C、D、E、F組蛋黃硒含量顯著或極顯著提高(P<0.05或P<0.01)；第42天，試驗(yàn)組蛋黃硒含量均顯著或極顯著提高(P<0.05或P<0.01)；第63天，C、D、E、F組蛋黃硒含量極顯著提高(P<0.01)。各試驗(yàn)期蛋黃硒含量均以F組最高，且第42天各試驗(yàn)組蛋黃硒含量均高于第21、63天。與對(duì)照組相比，除第42天試驗(yàn)組蛋黃鋅含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)外，各組各試驗(yàn)期蛋黃鐵、錳、鋅、銅含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。由此可見，飼糧添加納米硒能改善產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能，提高血清免疫力，促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，降低血液膽固醇含量，促進(jìn)機(jī)體健康，提高蛋黃中硒含量。綜合考慮，以飼糧添加0.4 mg/kg納米硒飼喂42 d作用效果較明顯。

產(chǎn)蛋雞；納米硒；免疫功能；血清生化指標(biāo)；蛋黃中硒含量

硒是畜禽機(jī)體必需微量元素之一，缺乏會(huì)導(dǎo)致畜禽患病，過(guò)量會(huì)導(dǎo)致中毒甚至死亡，對(duì)動(dòng)物健康有極其重要的作用。硒的添加量不僅與動(dòng)物種類、生長(zhǎng)階段有關(guān)，還與不同硒源有關(guān)。閻素梅等[1]針對(duì)蛋雛雞的研究報(bào)道，飼糧中添加以亞硒酸鈉為硒源的硒超過(guò)0.995 mg/kg時(shí)蛋雛雞出現(xiàn)慢性中毒癥，超過(guò)4.995 mg/kg時(shí)出現(xiàn)急性中毒癥。納米硒是紅色零價(jià)達(dá)到納米級(jí)水平有優(yōu)良的納米特性的元素硒，其直徑在60 nm以內(nèi)(20～60 nm，平均粒徑為36 nm時(shí)納米特性更為鮮明)。相比于無(wú)機(jī)硒(硒酸鹽、亞硒酸鹽)和有機(jī)硒(酵母硒、硒代氨基酸、硒多糖)，納米硒顆粒均勻細(xì)小，表面積大，不僅提高了胃腸道黏膜的黏著性，使自身易被動(dòng)物腸道吸收，同時(shí)也使表面鍵態(tài)嚴(yán)重失配后出現(xiàn)許多活性中心，導(dǎo)致納米體系的化學(xué)性質(zhì)特異性變化，納米硒的界面特性不僅是使納米硒具有高活性和高吸收率的原因，還可作為谷胱甘肽氧化物酶等多種酶活性中心使酶具有更高活性，是其生物學(xué)特性得以發(fā)揮的主要原因[2]。白燕等[3]對(duì)納米硒的界面化學(xué)作用進(jìn)行了探討，提出研究應(yīng)該關(guān)注納米硒與表面修飾劑的作用機(jī)制，及二者與外部離子、分子和其他個(gè)體之間的界面特性，尤其是生物活性分子作為納米硒的表面修飾劑，在界面化學(xué)和生物作用方面的差異。研究還認(rèn)為，納米硒的抗氧化能力與其表面修飾劑有關(guān)[4]。零價(jià)硒有黑、灰、紅3種顏色之分，黑、灰色的硒幾乎無(wú)毒性和生物活性，紅色硒有生物活性但易聚合形成黑、灰色的硒，而以蛋白質(zhì)為分散劑能夠控制紅色硒的聚合，使其保持生物活性[5]。高學(xué)云等[6]以蛋白質(zhì)為分散劑制備的納米硒針對(duì)小鼠急性毒性的研究表明，納米硒的急性毒性約為亞硒酸鈉的1/7，并推測(cè)可能是納米硒的尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)，使其與生物體內(nèi)谷胱甘肽(GSH)反應(yīng)低產(chǎn)生有害自由基量少有關(guān)，研究表明，在急性毒性方面，無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒含量分別為15和49 mg/kg，而納米硒含量則為113 mg/kg；在亞慢性毒性方面，飼料中無(wú)機(jī)硒或有機(jī)硒含量為4 mg/kg，而納米硒含量為6 mg/kg時(shí)也不會(huì)產(chǎn)生中毒現(xiàn)象。納米硒高效安全，能促進(jìn)畜禽的生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)制，被證實(shí)是已發(fā)現(xiàn)的急性毒性最低的補(bǔ)硒制劑。納米硒因其具有高效低毒性，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物試驗(yàn)研究。近年來(lái)，在硒的缺乏和中毒劑量研究的基礎(chǔ)上，對(duì)不同硒源在畜禽生產(chǎn)的應(yīng)用效果及適宜添加量的研究較多，并已取得了良好的效果，但由于受多種因素影響，研究結(jié)果不盡相同，針對(duì)產(chǎn)蛋雞的研究又較少，所以有必要對(duì)特定種類的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行細(xì)化。本研究針對(duì)納米硒的優(yōu)勢(shì)，在前人研究的基礎(chǔ)上在產(chǎn)蛋雞飼糧中添加不同水平的納米硒，研究其對(duì)產(chǎn)蛋雞生長(zhǎng)性能、血清免疫和生化指標(biāo)及蛋黃中硒含量的影響，并探討其作用效果及適宜添加水平，為以后的研究及畜禽生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

納米硒：商品名為喜來(lái)硒，有效成分硒含量1‰，納米硒由透射電子顯微鏡觀察，平均粒徑為50～100 nm。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2015年4月至2015年6月在天心黃雞育種有限公司進(jìn)行，采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將324只29周齡體重相近、健康、采食正常的羅曼產(chǎn)蛋雞，隨機(jī)分為6個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)9只雞。對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(B、C、D、E、F組)分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/kg納米硒的飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。B、C、D、E、F組實(shí)測(cè)飼糧硒含量分別為0.185、0.275、0.387、0.465、0.546 mg/kg。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of the diet:VA 6 000 U，VB25.5 mg，VD32 500 U，VB11.75 mg，VB64 mg，VB120.017 5 mg，VE 25 mg，VK32.25 mg，生物素 biotin 0.14 mg，葉酸 folic acid 0.9 mg，煙酸 nicotinic acid 34 mg，泛酸 pantothenic acid 12 mg，植酸酶 phytase 400 U，膽堿 chloride 300 mg，F(xiàn)e 75 mg，Cu 7.5 mg，Zn 60 mg，Mn 60 mg，I 0.75 mg，Se 0.15 mg，Ca 9.5 g，P 2.0 g，食鹽 NaCl 3.7 g.

2)硒為實(shí)測(cè)值，其他營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。Se was a measured value, while the other nutrient levels were calculated values.

雞舍采用水簾式降溫，用3層階梯式蛋雞籠飼養(yǎng)，每籠3只。各組飼養(yǎng)管理?xiàng)l件相同，每日喂料3次(07:00、12:00、17:00)，收蛋2次(08:00、14:00)，自由采食，自由飲水。按雞場(chǎng)常規(guī)管理程序進(jìn)行衛(wèi)生管理和免疫。預(yù)試期各組統(tǒng)一飼喂基礎(chǔ)飼糧，正試期各組分別飼喂添加了不同水平納米硒的飼糧。預(yù)試期7 d，正試期63 d。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的測(cè)定

正式飼養(yǎng)期內(nèi)，每日以重復(fù)為單位，記錄采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋量、破軟殼數(shù)及雞群的健康狀況。試驗(yàn)期內(nèi)每天記錄各組日耗料量，每天添加飼糧時(shí)用電子秤準(zhǔn)確稱量，并詳細(xì)記錄。計(jì)算第21、42、63天的平均蛋重、產(chǎn)蛋率、料蛋比和破殼率。

1.3.2 血清免疫和生化指標(biāo)的測(cè)定

在試驗(yàn)期的第42、63天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選2只產(chǎn)蛋雞，翅靜脈采血5 mL，緩緩注入試管中，傾斜試管，靜置30 min后，于3 000 r/min離心10 min，吸取上清液1.0～1.5 mL，注入1.5 mL離心管中，標(biāo)記組別及日期，置于-20 ℃冰箱保存，用于血清免疫和生化指標(biāo)測(cè)定。

采用酶標(biāo)儀(匯松MB-530)和R&D公司試劑盒測(cè)定血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量。

采用全自動(dòng)生化分析儀(邁瑞B(yǎng)S-200)和邁瑞生物公司生產(chǎn)的配套試劑盒測(cè)定血清白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(Glu)、尿酸(UA)含量及堿性磷酸酶(ALP)活性。

1.3.3 蛋黃中礦物質(zhì)元素含量的測(cè)定

在試驗(yàn)期的第21、42、63天，每組隨機(jī)選12個(gè)雞蛋，每個(gè)重復(fù)2個(gè)，用于蛋黃中微量元素含量的測(cè)定。蛋黃中鐵、錳、銅、鋅含量參照GB/T 5009.90—2003、GB/T 9695.20—2008火焰原子吸收光譜法測(cè)定，測(cè)定儀器為火焰原子吸收分光光度計(jì)(SP-AA3800)。蛋黃中硒含量參照鄧士林等[7]的方法，采用流動(dòng)注射氫化物發(fā)生原子吸收光譜法測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS 9.0軟件進(jìn)行方差分析，然后通過(guò)Duncan氏法進(jìn)行組間的多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2、表3、表4可知，與對(duì)照組相比，第21、42天，試驗(yàn)組平均蛋重、產(chǎn)蛋率在數(shù)值上均有所提高，但差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)組料蛋比均有所下降，除第21天C組料蛋比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)外，其余各組間均差異不顯著(P>0.05)；第42、63天，試驗(yàn)組破殼率均有所降低，B、D組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 納米硒對(duì)第21天產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表(除表7、表8)同。

In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below (except Table 7 and Table 8).

表3 納米硒對(duì)第42天產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表4 納米硒對(duì)第63天產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響

由表5、表6可知，第42天，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清IgM、IgA的含量均有所提高，E組血清IgM、IgA含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，分別提高了17.00%、20.30%；各試驗(yàn)組血清IgG含量均有所提高，且以C組最高，但各組間差異不顯著(P>0.05)。第63天，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清IgG含量均有所提高，但各組間血清IgM、IgA、IgG含量均差異不顯著(P>0.05)。

表5 納米硒對(duì)第42天產(chǎn)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響

2.3 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

由表7、表8可知，第42天，與對(duì)照組相比，D組血清ALB含量顯著提高(P<0.05)，D組血清TG和Glu含量極顯著降低(P<0.01)，F(xiàn)組血清TP含量顯著升高(P<0.05)，E、F組血清UA含量顯著降低(P<0.05)；各組間血清ALP活性和TC含量差異不顯著(P>0.05)。第63天，與對(duì)照組相比，F(xiàn)組血清TP含量顯著提高(P<0.05)，血清ALP活性和Glu含量顯著降低(P<0.05)；各組間血清ALB、TC、TG、UA含量差異不顯著(P>0.05)。

表6 納米硒對(duì)第63天產(chǎn)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響

表7 納米硒對(duì)第42天產(chǎn)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。表8同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as Table 8.

表8 納米硒對(duì)第63天產(chǎn)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

2.4 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞蛋黃中硒、鐵、鋅、錳、銅含量的影響

由表9、表10、表11、表12可知，第21天，與對(duì)照組相比，C組蛋黃中硒含量顯著提高(P<0.05)，D、E、F組蛋黃中硒含量極顯著提高(P<0.01)，且E、F組蛋黃中硒含量極顯著高于B、C、D組(P<0.01)。第42天，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組蛋黃中硒含量均顯著或極顯著提高(P<0.05或P<0.01)，其中F組蛋黃中硒含量極顯著提高了80.01%(P<0.01)，且C、D、E、F組蛋黃中硒含量極顯著高于B組(P<0.01)。第63天，C、D、E、F組蛋黃中硒含量極顯著高于對(duì)照組和B組(P<0.01)，且C、D、E、F組間蛋黃中硒含量差異不顯著(P>0.05)。從數(shù)值上看，各試驗(yàn)期蛋黃中硒含量均以F組的最高，且第42天各試驗(yàn)組蛋黃中硒含量均高于第21、63天。

與對(duì)照組相比，除第42天試驗(yàn)組蛋黃中鋅含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)外，各組各試驗(yàn)期蛋黃中鐵、錳、鋅、銅含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表9 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞蛋黃中硒含量的影響

表10 納米硒對(duì)第21天產(chǎn)蛋雞蛋黃中鐵、錳、銅、鋅含量的影響

表11 納米硒對(duì)第42天產(chǎn)蛋雞蛋黃中鐵、錳、銅、鋅含量的影響

3 討 論

3.1 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

添加硒能否提高生產(chǎn)性能是養(yǎng)殖者和研究者們首要關(guān)注的問題，近年來(lái)針對(duì)于不同硒源的作用效果的研究比較多，但是應(yīng)用于產(chǎn)蛋雞的研究比較少。李士平等[8]研究表明，飼糧添加0.1、0.2 mg/kg的硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能無(wú)顯著影響。夏枚生等[9]研究表明，飼糧添加0.2～1.0 mg/kg的納米硒能顯著提高肉雞的生長(zhǎng)性能，且0.4～0.5 mg/kg納米硒組的肉雞平均日增重(ADG)和料重比顯著優(yōu)于0.2 mg/kg納米硒組；0.4～1.0 mg/kg納米硒組對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響顯著高于相同水平的亞硒酸鈉組，0.1～0.3 mg/kg添加水平時(shí)，兩者之間差異不顯著。由此可知，無(wú)論是添加無(wú)機(jī)硒還是有機(jī)硒，只有添加一定劑量的硒才能對(duì)雞的生產(chǎn)性能產(chǎn)生影響，并且納米硒在一定水平下比亞硒酸鈉作用效果好。李寶春等[10]針對(duì)蛋雛雞的研究表明，飼糧添加0.4 mg/kg的納米硒，16～26日齡蛋雛雞的ADG低于對(duì)照組，但能促進(jìn)27～36日齡蛋雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育，且作用效果優(yōu)于相同添加水平的亞硒酸鈉。這說(shuō)明納米硒對(duì)處于不同生長(zhǎng)期的蛋雛雞的作用效果不同，所以針對(duì)不同品種的產(chǎn)蛋雞飼糧的納米硒添加量、添加時(shí)間和持續(xù)飼喂時(shí)間的研究也很重要。本研究表明，在產(chǎn)蛋雞飼糧中添加不同水平(0.1～0.5 mg/kg)的納米硒，試驗(yàn)前期(第21天)產(chǎn)蛋率在數(shù)值上有一定的提高，但未達(dá)顯著水平，0.2 mg/kg納米硒組的料蛋比顯著降低；隨試驗(yàn)期的延長(zhǎng)(第42、63天)，0.3 mg/kg納米硒組的破殼率顯著降低，試驗(yàn)至第42、63天，添加不同水平的納米硒對(duì)平均蛋重、產(chǎn)蛋率、料蛋比無(wú)顯著影響，但從數(shù)值上看，0.1～0.4 mg/kg納米硒有提高產(chǎn)蛋率和降低料蛋比的趨勢(shì)。說(shuō)明飼糧中添加適量的納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能有一定的促進(jìn)作用。

表12 納米硒對(duì)第63天產(chǎn)蛋雞蛋黃中鐵、錳、銅、鋅含量的影響

3.2 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響

IgG、IgA、IgM是家禽參與體液反應(yīng)的3種主要的免疫球蛋白，其中IgG在血清中的含量最高，其含量直接影響禽的體液免疫功能。IgA占血清免疫球蛋白的10%左右，僅次于IgM，是機(jī)體黏膜局部抗感染免疫的主要抗體。IgM是初次免疫應(yīng)答中最早產(chǎn)生的免疫球蛋白，在血清中含量較少，但是作為高效抗體對(duì)體液免疫有重要作用。缺硒會(huì)導(dǎo)致血清IgG、IgA、IgM含量的下降。研究表明，相比于對(duì)照組(0.2 mg/kg硒)，低硒組(0.034 6 mg/kg硒)雛雞血清IgG含量在14、28、42日齡時(shí)均極顯著降低，血清IgM含量在28、42日齡時(shí)顯著降低，血清IgA含量在42日齡時(shí)極顯著降低[11]。由此可以看出，缺硒對(duì)血清免疫球蛋白的影響程度由大到小為IgG、IgM、IgA。Cai等[12]研究表明，在1日齡的肉雞飼糧中添加0.3 mg/kg納米硒，飼喂42 d后能顯著提高血清IgG、IgM的含量，0.5 mg/kg納米硒組血清IgG、IgM的含量顯著低于0.3 mg/kg納米硒組，然而飼喂21 d時(shí)各試驗(yàn)組血清IgG、IgM、IgA含量均無(wú)顯著提高。胥保華[13]針對(duì)肉雞的研究表明，0.2～0.5 mg/kg的納米硒能顯著提高血清IgG、IgM、IgA含量，且血清IgG、IgM含量顯著高于相同水平的亞硒酸鈉組和硒代蛋氨酸組。由此可知，適量的納米硒可增強(qiáng)禽類機(jī)體的免疫功能，且作用效果受納米硒添加水平和飼養(yǎng)時(shí)間的影響。本試驗(yàn)結(jié)果與以上研究結(jié)果基本一致。添加0.1～0.5 mg/kg的納米硒能提高試驗(yàn)第42天產(chǎn)蛋雞血清IgG、IgM、IgA的含量，相比于對(duì)照組，0.4 mg/kg納米硒組血清IgM、IgA的含量分別提高了17.00%、20.30%；試驗(yàn)第63天，各試驗(yàn)組的血清IgM、IgA含量均有一定的提高。本研究驗(yàn)證了納米硒能提高產(chǎn)蛋雞血清的免疫活性，且與對(duì)照組相比，試驗(yàn)至42 d的作用效果最為明顯。

3.3 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

畜禽血清生化指標(biāo)能反映其機(jī)體健康及代謝狀況，其中血清TP、UA含量反映蛋白質(zhì)利用情況，血清TC和TG含量反映血脂水平，對(duì)動(dòng)物的健康有重要的參考價(jià)值。曲湘勇等[14]研究表明，在鵪鶉飼糧中添加0.2、0.4 mg/kg的納米硒極顯著降低了血清UA含量，0.4 mg/kg的納米硒可極顯著降低血清中TC、TP、ALB含量，且作用效果優(yōu)于酵母硒，但2種硒源對(duì)血清TG含量均無(wú)顯著影響。Vigas等[15]針對(duì)小鼠的研究表明，添加0.25、0.50 mg/kg的亞硒酸鈉可顯著降低血清中TG的含量，但對(duì)血清中TC含量無(wú)顯著影響。盛希群[16]針對(duì)小鼠的研究表明，濃度為2 mg/kg的亞硒酸鈉對(duì)糖尿病小鼠有降Glu的作用。由此可知，硒能在一定程度上降低血脂、血糖含量，對(duì)動(dòng)物健康有促進(jìn)作用。本研究表明，試驗(yàn)第42天，添加0.3～0.5 mg/kg水平的納米硒能提高血清ALB、TP含量，降低血清TG、UA、Glu的含量，0.4、0.5 mg/kg納米硒組作用效果最好；試驗(yàn)第63天，0.5 mg/kg納米硒組血清TP含量顯著提高，血清ALP活性和Glu含量顯著降低。與以上結(jié)論基本一致，并且血清ALB、TP含量升高和UA含量降低說(shuō)明納米硒可促進(jìn)產(chǎn)蛋雞機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，合成大于降解，對(duì)機(jī)體健康有利。血清ALP由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，反映動(dòng)物肝臟和骨的生理機(jī)能狀況，有報(bào)道稱，成骨細(xì)胞受損，則血清的ALP活性增加[17]。本研究表明，添加納米硒能使血清ALP活性顯著降低，可以防止產(chǎn)蛋雞骨細(xì)胞受損。納米硒具有降血脂、促進(jìn)機(jī)體蛋白合成、防止肝硬化、糖尿病等疾病的作用，但目前在禽方面的研究比較少，作用機(jī)理還有待深入探討。

3.4 納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞蛋黃中硒、鐵、鋅、錳、銅含量的影響

有機(jī)硒吸收率比無(wú)機(jī)硒高，因此動(dòng)物產(chǎn)品中的硒含量更高[18-19]。Hu等[20]研究表明，在肉雞飼糧中添加0.15、0.30、0.60、1.20 mg/kg的納米硒能顯著提高血清、肝臟、腎臟、肌肉中的硒含量，且硒含量隨著添加水平的增大而增加，作用效果顯著高于相同水平的亞硒酸鈉組，無(wú)論是口服還是靜脈注射，納米硒組全身硒含量和肝臟硒含量都顯著高于亞硒酸鈉組，結(jié)扎腸袢測(cè)得納米硒組滯留于腸中的硒含量和轉(zhuǎn)移到全身的硒含量分別顯著低于和高于亞硒酸鈉組。由此可知，相比于亞硒酸鈉，納米硒的安全線性范圍廣，硒沉積效果好，利用率高。楊清麗等[21]針對(duì)產(chǎn)蛋鴿的研究表明，添加納米硒能顯著提高蛋黃中硒含量，0.4 mg/kg納米硒組蛋黃硒含量提高了111.83%。研究表明，飼糧中添加0.15 mg/kg的硒，對(duì)肉仔雞肝臟、胰臟中鐵、錳、銅、鋅含量無(wú)顯著影響[22]。李士平等[8]研究表明，產(chǎn)蛋雞飼糧中添加0.1、0.2 mg/kg的硒，蛋黃中硒的沉積量有增高趨勢(shì)，對(duì)蛋黃中鐵、錳、銅、鋅等元素的沉積量無(wú)顯著影響。本研究表明，飼糧添加0.2～0.5 mg/kg的納米硒能顯著提高蛋黃中硒含量，試驗(yàn)第21天，0.4、0.5 mg/kg納米硒組分別提高了63.29%、65.32%，試驗(yàn)第42天,0.5 mg/kg 納米硒組提高了80.01%；試驗(yàn)第63天，0.5 mg/kg納米硒組提高了62.98%。各試驗(yàn)期中蛋黃硒含量均隨飼糧納米硒添加水平的增加而增大，隨著添加時(shí)間延長(zhǎng)至第42天時(shí)添加納米硒組的蛋黃硒含量普遍高于第21、63天時(shí)對(duì)應(yīng)組別的蛋黃硒含量。飼糧添加納米硒提高了試驗(yàn)第42天蛋黃鋅含量，對(duì)各試驗(yàn)期蛋黃鐵、銅、錳含量無(wú)顯著影響。

4 結(jié) 論

綜合考慮納米硒對(duì)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、血清免疫和生化指標(biāo)及蛋黃硒含量的作用效果，其適宜添加水平為0.4 mg/kg，飼喂42 d效果較好。

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*Corresponding author, professor, E-mail: quxy99@126.com

(責(zé)任編輯 武海龍)

Effects of Nano-Selenium on Performance, Serum Immune and Biochemical Indices and Yolk Selenium Content of Laying Hens

YANG Qingli1PENG Yudong1QU Xiangyong1*PENG Canyang1CAO Dongmei2SUN Anquan2

(1.CollaborativeInnovationCenterofHunanLivestockandPoultrySafetyProduction,CollegeofAnimalScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China; 2.OmegaBiotechShanghaiCo.,Ltd.,Shanghai201203,China)

This experiment was conducted to study the effects of nano-selenium on performance, serum immune and biochemical indices and yolk selenium content of laying hens. A total of 324 laying hens (29 weeks of age) were randomly allotted to 6 groups with 6 replicates in each group, and each replicate contained 9 hens. Hens in the control group (group A) were fed a basal diet, and hens in experimental groups (groups B, C, D, E and F) were fed the diets supplemented with 0.1， 0.2， 0.3， 0.4 and 0.5 mg/kg nano-selenium, respectively. The adjustment period lasted for 7 days, and the experimental period lasted for 63 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the feed to egg ratio at the 21st day of group C was significantly decreased (P<0.05), the grain-hulling rate at the 42nd and 63rd day of groups B and D was significantly decreased (P<0.05). There were no significant effects on laying rate and average egg weight among all groups (P>0.05). 2) Compared with the control group, the contents of immunoglobulin M (IgM) and immunoglobulin A (IgA) in serum at the 42nd day of group E were significantly increased (P<0.05), and there was no significant effect on serum immunoglobulin G (IgG) content at the 42nd day among all groups (P>0.05). There were no significant effects on serum IgM, IgA and IgG contents at the 63rd day among all groups (P>0.05). 3) Compared with the control group, at the 42nd day, the serum albumin content of group D was significantly increased (P<0.05), the serum triglyceride (TG) and glucose (Glu) contents of group D were significantly decreased (P<0.01), the serum total protein (TP) content of group F was significantly increased (P<0.05), the serum uric acid (UA) content of groups E and F was significantly decreased (P<0.05). Compared with the control group, at the 63rd day, the serum TP content of group F was significantly increased (P<0.05), the serum alkaline phosphatase (ALP) activity and Glu content of group F were significantly decreased (P<0.05). 4) Compared with the control group, the yolk selenium content at the 21st day of groups C, D, E and F was significantly increased (P<0.05 orP<0.01), the yolk selenium content at the 42nd days of experimental groups was significantly increased (P<0.05 orP<0.01), the yolk selenium content at the 63rd day of groups C, D, E and F was significantly increased (P<0.01). The yolk selenium content of group F was the highest at all experiment period, and the yolk selenium content of experimental groups at the 42nd days was higher than that at the 21st and 63rd day. There were no significant effects on yolk iron, manganese, zinc and copper contents among all groups (P>0.05), except the yolk zinc content at the 42nd day of experimental groups was significantly higher than that of control group (P<0.05). In conclusion, dietary nano-selenium can improve the performance of laying hens, improve the serum immunity, promote the synthesis of proteins of organism, reduce the content of cholesterol in blood, promote the health of hens and increase the yolk selenium content. Comprehensive consideration, the optimum level of nano-selenium in the diet is 0.4 mg/kg, and the effect is more obvious when experiment last for 42 days.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(1)：280-289]

laying hens; nano-selenium; performance; serum biochemical indices; yolk selenium content

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.01.032

2016-07-13

湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)產(chǎn)學(xué)研合作項(xiàng)目(11110,13098)

楊清麗(1988—)，女，黑龍江嫩江人，碩士研究生，研究方向?yàn)榧仪轄I(yíng)養(yǎng)。E-mail: 756553231@qq.com

*通信作者：曲湘勇，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: quxy99@126.com

S831

A

1006-267X(2017)01-0280-10