預防實驗家兔肉膜和深筋膜植入擴張器移位方法的改進

曹春艷，劉 姝

(1.中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院整形外科醫(yī)院，北京 100144;2.華北理工大學，河北 063099)

預防實驗家兔肉膜和深筋膜植入擴張器移位方法的改進

曹春艷1，劉 姝2

(1.中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院整形外科醫(yī)院，北京 100144;2.華北理工大學，河北 063099)

目的探討預防兔肉膜和深筋膜植入擴張器移位的方法。方法普通級實驗家兔40只，隨機分為兩組，即實驗組20只和對照組20只。在其一側(cè)背部皮膚肉膜深面自切口潛行分離形成植入腔穴，在腔穴周邊，用3-0絲線間斷縫合肉膜、深筋膜，植入50 mL腎形硅橡膠軟組織擴張器。術(shù)后1周，用文刺機在擴張器周圍四點做黑色文刺，用來標記擴張器位置。實驗組術(shù)后2個月開始注水直至達到總量140 mL;對照組術(shù)后1周開始注水直至達到總量140 mL。分別觀察和記錄實驗組和對照組擴張器在注水期間是否移位、切口是否裂開、注射壺是否翻轉(zhuǎn)等并發(fā)癥，以及動物的死亡率。結(jié)果實驗組中沒有兔子發(fā)生擴張器移位，對照組存活動物中有4只兔子發(fā)生擴張器移位，兩組擴張器移位相比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;實驗組兔子擴張期切口裂開發(fā)生率雖然低于對照組，但兩組比較沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;同時兩組擴張器在注水壺翻轉(zhuǎn)率、感染率及動物死亡率方面相比較都無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論分離腔隙內(nèi)固定加上延遲擴張的手術(shù)方法可有效預防兔肉膜與深筋膜之間的擴張器移位，實現(xiàn)有效擴張。

兔;肉膜;擴張器;移位

隨著臨床擴張器埋置治療皮膚組織缺損的手術(shù)方法的發(fā)展，在整形外科動物實驗中有關(guān)擴張器方面的研究也逐年上升。實驗用家兔因體型小、溫順、便于操作和觀察，尤其是在皮膚擴張過程中注水不需麻醉等優(yōu)點，一直被許多實驗者用來作為研究皮膚擴張相關(guān)問題的實驗對象［1-5］。皮膚擴張器一般放在肉膜和深筋膜之間，由于這個間隙非常疏松，需要采取適當方法防止擴張器移位并起到有效的皮膚擴張作用。但是我們多年來通過實驗觀察，以往預防植入擴張器移位方法的最后效果總是不盡人意，或多或少的影響實驗結(jié)果。因此我們進行了多次試驗，摸索出一種有效的預防兔肉膜和深筋膜植入擴張器移位的方法。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

普通級健康實驗家兔40只，雌雄不限，4～5月齡，體重2.5 kg～3.0 kg，隨機分為實驗和對照兩組，實驗動物生產(chǎn)許可證號【SCXK(京)2009-0005】。動物實驗在整形外科醫(yī)院研究中心動物室完成【SYXK(京)2010-0008】。

1.2 實驗材料

50 mL腎形擴張器40只、文刺機1臺、常規(guī)無菌手術(shù)器械、美蘭、無菌手套、生理鹽水、頭皮針、棉簽、碘伏、75%乙醇、一次性注射器數(shù)個(20 mL、10 mL)、無菌直尺、寵物專用剃毛器、無菌縫合絲線(3-0)。

1.3 實驗方法

1.3.1 動物麻醉:首先對動物進行麻醉，按 0.3 mL/kg體重的劑量肌注速眠新 II與鹽酸氯胺酮混合液，速眠新 II與鹽酸氯胺酮等體積混合(1:1)。待動物對外界刺激反應遲鈍時，經(jīng)兔耳緣靜脈以2～3 mL/min的速度靜注地西泮注射液，靜注量為1.5 mL/kg體重。

1.3.2 對照組動物手術(shù):動物被麻醉后，用寵物專用剃毛器剃去兔背部中線一側(cè)術(shù)區(qū)范圍的兔毛，用美蘭在兔的背部按擴張器大小標記分離范圍，碘伏消毒2遍，鋪無菌洞巾。在其一側(cè)背部做長約3 cm縱向切口，深達深筋膜淺層。沿皮膚肉膜深面自切口潛行分離形成植入腔穴。在腔穴周邊，用3-0絲線間斷縫合肉膜、深筋膜，共8針。植入硅橡膠軟組織擴張器，注射壺放于切口另一側(cè)的皮下，用3-0絲線固定注射壺。最后，間斷縫合大白兔皮膚。術(shù)中注入生理鹽水10 mL。術(shù)后1周，待擴張器界限清晰，用寵物專用剃毛器剃去擴張器表面兔毛，用文刺機在擴張器周圍四點做黑色文刺，用來標記擴張器位置。通常每周注水1次，每次注水量為額定容積的20%。初次注水時間為術(shù)后1周起，每周注水1次，每次注入生理鹽水 10 mL，達到總量140 mL。

1.3.3 實驗組動物手術(shù):埋置擴張器的手術(shù)過程及術(shù)后1周標記擴張器位置的方法同對照組一樣，但實驗組動物初次注水時間為術(shù)后2個月起，每周注水1次，每次注入生理鹽水 10 mL，達到總量140 mL。

1.3.4 術(shù)后護理:手術(shù)完成后，將兔放于蘇醒間，此時蘇醒間的溫度與手術(shù)室溫度保持一致，并且蓋上厚布單保暖，以便動物盡快蘇醒，待實驗兔清醒后放入清潔兔籠。每日密切觀察兔子飲食情況、擴張皮瓣情況及各項生命體征的變化是否正常，并做好護理記錄，這樣才有利于及時發(fā)現(xiàn)問題及時解決。另外，給擴張器注水時，一定注意注射壺部位的消毒，以防感染。

1.3.5 觀察指標:觀察實驗兔的生命體征及健康情況;觀察動物擴張器是否移位及固定的效果，擴張器移位的判定標準為整體移出紋刺點;密切觀察擴張皮瓣的情況，及時發(fā)現(xiàn)及時處理擴張器并發(fā)癥，如移位、血腫、切口裂開、擴張器外露、注水壺翻轉(zhuǎn)以及是否有膿性分泌物滲出的感染等;觀察在給動物擴張器注水的過程中動物的死亡率。

1.3.6 擴張器并發(fā)癥發(fā)生率的計算:擴張器移位的發(fā)生率是兩組沒有感染、沒有切口裂開的動物的總數(shù)作為分母統(tǒng)計，同時去除死亡動物數(shù);兩組動物感染率發(fā)生及切口裂開發(fā)生率是以存活動物為分母統(tǒng)計。

1.4 統(tǒng)計學方法

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行分析處理，使用Fisher精確檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

表1 兩組實驗兔擴張器并發(fā)癥及死亡率比較Tab.1 Comparison of the complications of tissue expander and death between the two group

2 結(jié)果

2.1 擴張器并發(fā)癥發(fā)生率比較

2.1.1 擴張器移位發(fā)生率的比較:實驗組中沒有兔子發(fā)生擴張器移位，擴張器全部位于紋刺范圍內(nèi)(圖1A)，對照組中雖有8只兔子發(fā)生擴張器移位，且擴張器移位至側(cè)腹部(圖1B)，但實驗結(jié)束前相繼死亡4只動物，因此實際有4只動物發(fā)生擴張器移位，移位率為36%，結(jié)果表明實驗組移位發(fā)生率明顯低于對照組，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05).

2.1.2 擴張期切口裂開發(fā)生率的比較:實驗組1只兔子發(fā)生切口裂開，切口裂開發(fā)生率為5%，對照組7只兔子發(fā)生切口裂開，但死亡兔子中有兩只切口裂開，因此實際有5只兔子切口裂開，切口裂開發(fā)生率為31%，實驗組切口裂開發(fā)生率雖低于對照組，但兩組相比無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.1.3 擴張器注水壺翻轉(zhuǎn)發(fā)生率比較:實驗組無注水壺翻轉(zhuǎn)發(fā)生，對照組3只兔子發(fā)生注射壺翻轉(zhuǎn)，兩組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.1.4 動物感染發(fā)生率的比較:實驗組無動物感染發(fā)生，對照組在存活動物中有1只兔子感染，實驗組和對照組比較差異沒有顯著性(P＞0.05)(表1)。

2.2 動物死亡率比較

實驗組無死亡，對照組死亡4只，實驗組和對照組差異沒有顯著性(P＞0.05)(表1)。

圖1 擴張動物模型圖Note.A:2 months after implantation，the expander of experimental group was inflated with 10 mL saline weekly to a total of 140 mL. There was no expander displacement.All the expanders were located within the tattoo area.B:7 days after implantation the expander of the control group inflated with 10 mL saline weekly to a total of 140 mL.4 expanders of the control group were moved from the back to belly.Fig.1 Rabbit models of skin and soft tissue expansion

3 討論

實驗用家兔體型小、溫順，手術(shù)麻醉不需插管，在皮膚擴張過程中注水不再需麻醉，不會亂蹭導致擴張器外露，解剖上在肉膜下放置皮膚擴張器與人體放置擴張器的層次接近，所以一直被許多實驗者用來作為研究皮膚擴張相關(guān)問題的實驗對象，如研究擴張皮膚的病理變化、包膜的形成及皮膚擴張對血管、周圍神經(jīng)、淋巴回流、骨骼及預制皮瓣等的影響［6-10］。

然而有人認為兔不適合用于擴張皮瓣的研究［10］，因為它們適于埋置擴張器的位置大多無皮下脂肪，由肉膜代替。皮膚肉膜與深筋膜結(jié)合疏松，在肉膜與深筋膜之間放置擴張器，擴張器很容易移位，擴張過程中擴張器表面的皮膚大都來源于周圍被牽拉過來的皮膚，而不是擴張的皮膚。因此避免擴張器移位的實驗方法是解決問題的關(guān)鍵。Timmenga［11］在兔的胸部皮膚和肉膜之間埋置了10 mL擴張器，術(shù)后5 d開始注射生理鹽水，共注射10天，他認為如果兔子的體重超過3 kg，皮膚和肉膜之間分離將是很容易，皮膚出現(xiàn)靜脈淤血，但沒有壞死，可有效抑制擴張器移動，并獲得有效的皮膚擴張。然而我們通過實驗證實在皮膚和肉膜之間埋置擴張器的方法不可行，擴張器表面的皮膚大部分壞死，因此我們認為兔的皮膚和肉膜之間不適合放置擴張器［12］。

趙作鈞等［13］改進了組織擴張術(shù)的兔模型，用絲線將擴張器周圍的皮膚或肉膜與深筋膜縫合在一起，有效控制了擴張器移位。然而在后來的實踐中我們發(fā)現(xiàn)還是有部分擴張器發(fā)生移位，由此造成實驗失敗。

擴張器植入術(shù)后周圍會形成包膜是眾所周知的事情，這層包膜在擴張器植入術(shù)后兩月最厚［14］。因此在實驗組中我們利用此特點，當擴張器植入后，即刻注入10 mL生理鹽水維持擴張器的形狀，就不再注水擴張，直到兩個月后包膜充分形成，再注水擴張，每周只注射1次，每次注入生理鹽水10 mL，直至總量140 mL為止。在整個注水擴張過程中，我們觀察到實驗組20只兔子的擴張器固定相當可靠，無移位發(fā)生，用力推動擴張器，移位不明顯，全部位于先前紋刺范圍，由此證明了擴張器表面的皮膚不是被牽拉過來的周圍皮膚，而且我們在實驗過程中發(fā)現(xiàn)擴張器并發(fā)癥的發(fā)生率明顯比對照組低。只有1只兔子發(fā)生手術(shù)切口裂開現(xiàn)象，及時處理傷口并重新縫合，最終傷口愈合。對照組同樣在擴張器植入后，即刻注入10 mL生理鹽水維持擴張器的形狀，一周后注水擴張，每次注入生理鹽水10 mL，直至總量140 mL為止。其結(jié)果是12只兔子的擴張器固定可靠，無移位發(fā)生，8只兔子的擴張器發(fā)生明顯移位，擴張器移位至側(cè)腹部，推動擴張器移動范圍較大。盡管在實驗結(jié)束前有4只兔子死亡，在存活的動物里發(fā)生擴張器移位的還剩4只，但與實驗組相比仍然具有顯著性差異(P＜0.05)。其原因可能是:對照組擴張器注水是在術(shù)后一周開始，包膜尚不堅韌，甚至沒有包膜，起不到限制擴張器移位的作用，即便做了分離腔隙內(nèi)固定，但隨著擴張囊注水量的增加，其重力作用的加大也會出現(xiàn)擴張器移位現(xiàn)象。由于擴張器移位，皮膚張力較大，由此導致對照組中擴張器切口裂開發(fā)生率高于實驗組，但兩組相比不具有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。針對此并發(fā)癥，雖然及時處理，對照組中仍然有些動物手術(shù)切口重新縫合后不易愈合，導致3只兔子切口感染。同時在擴張器注水期間發(fā)現(xiàn)對照組有3只注射壺發(fā)生翻轉(zhuǎn)，而實驗組無一只出現(xiàn)此種情況。此外，在整個實驗過程中對照組有4只兔子死亡，其中2只兔子因感染死亡，而另外2只在沒有感染的情況下死亡，觀察其擴張器全部發(fā)生移位至腹部，可能隨著注水量的增多，擴張器的移位，影響了兔子的正常呼吸功能，導致兔子死亡。實驗結(jié)果表明，通過利用擴張器周圍的包膜有效的限制了擴張器的移動，因此分離腔隙內(nèi)固定加上延遲擴張可有效預防兔肉膜與深筋膜之間的擴張器移位，從而降低并發(fā)癥的發(fā)生率，實現(xiàn)有效擴張。

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Improvement in preventing the displacement of tissue expander implanted between the panniculus carnosus and deep fasia in rabbits

CAO Chun-yan1，LIU Shu2
(1.Research Center of Plastic Surgery Hospital，Chinese Academy of Medical Sciences＆Peking Union Medical College，Beijing 100144，China;2.North China University of Technology，Hebei 063099)

ObjectiveTo investigate the method to prevent the displacement of tissue expander implanted between the panniculus carnosus and deep fasia in rabbits.Method 40 rabbits were divided into two groups randomly:the experimental group and the control group.Through an incision on the back，a pocket was made by dissecting between the rabbit panniculus carnosus and deep fasia.The panniculus carnosus at the pocket boundary were sutured with the deep fascia inside the pocket by interrupted 3-0 sutures.A 50 mL kidney-shaped tissue expander was implanted.The expander was inflated with 10 mL saline after the wound was sutured.7 days after implantation，black tattoos were made on the skin around the expander to mark the site of expander.Two months after implantation，the expanders in the experimental group were inflated with 10 mL saline weekly to a total of 140 mL.7 days after implantation the expanders of control group were inflated with 10 mL saline weekly to a total of 140 mL.The incidence of expander displacement，dehiscence of incision，reversal of injection pot and death were recorded.ResultsThere was no expander displacement in the 19 rabbits of experimental group.All the expanders were located within the tattoo area.There was no expander displacement in 11rabbits of the control group.4 expanders of the control group moved from the back to belly.The difference between them was statistically significant(P＜0.05).The incidence of dehiscence of incision in the experimental group was not significantly lower than that in the control group(P＞0.05).Meanwhile there was no significant difference in the incidences of reversal of injection pot，infections and deaths(P＞0.05 for all).ConclusionsSutures between the panniculus carnosus and the deep fascia at the pocket boundary asisted by delayed inflating can prevent the displacement of tissue expander implanted between the panniculus carnosus and deep fasia in rabbits，thus to obtain effective expansion.

Rabbit;Panniculus carnosus;Deep fascia;Expander;Displacement;Rabbits

R-33

A

1671-7856(2016)12-0066-04

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.12.013

2016-05-11

曹春艷(1965-)，女，主管技師，研究方向:醫(yī)學實驗動物學，Email:caochunyanaa@163.com。