畜禽血樣采集技術(shù)及注意事項

遠(yuǎn)永來 ， 張彥庭 ， 王國輝 ， 徐義強(qiáng) ， 劉俊麗

(河南省西華縣畜牧局 ， 河南 西華 466600)

畜禽血樣采集技術(shù)及注意事項

遠(yuǎn)永來 ， 張彥庭 ， 王國輝 ， 徐義強(qiáng) ， 劉俊麗

(河南省西華縣畜牧局 ， 河南 西華 466600)

近年來隨著我國養(yǎng)殖業(yè)集約化、規(guī)?；母呙芏仁金B(yǎng)殖模式的迅速發(fā)展，加之種畜禽頻繁從國外引種導(dǎo)致畜禽疫病復(fù)雜化，臨床獸醫(yī)憑眼觀或以經(jīng)驗(yàn)的傳統(tǒng)診療方式已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足實(shí)際生產(chǎn)的需要，因此要對畜禽疫病進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷分析，實(shí)驗(yàn)室診斷勢在必行，血清學(xué)抗體檢測不但為實(shí)驗(yàn)室診斷動物疫病的方法之一，而且為畜禽免疫程序的制定及調(diào)整提供科學(xué)依據(jù)，為定期分析評估豬場疫情趨勢，把握養(yǎng)殖場疫情動態(tài)，科學(xué)判斷防控形勢提供技術(shù)支持。采血工作是開展動物疫病診斷、免疫抗體效價檢測等工作的基礎(chǔ)，樣品質(zhì)量的優(yōu)劣與檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性息息相關(guān)，因此，如何獲得符合衛(wèi)生要求、高質(zhì)量的樣品，是擺在我們廣大獸醫(yī)工作者和畜禽養(yǎng)殖者面前的實(shí)際問題，筆者所在的工作崗位需每月定期進(jìn)行采樣監(jiān)測工作，介紹體會如下。

1 樣品采集前的準(zhǔn)備事項

1.1 采樣用品的準(zhǔn)備 采樣前應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)備數(shù)量充足的一次性注射器或盛放樣品的容器，還需準(zhǔn)備防護(hù)服、口罩、一次性手套、棉手套、保定器具、碘酊棉、酒精棉、記號筆、恒溫箱等器具。

1.2 采樣方法的確定 血樣的采集部位和方法，與檢測項目、試驗(yàn)方法及用血量有關(guān)，應(yīng)當(dāng)依據(jù)實(shí)際需要而定。

1.3 采樣比例的確定 依據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)康拇_定采樣數(shù)量，在進(jìn)行疫病診斷時發(fā)病畜禽采樣數(shù)不低于10份，進(jìn)行免疫效果評價時每群采樣不低于30份。

1.4 動物準(zhǔn)備 所采樣的畜禽在采樣前應(yīng)禁食6-8 h，此時血液中的各種生化成分較為恒定，對檢測結(jié)果影響最小。豬只保定多用站立保定法，從豬的側(cè)后方套豬上頜的成功概率要遠(yuǎn)大于正前方，正前方套時豬只看到保定人員多往后退易導(dǎo)致保定失敗，側(cè)后方套取時豬只多會抬頭或甩頭，即使豬只后退保定人員也易順勢將其保定。保定住豬只后，可以讓豬只的臀部靠墻或圈欄，這樣被采樣豬只會有一種相對的安全感，其掙扎反應(yīng)相對較少，特別是在進(jìn)行耳靜脈采血時效果顯著。脾性溫順的牛多采用徒手站立保定，暴躁的須借助保定架保定。個體較小的羊可用騎跨保定法，脾性暴躁及個體大的羊宜用拴系保定法或側(cè)臥保定法。家禽依據(jù)采血方法的不同可徒手進(jìn)行相應(yīng)姿勢的保定。被采樣畜禽采血部位需進(jìn)行剪毛，先用碘酊棉進(jìn)行點(diǎn)狀螺旋式消毒，之后用酒精進(jìn)行脫碘。

2 采樣方法

畜禽由于皮膚肌肉組織及血管分布的差異，采樣方法也不盡相同，豬的采樣方法常用的有耳緣靜脈采血法及前腔靜脈采血法，牛常用頸靜脈或尾靜脈采血法，羊主要使用頸靜脈采血法，禽類常用翅靜脈采血法。

2.1 豬血樣的采集

2.1.1 耳緣靜脈采血 其操作要領(lǐng)為豬只行站立提鼻保定，用一乳膠帶系住豬耳根部或助手用力在耳根捏壓靜脈的近心端，手指輕彈或揉搓耳靜脈使血管怒張，采血前可先將注射器回抽留點(diǎn)空隙，方便驗(yàn)證針頭是否刺入血管內(nèi)，入針時不可推動針?biāo)ㄒ悦庾⑷肟諝鈱ωi只造成傷害，進(jìn)針時針頭斜面朝上呈20度左右角度刺入血管，進(jìn)入血管后針頭降低角度呈平行狀態(tài)再適當(dāng)進(jìn)入，若刺入血管內(nèi)的話，血液因壓力會自動流入注射器內(nèi)，此時不要太過用力抽血，若不然常會導(dǎo)致血管變癟，血液回流受阻，應(yīng)緩慢抽取所需血液量，完成后用干棉球或棉簽按壓止血。筆者在實(shí)際工作中，感覺到如果朝遠(yuǎn)心端的方向進(jìn)針，且在采血時適當(dāng)按壓近心端能提高耳緣靜脈采血的成功幾率及速度。如果進(jìn)針時針頭斜面朝下，針頭在血管內(nèi)處于傾斜的狀態(tài)的話，勢必會影響采血速度。在針頭的選擇上，可用輸液帶的軟針頭來代替一次性注射器上的針頭，可大大減少因豬只掙扎扭動導(dǎo)致針頭刺穿血管或離開血管的幾率，提高耳緣靜脈采血成功的比例。耳緣靜脈采血時由于血管細(xì)血量少，故采血速度較慢，還易受豬只掙扎的影響不易成功，不適于大批量采樣及體重小于15 kg以下的豬只。

2.1.2 前腔靜脈采血 前腔靜脈采血缺點(diǎn)是看不到血管，給人以采血難度較大的感覺，其實(shí)不然，如果技術(shù)熟練的話，采血順暢、省時，采血量可滿足需要，可用于大批量采樣。此法可根據(jù)豬的大小來確定其保定方法，體重20 kg以下的豬可采用倒提保定法或仰臥保定法，體重20 kg以上的可采用提鼻保定法。成年公豬、母豬選用16×50 mm針頭；中、大豬選用12×38 mm針頭；體重10 kg以下乳豬選用9×20 mm針頭；體重10-30 kg小豬選用9×25 mm針頭。保定姿勢得當(dāng)?shù)那闆r下，頸靜脈溝的末端剛好處于胸腔入口處前方所形成的凹陷，采血的時候多在右側(cè)進(jìn)行，因?yàn)槠渥髠?cè)迷走神經(jīng)較右側(cè)豐富，將針從此凹陷處向?qū)?cè)肩關(guān)節(jié)頂端刺入，回抽見血即可。由于成年公母豬在進(jìn)行前腔靜脈采血時需用5 cm以上的長針頭，但現(xiàn)實(shí)是多數(shù)豬場并不儲備，加之大多數(shù)母豬皮下脂肪較厚，造成采樣難度增加，筆者認(rèn)為成年公母豬耳緣靜脈較粗，用耳緣靜脈采血的方法也很快。

2.2 牛血樣的采集

2.2.1 頸靜脈采血 如在右側(cè)頸部進(jìn)行，用左手的食指、中指及無名指按壓或半握拳狀按壓采血部位頸靜脈近心端，導(dǎo)致血液回流受阻而使血管怒張，另一手緊持消毒并干燥的針頭，用腕力以飛針方式把針頭刺入采血位置，用管接血時應(yīng)將管傾斜以使血液順管壁緩慢流入，避免因垂直滴入管底產(chǎn)生氣泡或紅細(xì)胞破裂而引起溶血，此種方式因使血液暴露于空氣中，易受牛毛、皮屑及舍中塵埃等雜物的污染，使用20 mL規(guī)格的一次性注射器直接刺入頸靜脈血管可避免血樣受污染，采樣過程中需手持注射器的針頭針管結(jié)合部，以避免針管折斷。

2.2.2 尾靜脈采血 采血者站在牛正后方，用左手緊握牛尾的中間并盡量高舉，使牛尾從尾跟處自然高抬，保持與背中線垂直，在尾跟中線腹側(cè)第2與第3尾椎之間(距離肛門約10 cm左右)的凹陷部正中處，垂直于縱軸進(jìn)針約0.5-1 cm即可。此法牛應(yīng)激較小，采血速度快，但不適于犢牛以免造成犢牛尾部血管的永久性損傷。

3 羊血樣的采集

羊主要用頸靜脈采血法，羊只保定消毒后，采血者左手拇指摁住頸靜脈近心端，使靜脈血流回流受阻而怒張，采血者右手持一次性注射器，依據(jù)羊的膘情，在血管隆起的最高位置，沿頸靜脈縱向與頸部呈適宜角度，向上刺入頸靜脈針頭進(jìn)入血管時感覺到阻力消失，回抽注射器見到回血即可。

4 家禽血樣的采集

由助手將禽只的翅膀展開，將翅膀根部的羽毛拔去找到翼下靜脈，采血者用左手拇指按壓翼下靜脈的近心端使血管怒張，右手持5 mL一次性注射器，由翅膀根部斜向刺入翼下靜脈進(jìn)行采血。由于雞的皮膚較松弛，血管易于滾動導(dǎo)致采血時將血管刺穿，皮下形成血腫，導(dǎo)致采血失敗或者養(yǎng)殖戶的反感，筆者在采樣中感覺到在入針時從血管側(cè)面進(jìn)針或由助手繃緊采血部位皮膚，可減少從上方刺入因血管滾動導(dǎo)致的皮下出血，能極大提高采血成功率。

5 樣品采集后的注意事項

5.1 不管何種采血方法，在采血完成后，用一次性注射器時注射器內(nèi)要留點(diǎn)空隙以利于血清析出，并將針頭折彎，蓋上針帽，以免血清析出后從針頭流出，然后將注射器傾斜擺放，使血液在注射器內(nèi)形成斜面，以利于血清的析出。

5.2 若需要把血樣注入離心管內(nèi)時，最好去掉針頭，以避免血樣注入時產(chǎn)生壓力導(dǎo)致速度快而使紅細(xì)胞破裂溶血，筆者認(rèn)為如果不是有特殊的要求，可不必將其注入離心管內(nèi)，在注射器內(nèi)如果血清析出效果好的話，不經(jīng)離心就能直接倒入離心管內(nèi)備用，相比還能節(jié)省一個離心管。

5.3 在完成采樣后的前0.5 h盡量不要劇烈晃動樣品，以免造成溶血而影響血清質(zhì)量。

5.4 根據(jù)運(yùn)輸距離的遠(yuǎn)近及室外溫度，采取適當(dāng)?shù)慕禍鼗虮卮胧?，避免血樣腐敗或凍結(jié)而影響血清質(zhì)量。

5.5 在豬和羊采樣量較大時，動物極易嚎叫，采血人員可用棉球?qū)⒍淙弦悦獠贿m。

S854.43

B

0529-6005(2017)09-0044-02

2016-12-31

遠(yuǎn)永來(1981-)，男，獸醫(yī)師，本科，主要從事動物疫病防治工作，E-mail:1006632573@qq.com

張彥庭，E-mail:35033391@qq.com